Wizualizacja zakrzepów mózgowych myszy za pomocą obrazowania fluorescencyjnego w bliskiej podczerwieni

Zacznij od wyciętej tkanki mózgowej myszy zawierającej skrzepliny lub skrzepy krwi w naczyniach krwionośnych mózgu.

Skrzepliny są znakowane za pomocą sondy fluorescencyjnej w bliskiej podczerwieni lub NIRF, która wiąże się kowalencyjnie z pasmami fibryny podczas dojrzewania skrzepliny.

Umieść tkankę mózgową w kamerze bliskiej podczerwieni, ustawiając podstawę mózgu lub stronę brzuszną skierowaną do góry, aby zobrazować skrzeplinę w głównych tętnicach mózgowych.

Zastosuj światło bliskiej podczerwieni do tkanki mózgowej, która wzbudza sondę NIRF w znakowanej skrzeplinie.

Po wzbudzeniu sonda emituje światło o większej długości fali.

Powoduje to, że skrzeplina fluoryzuje i wydaje się jasna na ciemnym tle, minimalizując zakłócenia z otaczających tkanek.

Następnie odwróć tkankę mózgową i zobrazuj grzbietową stronę mózgu, aby uwidocznić skrzeplinę w małych korowych naczyniach krwionośnych.

Zapewnia to pełną wizualizację skrzepliny w tkance mózgowej o wysokim kontraście.

Aby uwidocznić skrzeplinę za pomocą obrazowania w bliskiej podczerwieni ex-vivo, umieść wyciętą tkankę mózgową w kamerze z podstawą skierowaną do góry. Uzyskaj obrazy znakowanej fluorescencyjnie choroby zakrzepowo-zatorowej w tętnicach Koła Willisa. Następnie ustaw tkankę tak, aby wierzchołek był skierowany do góry i zobrazuj korową chorobę zakrzepowo-zatorową.