JoVE Encyklopedia Eksperymentów
Neuronauka
0 wyświetleń • 2:15 min. • June 17th, 2025
Zacznij od komórek Schwanna lub SC, mielinizujących komórek glejowych obwodowego układu nerwowego, hodowanych w pożywkach.
Przenieś komórki do naczynia kolorymetrycznego wyposażonego w elektrody po obu stronach.
Umieść naczynie na nanosekundowym impulsowym polu elektrycznym lub urządzeniu nsPEF i ustaw żądane natężenie pola elektrycznego.
Zastosuj impulsy nsPEF, ostrożnie obracając elektrody, aż pojawią się iskry.
Natychmiast po stymulacji oddziel elektrody i kontynuuj hodowlę komórek.
nsPEF rozrywa błony SC, tworząc przejściowe nanopory, które umożliwiają napływ wapnia. Membrany w końcu ponownie się uszczelniają.
Wewnątrzkomórkowy wapń aktywuje białka wiążące wapń, uruchamiając szlaki sygnałowe, które zwiększają regulację genów zaangażowanych w postęp cyklu komórkowego.
Trwała sygnalizacja wapniowa aktywuje również czynniki transkrypcyjne, które napędzają dedyferencjację SC do fenotypu naprawczego, po którym następuje proliferacja.
Dodatkowo zwiększa się wydzielanie czynników neurotroficznych, które wspierają przeżycie i wzrost neuronów.
Model jest teraz gotowy do badania roli SC stymulowanych przez nsPEF w regeneracji nerwów obwodowych po urazie.
Na początek ponownie zawieś hodowane komór
Wyświetl pełny transkrypt i uzyskaj dostęp do tysięcy filmów naukowych