Model przewlekłego nadciśnienia wewnątrzgałkowego indukowanego laserem u szczurów SD
4 grudnia 2007
Jaskra jest jedną z głównych przyczyn ślepoty na świecie. Podwyższone ciśnienie wewnątrzgałkowe stanowi główny czynnik ryzyka. Hipertonia oczna indukowana laserową fotokoagulacją jest jednym z dobrze ugruntowanych modeli zwierzęcych. Niniejszy film demonstruje, jak indukować hipertonię oczną za pomocą fotokoagulacji laserem argonowym u szczura.
Witajcie, reprezentuję laboratorium GOSO w Departamencie Anatomii Uniwersytetu w Hongkongu. Przedstawię Państwu sposób wykorzystania lasera do stworzenia modelu nadciśnienia wewnątrzgałkowego u szczurów. W tym celu zastosujemy lampę szczelinową wykorzystywaną w praktyce klinicznej.
Na obrazku widać zainstalowany kapelusz laserowy. Podczas pracy z laserem nosimy okulary ochronne. Jest to urządzenie laserowe, w którym do naświetlania czerwieni używamy komórki z ketaminą.
Przed zabiegiem laserowym stosujemy znieczulenie miejscowe, a następnie nakładamy na oko maść z antybiotykiem. W pierwszej kolejności uruchamiamy urządzenie laserowe. Rozgrzewanie potrwa około 30 sekund.
Używamy mocy lasera wynoszącej 1000 milliwatt i czasu trwania 0,1 s. Wyzeruj licznik, a następnie włącz lampę do usypiania. Przed naświetlaniem laserem podajemy znieczulenie miejscowe w obszarze czerwonego oka.
Następnie sprawdzamy oko pod lampą szczelinową. Rozpoczynamy laseroterapię w części dolnej. Widać, że wykonujemy koagulację laserową dolnej części skroniowej żyły odpływowej nadtwardówkowej.
Wyściela ona obszar pod spojówką, dlatego skupiamy się na tym miejscu. Następnie zastosujemy laser w obrębie dolnej części obrąbka rogówki. Przesuwamy każdy punkt laserowy w górę.
Widać, że na brzegu rogówki pojawi się biała plamka, a przepływ krwi zostanie tam zatrzymany, kończąc część dolną. Teraz przechodzimy do części górnej. Jest to górna żyła skroniowa powierzchowna.
Widoczne są dwie główne gałęzie. Należy się na nich skupić i poddać je laserowej koagulacji. Następnie należy sprawdzić gałąź wspólną pod kątem drożności lub zatoru.
Następnie wykonamy drenaż trzeciej żyły nadtwardówkowej. W górnej części nosowej żyła ta znajduje się pod cienką warstwą mięśnia gałkoruchowego, dlatego ustawienie ostrości w tym przypadku jest znacznie trudniejsze niż przy dwóch pozostałych, które leżą głębiej.
Wykonamy zabieg laserowy w górnym obszarze limbusa, punkt po punkcie. Nie należy pozostawiać nienaświetlonych przestrzeni między punktami laserowymi. Prosimy o zweryfikowanie tego stanu.
Kończymy naświetlanie laserem obszaru obrąbka w zakresie 270 stopni, pozostawiając nienaruszoną jedynie część nosową. Po zabiegu laserowym na oko nałożyliśmy maść z antybiotykiem, zatem łącznie w przypadku tego szczura powinno być 116. Zerujemy licznik, a następnie wyłączamy urządzenie laserowe oraz laptopa.
Właśnie zakończyłem pierwsze laserowe zabieganie prawego oka szczura. Tę samą procedurę zastosuje się ponownie w tym samym oku po siedmiu dniach. Po dwóch zabiegach laserowych ciśnienie wewnątrzgałkowe prawego oka wzrośnie o ponad 50% w stosunku do lewego oka kontrolnego. Podwyższone ciśnienie wewnątrzgałkowe może utrzymywać się przez co najmniej trzy miesiące.
Jak wiadomo, jaskra jest jedną z głównych przyczyn ślepoty na świecie. Podwyższone ciśnienie wewnątrzgałkowe stanowi główny czynnik ryzyka. Wykorzystując tę metodę fotokoagulacji laserowej, możemy stworzyć wiarygodny model nadciśnienia wewnątrzgałkowego u szczurów.
Wykorzystując ten model, możemy dalej badać mechanizm jaskry i próbować znaleźć sposób na ochronę komórek zwojowych siatkówki przed obumieraniem w jaskrze.
Wyświetl pełny transkrypt i uzyskaj dostęp do tysięcy filmów naukowych
Przegląd
W niniejszym materiale wideo zaprezentowano metodę indukowania nadciśnienia wewnątrzgałkowego u szczurów z wykorzystaniem fotokoagulacji laserem argonowym. Jaskra, będąca jedną z głównych przyczyn ślepoty, wiąże się z podwyższonym ciśnieniem wewnątrzgałkowym, co sprawia, że model ten ma istotne znaczenie dla prowadzonych badań.
Kluczowe elementy badania
Dziedzina nauki
- Neuronauka
- Oftalmologia
- Modele zwierzęce
Wprowadzenie
- Jaskra jest główną przyczyną ślepoty na całym świecie.
- Podwyższone ciśnienie wewnątrzgałkowe stanowi istotny czynnik ryzyka wystąpienia jaskry.
- Modele zwierzęce są niezbędne do badania mechanizmów jaskry.
- Fotokoagulacja laserowa jest uznaną metodą indukowania nadciśnienia wewnątrzgałkowego.
Cel badania
- Przedstawienie procedury indukowania nadciśnienia wewnątrzgałkowego w modelu szczurzym.
- Zapewnienie wizualnego przewodnika dla badaczy w tej dziedzinie.
- Pogłębienie zrozumienia mechanizmów jaskry poprzez badania na zwierzętach.
Zastosowane Metody
- Zastosowanie fotokoagulacji laserem argonowym.
- Indukcja nadciśnienia wewnątrzgałkowego u szczurów.
- Stosowanie środków ochrony osobistej podczas procedury.
- Podawanie środków znieczulających w celu zapewnienia dobrostanu zwierząt.
Główne wyniki
- Skuteczna indukcja nadciśnienia wewnątrzgałkowego w modelu szczurzym.
- Zaprezentowanie techniki aplikacji lasera.
- Wizualne potwierdzenie skuteczności procedury.
- Ustanowienie wiarygodnego modelu do przyszłych badań nad jaskrą.
Wnioski
- Metoda fotokoagulacji laserem argonowym jest skuteczna w indukowaniu nadciśnienia wewnątrzgałkowego.
- Model ten może być wykorzystywany do badania jaskry oraz testowania potencjalnych metod leczenia.
- Właściwa technika i środki bezpieczeństwa są kluczowe dla uzyskania pomyślnych rezultatów.
Najczęściej zadawane pytania
Znaczenie dla przemysłu
Laserowo indukowane przewlekłe nadciśnienie wewnątrzgałkowe u szczurów SD stanowi solidny model przedkliniczny do badań nad jaskrą, umożliwiając analizę mechanizmów wzrostu ciśnienia wewnątrzgałkowego oraz degeneracji komórek zwojowych siatkówki. Model ten wspiera wczesną walidację celów terapeutycznych oraz ograniczanie ryzyka w strategiach neuroprotekcyjnych w procesach odkrywania leków okulistycznych. Jego powtarzalność i trwały wzrost ciśnienia czynią go wartościowym narzędziem w zapewnieniu ciągłości translacyjnej oraz selekcji projektów w badaniach i rozwoju nad jaskrą.
Zastosowania strategiczne w badaniach i rozwoju biofarmaceutycznym
Wczesne etapy odkrywania i walidacja celu
- Umożliwia badanie patofizjologii jaskry poprzez kontrolowany wzrost ciśnienia wewnątrzgałkowego.
- Wspiera walidację funkcjonalną celów neuroprotekcyjnych w systemie istotnym dla przebiegu choroby.
- Ułatwia ograniczanie ryzyka mechanistycznego poprzez modelowanie przewlekłego stresu i degeneracji siatkówki.
Przesiewanie i opracowywanie testów
- Zapewnia zwalidowaną platformę in vivo do oceny związków kandydackich ukierunkowanych na nadciśnienie wewnątrzgałkowe lub neuroprotekcję.
- Umożliwia standaryzowany pomiar ciśnienia wewnątrzgałkowego oraz wyników siatkówkowych w celu przeprowadzenia przesiewu ilościowego.
- Wspiera powtarzalną indukcję fenotypu choroby, co zapewnia spójność i skalowalność testów.
Badania translacyjne i przedkliniczne
- Jest zgodny z opracowywaniem biomarkerów translacyjnych poprzez modelowanie trwałego podwyższenia ciśnienia wewnątrzgałkowego oraz utraty komórek zwojowych siatkówki.
- Łączy odkrycia z badaniami nad skutecznością przedkliniczną w kontekście istotnym klinicznie.
- Wspiera podejmowanie decyzji o dalszym rozwoju kandydatów na leki w jaskrze, z uwzględnieniem analizy ryzyka.
Integracja potoku i przepływu pracy
Model ten integruje się z kontinuum od odkrywania do fazy przedklinicznej, wspierając walidację celu, identyfikację substancji wiodących oraz badania translacyjne nad terapiami jaskry.
- Biologia odkrywcza: Umożliwia testowanie hipotez dotyczących mechanizmów ciśnienia wewnątrzgałkowego oraz szlaków neurodegeneracji.
- Przesiewanie: Zapewnia powtarzalny test in vivo do oceny skuteczności i bezpieczeństwa związków.
- Analityka: Dostarcza ilościowych pomiarów ciśnienia wewnątrzgałkowego i wyników siatkówkowych do analizy porównawczej.
- Badania translacyjne: Modeluje istotne dla choroby punkty końcowe w celu walidacji biomarkerów i terapii.
- Ponowne wykorzystanie w przedsiębiorstwie: Służy jako zestandaryzowana platforma do bieżących badań nad jaskrą i oceny międzyprogramowej.
Wpływ operacyjny i przedsiębiorstwa
- Wartość naukowa: Zwiększa pewność predykcyjną w walidacji celów oraz badaniach mechanistycznych jaskry.
- Wartość operacyjna: Oferuje zestandaryzowaną, powtarzalną i skalowalną indukcję nadciśnienia wewnątrzgałkowego u szczurów.
- Wartość strategiczna: Wspiera świadome podejmowanie decyzji o kontynuacji lub przerwaniu badań (go/no-go) i redukuje ryzyko biologiczne na późnych etapach w portfolio okulistycznym.
- Wpływ na portfolio: Umożliwia priorytetyzację kandydatów neuroprotekcyjnych i obniżających ciśnienie z uwzględnieniem analizy ryzyka.
Kwestie implementacyjne
- Wymagana jest wiedza specjalistyczna w zakresie mikrochirurgii okulistycznej oraz technik fotokoagulacji laserowej.
- Wymagany jest dostęp do sprzętu laserowego argonowego oraz narzędzi do pomiaru ciśnienia wewnątrzgałkowego.
- Konieczna jest standaryzacja znieczulenia, parametrów lasera oraz opieki pozabiegowej pomiędzy zespołami.
- Może być wymagana adaptacja protokołu dla różnych szczepów szczurów lub modeli ocznych.
- Potencjalne ograniczenia obejmują zmienność techniczną oraz konieczność monitorowania podłużnego.
