Wykorzystanie modelu gryzoni anoreksji opartej na aktywności do badania neurobiologicznych podstaw jadłowstrętu psychicznego

Ogólnym celem tej procedury jest wywołanie anoreksji opartej na aktywności u dorastających samic myszy. Osiąga się to poprzez wprowadzenie myszy do koła do biegania i przez co najmniej trzy dni ciągłe monitorowanie ich aktywności koła biegowego. Następnie M są umieszczane w ograniczonym harmonogramie dostępu do żywności i rejestrowane są zmiany w ich dobrowolnym biegu w kółko.

Ostatecznie ten model anoreksji oparty na aktywności może pokazać, że zmiany neurobiologiczne są związane ze zmianami w zachowaniu zwierzęcia, gdy ma ograniczony dostęp do pożywienia. Mam nadzieję, że ten model anoreksji opartej na aktywności pomoże w poprawie terapii jadłowstrętu psychicznego, ponieważ zidentyfikuje dyskretne indywidualne różnice w neurochemii i neuroanatomii, które leżą u podstaw odporności i podatności na jadłowstręt psychiczny. Chociaż ta metoda może zapewnić wgląd w jadłowstręt psychiczny, może być również stosowana do innych chorób, które współwystępują z lękiem.

Ogólnie rzecz biorąc, indywidualna metoda, ta metoda będzie miała problemy, ponieważ podatność każdego zwierzęcia na aktywność opartą na AIA jest bardzo zmienna. W związku z tym wymagane jest ścisłe monitorowanie utraty wagi, jedzenia i aktywności zwierzęcia, w przeciwnym razie zwierzęta mogą rozpocząć konfigurację. Umieść komputer i koncentrator USB w pomieszczeniu dla zwierząt, z dala od bieżącej wody i ruchu pieszego, a jednocześnie w zasięgu nadajnika kół jezdnych.

Korzystaj również z zapasowego źródła zasilania komputera i koncentratora USB za pomocą przełączników na koncentratorze. Ustaw numery kanałów tak, aby odpowiadały numerom kanałów wszystkich kół jezdnych, które będzie monitorował. Teraz uruchom oprogramowanie do zarządzania kierownicą i upewnij się, że oprogramowanie rozpoznaje każdy nadajnik.

Każde koło zostanie wyświetlone w oknie programu. Pod nagłówkiem czujniki koła. Oprogramowanie automatycznie nada numer identyfikacyjny każdemu kołu.

Pomocne może być zanotowanie tego numeru na kole. Jeśli koło nie zostanie rozpoznane, wymień baterie w kierownicy. Następnie przygotuj klatkę dla każdej myszy z gniazdami ściółkowymi, swobodnym dostępem do wody i kołem do biegania.

Koło jezdne musi poruszać się swobodnie, nie dotykając ścian klatki, kosza na żywność ani górnej części klatki. Upewnij się również, że oprogramowanie aktualizuje liczniki kół. Aby się zaaklimatyzować, zwierzęta trzymają każdą mysz indywidualnie w klatce z kółkiem do biegania i dostępem do około 100 gramów suchej karmy i 50 gramów mokrej karmy w klatce.

W oprogramowaniu. Rozpocznij pobieranie i przechowywanie danych, wybierając pozycję Rozpocznij pobieranie. Z menu plik wybierz katalog, w którym dane będą zapisywane do momentu zatrzymania.

Oprogramowanie będzie nagrywać w sposób ciągły każdego dnia tuż przed rozpoczęciem ciemnej fazy cyklu światła. Zważ zwierzę, zważ mokrą karmę i zważ suchą karmę. Napełnij pojemnik na suchą karmę, jeśli zawiera mniej niż 50 gramów, i wymień pojemnik na mokrą żywność.

Jeśli żywność wyschnie lub zostanie zabrudzona ściółką, w tym samym czasie ręcznie zapisz liczbę kół. Aby wykonać kopię zapasową danych cyfrowych w pierwszym dniu ograniczenia żywności, wyjmij całą mokrą i suchą karmę z klatki w środku części dnia poświęconej cyklowi światła. Później, na początku ciemności, zapisz wagę zwierzęcia i liczbę kół.

Następnie włóż około 50 gramów suchej karmy do zbiornika i podaj pięć gramów mokrej karmy w łodzi. Następnie przygotuj nową klatkę z ściółką i gniazdami dla każdego zwierzęcia. Po dwóch godzinach z przeniesieniem jedzenia, kółka do biegania i kilku garści brudnej ściółki do przygotowanej klatki.

Przenieś myszy do nowych klatek bez jedzenia. Pod koniec okresu dostępu do żywności należy zanotować masę żywności UNE i liczbę kół. Powtarzaj ten proces codziennie przez cały czas trwania eksperymentu.

Jeśli w którymkolwiek momencie zwierzę spadnie poniżej 75% swojej początkowej wagi, usuń je z eksperymentu. Inne oznaki nadmiernego głodu, które wskazywałyby, że zwierzę powinno zostać usunięte z eksperymentu, to zgarbiona postawa i niezdolność do poruszania się po klatce. Zwierzę może być zimne w dotyku i nie jeść w ciągu dwóch godzin dostępu do pożywienia.

Po trzech dniach ograniczania jedzenia zakończ eksperyment. Albo poddaj zwierzę eutanazji w celu pobrania tkanek, albo pozwól mu wyzdrowieć. Aby uzyskać dalsze testy behawioralne w oprogramowaniu, kliknij opcję zakończenia akwizycji w menu plików.

Dane są teraz zapisywane w pliku WLS w wybranym katalogu Na początku eksperymentu wyjmij koła jezdne z klatek, a następnie wyjmij ich baterie. Rekonwalescencja zwierząt powinna mieć zapewniony ad libido, dostęp do żywności. Teraz wyeksportuj dane do arkusza kalkulacyjnego.

Wybierz opcję eksportu w menu pliku i wybierz żądane pliki WLS w opcji pliku danych źródłowych. Następnie wybierz datę i godzinę rozpoczęcia i zakończenia, a na koniec wybierz każdy czujnik koła do eksportu. Na liście czujników koła dane mogą być następnie analizowane w razie potrzeby w celu zbadania wpływu b.

W populacji podobnej do ludzkiej jadłowstrętu psychicznego, samice dorastających myszy zaaklimatyzowały się do koła w P 36. Wkrótce po rozpoczęciu okresu dojrzewania na P 40 rozpoczęła się deprywacja pokarmowa, a ich masa ciała gwałtownie spadła. Wygłodzone zwierzęta biegały nadmiernie po wprowadzeniu ograniczeń w żywieniu.

Szczegółowa analiza aktywności kół wykazała wzorzec okołodobowy. Co ciekawe, nawet podczas dostępu do pożywienia wygłodniałe zwierzęta decydowały się na korzystanie z koła do biegania. Po rozpoczęciu ograniczania pożywienia niektóre zwierzęta wykazały wzrost aktywności tuż przed karmieniem, co można nazwać aktywnością antycypacyjną pokarmu Mistrzowie tworzenia kohorty do przejścia scenariusza opartego na aktywności można osiągnąć w ciągu kilku godzin, jeśli zostanie on wykonany prawidłowo.

Próbując wykonać tę procedurę, należy pamiętać o ręcznym rejestrowaniu liczby kół co najmniej raz dziennie. Nieoczekiwane zakłócenie linii energetycznej lub wyczerpanie baterii może zakłócić generowane komputerowo liczenie kół Zgodnie z tą procedurą. Inne metody, takie jak chemia immunocytologiczna, elektrofizjologia i testy behawioralne, mogą być wykonane w celu uzyskania odpowiedzi na dodatkowe pytania, takie jak to, jak indukcja anoreksji oparta na aktywności wpływa na anatomię mózgu, właściwości biofizyczne i zachowanie.