Zwężenie aorty wstępującej u szczurów w celu stworzenia modelu przerostu mięśnia sercowego spowodowanego przeciążeniem ciśnieniem

Cześć, nazywam się Aji Kumar Gs z Wydziału Biologii Chorób Sercowo-Naczyniowych Raj Gandhi, centrum Biotechnologii w Indiach. Pracuję pod kierunkiem karty procesowej i w tym filmie pokażemy krok po kroku procedurę budowy wznoszącej się I OTE u szczurów. W naszym laboratorium wykorzystujemy ten roczny model do badania patofizjologii i mechanizmów molekularnych leżących u podstaw przerostu serca i postępującej niewydolności serca.

Używamy tego modelu również do badania nadciśnienia płucnego związanego z niewydolnością serca. Więc zacznijmy i estetyzuj zwierzę i utrzymuj je w pozycji leżącej. Wykonaj intubację dotchawiczą, wykonując nacięcie w połowie odległości między dwoma pierścieniami tchawicy i wprowadzając kaniulę tchawicy, która z kolei jest podłączona do respiratora gryzoni.

Następnie wykonaj nacięcie skóry o długości około dwóch centymetrów w obszarze lewej klatki piersiowej między drugim a trzecim żebrem i oddziel warstwy mięśni. Aby uwidocznić zwężenie joty wstępującej części joty, należy wykonać za pomocą małego tytanowego klipsa z aplikatorem, przeciwstawić żebra, a następnie zszyć warstwy mięśni i skórę w przerywany wzór. Po usunięciu rurki dotchawiczej zamknij mięsień tchawicy, warstwy i skórę i pozwól zwierzęciu dojść do siebie.

Procedura została przeprowadzona po uzyskaniu zgody instytucjonalnej komisji etycznej ds. zwierząt. Przed zabiegiem należy zdezynfekować pole operacyjne 70% alkoholem i utrzymywać poduszkę grzewczą w sposób aseptyczny. Utrzymuj respirator gryzoni i jednostkę anestezjologiczną w gotowości do operacji.

Wysterylizuj narzędzia chirurgiczne przez autoklawowanie. Głównymi narzędziami chirurgicznymi do zwężenia wstępującego są sterylne rękawiczki, kleszcze do kciuków, nożyczki, ostrza chirurgiczne, małe klipsy tytanowe i kleszczyki tętnicze z aplikatorem z gazą w przypadku krwawienia, uchwyt igły materiał do szwów proline, pleciony jedwabny szew i igła. Trzymaj szczura pod parasolem antybiotykowym przez 24 godziny i estetyzuj szczury w komorze indukcyjnej z 3% fluorem ISO zmieszanym ze stuprocentowym tlenem.

Usuń sierść z dekoltu i lewej części klatki piersiowej szczura i trzymaj zwierzę na górze. Poduszka grzewcza. Utrzymuj znieczulenie za pomocą 1,5% fluoru ISO, aby potwierdzić udane znieczulenie.

Zdezynfekuj obszar operacyjny roztworem jodu powidonu, a następnie 70% alkoholem. Powtórz procedurę trzy razy. Umieść sterylną serwetę na zwierzęciu, odsłaniając tylko pole operacyjne.

Wykonaj nacięcie skóry równolegle do tchawicy i oddziel znajdującą się pod spodem tkankę. W celu odsłonięcia tchawicy. Przyłóż opaskę z jedwabnej nici pod tchawicę i delikatnie unieś ją do góry.

Wykonaj nacięcie w połowie odległości między dwoma pierścieniami chrząstki i włóż kaniulę tchawicy. Podłącz kaniulę tchawicy do respiratora dla gryzoni. Częstość oddechów wentylatora powinna wynosić 50 oddechów na minutę.

Objętość oddechowa 1,7 ml i czas wdechu 0,6 sekundy. Wykonaj nacięcie w obszarze lewej klatki piersiowej między drugim a trzecim żebrem. Mięśnie międzyżebrowe należy rozdzielać warstwa po warstwie.

Należy zachować ostrożność, aby uniknąć obrażeń płuc podczas wykonywania nacięcia między żebrami. Po cofnięciu żeber ostrożnie zlokalizuj wznoszącą się część joty, delikatnie manipulując tkanką tłuszczową. Strzałka wskazuje wznoszącą się część joty.

Umieść mały tytanowy klips wokół wznoszącej się joty za pomocą aplikatora, zwężając w ten sposób jotę od 50 do 60% oryginalnej średnicy. Po zwężeniu należy zmienić położenie serca i przybliżyć żebra za pomocą szwu prolinowego Jednocześnie wstrzymaj respirator na około dwie do czterech sekund, aby ponownie napompować płuca. Ułóż mięśnie warstwami za pomocą proliny, a następnie skóry za pomocą jedwabnych szwów w przerwanym wzorze szwów.

Stopniowo zmniejszaj częstość oddechów ustawioną na respiratorze i obserwuj zwierzę pod kątem spontanicznego oddychania. Usuń kaniulę tchawicy po przywróceniu spontanicznego i regularnego oddychania. Teraz znieczulenie jest utrzymywane przez stożek nosowy.

Zamknij otwór między pierścieniami tchawicy za pomocą szwów prolinowych. Zamknij warstwy mięśni i skórę odpowiednio szwami prolinowymi i jedwabnymi. Nałożyć roztwór jodu powidonu na obszar chirurgiczny jako wstrzyknięcie przeciwbólowe pooperacyjne.

Tremadol roztwór soli dootrzewnowej może być podawany dootrzewnowo. Jeśli oznaki odwodnienia pojawiają się stopniowo Znieczulenie do pozycji wyłączonej po wyzdrowieniu zwierzęcia, przeniesiono do klatki i podawano amoksycylinę doustnie zmieszaną z wodą pitną przez siedem dni. Intensywność przeciążenia ciśnieniowego wywołanego zwężeniem joty wstępującej można określić, obserwując gradient ciśnienia w poprzek miejsca zwężenia otycznego za pomocą dwuwymiarowej echokardiografii.

Lewy panel rysunku pokazuje echo dopplerowskie szczura zwężonego aorty o gradiencie ciśnienia 63 mm słupa rtęci. A prawy panel przedstawia fikcyjnie kontrolowanego szczura bez znaczącego gradientu ciśnienia na jotę. Górny panel pokazuje echokardiografię lewej komory w trybie M u szczurów, osiem tygodni po operacji, a dolny panel reprezentuje kontrolę pozorowaną, grubość przegrody międzykomorowej i grubość tylnej ściany lewej komory zostały znacznie zwiększone, podczas gdy wewnętrzna średnica lewej komory została znacznie zmniejszona u szczurów poddanych zwężeniu I.

W porównaniu z grupami kontrolnymi operowanymi pozorowanymi, u szczurów, u których po ośmiu tygodniach operacji podano wstępujące zwężenie mięśnia sercowego, obserwuje się znaczny przerost mięśnia sercowego w porównaniu z grupami kontrolnymi operowanymi pozorowanymi. Cześć, jestem Raj. Tutaj wyjaśniamy procedurę zwężenia joty wstępującej u szczura.

Główną zaletą tego modelu jest stopniowy rozwój przerostu mięśnia sercowego i niewydolności serca. Podobnie jak w sytuacji klinicznej w przewlekłym nadciśnieniu tętniczym, u tej matki należy zachować ostrożność przy stosowaniu klipsa Titanic w celu zwężenia joty. Najważniejsze jest to, że zastosowanie klipsa Titanic powinno być wystarczające do wytworzenia krytycznego zwężenia joty dla lewego 20 plus stresu, ale nie na tyle poważne, aby spowodować ostrą awarię elektroniczną i obrzęk płuc, a także należy zachować ostrożność, aby uniknąć obrażeń płuc podczas wykonywania nacięcia między żebrami.

Wentylatory powinny być ustawione na trzy do czterech sekund, jednocześnie przeciwlegle do żeber, aby ponownie napompować płuca. Dziękuję za obejrzenie tego filmu i życzymy powodzenia w eksperymentach.