Przeszczep komórek prekursorowych interneuronów pochodzenia ludzkiego do hipokampa szczeniaka myszy

Zabezpiecz znieczulone, genetycznie zmodyfikowane szczenię myszy w stereotaktycznej ramce za pomocą pasków nausznych w przeciwnym kierunku, aby zapobiec obrażeniom.

Hipokamp szczeniaka ma zmniejszone interneurony hamujące, co prowadzi do nadmiernego pobudzenia neuronów pobudzających.

Utrzymuj płaską pozycję głowy i przykryj szczeniaka lodem, aby przedłużyć znieczulenie.

Zdezynfekuj czaszkę i zidentyfikuj szew lambda jako punkt odniesienia.

Ustawić igłę do wstrzykiwań w docelowych współrzędnych hipokampa.

Za pomocą wygiętej igły stwórz otwór mikrowejściowy, jednocześnie minimalizując uszkodzenia czaszki.

Obniż igłę do docelowej głębokości i wstrzyknij komórki prekursorowe interneuronów pochodzenia ludzkiego w kontrolowanym tempie, minimalizując uszkodzenie tkanek.

Powoli chować igłę, aby zapobiec refluksowi komórek.

Wyjmij szczeniaka z ramy, ogrzej go, aż ruch zostanie wznowiony, a następnie włóż go z powrotem do ściółki w klatce.

Wstrzyknięte komórki prekursorowe rozpraszają się w hipokampie, dojrzewają i integrują się z siecią neuronalną. Z biegiem czasu nasilają przekaźnictwo hamujące, co przywraca równowagę pobudzająco-hamującą.

Ustaw szczeniaka, umieszczając go na ramie stereotaktycznej