JoVE Encyclopedia of Experiments
Neuronauka
0 wyświetleń • 1:45 min • June 17th, 2025
Zacznij od wyciętej tkanki mózgowej myszy zawierającej skrzepliny lub skrzepy krwi w naczyniach krwionośnych mózgu.
Skrzepliny są znakowane za pomocą sondy fluorescencyjnej w bliskiej podczerwieni lub NIRF, która wiąże się kowalencyjnie z pasmami fibryny podczas dojrzewania skrzepliny.
Umieść tkankę mózgową w kamerze bliskiej podczerwieni, ustawiając podstawę mózgu lub stronę brzuszną skierowaną do góry, aby zobrazować skrzeplinę w głównych tętnicach mózgowych.
Zastosuj światło bliskiej podczerwieni do tkanki mózgowej, która wzbudza sondę NIRF w znakowanej skrzeplinie.
Po wzbudzeniu sonda emituje światło o większej długości fali.
Powoduje to, że skrzeplina fluoryzuje i wydaje się jasna na ciemnym tle, minimalizując zakłócenia z otaczających tkanek.
Następnie odwróć tkankę mózgową i zobrazuj grzbietową stronę mózgu, aby uwidocznić skrzeplinę w małych korowych naczyniach krwionośnych.
Zapewnia to pełną wizualizację skrzepliny w tkance mózgowej o wysokim kontraście.
Aby uwidocznić skrzeplinę za pomocą obrazowania w bliskiej podczerwieni ex-vivo, umieść wyciętą tkankę mózgową w kamerze z podstawą skierowaną do góry. Uzyskaj obrazy znakowanej fluorescencyjnie choroby zakrzepowo-zatorowej w tętnicach Koła Willisa. Następnie ustaw tkankę tak, aby wierzchołek był skierowany do góry i zobrazuj korową chorobę zakrzepowo-zatorową.