JoVE Encyclopedia of Experiments
Neuronauka
0 wyświetleń • 3:37 min • August 7th, 2025
Weź znieczuloną mysz w pozycji leżącej z maską wziewną, aby zapewnić znieczulenie.
Do donosowego podawania leku za pomocą pipet należy wziąć mikropipetę zawierającą lek znakowany radioaktywnie.
Wprowadzić mikropipetę przez otwór w masce i podać lek do jamy nosowej.
Jama jest wyściełana nabłonkiem dróg oddechowych i węchowych, z których oba zawierają rzęski, które aktywnie usuwają substancje, ograniczając w ten sposób zatrzymywanie leków.
Zatrzymane cząsteczki leku przemieszczają się przez nerwy, aby dotrzeć do mózgu.
W przypadku donosowego podawania leku przez odwróconą kaniulację, umieść mysz pod mikroskopem i wykonaj nacięcie szyi.
Odsłoń tchawicę, nacinaj ją, włóż kaniulę i podłącz ją do maski, aby utrzymać znieczulenie.
Odsłoń przełyk, wykonaj nacięcie i włóż kaniulę skierowaną w stronę jamy nosowej.
Podwiązać kaniulę i podłączyć ją do strzykawki zawierającej lek znakowany radioaktywnie.
Dostarczyć lek w kierunku przeciwnym do kierunku ruchu rzęsek, zwiększając retencję i poprawiając transport leku.
W przypadku podawania donosowego za pomocą mikropipety w izolowanym urządzeniu z radioizotopem, znieczuloną mysz należy przykleić do tablicy korkowej w pozycji leżącej na plecach i podać 25 mikrolitrów roztworu inuliny węglowej 14 w dawkach od jednego do dwóch mikrolitrów na przemian do lewego i prawego nozdrza zwierzęcia.
W przypadku odwróconej kaniulacji od strony dróg oddechowych przez przełyk umieść znieczuloną mysz pod mikroskopem preparacyjnym i wykonaj 1,5 nacięcia skóry nad gardłem. Użyj kleszczy, aby rozszerzyć nacięcie, aż tchawica zostanie odsłonięta, i wykonaj 1-milimetrowe nacięcie w odsłoniętej tchawicy. Wprowadzić kaniulę 1,2 do wcześniej zaznaczonej pozycji do nacięcia i przymocować przeciwległy koniec kaniuli do wnętrza maski wziewnej.
Następnie użyj kleszczy, aby odsłonić przełyk spod tchawicy. Użyj nożyczek, aby wykonać 1-milimetrowe nacięcie w przełyku i włóż drugą kaniulę 1,4 do zaznaczonej pozycji w kierunku tylnego końca jamy nosowej.
Ważne jest, aby wprowadzić kaniulę na odpowiednią długość w zależności od wagi zwierzęcia doświadczalnego, a w innych dostosować długość kaniuli.
Podwiązać kaniulę przełyku i przymocować igłę o rozmiarze 27 do 1-mililitrowej strzykawki wypełnionej roztworem do podawania, podłączonej do programowalnej pompy mikrostrzykawkowej. Następnie podawaj 25 mikrolitrów inuliny węglowej-14 ze stałą szybkością 5 mikrolitrów na minutę, aż zostanie podana cała objętość roztworu.
Powolna, ale stała szybkość dyfuzji jest ważna dla zatrzymania jak największej ilości roztworu leku w jamie nosowej.