JoVE Encyklopedia Eksperymentów
Neuronauka
0 wyświetleń • 4:17 min. • August 7th, 2025
Zabezpiecz znieczuloną mysz w stereotaktycznej ramce.
Zdezynfekuj ogoloną skórę głowy, a następnie wykonaj nacięcie w linii środkowej, aby odsłonić czaszkę.
Osusz czaszkę i nałóż nadtlenek wodoru, aby poprawić widoczność bregma.
Zlokalizuj bregma i lambda, a następnie zidentyfikuj lokalizacje docelowe.
Ostrożnie przewiercić czaszkę w miejscach docelowych.
Podłącz strzykawkę wypełnioną wirusem do instrumentu stereotaktycznego.
Wirus koduje Cas9 i jednoprowadnicowy RNA do edycji genomu w neuronach zakrętu zębatego, wraz z fluorescencyjnym reporterem do znakowania zainfekowanych neuronów.
Opuścić strzykawkę, aby dotrzeć do zakrętu zębatego, a następnie powoli wstrzyknąć wirusa, aby zapewnić równomierne rozprowadzenie.
Stopniowo podnosić strzykawkę i powtarzać wstrzyknięcie na dodatkowych współrzędnych.
Zrób krótką przerwę, aby zapobiec cofaniu się, a następnie powoli wyjmij igłę.
Powtórz procedurę na przeciwnej półkuli.
Na koniec zszyj nacięcie.
Model jest teraz gotowy do dalszych badań.
Ogolić głowę znieczulonej myszy w celu przygotowania się do miejsca wstrzyknięcia. Skierować 4% izofluranu do stożka nosowego. Następnie umieść mysz w instrumencie stereotaktycznym. Włóż pręt do gryzienia do pysk
Wyświetl pełny transkrypt i uzyskaj dostęp do tysięcy filmów naukowych