JoVE Encyklopedia Eksperymentów
Neuronauka
0 wyświetleń • 3:22 min. • June 17th, 2025
Umieść szalkę Petriego zawierającą znieczulonego danio pręgowanego z rurką włożoną do jego pyska w celu dostarczenia natlenionej wody pod soczewką obiektywu o małym powiększeniu mikroskopu trójfotonowego.
Mózg danio pręgowanego zawiera genetycznie zmodyfikowane neurony wyrażające fluorescencyjnie znakowane białka do wizualizacji tkanek głębokich podczas obrazowania.
Oświetl antenę za pomocą źródła światła LED i dostosuj parametry wizualizacji, aby uzyskać klarowność obrazu.
Opuść soczewkę obiektywu, aż danio pręgowany będzie widoczny, wyśrodkowując jego głowę w polu view.
Zastąp obiektyw o małym powiększeniu obiektywem o wysokiej rozdzielczości, aby uzyskać obrazowanie trójfotonowe.
Ostrożnie opuść obiektyw, aż głowa będzie widoczna bez kontaktu fizycznego, i ustaw wartości osi na zero.
Wyłącz źródło światła LED i zamknij ciemną kurtynę, aby zminimalizować hałas w tle.
Ustaw parametry obrazowania i wykonaj obrazowanie trójfotonowe, gdzie dłuższe fale umożliwiają wzbudzenie trójfotonowe w głębokich tkankach.
Po wzbudzeniu fluorofory neuronalne emitują fluorescencję, umożliwiając wizualizację neuronów na różnych głębokościach w czasie rzeczywistym.
Aby uzyskać obrazowanie, umieść obiektyw o
Wyświetl pełny transkrypt i uzyskaj dostęp do tysięcy filmów naukowych