JoVE Encyklopedia Eksperymentów
Neuronauka
0 wyświetleń • 3:33 min. • June 17th, 2025
Zacznij od okienkowanego, zapłodnionego jaja kurzego zawierającego zarodek we wczesnym stadium z wyciętą cewą nerwową na poziomie somitów od jednego do siedmiu.
Pobrać cewę nerwową dawcy znakowaną GFP z transgenicznego zarodka kurczaka dopasowanego do etapu i wszczepić go biorcy, zapewniając właściwą orientację anatomiczną.
Usuń nadmiar płynu wokół przeszczepu, aby zwiększyć przyczepność między tkankami dawcy i gospodarza.
Uszczelnij okno przezroczystą taśmą, aby zapobiec odwodnieniu i zanieczyszczeniu.
Wysiaduj jajo, aż zarodek rozwinie się do pożądanego etapu.
Usuń taśmę.
Zidentyfikuj żyłę witelinową na żółtku, która przenosi krew w kierunku zarodka i usuń leżącą nad nią błonę witeliny.
Za pomocą szklanej igły stopniowo wstrzykiwaj lipofilowy barwnik fluorescencyjny do żyły.
Wizualizuj zarodek pod mikroskopem stereofluorescencyjnym.
Wstrzyknięty barwnik wiąże się z komórkami śródbłonka wyściełającymi naczynia krwionośne, uwydatniając sieć naczyniową, podczas gdy cewa nerwowa znakowana GFP umożliwia śledzenie sieci neuronowych.
Gdy będziesz gotowy do rozpoczęcia procedury szczepienia, ostrożnie przenieś wypreparowaną rurkę nerwową ze szkła zegarka do zarodka gospodarza. Ustaw cewę neuronow
Wyświetl pełny transkrypt i uzyskaj dostęp do tysięcy filmów naukowych