March 8th, 2019
Obrazowanie ultradźwiękowe stało się powszechną metodą określania wymiarów światła tętniaków aorty piersiowej i brzusznej u myszy. Protokół ten opisuje procedurę uzyskiwania wiarygodnych i powtarzalnych dwuwymiarowych obrazów ultrasonograficznych aorty wstępującej i brzusznej u myszy.
Pomiary ultrasonograficzne o wysokiej rozdzielczości są szeroko stosowane do pomiaru wymiarów aorty u myszy. Protokół ten stanowi praktyczny przewodnik po zastosowaniu tej modalności. Protokół ten ułatwia uzyskanie powtarzalnych i dokładnych dwuwymiarowych pomiarów średnicy aorty piersiowej i brzusznej u myszy.
Procedurę zademonstrują dr Hasashi Sawada, doktor habilitowany, i Jessica Morrleghen, naukowiec z University of Kentucky. Przed rozpoczęciem zabiegu za pomocą bawełnianego wacika nałóż krem rozszerzający na obszar obrazowania znieczulonej myszy. Po minucie delikatnie usuń cały krem i włosy, a następnie spłucz odsłoniętą skórę ciepłą wodą.
Po wytarciu skóry do sucha, aby całkowicie usunąć krem, umieść kropkę żelu ultradźwiękowego na każdym z czterech miedzianych przewodów na platformie. Przyklej każdą poduszkę łapy do każdego przewodu, aby uzyskać odczyty elektrokardiogramu. I sprawdź, czy tętno wynosi od 450 do 450 uderzeń na minutę.
Nałóż wstępnie podgrzany żel ultradźwiękowy na miejsce obrazowania i przymocuj sondę do uchwytu. Następnie obróć platformę, aby uzyskać optymalne skanowanie, i opuść sondę, aż zetknie się z żelem ultradźwiękowym. Aby zobrazować aortę piersiową, przechyl platformę w dół w kierunku lewej strony myszy i umieść sondę na prawej krawędzi mostka myszy.
Orientacja znacznika odniesienia na sondzie doogonowo. Przełącz się na kolorowy doppler na aorcie piersiowej, aby potwierdzić przepływ krwi. Dostosuj stolik i kąt sondy, aby wyraźnie uwidocznić aortę.
Za pomocą pokręteł do pomiaru głębi i szerokości obrazu przytnij obraz ultrasonograficzny, aby zwiększyć liczbę klatek na sekundę i zmienić głębokość ogniskowej po grzbietowej stronie aorty wstępującej, używając pokrętła głębokości ogniskowej. Sprawdź parametry ultrasonograficzne zgodnie z tabelą i użyj pokrętła stage osi X i Y, aby delikatnie przesunąć sondę, aby uchwycić podłużny obraz aorty o jak największej średnicy. Aby zobrazować aortę brzuszną, umieść sondę poprzecznie tuż pod mostkiem i wyrostkiem ksyloidalnym, tak aby znacznik odniesienia na sondzie był skierowany po prawej stronie myszy.
Aorta brzuszna powinna znajdować się obok żyły głównej dolnej i/lub żyły wrotnej. Wizualizuj aortę brzuszną za pomocą kolorowego doperu, aby potwierdzić pulsacyjny przepływ i przyciąć obraz ultrasonograficzny, aby zwiększyć liczbę klatek na sekundę. Zmień głębokość ogniskowej na tylną ścianę aorty brzusznej i przesuń sondę doogonowo, aby uwidocznić punkty rozgałęzień tętnic trzewnych i krezkowych górnych.
Następnie użyj prawej tętnicy nerkowej jako punktu orientacyjnego i uchwyć pętlę sinusoidalną obszaru zainteresowania, pokazując maksymalne rozszerzenie aorty brzusznej. Po przechwyceniu wszystkich obrazów usuń żel ultradźwiękowy, spłucz obszar obrazowania ciepłą wodą i delikatnie wytrzyj mysz do sucha. Umieść mysz w klatce na poduszce grzewczej i wyczyść ultrasonograf, sondę i platformę miękką szmatką i chusteczkami dezynfekującymi.
Następnie pobierz wszystkie pliki zebrane podczas skanowania i wyłącz aparat USG. Na tym reprezentatywnym obrazie ultrasonograficznym nietętniakowej bliższej aorty piersiowej można zaobserwować aortę wstępującą zlokalizowaną obok tętnicy płucnej i tworzącą zakrzywioną rurkę z trzema odgałęzieniami w okolicy łuku. Tętnica bezimienna, lewa tętnica szyjna wspólna i lewa tętnica podobojczykowa.
W tym reprezentatywnym obrazie ultrasonograficznym aorty brzusznej nietętniakowej aorta brzuszna jest wykrywana grzbietowo do żyły głównej dolnej. Tutaj pokazane są reprezentatywne obrazy tętniaków aorty piersiowej i brzusznej. Do pomiaru średnicy zatoki aortalnej i aorty wstępującej zielona linia służy odpowiednio do standaryzacji zatoki aortalnej i średnicy aorty wstępującej.
Następnie można narysować linie prostopadle do zielonej linii między dwiema wewnętrznymi krawędziami światła w zatoce aortalnej i maksymalną rosnącą średnicą aorty. Aby zmierzyć aortę brzuszną, narysuj linię w poprzek największej średnicy światła, od wewnętrznej krawędzi do wewnętrznej krawędzi światła naczynia, i prześledź wewnętrzną krawędź światła aorty dla obszaru światła. Średnice światła aorty piersiowej i brzusznej są różne w przypadku skurczu i rozkurczu.
W celu uzyskania dokładnych pomiarów należy również wziąć pod uwagę cykl pracy serca. W tym reprezentatywnym badaniu pilotażowym nie stwierdzono istotnej różnicy w zmierzonych średnicach aorty wstępującej między obrazami ultrasonograficznymi a obrazami ex vivo. Ta technika ultrasonograficzna pozwala na uzyskanie powtarzalnych i dokładnych wyników, ponieważ w tym eksperymencie nie zaobserwowano żadnych zmian między obserwatorami lub wewnątrz obserwatorów między pomiarami aorty wykonanymi przez dwóch niezależnych obserwatorów a sesjami pomiarowymi.
Regulacja sondy i ustawienia stolika są ważnymi krokami dla wiarygodnego i powtarzalnego obrazowania aorty. Etapy analizy danych są również ważne dla dokładnego pomiaru aorty.
Ten protokół opisuje zastosowanie obrazowania ultrasonograficznego do dokładnego pomiaru wymiarów tętniaków aorty piersiowej i brzusznej u myszy. Zapewnia krok po kroku przewodnik dla badaczy, aby uzyskać wiarygodne dwuwymiarowe obrazy aorty.