Name: Listopad 2011: W tym miesiącu w JoVE (Wideo) | JoVE Journal
Uploaded: 2011-11-01T00:00:00.000+00:00
Duration: 5 min 51 s
Description: Odkryj najważniejsze badania z listopada 2011 roku w dziedzinie neurobiologii i biologii. Poznaj innowacyjne metody wizualizacji eksperymentów oraz nowe spostrzeżenia dotyczące zachowania neuronów.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

<h2 class="jove_title"><a href="https://www.jove.com/video/3505/">Pomiar szybkich przepływów wapnia w kardiomiocytach</a></h2>
Urszula Golebiewska1, Suzanne Scarlata2 1Wydział Nauk Biologicznych i Geologii, Queensborough Community College, 2Wydział Fizjologii i Biofizyki, Uniwersytet Stony Brook
Prezentujemy metodę izolowania szybkich (mikrosekundowych) zdarzeń wapniowych od wolniejszych strumieni w żywych komórkach za pomocą laserowej skaningowej mikroskopii konfokalnej. Metoda mierzy fluktuacje intensywności fluorescencji wskaźników wapnia poprzez rejestrowanie skanów liniowych kilkuset pikseli w komórce. Analiza histogramu pozwala nam wyizolować skale czasowe różnych strumieni wapnia.
<h2 class="jove_title"><a href="https://www.jove.com/video/3373/">Synteza submonomerów w fazie stałej polimerów peptoidowych i ich samoorganizacja w wysoce uporządkowane nanoarkusze </a></h2>
Helen Tran, Sarah L. Gael, Michael D. Connolly, Ronald N. Odlewnia molekularna Zuckermanna , Narodowe Laboratorium Lawrence'a Berkeleya
Przedstawiono prostą i ogólną metodę ręcznej syntezy peptoidów, obejmującą podstawowy sprzęt i dostępne na rynku odczynniki, co umożliwia łatwą syntezę peptoidów w większości laboratoriów. Opisano syntezę, oczyszczanie i charakterystykę amfifilowego peptoidu 36mer, a także jego samoorganizację w wysoce uporządkowane nanoarkusze.
<h2 class="jove_title"><a href="https://www.jove.com/video/3258/">Behawioralna ocena zręczności manualnej u naczelnych innych niż ludzie</a></h2>
Eric Schmidlin*, Mélanie Kaeser*, Anne- Dominique Gindrat, Julie Savidan, Pauline Chatagny, Simon Badoud, Adjia Hamadjida, Marie-Laure Beaud, Thierry Wannier, Abderraouf Belhaj-Saif, Eric M. Wydział Lekarski Uniwersytetu weFryburgu * Autorzy ci przyczynili się w równym stopniu do 
Ponieważ zręczność manualna jest przywilejem głównie naczelnych, u makaków rozwinęły się zadania behawioralne. Cztery zadania polegające na chwytaniu sięgania i chwytania, mierzące zdolność i siłę manipulacji ręką, pozwalają na ustalenie funkcjonalnej regeneracji po uszkodzeniu ośrodkowego układu nerwowego oraz przetestowanie efektu leczenia.
<h2 class="jove_title"><a href="https://www.jove.com/video/3588/">Określanie aktywności fagocytarnej próbek przeciwciał klinicznych</a></h2>
Elżbieta G. McAndrew1, Anne-Sophie Dugast1, Anna F. Licht1, Justin R. Eusebio1, Galit Alter1, Margaret E. Ackerman2 1Massachusetts General Hospital, Ragon Institute of MGH, MIT i Harvard, 2Thayer School of Engineering, Dartmouth College
Prezentujemy wysokoprzepustowy test cytometryczny przepływowy do określenia aktywności fagocytarnej przeciwciał specyficznych dla antygenu z próbek klinicznych, wykorzystując fluorescencyjne kulki pokryte antygenem i monocytową linię komórkową wyrażającą wiele receptorów Fc, dostarczając użycie receptorów i określając aktywność fagocytarną w sposób ustandaryzowany i powtarzalny dla dowolnego interesującego nas antygenu.
<h2 class="jove_title"><a href="https://www.jove.com/video/3187/">Badanie cytoszkieletu aktynowego w żywych komórkach śródbłonka wykazujących ekspresję GFP-aktyny</a></h2>
Travis M. Doggett, Jerome W. Breslin Wydział Fizjologii, Centrum Nauk o Zdrowiu Uniwersytetu Stanowego Luizjany Obrazowanie mikroskopowe żywych komórek śródbłonka wykazujących ekspresję GFP-aktyny pozwala na scharakteryzowanie dynamicznych zmian w strukturach cytoszkieletu. W przeciwieństwie do technik wykorzystujących utrwalone próbki, ta metoda zapewnia szczegółową ocenę zmian czasowych w cytoszkielecie aktynowym w tych samych komórkach przed, w trakcie i po różnych bodźcach fizycznych, farmakologicznych lub zapalnych.
<h2 class="jove_title"><a href="https://www.jove.com/video/3260/">Implantacja nadajników radiotelemetrycznych dostarczających danych o EKG, tętnie, temperaturze ciała i aktywności u swobodnie poruszających się myszy laboratoryjnych</a></h2>
Nikola Cesarovic1, Paulin Jirkof2, Andreas Rettich2, Margarete Arras1 1Oddział Badań Chirurgicznych, Szpital Uniwersytecki w Zurychu, 2Instytut Nauk o Zwierzętach Laboratoryjnych, Uniwersytet w Zurychu
Pokazano technikę chirurgiczną do wszczepiania dostępnych na rynku nadajników telemetrycznych używanych do ciągłego pomiaru biopotencjału (jednoodprowadzeniowe EKG), tętna, temperatury ciała i aktywności lokomotorycznej u swobodnie poruszających się myszy. Przedstawiono również zalecenia i protokoły dotyczące opieki pooperacyjnej i łagodzenia bólu, poprawy rekonwalescencji, samopoczucia i przeżywalności.
<h2 class="jove_title"><a href="https://www.jove.com/video/3381">Elektroporacja mezenchymy twarzoczaszki</a></h2>
Jacqueline M. Tabler, Karen J. Liu Zakład Rozwoju Twarzoczaszki, King's College London
Chrząstki twarzoczaszki rozwijają się w bliskim kontakcie z innymi tkankami i są trudne do manipulowania u żywych zwierząt. Używamy elektroporacji do dostarczania narzędzi molekularnych podczas wzrostu szkieletu twarzoczaszki, omijając wczesne efekty embrionalne. Takie podejście pozwoli nam na efektywne testowanie cząsteczek kandydujących in vivo.
<h2 class="jove_title"><a href="https://www.jove.com/video/3379">Slice Zapis elektrofizjologiczny i optogenetyczna stymulacja neuronów urodzonych u dorosłych w opuszce węchowej</a></h2>
Matthew Valley, Sebastian Wagner, Benjamin W. Gallarda, Pierre-Marie Lledo Laboratory for Perception and Memory, Instytut Pasteura i Centre National de la Recherche Scientifique (CNRS)
Urodzone w dorosłym wieku neurony wyrażające ChR2 mogą być manipulowane w preparacjach elektrofizjologicznych w celu zbadania ich wkładu w funkcjonowanie obwodów nerwowych węchu.

listopad 2011: ten miesiąc w jove

November 2011: This Month in JoVE

Listopadowe wydanie Journal of Visualized Experiments rozpoczyna się od serii eksperymentów behawioralnych służących do pomiaru zdolności chwytania u naczelnych. Badacze z Uniwersytetu w Fryburgu prezentują cztery zadania polegające na chwytaniu i sięganiu, z których każde obejmuje wspólne etapy komfortowego unieruchomienia zwierzęcia i prawidłowego ustawienia jego głowy. Test tablicy Brinkmana (Brinkman Board) jest wykorzystywany do oceny sięgania po obiekty statyczne, podczas gdy obrotowa tablica Brinkmana (Rotating Brinkman Board) tworzy warunki, w których zwierzęta muszą przewidzieć pozycję obiektu. Test pudełka Brinkmana (Brinkman Box) pozwala badać zręczność w warunkach, w których małpa ma mniej stopni swobody podczas wykonywania zadania chwytania i nie może wykorzystywać wzroku do prowadzenia ruchu. Podczas gdy testy z tablicą i pudełkiem Brinkmana opierają się wyłącznie na analizie wideo uzyskanej podczas eksperymentów, aparat do zadania sięgania do szuflady posiada detektory monitorujące siły chwytu i obciążenia oraz pozycję szuflady, co czyni ten test odpowiednim do pomiaru zarówno siły, jak i zdolności chwytania. Łącznie te cztery testy stanowią potężne narzędzie do oceny kontroli motorycznej w dystalnej części kończyny przedniej; grupa z Fryburga przedstawia dane zarówno z badań nad uszkodzeniami, jak i z eksperymentów mających na celu przetestowanie potencjalnych terapii urazów rdzenia kręgowego. W sekcji Clinical and Translational Medicine współpracownicy z Division of Surgical Research w szpitalu uniwersyteckim w Zurychu oraz Institute of Laboratory Animal Science na Uniwersytecie w Zurychu wspólnie pracują nad implantacją urządzenia radiotelemetrycznego u myszy, które może być wykorzystywane do pomiarów fizjologicznych u swobodnie poruszających się zwierząt. Urządzenia składają się z dwóch elektrod, które umożliwiają pomiar aktywności biopotencjałowej (EKG, EEG lub EMG) oraz temperatury, a także lekkiego nadajnika radiowego (pasmo 1-200 Hz), który może być implantowany w jamie brzusznej. Stres związany z manipulowaniem zwierzętami oraz anestezja są znanymi czynnikami zakłócającymi, które wpływają na pomiary fizjologiczne, dlatego urządzenia radiotelemetryczne są wygodnym sposobem pozyskiwania danych fizjologicznych od zwierząt w niezakłóconym, naturalnym stanie, a także jednoczesnego pomiaru wielu osobników. JoVE rozszerza również swoją kolekcję protokołów elektroporacji o metodę wprowadzania makromolekuł do mezenchymy kraniofacjalnej rozwijających się kijank *Xenopus laevis*, opracowaną przez laboratorium Liu w King's College London. Kijanki *Xenopus* są przenoszone do komory elektroporacyjnej, gdzie są wstrzykiwane kwasy nukleinowe, a następnie poddawane elektroporacji, która dostarcza wektory ekspresyjne lub morfolino do rozwijającej się tkanki kraniofacjalnej. Dostarczanie genów do zróżnicowanej chrząstki jest z natury problematyczne, a laboratorium Liu wykazuje, że dzięki elektroporacji morfolino mogą być wprowadzane do tkanek prochrząstkowych i chrzęstnych kijanki *Xenopus* na różnych etapach rozwoju. W sekcji Bioengineering grupa Zuckermana z Lawrence Berkeley National Laboratory ilustruje swoją metodę syntezy peptoidów – klasy biologicznie aktywnych cząsteczek organicznych przypominających peptydy, lecz posiadających łańcuchy boczne przyłączone do azotu wiązania peptydowego, a nie do węgla alfa, co czyni je odpornymi na proteolizę. Grupa Zuckermana demonstruje syntezę submonomeryczną, w której monomery peptydowe są dodawane sekwencyjnie w reakcjach bromoacetylacji i wypierania bromku, co pozwala na precyzyjną kontrolę długości i składu łańcucha peptoidowego. Ponadto fakt, że synteza odbywa się na żywicy amidowej i jest zatem syntezą w fazie stałej, znacznie upraszcza oczyszczanie zsyntetyzowanych peptoidów. Autorzy pokazują również, jak nowo zsyntetyzowane peptoidy mogą być indukowane do samozgromadzenia w wysoce uporządkowane struktury, zwane nanoarkuszami, które można wizualizować za pomocą fluorescencji i skaningowej mikroskopii elektronowej. Nanoarkusze te mogłyby służyć jako potencjalna platforma dla mimetyków białek i błon. Później w tym miesiącu JoVE prezentuje w sekcji Immunology and Infection test służący do pomiaru aktywności fagocytycznej w komórkach eksponowanych na próbki przeciwciał klinicznych. Współpracownicy z Massachusetts General Hospital i Dartmouth College pokazują w mikroskopii wideo time-lapse, że komórki THP-1 pochłaniają kuleczki pokryte antygenem związanym z przeciwciałem, oraz przedstawiają metodę cytometrii przepływowej na płytkach do ilościowego określenia zakresu fagocytozy. Autorzy wykorzystują tę metodę do określenia zdolności różnych próbek przeciwciał do indukowania fagocytozy, np. próbek od pacjentów z HIV, zarówno leczonych, jak i nieleczonych terapiami antyretrowirusowymi. Powyższe podsumowanie treści JoVE w listopadzie stanowi krótki przegląd najważniejszych materiałów w tym miesiącu. Inne godne uwagi artykuły obejmują metody obrazowania na żywo dynamiki cytoszkieletu w komórkach śródbłonka, pomiar przepływu wapnia w kardiomiocytach oraz elektrofizjologię skrawków neuronów powstałych w dorosłym organizmie w opłacie węchowej.

Oto wybrane najważniejsze treści z listopadowego wydania z 2011 roku Journal of Visualized Experiments (JoVE).

Listopad 2011: Ten miesiąc w JoVE

Listopadowy numer Journal of Visualized Experiments rozpoczyna seria eksperymentów behawioralnych służących do pomiaru zdolności chwytnych u naczelnych. Badacze z Uniwersytetu we Fryburgu prezentują cztery zadania polegające na chwytaniu i sięganiu, z których każde obejmuje wspólne etapy komfortowego unieruchomienia zwierzęcia i prawidłowego ustawienia jego głowy. Test tablicy Brinkmana (Brinkman Board) jest wykorzystywany do oceny sięgania po obiekty statyczne, natomiast obrotowa tablica Brinkmana (Rotating Brinkman Board) wprowadza warunki, w których zwierzęta muszą przewidzieć położenie obiektu. Test pudełka Brinkmana (Brinkman Box) pozwala na zbadanie zręczności w warunkach, w których małpa ma ograniczoną liczbę stopni swobody podczas wykonywania zadania chwytania i nie może wykorzystywać wzroku do prowadzenia ruchu. Podczas gdy testy z tablicą i pudełkiem Brinkmana opierają się wyłącznie na analizie nagrań wideo z eksperymentów, aparatura do zadania sięgania po szufladę, w celu generowania danych, posiada detektory monitorujące siły chwytu i obciążenia, a także położenie szuflady, co czyni ten test odpowiednim do pomiaru zarówno siły, jak i zdolności chwytnych. Łącznie cztery te testy stanowią potężne narzędzie do oceny kontroli motorycznej w dystalnej części kończyny przedniej; grupa z Fryburga przedstawia dane zarówno z badań nad zmianami ogniskowymi (lesion studies), jak i z eksperymentów mających na celu przetestowanie potencjalnych terapii urazów rdzenia kręgowego.

W sekcji Medycyna Kliniczna i Translacyjna współpracownicy z Wydziału Badań Chirurgicznych Szpitala Uniwersyteckiego w Zurychu oraz Instytutu Nauk o Zwierzętach Laboratoryjnych Uniwersytetu w Zurychu wspólnie pracują nad implantacją urządzenia do radiotelemetrii u myszy, które może być wykorzystane do pomiarów fizjologicznych u swobodnie poruszających się zwierząt. Urządzenia składają się z dwóch elektrod, które umożliwiają pomiar aktywności biopotencjałów (EKG, EEG lub EMG) oraz temperatury, a także lekkiego nadajnika radiowego (szerokość pasma 1–200 Hz), który może zostać zaimplantowany w jamie brzusznej. Stres związany z obchodzeniem się ze zwierzętami oraz znieczulenie są znanymi czynnikami zakłócającymi, które wpływają na pomiary fizjologiczne, dlatego urządzenia do radiotelemetrii stanowią wygodny sposób pozyskiwania danych fizjologicznych od zwierząt w niezakłóconym, naturalnym stanie, a także umożliwiają jednoczesne pomiary u wielu osobników.

JoVE uzupełnia również swój zbiór protokołów elektroporacji o metodę wprowadzania makromolekuł do mezenchymy kraniofacjalnej rozwijających się kijanek Xenopus laevis, opracowaną w laboratorium Liu w King's College London. Kijanki Xenopus są przenoszone do komory elektroporacyjnej, gdzie otrzymują wstrzyknięcie kwasów nukleinowych, a następnie poddawane elektroporacji, która dostarcza wektory ekspresyjne lub morfolino do rozwijającej się tkanki kraniofacjalnej. Dostarczenie genów do zróżnicowanej chrząstki jest z natury problematyczne, a laboratorium Liu wykazuje, że za pomocą elektroporacji morfolino mogą być wprowadzane do tkanek prochrząstkowych i chrzęstnych kijanek Xenopus na różnych etapach rozwoju.

W sekcji Bioinżynieria grupa Zuckermana z Lawrence Berkeley National Laboratory ilustruje swoją metodę syntezy peptoidów – klasy biologicznie czynnych cząsteczek organicznych przypominających peptydy, lecz posiadających łańcuchy boczne przyłączone do azotu wiązania peptydowego, a nie do węgla alfa, co czyni je odpornymi na proteolizę. Grupa Zuckermana demonstruje syntezę submonomerową, w której monomery peptydowe są dodawane sekwencyjnie w reakcjach bromoacetylacji i wypierania bromku, co pozwala na precyzyjną kontrolę długości i składu łańcucha peptoidowego. Co więcej, fakt, że synteza odbywa się na żywicy amidowej i jest zatem syntezą w fazie stałej, znacznie upraszcza oczyszczanie zsyntetyzowanych peptoidów. Autorzy pokazują również, w jaki sposób nowo zsyntetyzowane peptoidy mogą być indukowane do samoorganizacji w wysokouporządkowane struktury, zwane nanoarkuszami, które można wizualizować za pomocą fluorescencji i skaningowej mikroskopii elektronowej.

Research

JoVE Journal

Biology

Biologia

Listopad 2011: W tym miesiącu w JoVE

Odkryj najważniejsze badania z listopada 2011 roku w dziedzinie neurobiologii i biologii. Poznaj innowacyjne metody wizualizacji eksperymentów oraz nowe spostrzeżenia dotyczące zachowania neuronów.

Listopad 2011: W tym miesiącu w JoVE (Wideo) | JoVE Journal

Aaron Kolski-Andreaco

Listopad 2011: Ten miesiąc w JoVE

Przeglądaj więcej filmów