Obrazowanie migracji komórek nowotworowych w tkance glejaka za pomocą poklatkowej skaningowej mikroskopii konfokalnej
JoVE Encyklopedia Eksperymentów
Neuronauka
0 wyświetleń • 2:07 min. • June 17th, 2025
Zacznij od wycinka tkanki glejaka uzyskanego z chirurgicznie wyciętego guza.
Utrzymuj wycinek tkanki w pożywce hodowlanej, aby wspomóc przeżycie komórek.
Komórki nowotworowe w wycinku wyrażają zielone białko fluorescencyjne lub GFP, które ułatwia wizualizację komórek nowotworowych podczas migracji komórek.
Umieścić płytkę hodowlaną zawierającą wycinki tkanki na stoliku mikroskopu konfokalnego.
Ustawić inkubator ze stopniem, aby utrzymać temperaturę pożywki.
Wybierz obiektyw i zwizualizuj kultury plastrów pod mikroskopem.
Mikroskopy wykorzystują światło laserowe do wzbudzania białek fluorescencyjnych w komórkach.
Teraz zeskanuj próbkę warstwa po warstwie, aby uchwycić obrazy na różnych głębokościach.
Ułóż obrazy w stos, aby utworzyć szczegółową reprezentację 3D komórek.
Następnie przechwytuj obrazy stosu Z w regularnych odstępach czasu, aby śledzić ruch i kierunek komórek, umożliwiając badanie migracji komórek nowotworowych w czasie.
Umieść naczynie w szczelnym inkubatorze mikroskopu konfokalnego o temperaturze 37 stopni, 5% CO2 i stopniu mikroskopu konfokalnego. Użyj obiektywu powietrznego o dużej odległości roboczej 10x w połączeniu z obrazowaniem jedno- lub wielofotonowym, aby uchwycić tr
Wyświetl pełny transkrypt i uzyskaj dostęp do tysięcy filmów naukowych