August 14th, 2018
Tutaj prezentujemy protokół wprowadzający szczurzy model zmęczenia centralnego przy użyciu zmodyfikowanej metody wieloplatformowej (MMPM).
Metoda ta może pomóc odpowiedzieć na kluczowe pytania w konstrukcji modelu zmęczenia centralnego. Na przykład, jak wywołać zmęczenie zarówno w aspekcie fizycznym, jak i psychicznym oraz jak je ocenić. Główną zaletą tej techniki jest połączenie czynników psychicznych za pomocą zmodyfikowanej metody wieloplatformowej, aby lepiej symulować początek zmęczenia centralnego.
Po raz pierwszy wpadliśmy na ten pomysł, gdy zauważyliśmy ścisły związek między okresowym brakiem snu a zmęczeniem centralnym. Próbowaliśmy różnych godzin i dni deprywacji, aby wywołać centralne zmęczenie i ostatecznie stwierdziliśmy, że 14 godzin w ciągu 21 dni to właściwy wzorzec. Model wykazuje dobrą trafność w zakresie zmęczenia centralnego i może być wykorzystany w przyszłych badaniach, aby pomóc w przeglądzie mechanizmu leżącego u podstaw choroby.
Zacznij od zbudowania nieprzezroczystego plastikowego zbiornika bez pokrywy. Zamocuj 15 okrągłych platform na dnie zbiornika, które są uporządkowane w trzech rzędach i pięciu kolumnach. Pozostaw wystarczająco dużo miejsca między każdą platformą, około 13 centymetrów między rzędami i 10 centymetrów między kolumnami.
Zamontuj kran w wylocie wody po bocznej stronie zbiornika. Na koniec zrób osłonę z siatki żelaznej na zbiornik, na której wisi pudełko na żywność. Zacznij od ponumerowania korzeni ogonów szczurów za pomocą markera.
Zważ szczury, z wyłączeniem tych wyjątkowo lekkich lub ciężkich, a resztę podziel losowo na grupę modelową i kontrolną. Delikatnie umieść szczury w czystych klatkach i pozwól im zaaklimatyzować się w laboratorium przez co najmniej trzy dni. Zapewnij wystarczające zaopatrzenie w wodę i żywność.
Zacznij od umieszczenia zbiornika na płaskim serwisie, a następnie napełnij go siedmioma centymetrami ciepłej wody, około jednego centymetra poniżej płaskiej platformy. Następnie włóż do pudełka na żywność paszę i wodę na jeden dzień i zawieś je na pokrywie. Następnie wyjmij modelową grupę szczurów z klatki za ogon i delikatnie włóż je do zbiornika.
Wystrzel wszystkie szczury w wodzie zamiast na platformy, aby zmotywować ich strach przed wodą. Upewnij się, że każdy szczur ma platformę, na której może stanąć, podczas gdy szczury z grupy kontrolnej pozostają w swoich oryginalnych klatkach z wystarczającą ilością pożywienia i wody. Następnie przykryj zbiornik i monitoruj szczury.
Po 14 godzinach wyjmij model szczurów ze zbiornika i wysusz ich włosy suszarką. Zwróć uwagę na ogony szczurów, jeśli znikną. Następnie włóż szczura z powrotem do oryginalnej klatki z jedzeniem i wodą.
Na koniec przepłucz zbiornik i otwórz kran, aby odprowadzić ścieki. Następnie wysterylizuj zbiornik za pomocą sprayu 75% etanolu. Wyniki badań na otwartym polu wskazują, że w porównaniu z grupą kontrolną obserwuje się znaczny spadek zarówno ruchu odchowu, jak i średniej prędkości dobrowolnej aktywności u szczurów modelowych.
Test labiryntu z podwyższonym plusem pokazuje, że 21 dni modelowania znacznie zmniejszyło zarówno wejścia, jak i czas trwania w otwartym ramieniu w porównaniu z grupą kontrolną, podczas gdy nastąpił wzrost w przypadku zamkniętego ramienia. Wyczerpujący test pływacki wykazał, że czas pływania w grupie modelowej jest znacznie krótszy niż w grupie kontrolnej. Wreszcie, wyniki te wskazują, że dopamina w podwzgórzu, a także stosunek dopaminy do serotoniny, znacznie spada w grupie modelowej w porównaniu z grupą kontrolną, podczas gdy zawartość serotoniny znacznie wzrasta.
Po obejrzeniu tego filmu powinniście dobrze zrozumieć, jak zbudować czołg wieloplatformowy i zastosować go w swoim centralnym modelu zmęczeniowym. Jest to model nieinwazyjny, który jest łatwy do opanowania. Wypróbowując ten model, bardzo ważne jest, aby mieć oko na resztę, ponieważ w ciągu pierwszych dwóch tygodni są one dość agresywne i może dojść do kontuzji.
Chociaż model ten ma na celu zapewnienie wglądu w zmęczenie centralne, można go również zastosować do innych chorób poprzez sumowanie czynników lub dostosowywanie czasu trwania modelu, takich jak zmęczenie nawigacją i depresja.
View the full transcript and gain access to thousands of scientific videos
Niniejsze badanie przedstawia protokół wprowadzenia modelu szczura centralnego zmęczenia stosując metodę zmodyfikowanych wielu platform (MMPM). Podejście łączy czynniki mentalne i fizyczne, aby lepiej symulować centralne zmęczenie, zmierzając do zbadania mechanizmów leżących u podstaw i skutków okresowego pozbawienia snu w modelu.