JoVE Encyklopedia Eksperymentów
Neuronauka
0 wyświetleń • 5:18 min. • June 17th, 2025
Weźmy sparaliżowaną transgeniczną larwę danio pręgowanego zamontowaną w komorze perfuzyjnej.
Larwa wykazuje ekspresję zlokalizowanych w błonie wskaźników wapnia w komórkach rzęsatych neuromastu, składnika systemu linii bocznej, który wykrywa ruch wody.
Komórki rzęsate składają się z wierzchołkowych wiązek włosów i podstawowych regionów presynaptycznych, które tworzą synapsy z neuronami doprowadzającymi do przekazywania sygnałów.
Pod mikroskopem konfokalnym użyj małego powiększenia, aby umieścić pipetę strumieniową płynu w pobliżu larwy.
Zwiększ powiększenie, aby zlokalizować neuromast, umieść pipetę w pobliżu niego i przełącz się na
obrazowanie fluorescencyjne.
Dostarczają impulsy płynu, aby odchylić wiązki włosów, otwierając kanały mechanotransdukcji dla napływu kationów wierzchołkowych, w tym jonów wapnia.
Słabo fluorescencyjne wskaźniki wiążą się z wapniem, powodując miejscowy wzrost fluorescencji.
Napływ kationów depolaryzuje komórkę, wyzwalając wnikanie wapnia przez kanały bramkowane napięciem w podstawowej presynapsie, gdzie wiąże się ze wskaźnikami i lokalnie zwiększa fluorescencję.
Wizualizacja wierzchołkowej i podstawowej dynamiki wapnia w czasie rzeczywistym.
W tej procedurze nale
Wyświetl pełny transkrypt i uzyskaj dostęp do tysięcy filmów naukowych