JoVE Encyklopedia Eksperymentów
Neuronauka
0 wyświetleń • 2:13 min. • June 17th, 2025
Zacznij od znieczulonej myszy z chirurgicznie odsłoniętym ganglionem kolankowatym, skupiskiem neuronów obwodowych przetwarzających smak.
Neurony te wyrażają GCaMP, wskaźnik wapnia, który fluoryzuje po związaniu wapnia.
Usuń płyn pokrywający ganglion, aby uzyskać wyraźną wizualizację.
Umieść mysz na podkładce chłonnej pod mikroskopem i zlokalizuj ganglion kolankowaty, korzystając z anatomicznych punktów orientacyjnych.
Używając odpowiedniego filtra na zakresie epifluorescencji, wykryj zieloną fluorescencję z neuronów eksprymujących GCaMP.
Następnie włóż igłę dozującą podłączoną do rurki do podawania degustacji do ust myszy i podaj degustator.
Degustator stymuluje komórki receptorów smaku, uwalniając ATP, który wiąże się z receptorami neuronów zwojowych, wywołując napływ wapnia.
Te jony wapnia wiążą się z GCaMPs, indukując emisję fluorescencji.
Dopasuj kamerę do pola widzenia mikroskopu i zsynchronizuj nagrywanie wideo z dostarczaniem degustacji, aby uchwycić aktywność neuronalną w czasie rzeczywistym poprzez zmiany fluorescencji.
Aby uruchomić panel degustacyjny, użyj ssania, aby usunąć płyn znad kolankowatego i umieść mysz na podkładce chłonnej pod mikroskopem preparacyjnym. Użyj otworu po
Wyświetl pełny transkrypt i uzyskaj dostęp do tysięcy filmów naukowych