JoVE Encyklopedia Eksperymentów
Neuronauka
0 wyświetleń • 3:25 min. • June 17th, 2025
Zacznij od komory eksperymentalnej pokrytej elastomerem silikonowym, zawierającej zabezpieczony mięsień myszy umieszczony pod mikroskopem konfokalnym.
Mięsień jest zanurzony w roztworze fizjologicznym zawierającym inhibitory, które blokują skurcze mięśni.
Kikut nerwowy oznaczony fluorescencyjnym barwnikiem wapniowym umieszcza się wewnątrz elektrody ssącej, która jest podłączona do stymulatora elektrycznego.
W połączeniu nerwowo-mięśniowym nerw obwodowy jest połączony z mięśniem.
Zastosuj bodziec elektryczny do nerwu za pomocą elektrody. Powoduje to szybki napływ jonów wapnia, które wiążą się z wewnątrzkomórkowym barwnikiem wapnia.
Oświetl połączenie nerwowo-mięśniowe, aby wzbudzić barwnik wapniowy, powodując jego fluoryzację.
Następnie uchwyć obrazy o wysokiej rozdzielczości, aby zarejestrować szybkie stany przejściowe wapnia w zakończeniach nerwów obwodowych.
Wybierz obszar zainteresowania i zmierz intensywność fluorescencji.
Szybki wzrost intensywności fluorescencji wskazuje na napływ wapnia do zakończeń nerwów obwodowych, podczas gdy spadek odzwierciedla klirens wapnia.
Napełnij system perfuzyjny roztworem Ringera zawierającym 10 mikromolową D-tubokurarynę i włącz perfuzyjną pompę ssącą
Wyświetl pełny transkrypt i uzyskaj dostęp do tysięcy filmów naukowych