Name: Inwazyjna ocena hemodynamiczna układu prawej komory i tętniczego nadciśnienia płucnego wywołanego niedotlenieniem u myszy (Wideo) | JoVE Journal
Uploaded: 2019-10-24T13:30:00.000+00:00
Duration: 4 min 54 s
Description: Poznaj inwazyjną ocenę hemodynamiczną prawej komory i tętnicy płucnej u myszy poprzez chirurgię otwartej klatki piersiowej. Ta metoda umożliwia jednoczesny pomiar ciśnień RVP i PAP w modelach nadciśnienia płucnego.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

To badanie jest wspierane przez Projekt Reformy Kształcenia Podyplomowego i Nauczania Peking Union Medical College (10023-2016-002-03), Fundusz Młodzieżowy Szpitala Fuwai (2018-F09) oraz Fundusz Dyrektora Beijing Key Laboratory of Pre-clinical Research and Evaluation for Cardiovascular Implant Materials (2018-PT2-ZR05).

Protokół dla zwierząt został sprawdzony i zatwierdzony przez Instytucjonalny Komitet ds. Opieki i Użytkowania Zwierząt w Szpitalu Fuwai, Chińskiej Akademii Nauk Medycznych, Peking Union Medical College (NO.0000287). Zwierzęta doświadczalne były trzymane i karmione zgodnie z wytycznymi dotyczącymi dobrostanu zwierząt w Chinach.
UWAGA: Ośmio- do 12-tygodniowe samce myszy C57BL były trzymane w środowisku o 12-godzinnym cyklu ciemności / 12 godzin światła. Myszy z TNP trzymano przez 4 tygodnie w stężeniu tlenu wynoszącym 10%, utrzymywanym w komorze hipoksji kontrolowanej tlenem w celu wywołania nadciśnienia płucnego, a myszy kontrolne trzymano w powietrzu pokojowym (21% tlenu) w identycznych warunkach. Pomiary RVP i PAP wykonano pod koniec 4-tygodniowej prowokacji hipoksją.
1. Przygotowanie przedoperacyjne
<ol>
	<li>Namoczyć cewnik przetwornika ciśnienia (rozmiar: 1 Fr) w 0,9% soli fizjologicznej w temperaturze pokojowej przez co najmniej 30 minut przed eksperymentem hemodynamicznym.</li>
	<li>Przefiltruj roztwór 2,2,2-tribromoetanolu z filtrem 0,22 μm i przechowuj w lodówce o temperaturze 4 stopni.</li>
	<li>Przygotuj oczyszczone narzędzia i materiały chirurgiczne, takie jak rękawiczki do operacji.</li>
	<li>Przygotuj 10 ml 1,0% roztworu enzymów trawiennych do czyszczenia cewnika.</li>
	<li>Podłączyć cewnik przetwornika ciśnienia do układu ciśnienie-objętość.</li>
	<li>Skalibruj przetwornik ciśnienia przed uzyskaniem pomiarów ciśnienia dla każdej myszy.
	<ol>
		<li>Przekręć pokrętło kalibracji na 0 mmHg i 25 mmHg, aby wysłać sygnał ciśnienia weryfikacyjnego do oprogramowania do akwizycji danych i skonfigurować ustawienie kalibracji w oprogramowaniu.</li>
		<li>Przekręć pokrętło na Przetwornik i ustaw pokrętło Balance na linię bazową zera.</li>
	</ol>
	</li>
	<li>Ustaw standardowy mikroskop stereoskopowy i stół chirurgiczny dla małych zwierząt z kontrolowaną temperaturą do utrzymania temperatury ciała podczas operacji.</li>
	<li>Skonfiguruj system oświetlenia świetlnego do mikrochirurgii, aby zapewnić wystarczającą ilość światła na obszarze operacyjnym.</li>
</ol>
2. Chirurgia na otwartej klatce piersiowej i pomiary hemodynamiczne
<ol>
	<li>Znieczulić myszy 250 mg/kg 2,2,2-tribromoetanolu we wstrzyknięciu dootrzewnowym (i.p.). W razie potrzeby należy powtórzyć dawki uzupełniające w ilości od 1/3 do 1/2 dawki pierwotnej podczas zabiegu.</li>
	<li>Usuń sierść na klatce piersiowej i szyi za pomocą golarki i balsamu do depilacji (<silna klasa="xfig">Rysunek 1A, 2A).</li>
	<li>Zabezpiecz każdą mysz w pozycji leżącej na stole chirurgicznym dla małych zwierząt z kontrolowaną temperaturą, aby pomóc utrzymać temperaturę ciała (37 °C) podczas operacji.</li>
	<li>Oczyść miejsce operowane 70% octanalem.</li>
	<li>Po uruchomieniu znieczulenia potwierdź odpowiednią indukcję znieczulenia za pomocą szczypania palca u nogi.</li>
	<li>Wykonaj nacięcie w linii środkowej na skórze szyi (<silna klasa="xfig">Rysunek 1A).</li>
	<li>Wypreparuj mięśnie szkieletowe za pomocą zakrzywionych kleszczy i odsłoń tchawicę (<silna klasa = "xfig" >Rysunek 1B, 1C).</li>
	<li>Wykonać intubację przez usta za pomocą zmodyfikowanego cewnika dożylnego 22 G. Upewnij się, że rurka znajduje się w tchawicy za pomocą kleszczy (<silna klasa="xfig">Rysunek 1D).</li>
	<li>Podłącz rurkę do respiratora dla małych zwierząt. Oblicz i ustaw częstość oddechów i objętość oddechową na podstawie masy ciała zgodnie z instrukcją obsługi respiratora10. Na przykład ustaw częstość oddechów na 133/min, a objętość oddechową na 180 μl dla myszy o wadze 30 g na podstawie opisanych obliczeń.</li>
	<li>Zabezpiecz rurkę do wentylacji za pomocą taśmy.</li>
	<li>Potwierdź odpowiednią indukcję znieczulenia za pomocą uszczypnięcia palca u nogi.</li>
	<li>Wykonaj nacięcie w linii środkowej na skórze klatki piersiowej i ostrożnie wypreparuj mięśnie klatki piersiowej za pomocą narzędzia do kauteryzacji (<silna klasa="xfig">Rysunek 2B, 2C).</li>
	<li>Przetnij mostek nożyczkami przez środek i odsłoń klatkę piersiową (<silna klasa="xfig">Rysunek 2D).</li>
	<li>Zapobiegaj krwawieniu za pomocą narzędzia do kauteryzacji podczas zabiegu chirurgii na otwartej klatce piersiowej.</li>
	<li>Odsłoń prawą komorę za pomocą zwijaczy (<silna klasa="xfig">Rysunek 2E).</li>
	<li>Wprowadzić cewnik przetwornika ciśnienia nasączony solą fizjologiczną przez mały tunel utworzony za pomocą igły 25 G do prawej komory, aby zmierzyć RVP (<silna klasa = "xfig" >Rysunek 2F i <silna klasa = "xfig" >Rysunek 3A, 3C).</li>
	<li>Przytrzymaj cewnika i skrzyżuj zastawkę płucną w sposób koncentryczny z tętnicą płucną. Obserwuj przebieg ciśnienia i uzyskaj stabilny sygnał PAP (rysunek 3B, 3D).</li>
	<li>Rejestruj dane hemodynamiczne za pomocą systemu akwizycji danych i oprogramowania.</li>
	<li>Po końcowych pomiarach należy humanitarnie poddać myszy eutanazji poprzez wstrzyknięcie nadmiaru dawki roztworu 2,2,2-tribromoetanolu.</li>
	<li>Ostrożnie wyjmij cewnik z prawego układu sercowego i umieść go w strzykawce o pojemności 1 ml zawierającej 1% roztwór enzymów trawiennych.</li>
	<li>Użyj wody destylowanej do ciągłego ostrożnego przepłukiwania cewnika i przechowuj go w oryginalnym pudełku.</li>
</ol>
3. Analiza danych dla hemodynamiki
UWAGA: Dane hemodynamiczne zostały zarejestrowane i przeanalizowane za pomocą oprogramowania analitycznego11 (Tabela materiałów).
<ol>
	<li>Dla każdej myszy wybierz co najmniej 10 ciągłych i stabilnych cykli bicia serca bez szumów, aby uzyskać średnie dane RVP lub PAP dla każdego parametru.</li>
	<li>Użyj testu t-Studenta, aby porównać normalne grupy kontroli powietrza i hipoksji. UWAGA: p < 0,05 uznano za statystycznie istotne. Dane są prezentowane jako średnia ± SD.</li>
</ol>

<ol><li>Humbert, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Advances+in+therapeutic+interventions+for+patients+with+pulmonary+arterial+hypertension%5BTitle%5D)+AND+%22Circulation%22%5BJournal%5D)">Advances in therapeutic interventions for patients with pulmonary arterial hypertension.</a> Circulation. 130 (24), 2189-2208 (2014).</li>
<li>Chatterjee, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+Swan-Ganz+catheters%3A+past%2C+present%2C+and+future%3A+a+viewpoint%5BTitle%5D)+AND+%22Circulation%22%5BJournal%5D)">The Swan-Ganz catheters: past, present, and future: a viewpoint.</a> Circulation. 119 (1), 147-152 (2009).</li>
<li>Adamson, P. B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((CHAMPION+trial+rationale+and+design%3A+the+long-term+safety+and+clinical+efficacy+of+a+wireless+pulmonary+artery+pressure+monitoring+system%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Cardiac+Failure%22%5BJournal%5D)">CHAMPION trial rationale and design: the long-term safety and clinical efficacy of a wireless pulmonary artery pressure monitoring system.</a> Journal of Cardiac Failure. 17 (1), 3-10 (2011).</li>
<li>Abraham, W. T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Wireless+pulmonary+artery+haemodynamic+monitoring+in+chronic+heart+failure%3A+a+randomised+controlled+trial%5BTitle%5D)+AND+%22The+Lancet%22%5BJournal%5D)">Wireless pulmonary artery haemodynamic monitoring in chronic heart failure: a randomised controlled trial.</a> The Lancet. 377 (9766), 658-666 (2011).</li>
<li>Adamson, P. B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Wireless+pulmonary+artery+pressure+monitoring+guides+management+to+reduce+decompensation+in+heart+failure+with+preserved+ejection+fraction%5BTitle%5D)+AND+%22Circulation%3A+Heart+Failure%22%5BJournal%5D)">Wireless pulmonary artery pressure monitoring guides management to reduce decompensation in heart failure with preserved ejection fraction.</a> Circulation: Heart Failure. 7 (6), 935-944 (2014).</li>
<li>Shatat, M. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Endothelial+Kruppel-like+Factor+4+modulates+pulmonary+arterial+hypertension%5BTitle%5D)+AND+%22American+Journal+of+Respiratory+Cell+and+Molecular+Biology%22%5BJournal%5D)">Endothelial Kruppel-like Factor 4 modulates pulmonary arterial hypertension.</a> American Journal of Respiratory Cell and Molecular Biology. 50 (3), 647-653 (2014).</li>
<li>SPR-1000 Mouse Pressure Catheter. , Available from: 
 <a target="_blank" href="https://millar.com/products/research/pressure/single-pressure-no-lumen/spr-1000">https://millar.com/products/research/pressure/single-pressure-no-lumen/spr-1000</a> (2019).</li>
<li>Tabima, D. M., Hacker, T. A., Chesler, N. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Measuring+right+ventricular+function+in+the+normal+and+hypertensive+mouse+hearts+using+admittance-derived+pressure-volume+loops%5BTitle%5D)+AND+%22American+Journal+of+Physiology+Heart+and+Circulatory+Physiology%22%5BJournal%5D)">Measuring right ventricular function in the normal and hypertensive mouse hearts using admittance-derived pressure-volume loops.</a> American Journal of Physiology Heart and Circulatory Physiology. 299 (6), 2069-2075 (2010).</li>
<li>Skuli, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Endothelial+deletion+of+hypoxia-inducible+factor-2alpha+%28HIF-2alpha%29+alters+vascular+function+and+tumor+angiogenesis%5BTitle%5D)+AND+%22Blood%22%5BJournal%5D)">Endothelial deletion of hypoxia-inducible factor-2alpha (HIF-2alpha) alters vascular function and tumor angiogenesis.</a> Blood. 114 (2), 469-477 (2009).</li>
<li>Harvard Inspira Advanced Safety Ventilator User's Manual. , Available from: 
 <a target="_blank" href="http://www.harvardapparatus.com/media/harvard/pdf/Inspira_557058_9.pdf.">http://www.harvardapparatus.com/media/harvard/pdf/Inspira_557058_9.pdf.</a> (2019).</li>
<li>LabChart. , Available from: 
 <a target="_blank" href="https://www.adinstruments.com/products/labchart?creative=290739105773_keyword=labchart_matchtype=e_network=g_device=_gclid=CjwKCAjwxrzoBRBBEiwAbtX1n42I2S06KmccVncUHkmExU8KKOXXREyzx8bvTrxYMSze-ooE0atcbRoCliwQAvD_BwE">https://www.adinstruments.com/products/labchart?creative=290739105773_keyword=labchart_matchtype=e_network=g_device=_gclid=CjwKCAjwxrzoBRBBEiwAbtX1n42I2S06KmccVncUHkmExU8KKOXXREyzx8bvTrxYMSze-ooE0atcbRoCliwQAvD_BwE</a> (2019).</li>
<li>Marius, M. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Definitions+and+diagnosis+of+pulmonary+hypertension%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+the+American+College+of+Cardiology%22%5BJournal%5D)">Definitions and diagnosis of pulmonary hypertension.</a> Journal of the American College of Cardiology. 62 (25), 42-50 (2013).</li>
<li>Ciuclan, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+novel+murine+model+of+severe+pulmonary+arterial+hypertension%5BTitle%5D)+AND+%22American+Journal+of+Respiratory+and+Critical+Care+Medicine%22%5BJournal%5D)">A novel murine model of severe pulmonary arterial hypertension.</a> American Journal of Respiratory and Critical Care Medicine. 184 (10), 1171-1182 (2011).</li>
<li>Brown, R. H., Walters, D. M., Greenberg, R. S., Mitzner, W. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+method+of+endotracheal+intubation+and+pulmonary+functional+assessment+for+repeated+studies+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Applied+Physiology%22%5BJournal%5D)">A method of endotracheal intubation and pulmonary functional assessment for repeated studies in mice.</a> Journal of Applied Physiology. 87 (6), 2362-2365 (1999).</li>
<li>Chen, W. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Right+ventricular+systolic+pressure+measurements+in+combination+with+harvest+of+lung+and+immune+tissue+samples+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Visualized+Experiments%22%5BJournal%5D)">Right ventricular systolic pressure measurements in combination with harvest of lung and immune tissue samples in mice.</a> Journal of Visualized Experiments. (71), 50023(2013).</li>
<li>Ma, Z., Mao, L., Rajagopal, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Hemodynamic+characterization+of+rodent+models+of+pulmonary+arterial+hypertension%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Visualized+Experiments%22%5BJournal%5D)">Hemodynamic characterization of rodent models of pulmonary arterial hypertension.</a> Journal of Visualized Experiments. (110), 53335(2016).</li>
<li>Chen, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Berberine+attenuates+hypoxia-induced+pulmonary+arterial+hypertension+via+bone+morphogenetic+protein+and+transforming+growth+factor-%CE%B2+signaling%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Cellular+Physiology%22%5BJournal%5D)">Berberine attenuates hypoxia-induced pulmonary arterial hypertension via bone morphogenetic protein and transforming growth factor-β signaling.</a> Journal of Cellular Physiology. , (2019).</li>
<li>Bueno-Beti, C., Hadri, L., Hajjar, R. J., Sassi, Y. The Sugen 5416/Hypoxia mouse model of pulmonary arterial hypertension. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aBueno-Beti%2C+C+%22Experimental+Models+of+Cardiovascular+Diseases.+Methods+in+Molecular+Biology.+vol+1816%22">Experimental Models of Cardiovascular Diseases. Methods in Molecular Biology. vol 1816</a>. Ishikawa, K. , Humana Press. New York, NY. (2018).</li>
</ol>

Autorzy nie mają nic do ujawnienia.

Intubacja tchawicy jest pierwszym ważnym krokiem w przypadku operacji na otwartej klatce piersiowej. Klasyczna metoda intubacji tchawicy u małych zwierząt, takich jak szczury czy myszy, polega na wykonaniu nacięcia w kształcie litery T na tchawicy i bezpośrednim wprowadzeniu rurki tchawicy typu Y do tchawicy. W praktyce okazuje się, że ta metoda nie jest łatwa podczas operacji. Rurka tchawicy typu Y jest zbyt duża dla małych zwierząt i tworzy kąt z tchawicą. W związku z tym trudno jest zamocować rurkę na miejscu. Dodatko...

Tętnicze nadciśnienie płucne (PAH) to przewlekła i ciężka choroba krążeniowo-oddechowa z podwyższonym ciśnieniem w tętnicy płucnej (PAP) i ciśnieniem w prawej komorze (RVP), która jest spowodowana proliferacją komórkową i zwłóknieniem małych tętnic płucnych1. Cewniki do tętnic płucnych, zwane również cewnikami Swana-Ganza2, są powszechnie stosowane w klinicznym monitorowaniu RVP i PAP. Ponadto klinicznie zastosowano bezprzewodowy system monitorowania PAP3,4,5. Aby naśladować chorobę do badań na myszach, stosuje się środowisko hipoksyjne do symulacji ludzkich objawów klinicznych PAH6. W ocenie PAP u zwierząt, duże zwierzęta są stosunkowo łatwe do monitorowania za pomocą cewników do tętnic płucnych przy użyciu tej samej techniki, co u ludzi, ale małe zwierzęta, takie jak szczury i myszy, są trudne do oceny ze względu na ich mały rozmiar ciała. Pomiar hemodynamiczny prawego układu komorowego u myszy jest możliwy za pomocą cewnika Fr o ultramałym rozmiarze 1 Fr7. Metoda pomiaru RVP i PAP u myszy została opisana w literaturze8,9, ale metodologia ta nie ma szczegółowego opisu. RVP i PAP są trudniejsze do zmierzenia niż ciśnienie w lewej komorze ze względu na różnice anatomiczne między lewym i prawym układem serca.
Aby uzyskać parametry PAP i RVP w tej samej myszy, opisujemy podejście oparte na operacji otwartej klatki piersiowej do pomiarów hemodynamicznych prawego serca, jego walidację u zdrowych myszy i myszy z PAH oraz jak uniknąć generowania sztucznych danych podczas skomplikowanej operacji na otwartej klatce piersiowej. Chociaż ta technika jest najlepiej wykonywana przez dobrze wyszkolonego chirurga, ma tę zaletę, że jest w stanie ocenić PAP i RVP w tej samej myszy.

<table><tbody><tr><td>2,2,2-tribromoetanol</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>T48402-5G</td><td>Do znieczulenia</td></tr><tr><td>Regulator temperatury zwierząt</td><td>Physitemp Instruments, Inc.</td><td>TCAT-2LV</td><td>Do kontroli temperatury</td></tr><tr><td>Kleszcze preparacyjne</td><td>Fine Science Tools, Inc.</td><td>11274-20</td><td>Do operacji</td></tr><tr><td>System kauteryzacji</td><td>Gemini</td><td>Gemini GEM 5917</td><td>Do operacji</td></tr><tr><td>Cewnik dożylny (22G)</td><td>Angiocath BD</td><td>381123</td><td>Do intubacji</td></tr><tr><td>LabChart 7.3</td><td>ADInstruments</td><td></td><td>Do analizy danych</td></tr><tr><td>System oświetlenia świetlnego</td><td>Olympus</td><td></td><td>Do operacji</td></tr><tr><td>Cewnik Mikro-Tip</td><td>Millar Instruments, Houston, TX</td><td>SPR-1000</td><td>Do pomiaru ciśnienia</td></tr><tr><td>Millar Systemy ciśnieniowo-objętościowe</td><td>Millar Instruments, Houston, TX</td><td>MVPS-300</td><td>Do pomiaru ciśnienia</td></tr><tr><td>Kontroler O2 i komora hipoksji</td><td>Biospherix</td><td>ProOx 110</td><td>Do przewlekłego niedotlenienia</td></tr><tr><td>System akwizycji danych PowerLab</td><td>ADInstruments</td><td>PowerLab 16/30</td><td>Do rejestracji danych</td></tr><tr><td>Nożyczki</td><td>Narzędzia Fine Science Tools, Inc.</td><td>14084-08</td><td>Do chirurgii</td></tr><tr><td>Wentylator dla małych zwierząt</td><td>Harvard Apparatus</td><td>Mini-Vent 845</td><td>Do operacji</td></tr><tr><td>Stereoskop</td><td>Olympus</td><td>SZ61</td><td>Do operacji</td></tr><tr><td>Taśma chirurgiczna</td><td>3M</td><td></td><td>Do operacji</td></tr><tr><td>Enzym terg-a-zyme</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>Z273287-1EA</td><td>Do czyszczenia cewnika</td></tr></tbody></table>

inwazyjna ocena hemodynamiczna układu prawej komory i tętniczego nadciśnienia płucnego wywołanego niedotlenieniem u myszy

Invasive Hemodynamic Assessment for the Right Ventricular System and Hypoxia-Induced Pulmonary Arterial Hypertension in Mice

Tętnicze nadciśnienie płucne (PAH) jest przewlekłą i ciężką chorobą krążeniowo-oddechową. Myszy są popularnym modelem zwierzęcym używanym do naśladowania tej choroby. Jednak ocena ciśnienia w prawej komorze (RVP) i ciśnienia w tętnicy płucnej (PAP) pozostaje wyzwaniem technicznym u myszy. RVP i PAP są trudniejsze do zmierzenia niż ciśnienie w lewej komorze ze względu na różnice anatomiczne między lewym i prawym układem serca. W tym artykule opisano stabilną metodę pomiaru hemodynamicznego prawego serca i jej walidację przy użyciu zdrowych myszy i PAH. Metoda ta opiera się na operacji otwartej klatki piersiowej i wspomaganiu wentylacji mechanicznej. Jest to skomplikowana procedura w porównaniu z zabiegami z zamkniętą klatką piersiową. Chociaż do tej operacji wymagany jest dobrze wyszkolony chirurg, zaletą tej procedury jest to, że może generować zarówno parametry RVP, jak i PAP w tym samym czasie, więc jest to preferowana procedura do oceny modeli PAH.

Cewnik z przetwornikiem ciśnienia wprowadzono do prawej komory (Rysunek 3A) przez tunel rozszerzony igłą 25 G, uzyskując typowy przebieg fali RVP (Rysunek 3C). Cewnik był stale korygowany, powoli przesuwany i utrzymywany w tej samej osi co tętnica płucna podczas przechodzenia przez zastawkę płucną (Rysunek 3B). Po pomyślnym wprowadzeniu czujnika ciśnienia do tętnicy płucnej pojawił ...

Tutaj prezentujemy protokół do przeprowadzenia inwazyjnej oceny hemodynamicznej prawej komory i tętnicy płucnej u myszy przy użyciu metody chirurgicznej na otwartej klatce piersiowej.

Inwazyjna ocena hemodynamiczna układu prawej komory i tętniczego nadciśnienia płucnego wywołanego niedotlenieniem u myszy

Pulmonary arterial hypertension (PAH) is a chronic and severe cardiopulmonary disorder. Mice are a popular animal model used to mimic this disease. ...

Protokół ten jest oceną hemodynamiczną opartą na otwartej operacji klatki piersiowej i jest przydatny do oceny ciśnienia w prawej komorze i tętnicy płucnej u małych zwierząt, takich jak myszy. Zaletą tej procedury jest to, że może generować zarówno parametry VP, jak i PAP w tym samym czasie. Dlatego jest to preferowane rozwiązanie do oceny modeli WWA.Zacznij od ustawienia sprzętu do operacji. Zanurzyć cewnik przetwornika ciśnienia w 0,9% soli fizjologicznej w temperaturze pokojowej na co najmniej 30 minut przed eksperymentem hemodynamicznym. Następnie podłącz cewnik do systemu objętości ciśnienia.Skalibruj przetwornik ciśnienia, przekręcając pokrętło kalibracji na zero i 25 milimetrów słupa rtęci, aby wysłać sygnał weryfikacyjny ciśnienia do oprogramowania do akwizycji danych, a następnie skonfiguruj ustawienie kalibracji. Przekręć pokrętło do przetwornika i ustaw zawór równoważący na zerową linię bazową. Skonfiguruj standardowy mikroskop stereoskopowy, stół chirurgiczny dla małych zwierząt z kontrolowaną temperaturą i system oświetlenia świetlnego do mikrochirurgii.Gdy mysz zostanie odpowiednio znieczulona, usuń sierść na klatce piersiowej i szyi za pomocą golarki i balsamu do depilacji. Zamocuj mysz w pozycji leżącej na stole operacyjnym z kontrolowaną temperaturą. Po upewnieniu się, że znieczulenie działa, wykonaj nacięcie w linii środkowej na skórze szyi.Wypreparuj mięśnie szkieletowe za pomocą zakrzywionych kleszczy i odsłoń tchawicę. Wykonaj intubację przez usta za pomocą cewnika dożylnego z osłonką o rozmiarze 22, potwierdzając, że rurka znajduje się w tchawicy za pomocą kleszczy. Podłącz rurkę do wentylatora dla małych zwierząt i zabezpiecz ją do wentylacji za pomocą taśmy.Następnie wykonaj nacięcie w linii środkowej na skórze klatki piersiowej i ostrożnie wypreparuj mięsień klatki piersiowej za pomocą narzędzia do kauteryzacji. Przetnij mostek nożyczkami przez środek i odsłoń klatkę piersiową. Upewnij się, że nie dopuścić do krwawienia za pomocą narzędzia do kauteryzacji.Odsłoń prawą komorę za pomocą retraktorów, a następnie włóż cewnik przetwornika ciśnienia nasączony solą fizjologiczną przez mały tunel utworzony za pomocą igły o rozmiarze 25 do prawej komory, aby zmierzyć ciśnienie w prawej komorze lub RVP. Przytrzymaj cewnika i skrzyżuj zastawkę płucną w sposób koncentryczny z tętnicą płucną. Obserwuj przebieg ciśnienia i uzyskaj stabilne ciśnienie w tętnicy płucnej lub sygnał PAP.Następnie zapisz dane hemodynamiczne za pomocą oprogramowania do akwizycji danych. Ostrożnie wyjmij cewnik z prawego układu sercowego i umieść go w jednomililitrowej strzykawce zawierającej 1% roztwór enzymu trawiennego. Protokół ten został z powodzeniem wykorzystany do uzyskania przebiegów RVP i PAP u myszy poprzez wprowadzenie cewnika przetwornika ciśnienia do prawej komory i tętnicy płucnej.Aby uniknąć generowania sztucznych danych, segmenty z szumem zostały wyłączone z analizy danych i wprowadzono poprawki, jeśli poziom zerowy cewnika dryfował. RVP i PAP mierzono u myszy z indukowanym przewlekłym niedotlenieniem, a wyniki porównano z wynikami uzyskanymi z grupy kontrolnej. Skurczowe PAP, rozkurczowe PAP, średnie PAP i ciśnienie skurczowe prawej komory były znacznie zwiększone w grupie przewlekłego niedotlenienia.Najważniejszą rzeczą do zapamiętania jest ostrożne włożenie cewnika przetwornika ciśnienia do prawej komory, upewniając się, że nie ma uszkodzenia cewnika i upewnij się, że na ekranie pojawia się płynny przebieg RVP.

invasive-hemodynamic-assessment-for-right-ventricular-system-hypoxia

Research

JoVE Journal

Medicine

Medycyna

Specyficzny i szybki protokół do jednoczesnego badania funkcji prawego serca, zapalenia płuc i odpowiedzi immunologicznej jest opisany jako narzędzie do nauki.  Filmy i rysunki opisują fizjologię i techniki mikrodysekcji w zorganizowanym podejściu zespołowym, które można dostosować do stosowania w małych i dużych badaniach.

Pomiary ciśnienia skurczowego prawej komory w połączeniu z pobieraniem próbek płuc i tkanek immunologicznych u myszy

Ten artykuł zawiera protokół do echokardiograficznej oceny wielkości prawej komory i nadciśnienia płucnego u myszy.  Zastosowania obejmują określanie fenotypu i seryjną ocenę w transgenicznych i indukowanych toksynami mysich modelach kardiomiopatii i chorób naczyń płucnych.

Echokardiograficzna ocena prawego serca u myszy

Dysfunkcja prawej komory (RV) jest kluczowa dla patogenezy chorób sercowo-naczyniowych, jednak dostępne są ograniczone metodologie jej oceny. Ostatnie postępy w obrazowaniu ultrasonograficznym zapewniają nieinwazyjną i dokładną opcję podłużnego badania RV. W tym artykule szczegółowo opisujemy krok po kroku metodę echokardiograficzną wykorzystującą mysi model przeciążenia ciśnienia RV.

Ocena struktury i funkcji prawej komory serca w mysim modelu zwężenia tętnicy płucnej za pomocą echokardiografii przezklatkowej

Tętnicze nadciśnienie płucne (PAH) to choroba tętniczek płucnych, która prowadzi do ich zatarcia i rozwoju niewydolności prawej komory. Modele WWA u gryzoni mają kluczowe znaczenie dla zrozumienia patofizjologii WWA. Tutaj pokazujemy charakterystykę hemodynamiczną, z cewnikowaniem prawego serca i echokardiografią, u myszy i szczura.

Charakterystyka hemodynamiczna modeli tętniczego nadciśnienia płucnego u gryzoni

Przedstawiamy protokół tworzenia dysfunkcji prawej komory u świni poprzez indukowanie ARDS. Wykazano inwazyjne monitorowanie rzutu serca lewej i prawej komory za pomocą sond przepływu wokół aorty i tętnicy płucnej, a także pomiary ciśnienia krwi w aorcie i tętnicy płucnej.

Inwazyjne monitorowanie hemodynamiczne hemodynamiki aorty i tętnic płucnych w dużym modelu zwierzęcym ARDS

Ten protokół opisuje indukcję nadciśnienia płucnego (PH) u myszy na podstawie ekspozycji na niedotlenienie i wstrzyknięcia antagonisty receptora VEGF. U zwierząt rozwija się PH i przerost prawej komory (RV) 3 tygodnie po rozpoczęciu protokołu. Przedstawiono również charakterystykę funkcjonalną i morfometryczną modelu.

Indukcja i charakterystyka nadciśnienia płucnego u myszy przy użyciu modelu hipoksji/SU5416

Tutaj oferujemy użyteczne podejście do badania mechanizmu niewydolności prawej komory. Wygodniejsze i skuteczniejsze podejście do zwężenia tętnicy płucnej ustala się za pomocą narzędzi chirurgicznych wykonanych we własnym zakresie. Ponadto przedstawiono metody oceny jakości tego podejścia za pomocą echokardiografii i cewnikowania.

Indukcja niewydolności prawej komory przez zwężenie tętnicy płucnej i ocena funkcji prawej komory u myszy

Niniejszy protokół opisuje echokardiograficzną charakterystykę morfologii i funkcji prawej komory w szczurzym modelu tętniczego nadciśnienia płucnego.

Kompleksowa echokardiograficzna ocena funkcji prawej komory serca w szczurzym modelu tętniczego nadciśnienia płucnego

Ten protokół krok po kroku przeprowadza wielokrotne dożylne podawanie dawki bolusa i inwazyjne monitorowanie hemodynamiczne u myszy. Badacze mogą wykorzystać ten protokół do przyszłych badań przesiewowych związków terapeutycznych w kierunku nadciśnienia tętniczego płucnego.

Wielokrotne dożylne dawkowanie bolusa i inwazyjna ocena hemodynamiczna w modelu nadciśnienia tętniczego płucnej myszy wywołanego niedotlenieniem

Prezentacja szczegółowych metod oceny funkcji prawej komory poprawi jakość i wiarygodność badań nad nadciśnieniem płucnym, oferując solidne ramy dla przyszłych badań i zwiększając odtwarzalność w różnych laboratoriach.

Ocena funkcji prawej komory w eksperymentalnych modelach tętniczego nadciśnienia płucnego

Poznaj inwazyjną ocenę hemodynamiczną prawej komory i tętnicy płucnej u myszy poprzez chirurgię otwartej klatki piersiowej. Ta metoda umożliwia jednoczesny pomiar ciśnień RVP i PAP w modelach nadciśnienia płucnego.

Inwazyjna ocena hemodynamiczna układu prawej komory i tętniczego nadciśnienia płucnego wywołanego niedotlenieniem u myszy

Przeglądaj więcej filmów