Wykorzystanie danych z obrazowania metodą rezonansu magnetycznego i biopsji do kierowania procedurami pobierania próbek do biobankowania raka prostaty

Znaczenie tego protokołu w porównaniu z poprzednimi metodami pobierania próbek prostaty polega na tym, że daje nam większą pewność celowania w świeżą tkankę nowotworową do badań. Dlatego możemy zabrać świeżą tkankę prosto z powrotem do laboratorium i użyć jej do hodowli lub obrazowania, ponieważ mamy dużą pewność, które próbki są nowotworem, a które są łagodne. Moją kluczową radą podczas nauki tej techniki jest współpraca z lokalnym patologiem, aby ostateczna diagnoza tkankowa i raport nie były zagrożone.

Aby celować w lokalizację guza, przejrzyj obrazy MRI, aby zmierzyć lokalizację nad guzem i znaleźć sekwencję, w której guz jest najbardziej widoczny w płaszczyźnie osiowej. Przewiń obrazy osiowe, aby zidentyfikować obraz, na którym guz jest największy i wydrukuj obraz w celach informacyjnych. Na odpowiednim obrazie koronalnym zmierz odległość od podstawy prostaty do wybranej pozycji osiowej i zmierz całą długość prostaty od wierzchołka do podstawy w milimetrach.

Następnie wydrukuj te pomiary i zaznacz lokalizacje guza w celach informacyjnych. Po pobraniu próbki wysterylizuj okap z przepływem laminarnym i aparat do krojenia prostaty 70% etanolem i zważyć prostatę na standardowej skali w gramach. Następnie pomaluj prawą stronę niebieskim tuszem, a lewą stronę próbki czarnym tuszem, pokrywając tuszem całą kapsułkę i pęcherzyki nasienne, aby umożliwić rozróżnienie marginesów chirurgicznych.

Aby przeciąć prostatę, umieść tkankę tak, aby podstawa i wierzchołek były skierowane w przeciwległe ściany aparatu, tylną stroną w dół i przednią stroną do góry. Umieść złote szpilki wokół próbki tkanki, lekko popychając prostatę do wewnątrz, jeśli to konieczne, aby uzyskać dokładne dopasowanie, i zmierz długość prostaty od podstawy do wierzchołka, aby porównać ten pomiar z długością prostaty mierzoną za pomocą MRI. Jeśli prostata się skurczyła, dostosuj przewidywaną pozycję krojenia o odpowiedni procent redukcji.

Następnie zmierz od podstawy do żądanego przekroju poprzecznego i wybierz szpilkę, która znajduje się najbliżej tego pomiaru, aby ją przeciąć. Zakładając rękawice z kolczugi, aby zapobiec obrażeniom, umieść ostrza urządzenia do krojenia po obu stronach zidentyfikowanej szpilki i użyj przekładki, aby utrzymać ostrza w odległości pięciu milimetrów od siebie. Aby uzyskać plasterek, użyj długich pociągnięć, aby powoli, ale stanowczo przesuwać ostrza w dół, do przodu i do tyłu, potwierdzając dotykiem, że cały plasterek został oddzielony przed demontażem urządzenia.

Następnie usuń ścianki i szpilki i użyj rękawiczek, aby ostrożnie przenieść plasterek na sterylny kawałek tablicy korkowej. Po pobraniu próbki należy przeprowadzić oględziny wycinka poprzecznego w celu porównania z osiowym obrazem MRI. W niektórych przypadkach obszar guza może wydawać się jaśniejszy niż otaczająca tkanka.

Delikatnie obmacuj poprzeczny plasterek. Guz może być twardszy niż otaczająca go tkanka. Korzystając z osiowego obrazu MRI jako przewodnika, wybierz jeden lub więcej obszarów do pobrania próbki i użyj sześciomilimetrowego stempla, aby docisnąć obszar tkanki będącej przedmiotem zainteresowania.

Przekręć stempel do tkanek w miejscu i w dół do korka, aby zapewnić pełne oddzielenie za pomocą ostrego skalpela, aby w razie potrzeby oddzielić próbkę z biopsji od próbki. Po pobraniu próbki należy wyjąć stempel i za pomocą tłoka wyrzucić próbkę do odpowiedniego pojemnika w celu przeprowadzenia dalszej analizy. Następnie namaluj na czerwono otwory, w których zostały wykonane stemple i zanotuj położenie każdego stempla wraz z wagą prostaty i wszelkimi uwagami dotyczącymi koloru i jędrności tkanki.

Przypnij kapsułkę prostaty do korka, aby zapobiec pękaniu podczas mocowania. Zanurz prostatę i korek w utrwalaczu, upewniając się, że próbka jest całkowicie zanurzona. W tej reprezentatywnej analizie, z pierwszych 92 przypadków, w których pobrano próbki, jak wykazano, 64% próbek zawierało co najmniej 40% guza i zostało zgłoszonych do Projektu 100 000 Genomów bez mikrodysekcji.

DNA zostało wyekstrahowane i we wszystkich przypadkach miało wystarczającą wydajność i jakość, a wstępny podzbiór 59 tych próbek został opublikowany w celu porównania z wcześniejszą metodą pobierania próbek. Po tej procedurze świeże próbki guza można wykorzystać do obrazowania na żywo lub hodowli, co pozwala nam przetestować nowe biomarkery, leki i dowiedzieć się więcej o biologii guza. Teraz, gdy rutynowo stosujemy tę metodę, udało mi się przedstawić projekt wykorzystujący tę tkankę do hodowli ex vivo, aby przyjrzeć się nowym kombinacjom przedklinicznych terapii raka prostaty.