Name: Elektroretinogramy wieloogniskowe (Wideo) | JoVE Journal
Uploaded: 2011-12-04T14:00:00.000+00:00
Duration: 16 min 49 s
Description: Poznaj metodologię elektroretinografii wieloogniskowej do oceny lokalizowanej funkcji siatkówki. Technika ta umożliwia wykrywanie wczesnych zmian w zwyrodnieniu plamki żółtej i toksyczności lekowej.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

1. Tekst protokołu
Wybierz pomieszczenie z niewielkimi zakłóceniami elektrycznymi. Zlew będzie pomocny podczas mycia rąk oraz czyszczenia elektrod. Pożądane jest również połączenie z internetem w celu udostępniania danych, a także po to, aby producent systemu mógł zaktualizować oprogramowanie lub pomóc w rozwiązaniu problemów.
<ol>
 <li>Przygotuj krople rozszerzające źrenice, zrównoważony roztwór soli, znieczulenie miejscowe oraz środki do czyszczenia w taki sposób, aby były łatwo dostępne. </li>
 <li>Zawsze umieszczaj badanych w tej samej pozycji i stosuj to samo oświetlenie pomieszczenia dla każdego z nich. </li>
 <li>Po przedstawieniu się i wyjaśnieniu procedury, rozszerz źrenice badanego. Wystarczy rozszerzenie mydryatyczne. Badanie można rozpocząć, gdy źrenice rozszerzą się do około 7 mm. </li>
 <li>Istnieje kilka rodzajów elektrod rejestrujących. Popularne elektrody to ERG Jet, srebrne druty DTL, folia złota oraz soczewki kontaktowe ze speculum. W przypadku stosowania elektrod wielorazowych należy przestrzegać zaleceń producenta dotyczących sterylizacji. </li>
 <li>Zgodnie z konwencją, elektroda rejestrująca dotykająca rogówki lub twardówki stanowi biegun dodatni, co generuje sygnał z falą b skierowaną w górę. W przypadku stosowania monopolarnej elektrody rejestrującej należy wybrać miejsce na głowie dla bieguna ujemnego, np. czoło, wyrostek sutkowaty lub płatek ucha. Elektrodę uziemiającą można umieścić w dowolnym miejscu na ciele. </li>
 <li> Dokładnie oczyść miejsca przyłożenia elektrod skórnych alkoholem i/lub preparatem do przygotowania skóry. </li>
 <li>Jeśli elektroda rejestrująca styka się z okiem, znieczul je kilkoma kroplami środka znieczulającego miejscowo. W przypadku stosowania soczewek kontaktowych lub kontaktów ze speculum należy zachować szczególną ostrożność, aby nie podrapać rogówki. </li>
 <li>Jeśli system mfERG wyświetla bodziec na monitorze wideo, umieść wszystkich badanych w tej samej odległości od monitora bodźca. Zapewnij identyczne warunki badania dla każdego uczestnika. </li>
 <li>Zwróć uwagę, czy badany czuje się komfortowo i podkreśl znaczenie utrzymania fiksacji oraz stanu odprężenia. Wybierz cel fiksacji, na którym badany będzie w stanie utrzymać wzrok. Podczas badania instruuj pacjentów słownie, aby utrzymywali fiksację i pozostawali zrelaksowani. </li>
 <li>Multifokalne elektroretinogramy są użyteczne w diagnozowaniu i ilościowym określaniu postępu większości chorób siatkówki, urazów oka oraz toksyczności leków oddziałujących na siatkówkę. </li>
 <li>Po każdej sesji rejestracji wykonaj kopię zapasową danych, oprócz zapisania ich w pamięci komputera systemu. </li>
 <li>Zalecam zapoznanie się z wytycznymi procedury rejestracji mfERG opracowanymi przez ISCEV2 oraz uzyskanie zgody Instytucjonalnej Komisji Bioetycznej na wszystkie procedury, w tym te z udziałem osób badanych. </li>
</ol>
2. Reprezentatywne wyniki
Na rysunku 1 przedstawiono przykład pomiaru mfERG wykonanego u pacjenta ze znaczną utratą górnej lewej części pola widzenia, nałożony na pole widzenia Humphrey 24-2.
Rysunek 2 przedstawia transformację skali kolorów u pacjenta z ogniskami toksyczności siatkówkowej w odległości od 5 do 15 stopni od dołka środkowego. Wynik ten jest zgodny z toksycznością wywołaną przez Plaquenil i chloropromazynę 3, 4, która zazwyczaj rozpoczyna się od niewielkich obszarów o powierzchni kilku milimetrów kwadratowych w regionie oddalonym o 5–15 stopni od dołka. W przeciwieństwie do tego, choroba Stargardta oraz dystrofie czopków wykazują wyraźny spadek amplitud mfERG w centralnej części plamki, gdzie dominują czopki. Wynik ten ilustruje wartość mfERG w diagnostyce różnicowej. Chorioretinopatia Birdshot (Rysunek 3) to rzadkie schorzenie siatkówki, którego specyfiką jest fakt, że pierwszą anomalią elektrofizjologiczną jest spowolnienie fizjologicznej odpowiedzi czopków. Postęp tego spowolnienia można monitorować za pomocą mfERG, ponieważ efekt ten rozprzestrzenia się z niewielkiego obszaru w nosowej części siatkówki aż do całkowitego objęcia całej siatkówki (Rysunek 4).
<img src="/files/ftp_upload/3176/3176fig1.jpg" align="Figure 1" alt="Schemat potencjału polowego w elektrofizjologii; mapa sygnałów napięciowych; analiza wzorca aktywności neuronalnej." data-altupdatedat="1787630408000"> 
Rysunek 1. Multifokalne ERG nałożone na pole widzenia Humphrey 24-2, wykazujące zgodność z ubytkiem pola widzenia.
<img src="/files/ftp_upload/3176/3176fig2.jpg" align="Figure 2" alt="Schemat pola widzenia; rozkład czułości prawego oka, strefy koncentryczne, analiza z kodowaniem kolorystycznym." data-altupdatedat="1787630408000"> 
Rysunek 2. Transformacja skali kolorów „amplitud” mfERG u pacjenta wykazującego wczesne ogniska toksyczności siatkówki w odległości 5-15 stopni od dołka środkowego.
<img src="/files/ftp_upload/3176/3176fig3.jpg" align="Figure 3" alt="Obraz skanu siatkówki z naczyniami krwionośnymi; fotografia dna oka w diagnostyce okulistycznej." data-altupdatedat="1787630408000"> 
Rysunek 3. Fotografia dna oka w obszarze nosowej części siatkówki lewego oka pacjenta z chorioretinopatią typu birdshot.
<img src="/files/ftp_upload/3176/3176fig4.jpg" align="Figure 4" alt="Wykres czasu ukrycia fali b lewego oka; sześciokątny widok pola; analiza pola widzenia." data-altupdatedat="1787630408000"> 
Rysunek 4. Transformacja kolorystyczna czasów ukrycia „fali b” lewego oka pacjenta z chorioretinopatią typu birdshot, wykazująca wydłużone czasy.

<ol><li>Sutter, E. E. Noninvasive Testing Methods: Multifocal Electrophysiology. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aSutter%2C+EE+%22Encyclopedia+of+the+Eye%22">Encyclopedia of the Eye</a>. Dartt, D. A. 3, Academic Press. Oxford. 142-160 (2010).</li>
<li>Hood, D. C., Bach, M., Brigell, M., Keating, D., Kondo, M., Lyons,, Palmowski, J. S., M, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((ISCEV+guidelines+for+clinical+multifocal+electroretinography%5BTitle%5D)+AND+%22Doc.+Ophthalmol%22%5BJournal%5D)">ISCEV guidelines for clinical multifocal electroretinography.</a> Doc. Ophthalmol. 116, 1-11 (2008).</li>
<li>Lai, T. Y., Chan, W. M., Li, H., Lai, R. Y., Lam, D. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Multifocal+electroretinographic+changes+in+patients+receiving+hydroxychloroquinetherapy%5BTitle%5D)+AND+%22Am.+J.+Ophthalmol%22%5BJournal%5D)">Multifocal electroretinographic changes in patients receiving hydroxychloroquinetherapy.</a> Am. J. Ophthalmol. 140, 794-807 (2005).</li>
<li>Michaelides, M., Stover, N. B., Francis, P. J., Weleber, R. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Retinal+toxicity+associated+with+hydroxychloroquine+and+chloroquine%3A+risk+factors%2C+screening%2C+and+progression+despite+cessation+of+therapy%5BTitle%5D)+AND+%22Arch.+Ophthalmol%22%5BJournal%5D)">Retinal toxicity associated with hydroxychloroquine and chloroquine: risk factors, screening, and progression despite cessation of therapy.</a> Arch. Ophthalmol. 129, 30-39 (2011).</li>
<li>Feigl, B., Brown, B., Lovie-Kitchin, J., Swann, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Adaptation+responses+in+early+age-related+maculopathy+Adaptation+responses+in+early+age-related+maculopathy%5BTitle%5D)+AND+%22Investigative+Ophthalmology+and+Visual+Science%22%5BJournal%5D)">Adaptation responses in early age-related maculopathy Adaptation responses in early age-related maculopathy.</a> Investigative Ophthalmology and Visual Science. 46, 4722-4727 (2005).</li>
<li>Greenstein, V. C., Holopigian, K., Seiple, W., Carr, R. E., Hood, D. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Atypical+multifocal+ERG+responses+in+patients+with+diseases+affecting+the+photoreceptors%5BTitle%5D)+AND+%22Vision+Res%22%5BJournal%5D)">Atypical multifocal ERG responses in patients with diseases affecting the photoreceptors.</a> Vision Res. 44, 2867-2874 (2004).</li>
<li>Hansen, R. M., Moskowitz, A., Fulton, A. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Multifocal+ERG+responses+in+infants%5BTitle%5D)+AND+%22Invest+Ophthalmol+Vis+Sci%22%5BJournal%5D)">Multifocal ERG responses in infants.</a> Invest Ophthalmol Vis Sci. 50, 470-475 (2009).</li>
<li>Miguel-Jiménez, J. M., Ortega, S., Boquete, L., Rodríguez-Ascariz, J. M., Blanco, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Multifocal+ERG+wavelet+packet+decomposition+applied+to+glaucoma+diagnosis%5BTitle%5D)+AND+%22BioMedical+Engineering+OnLine%22%5BJournal%5D)">Multifocal ERG wavelet packet decomposition applied to glaucoma diagnosis.</a> BioMedical Engineering OnLine. 10, 1186-1186 (2011).</li>
<li>Dale, E. A., Hood, D. C., Greenstein, V. C., Odel, J. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+comparison+of+multifocal+ERG+and+frequency+domain+OCT+changes+in+patients+with+abnormalities+of+the+retina%5BTitle%5D)+AND+%22Doc.+Ophthalmol%22%5BJournal%5D)">A comparison of multifocal ERG and frequency domain OCT changes in patients with abnormalities of the retina.</a> Doc. Ophthalmol. 120 (2), 175-186 (2010).</li>
<li>Birch, D. G., Williams, P. D., Callanan, D., Wang, R., Locke, K. G., Hood, D. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Macular+atrophy+in+birdshot+retinochoroidopathy%3A+an+optical+coherence+tomography+and+multifocal+electroretinography+analysis%5BTitle%5D)+AND+%22Retina%22%5BJournal%5D)">Macular atrophy in birdshot retinochoroidopathy: an optical coherence tomography and multifocal electroretinography analysis.</a> Retina. 30, 930-937 (2010).</li>
<li>Creel, D. J. P. art Part XI. The electroretinogram. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aCreel%2C+DJPart+%22Clinical+applications%22">Clinical applications</a>. , http://webvision.med.utah.edu (2011).</li>
<li>Zhou, W., Rangaswamy, N., Ktonas, P., Frishman, L. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Oscillatory+potentials+of+the+slow-sequence+multifocal+ERG+in+primates+extracted+using+the+Matching+Pursuit+method%5BTitle%5D)+AND+%22Vision+Research%22%5BJournal%5D)">Oscillatory potentials of the slow-sequence multifocal ERG in primates extracted using the Matching Pursuit method.</a> Vision Research. 47 (15), 2021-2036 (2007).</li>
</ol>

Nie zadeklarowano konfliktów interesów.

Tradycyjnie do diagnostyki i monitorowania postępu zaburzeń siatkówki stosowano ERG pełno- i jednopunktowe, które rejestrują sygnały z ograniczonego obszaru siatkówki. Ograniczeniem tego podejścia jest fakt, że techniki te są nieczułe, dopóki nie zostanie zajęte co najmniej 20% siatkówki. Urazy siatkówki powodujące ubytki w polu widzenia wywołują nieprawidłowe wyniki mfERG, co jest zgodne z utratą pola widzenia 5. W ten sposób badanie wieloogniskowego ERG otworzyło nowe możliwości w diagnostyce i monitorowaniu...

multifokalne elektroretinogramy

Multifocal Electroretinograms

Ograniczeniem tradycyjnych pełnowpólnych elektroretinogramów (ERG) w diagnostyce retinopatii jest brak czułości. Zazwyczaj wyniki ERG pozostają w normie, dopóki uszkodzeniu nie ulegnie więcej niż około 20% siatkówki. W praktyce pacjent może być uznany za niewidomego w wyniku zwyrodnienia plamki żółtej lub innych scotom, a mimo to wynik tradycyjnego pełnowpólnego ERG może nadal być prawidłowy. Ważnym rozworem w dziedzinie ERG jest multifokalny ERG (mfERG). Erich Sutter zaadaptował sekwencje matematyczne zwane binarnymi sekwencjami m, co umożliwiło wyodrębnienie z pojedynczego sygnału elektrycznego elektroretinogramu reprezentującego obszar mniejszy niż jeden milimetr kwadratowy siatkówki w odpowiedzi na bodziec wzrokowy1.
Wyniki generowane przez mfERG są zbliżone do tych uzyskiwanych za pomocą flash ERG. W przeciwieństwie do flash ERG, który najlepiej dostarcza danych odpowiednich dla schorzeń obejmujących całe oko. Podstawowy wynik mfERG opiera się na obliczonej średniej matematycznej przybliżenia komponentu odchylenia dodatniego tradycyjnej odpowiedzi ERG, znanego jako fala b1. Programy mfERG mierzą aktywność elektryczną z ponad stu obszarów siatkówki w każdym oku w ciągu kilku minut. Zwiększona rozdzielczość przestrzenna umożliwia mapowanie i kwantyfikację skotom oraz dysfunkcji siatkówki.
W poniższym protokole opisano rejestrację mfERG z wykorzystaniem bipolarnej soczewki kontaktowej typu speculum.
Komponenty systemów mfERG różnią się w zależności od producenta. Do prezentacji bodźców widzialnych dostępne są odpowiednie monitory CRT, jednak większość systemów wykorzystuje wyświetlacze ciekłokrystaliczne (LCD) z płaskim panelem. Bodźce wzrokowe przedstawione w niniejszym materiale zostały wygenerowane przez mikro-wyświetlacz LCD obejmujący 35 - 40 stopni w poziomie i 30 - 35 stopni w pionie pola widzenia, skalibrowany tak, aby uzyskać wieloogniskowe intensywności błysku wynoszące 2,7 cd s m-2. Wzmocnienie wynosiło 50K. Dolna i górna granica pasma przepustowego wynosiły odpowiednio 10 i 300 Hz. Wykorzystano pakiety oprogramowania VERIS w wersjach 5 i 6.

Opracowanie wieloogniskowego elektroretinogramu (mfERG) stanowi istotny postęp w diagnostyce i charakteryzacji retinopatii. Wieloogniskowe elektroretinogramy są średnią matematyczną przybliżenia fali b. Programy komputerowe potrafią wygenerować ERG z ponad stu obszarów siatkówki w ciągu zaledwie kilku minut na jedno oko. Dzięki temu możliwe jest mapowanie i ilościowa ocena scotom oraz dysfunkcji siatkówki.

Multifokalne elektroretinogramy

Ograniczeniem tradycyjnej pełno-polowej elektroretinografii (ERG) w diagnostyce retinopatii jest brak czułości. Zazwyczaj wyniki ERG są...

Oczywiście. Donald Creel. Witam, nazywam się Don Creel i jestem dyrektorem działu elektrofizjologii w Moran Eye Center w Salt Lake City.Dzisiaj omówimy wieloogniskowy elektroretinogram. Eric Sutter zaadaptował sekwencje matematyczne zwane binarnymi sekwencjami M w taki sposób, aby z pojedynczego sygnału elektrycznego można było wyizolować przybliżenie elektroretinogramu z każdego milimetra kwadratowego siatkówki. Elektroretinogramy te przypominają elektroretinogram błyskowy, lecz w rzeczywistości są średnią matematyczną przybliżenia fali B.Przyjrzyjmy się sprzętowi do rejestracji. Wybierając pomieszczenie do rejestracji elektrofizjologicznej, należy wybrać takie, w którym występują niewielkie zakłócenia elektryczne. Nie należy wybierać pomieszczenia sąsiadującego ze źródłem zakłóceń wysokiego napięcia, takim jak winda, urządzenia o dużym natężeniu prądu, autoklaw lub wirówki.Pomieszczenie z zlewem jest wygodne do mycia rąk i czyszczenia elektrod. Warto zapewnić połączenie z internetem, aby umożliwić udostępnianie danych, a producentowi systemu pozwolić na pobieranie aktualizacji oprogramowania oraz dostęp do komputera w celu pomocy w rozwiązywaniu problemów. Należy dbać o rygorystyczną organizację w pomieszczeniu.Przechowuj krople rozszerzające źrenice oraz roztwór soli fizjologicznej w tym samym miejscu, aby były łatwo dostępne. Bądź skrupulatny w stosowaniu procedur rejestracji danych. Stosuj to samo oświetlenie w pomieszczeniu.Umieść każdego pacjenta w tym samym miejscu. System w Moran Eye Center to system Vera Erica Suttera, wyprodukowany przez firmę EDI. System Vera wykorzystuje mikroekran do wyświetlania wzoru bodźca.Większość systemów mfERG wyświetla bodźce na monitorze wideo, z którego badany korzysta z odległości pół metra lub mniejszej. Większość wyświetlaczy bodźców wykorzystuje wzór podobny do tego. Obraz fiksacyjny różni się w zależności od producenta.System VERA pozwala na wybór koła lub krzyża maltańskiego o dowolnej wielkości X. Kształty te można dostosować do dowolnego rozmiaru czcionki i pióra, od kilku milimetrów aż po pełną szerokość pola bodźca. Stosowanie krzyża maltańskiego jest przydatne u pacjentów ze scotoma plamką.Można dostosować rozmiar i szerokość ramion krzyża maltańskiego, aby pacjent mógł oszacować położenie środka i utrzymać ten punkt fiksacji. Niezależnie od zastosowanego systemu, wyniki są zazwyczaj wyświetlane na monitorze wideo i wyglądają w ten sposób. Posiadam automatyczny system kopii zapasowych, który co kilka minut zapisuje wszystkie zarejestrowane dane.Zalecam to na wypadek wystąpienia problemów z komputerem. Ponownie rekomenduję skrupulatność w organizacji rozmieszczenia kropel rozszerzających, sztucznych łez oraz roztworów używanych do czyszczenia elektrod. Stosuję rozcieńczony roztwór, 10% roztwór wybielacza do tkanin, który rozcieńczam z koncentratu do stężenia 10% i przechowuję w mniejszej butelce, na przykład o pojemności jednego litra, mając pod ręką wodę destylowaną.Do płukania. Wyraźnie oznacz pojemnik służący do czyszczenia, który w naszym przypadku oznaczamy czerwoną kropką. W nim czyścimy soczewki kontaktowe, a następnie płuczemy je wodą z kranu i wodą destylowaną.Należy stosować się do zaleceń producenta soczewek kontaktowych. Dotyczy to sytuacji, w których używane są soczewki kontaktowe wielorazowe. Istnieje szereg rodzajów elektrod do oczu.Zaprezentuję Państwu niektóre z nich. Jest to elektroda ERG, która po umieszczeniu na oku wygląda w ten sposób. To z kolei złota folia, będąca fragmentem taśmy magnetofonowej z naniesioną z jednej strony złotą folią, którą umieszcza się w oku, zazwyczaj zawieszając ją na dolnej powiece.Złota folia styka się z twardówką i rejestruje aktywność elektryczną oka. Można użyć cienkiego srebrnego drutu. Są one nazywane DTL.Są one jednorazowe. Posiadają samoprzylepne elementy mocujące, które umieszcza się w pobliżu krawędzi wewnętrznej i zewnętrznej powieki, a srebrny drucik styka się ze sklerą i dolną częścią oka. Stosuję przezroczysty bipolarne wziernik typu buran produkcji Hanson Laboratories z Iowa City w stanie Iowa.Jeśli nie używasz bipolarnej soczewki kontaktowej, musisz wybrać inne miejsce dla ujemnego odniesienia w badaniu okulistycznym. Jako uziemienie powszechnie wykorzystywano czoło, wyrostek sutkowaty lub płatek ucha. Możesz użyć dowolnego miejsca, na przykład nadgarstka.W moim przypadku wykorzystuję płatek ucha. Najpierw dokładnie oczyszczam go alkoholem, a następnie stosuję komercyjny środek czyszczący sprzedawany jako pasta do przygotowania do EEG.Im lepsze połączenia, tym lepsze dane. Przedstawię główną procedurę podłączenia pacjenta. W przypadku multifokalnego elektroretinogramu znieczulam oko, podając kilka kropli anestetyku miejscowego.Używamy propanokainy. Zazwyczaj podaję dwie lub trzy krople, aby upewnić się, że oko jest odpowiednio znieczulone. Należy unikać przesuwania soczewki po rogówce, dlatego proszę pacjenta o spojrzenie w dół, umieszczam soczewkę wysoko na twardówce, a następnie opuszczam ją pionowo w dół, aby nie spowodować otarcia rogówki.W mojej procedurze testowej używam następnie podpórek pod głowę w celu jej unieruchomienia, aby zapewnić maksymalną stabilizację, pytając pacjenta, czy czuje się komfortowo, a następnie ustawiam mikroekran. Kieruję dłoń pacjenta do pokrętła ostrości w systemie VERA. Wówczas można zobaczyć obraz oka na ekranie.Widać wzór padający na źrenicę. Jedną z funkcji systemu VERA jest zewnętrzne nagranie wideo oka, które pozwala instruować badanych, aby utrzymywali fiksację w przypadku uciekania wzroku. Można również przełączyć się na widok dna oka, co umożliwia projekcję wzoru na siatkówkę w modelach zwierzęcych lub u pacjentów w znieczuleniu.Chciałbym ponownie podkreślić procedury łączenia pacjenta oraz bardzo dokładnego osadzenia soczewki kontaktowej. Niezależnie od wybranych lokalizacji dla referencji ujemnej lub masy, im lepsze połączenie, tym lepszej jakości dane. Ponownie, znieczul oko, stosując kilka kropli miejscowego środka znieczulającego, takiego jak prokaina.U pacjentów należy jedynie rozszerzyć źrenice, używając moich kropli datic. Aby obraz bodźca padał na centralne około 40 stopni siatkówki, wystarczy źrenica o średnicy około siedmiu milimetrów.Ponownie, w przypadku używanych przeze mnie elektrod, upewniam się, że są one odpowiednio skierowane w dół, a następnie umieszczam kontakt bezpośrednio, aby w ogóle nie uszkodzić rogówki. Aby zabezpieczyć jego położenie na oku, wyrównuję środek źrenicy ze środkiem soczewki kontaktowej, naklejam mały kawałek taśmy na policzek, aby utrzymać jej pozycję, a następnie umieszczam głowę pacjenta w stabilizatorach, aby pomóc w unieruchomieniu głowy, i pytam, czy czuje się komfortowo w tej pozycji. Następnie ustawiam mikroekran, zawsze zasłaniając drugie oko.Niektóre osoby mają tak wyraźnie dominujące oko, że nawet gdy prosimy je o patrzenie na wzór jednym okiem, nie będą one patrzeć bezpośrednio na niego, jeśli oko dominujące pozostanie otwarte; w takim przypadku proszę pacjenta o skupienie wzroku w celu uzyskania ostrego obrazu. Poproś pacjenta, aby skupił się wyłącznie na punkcie fiksacji – tak właśnie wygląda to podczas rejestracji. Można zauważyć ruch wzoru na rogówce.Tak prezentuje się obraz wewnątrz mikroekranu i ponieważ większość bodźców jest wyświetlana na monitorach wideo w innych systemach wielomiejscowego elektroretinogramu, kluczowe jest, aby pacjent utrzymywał fiksację wzroku. Brak utrzymania fiksacji skutkuje pojawieniem się wielu punktów wskazujących na to, że pacjent skupiał wzrok w różnych miejscach podczas rejestracji, zamiast uzyskania jednego centralnego piku. Jednym z wielu zastosowań wielomiejscowego elektroretinogramu jest monitorowanie postępu degeneracji plamki żółtej.U tego pacjenta widoczne są początki zwyrodnienia plamki żółtej w jednym oku. Można zauważyć obniżone amplitudy ERG w centralnej części tego oka. Wyświetlacz kolorowy wyglądałby w ten sposób.W porównaniu do zdrowych osób poniżej, innym zastosowaniem multifokalnego elektroretinogramu jest wykrywanie i monitorowanie progresji u pacjentów przyjmujących leki, które mogą być toksyczne dla oka, takie jak chlorochina lub Plaquenil. U tych osób, w przypadku toksyczności leku, mogą pojawić się szotomy pierścieniowate, zazwyczaj w odległości od 5 do 10 stopni od dołka środkowego. Jest to obraz osoby z istotną toksycznością siatkówki wywołaną przez Plaquenil.Można zauważyć obszary scotom wokół dołka centralnego w odległości od 5 do około 10–15 stopni oraz powstający w wyniku tego pierścień scotomy. Jest to bardzo ciężki przejaw toksyczności Plaquenil. Jest to pole widzenia osoby, która doznała urazu oka, wykazujące ubytek pola widzenia.Przedstawiono tutaj multifokalny elektroretinogram, który wykazuje osłabienie w obszarze odpowiadającym ubytkowi pola widzenia; widoczna jest również kolorowa reprezentacja tego ubytku. Widoczne jest jednak oszczędzenie centrum, przy czym obszary skotom zaczynają się w odległości około pięciu stopni od dołka środkowego i rozciągają się do godziny dziewiątej w polu widzenia pacjenta. Tradycyjnie w przypadku multifokalnego elektroretinogramu analizowano głównie to, co można określić jako amplitudę fali B.Ważne jest również przeanalizowanie czasów utajonych. W zależności od rodzaju choroby czasy utajone mogą być zmienione. Oprócz tłumienia amplitudy, pacjent ten cierpi na chorioretinopatię typu birdshot.U tych osób może występować dowolne stadium degeneracji siatkówki, jednak w początkowych fazach charakterystyczne jest jedynie wydłużenie czasów utajenia, szczególnie w fizjologii czopków. Przejawia się to wydłużeniem czasów utajenia przekraczającym dwie lub trzy odchylenia standardowe. Należy analizować czasy utajenia u wszystkich pacjentów.Rysunek ten przedstawia multifokalny elektroretinogram pacjenta z zespołem powiększonych plamek ślepych. Można zauważyć znacznie powiększony obszar obniżonych wartości wokół prawidłowej plamki ślepej. Przedstawia to transformację kolorystyczną amplitudy w obszarze występowania zespołu powiększonych plamek ślepych.Przedstawiono tutaj czasy ukryte w zespole dużej plamki ślepej. Obraz pacjenta przekształcono w skalę kolorystyczną. Obszary białe wskazują spowolnienie o pięć odchyleń standardowych.Różowy obszar oznacza spowolnienie o cztery odchylenia standardowe w czasie ukrytym, a czerwony obszar o trzy odchylenia standardowe. W przypadku czasów ukrytych, jak wspomniałem wcześniej, ważne jest, aby regularnie analizować czasy ukryte pacjentów, a nie tylko amplitudy ich multifokalnego elektroretinogramu. Jest to pacjent z chorobą Stargardta.W centralnej części siatkówki widoczny jest osłabiony multifokalny elektroretinogram. Rycina ta przedstawia transformację kolorystyczną amplitud, przy czym nie stwierdzono obecności piku centralnego. Podsumowując, zachęcam osoby rejestrujące multifokalny elektroretinogram do poszerzania horyzontów oraz stosowania nowych protokołów i analiz.Multifokalny elektroretinogram to nie tylko jedna analiza stosowana przez większość badaczy, która stanowi matematyczną aproksymację amplitud BWA. Należy analizować inne parametry, w szczególności czasy utajenia, oraz stosować różne protokoły dostosowane do każdego pacjenta. Warto zapytać o inne protokoły opracowane specjalnie dla różnych grup pacjentów.Multifokalna elektroretinografia obejmuje system wielu możliwych protokołów i analiz.

Research

JoVE Journal

Medicine

Medycyna

W tym filmie wykonujemy zapis elektroretinogramu, zapis z nerwu wzrokowego oraz zapis wewnątrzsiatkówkowy u amerykańskiego kraba podkowiasty, Limulus Polyphemus. Te paradygmaty elektrofizjologiczne mogą być wykorzystywane do badania neuronalnych podstaw widzenia w laboratoriach badawczych lub dydaktycznych.

Wykorzystanie kraba podkowiastego, Limulus Polyphemus, w badaniach nad wzrokiem

Opisujemy stosunkowo prostą metodę rejestracji transretinalnego elektroretinogramu (ERG) w celu uzyskania odpowiedzi fotoreceptorowych pręcików i czopków z nienaruszonej siatkówki myszy. Podejście to wykorzystuje blokadę przekaźnictwa synaptycznego z fotoreceptorów w celu wyizolowania ich odpowiedzi na światło i zarejestrowania ich za pomocą elektrod polowych umieszczonych w poprzek wyizolowanej, rozłożonej płasko siatkówki.

Rejestracja transretinalnego ERG z siatkówki myszy: fotoreakcje czopków i pręcików

Ten film pokazuje, jak rejestrować elektroretinogram (ERG) i wizualny potencjał wywołany (VEP) u przytomnego szczura. Szczur, z chirurgicznie wszczepionymi elektrodami, jest najpierw przystosowany do ciemności. Po zastosowaniu kropli rozszerzających zwierzę umieszcza się w unieruchomieniu i umieszcza w misce Ganzfelda. Następnie rejestrowane są sygnały ERG i VEP.

Zapis elektroretinogramu i wizualnego potencjału wywołanego u szczura

Ten film pokazuje nagranie bezpośrednio sprzężonego elektroretinogramu (DC-ERG) na przystosowanym do ciemności, znieczulonym nabłonku barwnikowym siatkówki myszy (RPE). Po zastosowaniu kropli rozszerzających zwierzę umieszcza się w ustawieniu do nagrywania, a elektrodę kapilarną wypełnioną buforem solnym umieszcza się na rogówce. Po ustaleniu linii bazowej rejestruje się DC-ERG.

Zapis elektroretinogramu z bezpośrednim sprzężeniem nabłonka barwnikowego siatkówki u myszy

Elektroretinogram (ERG) to potencjał elektryczny generowany przez siatkówkę w odpowiedzi na światło. W artykule opisano, w jaki sposób można wykorzystać ERG do oceny funkcji siatkówki u szczurów przystosowanych do ciemności oraz jak można go wykorzystać do oceny interwencji neuroprotekcyjnej, w tym przypadku zdalnego warunkowania niedokrwiennego.

Wykorzystanie elektroretinogramu do oceny funkcji siatkówki gryzoni i ochronnych skutków warunkowania wstępnego niedokrwiennego kończyn na odległość

Ex vivo ERG może być używany do rejestrowania aktywności elektrycznej komórek siatkówki bezpośrednio z izolowanych nienaruszonych siatkówk zwierząt lub ludzi. Pokazujemy tutaj, jak powszechne systemy ERG in vivo można dostosować do zapisów ERG ex vivo w celu zbadania aktywności elektrycznej komórek siatkówki.

Jednoczesne badanie funkcjonalne ex vivo dwóch siatkówk za pomocą systemu elektroretinogramu in vivo

Ten protokół opisuje jednoczesny pomiar elektroretinogramu i wzrokowych potencjałów wywołanych u znieczulonych szczurów.

Jednoczesna rejestracja elektroretinografii i wzrokowych potencjałów wywołanych u znieczulonych szczurów

Tutaj prezentujemy metodę rejestrowania wywołanych światłem reakcji elektrycznych nabłonka barwnikowego siatkówki (RPE) u myszy za pomocą techniki znanej jako DC-ERG, po raz pierwszy opisanej przez Marmorsteina, Peacheya i współpracowników na początku 2000 roku.

Elektroretinogram ze sprzężeniem bezpośrednim (DC-ERG) do rejestrowania wywołanych światłem reakcji elektrycznych nabłonka barwnikowego siatkówki myszy

Przestrzeganie międzynarodowych standardów i utrzymanie adaptacji siatkówki do ciemności jest niezbędne do uzyskania prawidłowych odpowiedzi na elektroretinogram w pełnym polu w diagnostyce i leczeniu dziedzicznych chorób siatkówki. Dostępny jest praktyczny protokół wykorzystujący przenośną ciemnię w celu uzyskania  pełnopolowy elektroretinogram dla niemowląt i dzieci w sedacji lub znieczuleniu ogólnym na sali operacyjnej.

Zapis elektroretinogramu dla niemowląt i dzieci pod narkozą w celu osiągnięcia optymalnej adaptacji do ciemności i międzynarodowych standardów

Modyfikacja istniejących urządzeń do tworzenia wieloelektrodowych układów lub krosówek sprawia, że elektroretinogram ex vivo jest szerzej dostępny. Ulepszone metody rejestrowania i utrzymywania odpowiedzi na światło ex vivo ułatwiają badanie funkcji fotoreceptorów i komórek dwubiegunowych ON w zdrowej siatkówce, zwierzęcych modelach chorób oczu i ludzkich siatkówkach dawców.

Optymalizacja ustawień i warunków elektroretinogramu ex vivo w celu badania funkcji siatkówki w małych i dużych oczach

Tutaj prezentujemy dwa protokoły do rejestracji mikro-elektrokortykografii o wysokiej gęstości (μEcoG) u szczurów i myszy, w tym metody chirurgiczne, implantacyjne i rejestracyjne. Zapisy μECoG są wykonywane w połączeniu z zapisem laminarnej politrody w korze słuchowej szczura lub z optogenetycznym manipulowaniem aktywnością neuronalną w korze somatosensorycznej myszy.

Wieloskalowe badania przetwarzania kory mózgowej poprzez integrację politrod laminarnych i optogenetyki z mikroelektrokortykografią u gryzoni

Poznaj metodologię elektroretinografii wieloogniskowej do oceny lokalizowanej funkcji siatkówki. Technika ta umożliwia wykrywanie wczesnych zmian w zwyrodnieniu plamki żółtej i toksyczności lekowej.

Multifokalne elektroretinogramy

Przeglądaj więcej filmów