$$\rightleftharpoonup{xx}$$
$$\longleftharp{xx}$$,
$$\longrightharp{xx}$$,
Przymocuj znieczuloną mysz z wszczepionym guzem do ramy stereotaktycznej.
Usuń zszywki z poprzedniej operacji, zdezynfekuj skórę i naciąć wzdłuż poprzedniej rany, aby odsłonić czaszkę.
Zlokalizuj otwór w zadziorze z poprzedniej operacji, aby uzyskać dostęp do mózgu.
Umieść minimalnie inwazyjny system resekcji (MIRS) nad otworem w zadziorach.
System składa się z kaniuli z obrotowym okienkiem, które wykorzystuje ssanie do pobierania docelowej tkanki oraz cylindrycznego ostrza przy otworze do wycinania tkanki.
Włóż kaniulę do obszaru docelowego i rozpocznij resekcję.
Ssanie wciąga małe skrawki guza przez okno, podczas gdy ostrze wycina tkankę.
Obrotowe okienko umożliwia kontrolowaną resekcję poprzez ciągłe odsysanie i cięcie.
Wycięte fragmenty są przesyłane przez sterylny przewód do komory pobierania próbek.
Wyjmij kaniulę, zamknij ranę i pozwól myszy dojść do siebie.
Rozpocznij eksperyment od oceny myszy pod kątem sedacji, szczypiąc palec u nogi. Nałóż maść okulistyczną na oczy, aby uniknąć wysuszenia rogówki. Następnie umieść mysz na ramce stereotaktycznej. Usuń zszywkę z poprzedniego zabiegu i zdezynfekuj skórę za pomocą naprzemiennych cykli peelingu na bazie chlorheksydyny lub betadyny i alkoholu. Następnie za pomocą sterylnego skalpela wykonaj 1-centymetrowe podłużne nacięcie linii środkowej wzdłuż poprzedniej blizny pooperacyjnej. Przymocuj rękojeść MIRS do ramienia stereotaktycznego za pomocą stage adapter.
Aby skonfigurować urządzenie MIRS, włóż zestaw przewodu zasilającego na tylnym panelu do gniazda przewodu zasilającego. Włącz lub wyłącz zasilanie systemu, przełączając między 0 a 1. Włóż jeden koniec węża azotowego do złączki męskiej na tylnym panelu konsoli. Obróć nakrętkę łączącą zgodnie z ruchem wskazówek zegara, aby ją dokręcić. Upewnij się, że ciśnienie zasilania nie przekracza 100 PSIG i podłącz wąż do źródła azotu.
Uszczelnij pokrywę portu próżniowego, aby uniknąć wycieków. Sprawdź, czy pokrętło zasysania z przodu konsoli jest ustawione na 100, czy nie ma wycieków w systemie zasysania i czy ciśnienie zasilania azotem jest prawidłowe. Włóż szare złącze pedału nożnego do szarego gniazda, aż usłyszysz kliknięcie. W ten sam sposób włóż niebieskie złącze rękojeści do niebieskiego gniazda. Zalać każdą rękojeść, zasysając sterylny płyn do otworu przez rurkę i rękojeść, a następnie do kanistra, aby upewnić się, że wnętrze rurki i rękojeści są nasmarowane.
Wybierz tryb aspiracji na panelu przednim konsoli i rozpocznij za pomocą pedału nożnego. Włóż kaniulę 23G MIRS do odwiertu na głębokość 2.5 milimetra. Rozpocznij proces resekcji, naciskając pedał nożny podłączony do kaniuli. Wykonaj pełne cykle resekcji za pomocą pokrętła w rękojeści. Po procesie resekcji wyjmij kaniulę MIRS o rozmiarze 23 i dodaj 5 mililitrów 1x PBS, aby przepłukać rurkę i usunąć wszelkie resztki zanieczyszczeń. Następnie zamknij ranę zszywaczem i wyjmij mysz z ramki stereotaktycznej. Umieść mysz z powrotem na poduszce grzewczej, aby wyleczyć się ze znieczulenia, zanim umieścisz ją z powrotem w klatce.