Wstrzykiwanie rekombinowanych wektorów związanych z adenowirusem w mysim modelu rdzeniowego i opuszkowego zaniku mięśni

Zacznij od powściągliwego rdzeniowego i opuszkowego zaniku mięśni lub myszy dotkniętej SBMA.

Oczyść jego ogon i ogrzej go, aby rozszerzyć żyłę.

SBMA jest wywoływane przez zmutowany receptor androgenowy lub gen AR, który wytwarza zmutowane mRNA AR.

To mRNA syntetyzuje toksyczne białka w neuronach ruchowych, które upośledzają przekazywanie sygnałów i powodują osłabienie mięśni.

Następnie należy pobrać strzykawkę zawierającą rekombinowany wirus związany z adenowirusem lub wektory AAV z plazmidem kodującym terapeutyczne mikroRNA.

Wprowadzić igłę do żyły ogonowej i wstrzyknąć roztwór.

Teraz zastosuj nacisk, aby zatrzymać krwawienie, a następnie przywróć mysz do klatki.

Po dostaniu się do krążenia wektor wirusowy dociera do neuronów ruchowych, które kontrolują funkcję mięśni.

Wirus dostaje się do komórki poprzez endocytozę, uwalniając plazmid.

Plazmid wytwarza dojrzałe mikroRNA z sekwencjami komplementarnymi do zmutowanego mRNA AR.

Te mikroRNA wiążą się z mRNA AR, wywołując ich degradację.

Hamuje to akumulację toksycznych białek i pomaga poprawić funkcje nerwowo-mięśniowe.

Podziel zapas plazmidu mikroRNA AAV na podwielokrotności od 100 do 200 mikrolitrów, zawierające miano wirusa od 10 do 100 bilio