Pomiar aktywnego i pasywnego oswajania oddzielnie u myszy

Metoda ta może ocenić poziom oswojenia u każdej myszy, a dane będą bardzo przydatne do dalszych badań nad oswojeniem, takich jak mapowanie genetyczne genów związanych z oswojeniem. Główną zaletą tej techniki jest to, że przy użyciu tej metody może ona ocenić dwa główne składniki oswajania: oswajanie aktywne i pasywne, oddzielnie. Procedurę zademonstrują pan Hiromichi Nagayama, doktorant i pani Motoko Nihei, technik z mojego laboratorium.

Aby rozpocząć, włącz aparat cyfrowy i rozpocznij nagrywanie. Następnie użyj dużej pęsety, aby delikatnie podnieść mysz za ogon. Przenieś mysz z jej klatki domowej na środek aparatu na otwartym polu.

Po uruchomieniu stopera umieść dłoń w dolnym, lewym rogu aparatu. Trzymając dłoń skierowaną do góry, poruszaj palcami, powoli i równomiernie. Powoli przesuń rękę w kierunku myszy i zatrzymaj się w odległości 10 centymetrów od boku ciała myszy.

Zachowaj tę odległość, jeśli mysz próbuje się oddalić. Jeśli mysz zbliży się do dłoni, trzymaj dłoń w tej samej pozycji i kontynuuj powolne i równomierne poruszanie palcami. Usuń mysz wolną ręką, jeśli próbuje wspiąć się na ramię.

Po minucie zakończ test. Po ustawieniu myszy w aparacie umieść lewą rękę w aparacie. Następnie powoli i równomiernie przesuwaj dłoń w kierunku myszy i delikatnie dotykaj myszy opuszkami palców.

Kontynuuj dotykanie myszy opuszkami palców, aż się odsunie. Gdy mysz spróbuje zerwać kontakt, podążaj za nim ręką i ponownie zainicjuj kontakt. Zakończ test po jednej minucie.

Natychmiast po zakończeniu poprzedniego testu użyj dużej pęsety, aby podnieść mysz za ogon i delikatnie połóż ją na lewej dłoni. Delikatnie pogłaszcz mysz lewym kciukiem, aż opuści dłoń. Następnie umieść mysz z powrotem na dłoni za pomocą pęsety.

Po trzeciej próbie zatrzymaj nagrywanie wideo i zważ mysz. Po powrocie myszy do klatki domowej zapisz ilość kału i moczu pozostawionych w otwartym polu aparatu. Następnie wytrzyj aparat i rękawice ręcznikiem papierowym nasączonym 0,2% środkiem odkażającym jodoforowym i wytrzyj urządzenie suchym ręcznikiem papierowym.

Po przypisaniu kluczy do każdego indeksu zachowań, uruchom oprogramowanie tanaMove. Następnie przeciągnij i upuść plik wideo do analizy w oknie. Upewnij się, że plik został załadowany i że informacje w pliku danych.

Pole CSV jest poprawne. Kliknij przycisk Gotowe i wprowadź przypisane klucze dla każdego indeksu zachowania w kolejnym oknie. Następnie kliknij przycisk Odtwórz, aby uruchomić plik wideo i Zatrzymaj się, aby go wstrzymać.

Naciśnij A, gdy zaobserwujesz, że mysz zmierza w kierunku ręki lub się do niej zbliża. Naciśnij R, gdy zaobserwujesz, że mysz porusza się bez kierowania się w stronę ręki podczas aktywnego testu oswajania. Naciśnij i przytrzymaj W, gdy usłyszysz dźwięk timera po 60 sekundach, aby zaznaczyć koniec aktywnego testu oswajania.

Gdy lewa ręka znajdzie się w kadrze, rozpocznij analizę do Testu Pasywnego Oswojenia. Naciśnij A, gdy zaobserwujesz, że mysz zmierza w kierunku ręki i R, gdy zaobserwujesz, że mysz porusza się bez kierowania się w stronę ręki. Następnie naciśnij i przytrzymaj W, gdy usłyszysz dźwięk timera po 60 sekundach.

Zainicjuj pasywną analizę oswajania, gdy zauważysz, że lewa ręka wchodzi w kadr. Podczas odtwarzania wideo naciśnij A, gdy zauważysz, że mysz zbliża się do ręki i R, gdy zauważysz, że mysz porusza się bez kierowania się w stronę dłoni. Jeszcze raz naciśnij W, gdy usłyszysz minutnik po 60 sekundach.

Następnie naciskaj T za każdym razem, gdy mysz pozostaje na dłoni podczas testu. Po zakończeniu testu kliknij przycisk Zatrzymaj. Następnie kliknij przycisk Wstecz, aby aktywować nowe okno, i wprowadź nową nazwę pliku do wprowadzania danych CSV.

Następnie kliknij przycisk Gotowy i wprowadź odpowiednie klucze w nowym oknie. Następnie kliknij przycisk Odtwórz, aby ponownie uruchomić wideo i rozpocząć analizę Aktywnego Testu Okiełznania. Podczas odtwarzania wideo naciśnij T za każdym razem, gdy mysz dobrowolnie skontaktuje się z programem obsługi.

Gdy licznik czasu zabrzmi po 60 sekundach, naciśnij i przytrzymaj W. Podczas testu pasywnego oswajania naciśnij T, gdy mysz pozwoli przewodnikowi dotknąć swojego ciała. Następnie naciśnij i przytrzymaj W, gdy minutnik zabrzmi po 60 sekundach. Następnie kliknij przycisk Zatrzymaj, a następnie przycisk Wstecz przed wprowadzeniem nazwy pliku do wyjścia danych CSV.

Następnie kliknij przycisk Gotowy, aby aktywować nowe okno w celu wprowadzenia przypisanych. Następnie kliknij przycisk Odtwórz, aby rozpocząć aktywny test oswajania. Gdy zobaczysz, że mysz skacze, naciśnij J. Następnie naciśnij W, gdy po 60 sekundach zabrzmi minutnik.

Kliknij przycisk Zatrzymaj, aby zatrzymać obserwację wideo, a licznik czasu włączy się ponownie po 60 sekundach. Następnie kliknij przycisk Wstecz i wprowadź nazwę pliku wyjściowego danych CSV. Następnie zapisz wszystkie pliki danych surowych w folderze zawierającym dwa dodatkowe pliki.

Otwórz dwa dodatkowe pliki i kliknij przycisk Podsumuj. Na koniec zapisz wyniki jako osobny plik do dalszych analiz. Stosując selektywną hodowlę, wyprodukowano myszy o wysokim poziomie aktywnego oswajania.

Myszy z selektywnych grup hodowlanych uzyskały wyższe wyniki w teście aktywnej oswajalności, wykazując dłuższy czas kontaktu z ludzką ręką niż myszy kontrolne. Myszy z obu grup nie różniły się istotnie pod względem kursowania, lokomocji czy czasu skakania. Jednak wybrane myszy uzyskały wyższe wyniki w teście pasywnej oswajalności.

Ponadto wybrane myszy pozostawały na ludzkiej dłoni znacznie dłużej niż myszy kontrolne w teście Stay-On-Hand. Próbując wykonać tę procedurę, należy pamiętać, aby unikać dotykania myszy do czasu wykonania testu oswajania, ponieważ doświadczenie w obsłudze może znacząco wpłynąć na oswojenie każdej myszy.