JoVE Encyklopedia Eksperymentów
Neuronauka
0 wyświetleń • 5:25 min. • June 17th, 2025
Weźmy neurony piramidowe, które są transdukowane i znakowane immunologicznie, aby fluoryzowały na zielono.
Uzyskuj obrazy neuronów za pomocą konfokalnego laserowego mikroskopu skaningowego z ustawieniami dostosowanymi w celu zapewnienia optymalnej jakości obrazu.
Otwórz obraz za pomocą specjalistycznego oprogramowania i użyj filtra Gaussa, aby zredukować szum tła.
Wykonaj półautomatyczne śledzenie dendrytów, najpierw szacując średnicę dendrytu. Następnie wybierz punkt początkowy, ścieżkę i punkt końcowy dendrytu.
W przypadku automatycznej segmentacji grzbietu wybierz opcję odbuduj średnicę dendrytu i ustaw próg objętości dendrytu, aby reprezentował rzeczywistą objętość dendrytu.
Określ wartości najmniejszej średnicy głowy grzbietu i maksymalnej długości grzbietu.
Dostosuj próg dla punktów reprezentujących kolce, upewniając się, że są one zlokalizowane na rzeczywistych głowach kręgosłupów.
Ustaw parametry, aby sklasyfikować kolce na podstawie długości, średnicy głowy i kształtu.
Wygeneruj model 3D dendrytu z kolcami i wyeksportuj dane do dalszej analizy.
Pod mikroskopem konfokalnym wybierz co najmniej 10 zdrowych neuronów na stan o morfologii piramidalnej i pełnej arboryzacji dendrytycznej.
Wyświetl pełny transkrypt i uzyskaj dostęp do tysięcy filmów naukowych