JoVE Encyklopedia Eksperymentów
Neuronauka
0 wyświetleń • 3:00 min. • June 17th, 2025
Weź chemicznie utrwalony plasterek mózgu myszy na płytce wielodołkowej.
Tkanka zawiera aksony otoczone bogatymi w lipidy osłonkami mielinowymi. Ciała komórkowe zawierają ciała Nissl złożone z szorstkiej retikulum endoplazmatycznego i rybosomów.
Inkubować w roztworze przepuszczalnym zawierającym fluorescencyjne barwienie Nissl. Roztwór przenika przez błony komórkowe, umożliwiając barwieniu wiązanie się z rybosomalnym RNA w ciałach Nissl i znakowanie ciał komórkowych.
Umieść tkankę pod mikroskopem konfokalnym ze spójnym systemem obrazowania anty-Stokesa Ramana lub CARS.
Bezpośrednio zsynchronizowana pompa i wiązki lasera Stokesa na tkankę, dostrojone do wzbudzania wiązań molekularnych w bogatej w lipidy osłonce mielinowej.
Wprowadź wiązkę lasera sondy, aby oddziaływać ze wzbudzonymi wiązaniami i wytwarzać sygnał anty-Stokesa specyficzny dla mieliny.
Fotodetektor przechwytuje sygnał w celu wygenerowania obrazu specyficznego dla mieliny.
Użyj obrazowania konfokalnego, aby uchwycić sygnały z oznakowanych nadwozi Nissla.
Nałóż obrazy konfokalne i CARS w celu wizualizacji architektury neuronalnej.
Po przygotowaniu tkanek zgodnie z opisem w manuskrypcie, wybarwić swobodnie pływające skrawki dla Ni
Wyświetl pełny transkrypt i uzyskaj dostęp do tysięcy filmów naukowych