Name: OP-IVM: Połączenie dojrzewania in vitro po pobraniu komórek jajowych z chirurgią ginekologiczną (Wideo) | JoVE Journal
Uploaded: 2021-05-09T14:00:00.000+00:00
Duration: 5 min 31 s
Description: Poznaj metodę OP-IVM łączącą pobieranie komórek jajowych z chirurgią ginekologiczną w celu zachowania płodności. Technika ta umożliwia dojrzewanie in vitro oocytów pobranych podczas zabiegów operacyjnych u pacjentek z niepłodnością.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

Ta praca była wspierana przez granty z China National Key R&D Program (nr 2017YFC1002000, 2018YFC1004001, 2019YFA0801400), Narodowej Fundacji Nauki Chin (nr 81571386, 81730038), Funduszu Innowacji CAMS dla Nauk Medycznych (2019-I2M-5-001) oraz Specjalnego Projektu Badawczego Rozwoju Zdrowia Kapitału Chińskiego (2018-2-4095).

UWAGA: Badania związane z metodą OP-IVM zostały zatwierdzone przez instytucjonalną komisję rewizyjną (IRB) Trzeciego Szpitala Uniwersytetu Pekińskiego oraz Komisję Etyki Uniwersytetu Pekińskiego (2014S2004). Podsumowanie OP-IVM znajduje się w Rysunek 1. Procedura krok po kroku zostanie przedstawiona w następnej sekcji.
1. Wprowadzenie OP-IVM do odpowiednich pacjentów
<ol>
	<li>Zidentyfikuj potencjalnych pacjentów, którzy mogą odnieść korzyści z OP-IVM, takich jak ci opisani w krokach 1.1.1-1.1.3:
	<ol>
		<li>Pacjentki z zespołem policystycznych jajników (PCOS) z opornością na klomifen, które wymagają laparoskopowej operacji wiercenia jajników.</li>
		<li>Niepłodni pacjenci, którzy wymagają łagodnych operacji ginekologicznych, takich jak histeroskopowa miomektomia, polipektomia, przezszyjkowa resekcja przegrody i laparoskopowa chirurgia jajowodów oraz ooforocystektomia, przed leczeniem ART.</li>
		<li>Pacjenci z rakiem lub chorobą hematologiczną, którzy otrzymują chemioradioterapię lub radioterapię.</li>
	</ol>
	</li>
</ol>
2. Świadoma zgoda
<ol>
	<li>Przekaż pacjentom pełne informacje, w tym o tym, dlaczego OP-IVM może być korzystny, jego procedurę, zastosowania oocytów IVM (IVF-ET lub krioprezerwacja), szacowane RKO i LBR oraz możliwe powikłania. Poproś pacjentów o wyrażenie świadomej zgody poprzez podpisanie formularza zgody.</li>
</ol>
3. Przygotuj etykiety i pożywkę z oocytów IVM
<ol>
	<li>Wydrukuj etykiety identyfikacyjne (ID) z imieniem i nazwiskiem pacjenta oraz datami dla szalek i probówek hodowlanych.</li>
	<li>Dodaj 0,5 ml pożywki IVM uzupełnionej 0,75 IU / ml hormonu folikulotropowego (FSH) i 0,75 IU / ml hormonu luteinizującego (LH) do każdego dołka 4-dołkowej płytki. Przykryj podłoże olejem. 
	UWAGA: Wszystkie te procedury należy wykonywać na ławkach z czystym przepływem laminarnym.</li>
	<li>Podgrzej 4-dołkową płytkę z pożywką oocytową IVM w temperaturze 37 °C w wilgotnym powietrzu zawierającym 5%CO2 i 5%O2 co najmniej 6 godzin przed użyciem.</li>
</ol>
4. Podanie znieczulenia na sali operacyjnej
<ol>
	<li>Sprawdź imię i nazwisko pacjenta przed podaniem znieczulenia.</li>
	<li>Znieczulenie dożylne pacjenta przez anestezjologa.</li>
</ol>
5. Pobieranie komórek jajowych
<ol>
	<li>Oznacz etykiety imieniem i nazwiskiem, datą i identyfikatorem na szalkach i probówkach hodowlanych.</li>
	<li>Ułóż pacjentkę w pozycji litotomii pęcherza moczowego; stale dezynfekuj, układaj i szoruj pochwę ciepłym roztworem soli fizjologicznej.</li>
	<li>Umieść sondę ultradźwiękową w pochwie; zeskanuj i zapisz liczbę pęcherzyków w obu jajnikach. Znajdź miejsce najbliżej jajnika jako miejsce nakłucia i unikaj jelita, pęcherza moczowego i dużych naczyń krwionośnych.</li>
	<li>Odessać płyn pęcherzykowy.
	<ol>
		<li>Przed nakłuciem przemyć igłę środkiem ściernym o stabilnym pH (patrz Tabela materiałów).</li>
		<li>Wstrzyknąć 19 G, jednostrumieniową igłę aspiracyjną do jajników pod kontrolą ultradźwięków.</li>
		<li>Nakłuj większe mieszki włosowe z wyraźnymi granicami najbliżej sondy. W niskiej pozycji szybko wstrzyknąć roztwór płuczący uzupełniony 25 j./ml heparyny. Odessać płyn pęcherzykowy igłą pod ciśnieniem 80-90 mmHg, lekko obracając igłę, aby zassać jak najwięcej płynu pęcherzykowego. Nakłuć inne mieszki włosowe od bliskiej do dalszej strony na tej płaszczyźnie. 
		UWAGA: Podczas aspiracji płyn pęcherzykowy zawierający oocyty spłynie do sterylnej probówki o pojemności 10 ml pod podciśnieniem. Heparyna może zmniejszać lepkość płynu pęcherzykowego, aby ułatwić proces aspiracji.</li>
		<li>Wyjąć igłę z jajnika (trzymać igłę w ścianie pochwy). Dostosuj kierunek sondy ultradźwiękowej i nakłuj pozostałe mieszki włosowe w innych płaszczyznach. Spróbuj odessać wszystkie mieszki włosowe o średnicy ~5-9 mm. 
		UWAGA: Dostosuj pozycję sondy, aby przez cały czas znajdowała się jak najbliżej jajników. Uciskaj sklepienie pochwy z odpowiednią siłą, aby zmniejszyć uraz i krwawienie.</li>
		<li>Wyciągnij igłę po zakończeniu w jednym jajniku, umyj igłę medium manipulacyjnym i nakłuj drugą stronę tą samą metodą. 
		UWAGA: Całkowite aspiracje mieszków włosowych w ciągu 25-30 min.</li>
	</ol>
	</li>
	<li>Przenieś płyn pęcherzykowy z sali operacyjnej do laboratorium IVF w ciągu kilku minut po potwierdzeniu imienia i nazwiska pacjenta oraz numeru identyfikacyjnego 
	UWAGA: Odessany płyn pęcherzykowy należy przenieść na stanowisko laboratoryjne IVF tak szybko, jak to możliwe, aby zapobiec krzepnięciu.</li>
	<li>Wykryj aktywny krwotok w jamie miednicy za pomocą ultradźwięków w trybie B po nakłuciu wszystkich mieszków włosowych. Włóż wziernik i skieruj końcówkę na tylną sklepienie, aby wykryć aktywne krwawienie w miejscu nakłucia. 
	UWAGA: Nie należy obserwować aktywnego krwawienia w miejscu wkłucia pochwy, jeśli pozycja jajnika jest normalna, a pobieranie komórek jajowych jest wykonywane ostrożnie. W przypadku lekkiego krwawienia, które utrzymuje się nawet po ucisku, trzymaj sterylny kompres z gazy w pochwie przez 2-4 godziny. Kontroluj nadmierne krwawienie z małych tętnic za pomocą klamer z kleszczami naczyniowymi przez 2-4 godziny. Krwawienie w jamie miednicy lub jajnika, które zdarza się rzadko, powinno być opanowane za pomocą elektrokoagulacji za pomocą operacji laparoskopowej.</li>
</ol>
6. Chirurgia ginekologiczna
<ol>
	<li>W zależności od potrzeb i stanu pacjenta należy wykonać odpowiednią operację ginekologiczną po pobraniu komórek jajowych.
	<ol>
		<li>Wykonaj laparoskopową operację wiercenia jajników u pacjentek z zespołem policystycznych jajników (PCOS) z opornością na klomifen</li>.
		<li>Wykonaj łagodną operację ginekologiczną u niepłodnych pacjentek przed leczeniem ART, taką jak histeroskopowa miomektomia, polipektomia, przezszyjkowa resekcja przegrody i laparoskopowa chirurgia jajowodów oraz ooforocystektomia.</li>
		<li>Wykonaj jajnikomię w celu kriokonserwacji płodności u pacjentów z rakiem lub chorobą hematologiczną, którzy muszą otrzymać chemioradioterapię. 
		UWAGA: Te operacje ginekologiczne są podstawowymi i standardowymi operacjami klinicznymi. Wytyczne operacyjne w różnych krajach i szpitalach powinny być stosunkowo podobne.</li>
	</ol>
	</li>
</ol>
7. Wykonaj IVM
UWAGA: Wykonaj cały proces IVM na płaskim homotermicznym pomieszczeniu o temperaturze 37 °C.
<ol>
	<li>Przefiltrować zasysany płyn pęcherzykowy za pomocą sitka do komórek nylonowych o wielkości 70 μm. Kilkakrotnie przepłukać probówkę hodowlaną i sitko wstępnie podgrzanym podłożem o stabilnym pH. Upewnij się, że wszystkie niedojrzałe COC zostały całkowicie przeniesione do naczynia hodowlanego. Zebrać przefiltrowany płyn, przepłukać i wyhodować kulturę na szalce Petriego o wymiarach 100 x 15 mm.</li>
	<li>Zbadaj COC (<silna klasa="xfig">Rysunek 2) pod stereoskopem z 40-krotnym powiększeniem. Szybko przenieś niedojrzałe zwierzęta do wstępnie ogrzanej pożywki oocytowej IVM. 
	UWAGA: Wybierz odpowiednie powiększenie w zależności od nawyku operatora.</li>
	<li>Zapisz liczbę hodowanych niedojrzałych COC.</li>
	<li>Poinformuj pacjenta o liczbie wyhodowanych COC. Omów pobieranie nasienia z pacjentami i ich partnerami. Wykonaj ekstrakcję nasienia zgodnie z normalną procedurą.</li>
	<li>Hodować niedojrzałe COC w temperaturze 37 °C w wilgotnym powietrzu zawierającym 5% CO2 i 5%O2 przez 28-32 godzin.</li>
	<li>Oceń dojrzałość oocytów.
	<ol>
		<li>Ogołocić wzgórki z komórek poprzez wielokrotne pipetowanie za pomocą szklanej pipety Pasteura pod stereoskopem z 40-krotnym powiększeniem. Zbadaj ekstruzję ciała polarnego (PB), aby określić etap rozwoju oocytów. Zobacz Rysunek 2 dla reprezentatywnych obrazów oocytów w COC, metafazie II (MII), metafazie I (MI) i pęcherzykach rozrodczych (GV) o wyraźnych cechach morfologicznych. 
		UWAGA: Użyj pionowego płomienia (np. palnika Bunsena), aby dostosować średnicę szklanej pipety Pasteura do wielkości oocytu.</li>
		<li>Policz oocyty MII i zapisz ich liczbę.</li>
		<li>Wybierz dojrzałe oocyty do zapłodnienia in vitro lub witryfikacji. 
		UWAGA: Plemniki należy pobrać w dniu, w którym oocyty dojrzewają do zapłodnienia in vitr, ale nie do witryfikacji oocytów.</li>
		<li>Hodować niedojrzałe oocyty w stadium GV i MI w oryginalnej pożywce hodowlanej IVM z komórkami wzgórka przez kolejne 10-14 godzin. Powtórz kroki 7.6.2-7.6.3.</li>
	</ol>
	</li>
</ol>
8. Wykonaj ICSI lub witryfikację oocytów
<ol>
	<li>Postępuj zgodnie ze standardową procedurą centrum rozrodu8.</li>
</ol>
9. Hodowla zarodków i kriokonserwacja zarodków
<ol>
	<li>Postępuj zgodnie ze standardową procedurą centrum rozrodu8.</li>
</ol>

<ol><li>Ho, V. N. A., Braam, S. C., Pham, T. D., Mol, B. W., Vuong, L. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+effectiveness+and+safety+of+in+vitro+maturation+of+oocytes+versus+in+vitro+fertilization+in+women+with+a+high+antral+follicle+count%5BTitle%5D)+AND+%22Human+Reproduction%22%5BJournal%5D)">The effectiveness and safety of in vitro maturation of oocytes versus in vitro fertilization in women with a high antral follicle count.</a> Human Reproduction. 34 (6), 1055-1064 (2019).</li>
<li>Yang, Z. Y., Chian, R. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Development+of+in+vitro+maturation+techniques+for+clinical+applications%5BTitle%5D)+AND+%22Fertility+and+Sterility%22%5BJournal%5D)">Development of in vitro maturation techniques for clinical applications.</a> Fertility and Sterility. 108 (4), 577-584 (2017).</li>
<li>Hatirnaz, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Oocyte+in+vitro+maturation%3A+A+sytematic+review%5BTitle%5D)+AND+%22Turkish+Journal+of+Obstetrics+and+Gynecology%22%5BJournal%5D)">Oocyte in vitro maturation: A sytematic review.</a> Turkish Journal of Obstetrics and Gynecology. 15 (2), 112-125 (2018).</li>
<li>Gremeau, A. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((In+vitro+maturation+or+in+vitro+fertilization+for+women+with+polycystic+ovaries%3F+A+case-control+study+of+194+treatment+cycles%5BTitle%5D)+AND+%22Fertility+and+Sterility%22%5BJournal%5D)">In vitro maturation or in vitro fertilization for women with polycystic ovaries? A case-control study of 194 treatment cycles.</a> Fertility and Sterility. 98 (2), 355-360 (2012).</li>
<li>Ho, V. N. A., Braam, S. C., Pham, T. D., Mol, B. W., Vuong, L. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+effectiveness+and+safety+of+in+vitro+maturation+of+oocytes+versus+in+vitro+fertilization+in+women+with+a+high+antral+follicle+count%5BTitle%5D)+AND+%22Human+Reproduction%22%5BJournal%5D)">The effectiveness and safety of in vitro maturation of oocytes versus in vitro fertilization in women with a high antral follicle count.</a> Human Reproduction. 34 (6), 1055-1064 (2019).</li>
<li>Sahin, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Which+should+be+the+preferred+technique+during+laparoscopic+ovarian+cystectomy%5BTitle%5D)+AND+%22Reproductive+Sciences%22%5BJournal%5D)">Which should be the preferred technique during laparoscopic ovarian cystectomy.</a> Reproductive Sciences. 24 (3), 393-399 (2017).</li>
<li>Xiao, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Impact+of+hemostatic+methods+on+ovarian+reserve+and+fertility+in+laparoscopic+ovarian+cystectomy%5BTitle%5D)+AND+%22Experimental+and+Therapeutic%22%5BJournal%5D)">Impact of hemostatic methods on ovarian reserve and fertility in laparoscopic ovarian cystectomy.</a> Experimental and Therapeutic. 17 (4), 2689-2693 (2019).</li>
<li>Song, X. -L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Enhancing+the+scope+of+in+vitro+maturation+for+fertility+preservation%3A+transvaginal+retrieval+of+immature+oocytes+during+endoscopic+gynaecological+procedures%5BTitle%5D)+AND+%22Human+Reproduction%22%5BJournal%5D)">Enhancing the scope of in vitro maturation for fertility preservation: transvaginal retrieval of immature oocytes during endoscopic gynaecological procedures.</a> Human Reproduction. 35 (4), 837-846 (2020).</li>
<li>Magnusson, Å, Källen, K., Thurin-Kjellberg, A., Bergh, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+number+of+oocytes+retrieved+during+IVF%3A+a+balance+between+efficacy+and+safety%5BTitle%5D)+AND+%22Human+Reproduction%22%5BJournal%5D)">The number of oocytes retrieved during IVF: a balance between efficacy and safety.</a> Human Reproduction. 33 (1), 58-64 (2018).</li>
<li>Larose, H., et al. Gametogenesis: A journey from inception to conception. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aLarose%2C+H+%22Current+Topics+in+Developmental+Biology%22">Current Topics in Developmental Biology</a>. Wellik, D. M., et al. 132, Academic Press. 257-310 (2019).</li>
<li>Broer, S. L., Broekmans, F. J. M., Laven, J. S. E., Fauser, B. C. J. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Anti-M%C3%BCllerian+hormone%3A+ovarian+reserve+testing+and+its+potential+clinical+implications%5BTitle%5D)+AND+%22Human+Reproduction+Update%22%5BJournal%5D)">Anti-Müllerian hormone: ovarian reserve testing and its potential clinical implications.</a> Human Reproduction Update. 20 (5), 688-701 (2014).</li>
<li>Arce, J. C., La Marca, A., Mirner Klein, B., Nyboe Andersen, A., Fleming, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Antim%C3%BCllerian+hormone+in+gonadotropin+releasing-hormone+antagonist+cycles%3A+prediction+of+ovarian+response+and+cumulative+treatment+outcome+in+good-prognosis+patients%5BTitle%5D)+AND+%22Fertility+and+Sterility%22%5BJournal%5D)">Antimüllerian hormone in gonadotropin releasing-hormone antagonist cycles: prediction of ovarian response and cumulative treatment outcome in good-prognosis patients.</a> Fertility and Sterility. 99 (6), 1644-1653 (2013).</li>
<li>Katayama, K. P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Ultrasound-guided+transvaginal+needle+aspiration+of+follicles+for+in+vitro+fertilization%5BTitle%5D)+AND+%22Obstetrics+and+Gynecology%22%5BJournal%5D)">Ultrasound-guided transvaginal needle aspiration of follicles for in vitro fertilization.</a> Obstetrics and Gynecology. 72 (2), 271-274 (1988).</li>
<li>Dellenbach, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Transvaginal+sonographically+controlled+follicle+puncture+for+oocyte+retrieval%5BTitle%5D)+AND+%22Fertility+and+Sterility%22%5BJournal%5D)">Transvaginal sonographically controlled follicle puncture for oocyte retrieval.</a> Fertility and Sterility. 44 (5), 656-662 (1985).</li>
<li>Hirata, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Concomitant+ovarian+drilling+and+oocyte+retrieval+by+laparoendoscopic+single-site+surgery+led+to+live+birth+using+in+vitro+maturation+of+oocyte+and+transfer+of+frozen-thawed+blastocyst+in+woman+with+polycystic+ovary+syndrome%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Obstetrics+and+Gynaecology+Research%22%5BJournal%5D)">Concomitant ovarian drilling and oocyte retrieval by laparoendoscopic single-site surgery led to live birth using in vitro maturation of oocyte and transfer of frozen-thawed blastocyst in woman with polycystic ovary syndrome.</a> Journal of Obstetrics and Gynaecology Research. 40 (5), 1431-1435 (2014).</li>
<li>Deutinger, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Follicular+aspiration+for+in+vitro+fertilization%3A+sonographically+guided+transvaginal+versus+laparoscopic+approach%5BTitle%5D)+AND+%22European+Journal+of+Obstetrics%2C+Gynecology%2C+and+Reproductive+Biology%22%5BJournal%5D)">Follicular aspiration for in vitro fertilization: sonographically guided transvaginal versus laparoscopic approach.</a> European Journal of Obstetrics, Gynecology, and Reproductive Biology. 26 (2), 127-133 (1987).</li>
<li>Tanbo, T., Henriksen, T., Magnus, O., Abyholm, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Oocyte+retrieval+in+an+IVF+program.+A+comparison+of+laparoscopic+and+transvaginal+ultrasound-guided+follicular+puncture%5BTitle%5D)+AND+%22Acta+Obstetricia+et+Gynecologica+Scandinavica%22%5BJournal%5D)">Oocyte retrieval in an IVF program. A comparison of laparoscopic and transvaginal ultrasound-guided follicular puncture.</a> Acta Obstetricia et Gynecologica Scandinavica. 67 (3), 243-246 (1988).</li>
<li>Nagy, Z. P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Pregnancy+and+birth+after+intracytoplasmic+sperm+injection+of+in+vitro+matured+germinal-vesicle+stage+oocytes%3A+case+report%5BTitle%5D)+AND+%22Fertility+and+Sterility%22%5BJournal%5D)">Pregnancy and birth after intracytoplasmic sperm injection of in vitro matured germinal-vesicle stage oocytes: case report.</a> Fertility and Sterility. 65 (5), 1047-1050 (1996).</li>
<li>Söderström-Anttila, V., Mäkinen, S., Tuuri, T., Suikkari, A. -M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Favourable+pregnancy+results+with+insemination+of+in+vitro+matured+oocytes+from+unstimulated+patients%5BTitle%5D)+AND+%22Human+Reproduction%22%5BJournal%5D)">Favourable pregnancy results with insemination of in vitro matured oocytes from unstimulated patients.</a> Human Reproduction. 20 (6), 1534-1540 (2005).</li>
<li>Hwang, J. L., Lin, Y. H., Tsai, Y. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((In+vitro+maturation+and+fertilization+of+immature+oocytes%3A+a+comparative+study+of+fertilization+techniques%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Assisted+Reproduction+and+Genetics%22%5BJournal%5D)">In vitro maturation and fertilization of immature oocytes: a comparative study of fertilization techniques.</a> Journal of Assisted Reproduction and Genetics. 17 (1), 39-43 (2000).</li>
<li>Walls, M., Junk, S., Ryan, J. P., Hart, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((IVF+versus+ICSI+for+the+fertilization+of+in-vitro+matured+human+oocytes%5BTitle%5D)+AND+%22Reproductive+Biomedicine+Online%22%5BJournal%5D)">IVF versus ICSI for the fertilization of in-vitro matured human oocytes.</a> Reproductive Biomedicine Online. 25 (6), 603-607 (2012).</li>
<li>Park, J. H., Jee, B. C., Kim, S. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Comparison+of+normal+and+abnormal+fertilization+of+in+vitro-matured+human+oocyte+according+to+insemination+method%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Obstetrics+and+Gynaecology+Research%22%5BJournal%5D)">Comparison of normal and abnormal fertilization of in vitro-matured human oocyte according to insemination method.</a> Journal of Obstetrics and Gynaecology Research. 42 (4), 417-421 (2016).</li>
<li>Ho, V. N. A., Pham, T. D., Le, A. H., Ho, T. M., Vuong, L. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Live+birth+rate+after+human+chorionic+gonadotropin+priming+in+vitro+maturation+in+women+with+polycystic+ovary+syndrome%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Ovarian+Research%22%5BJournal%5D)">Live birth rate after human chorionic gonadotropin priming in vitro maturation in women with polycystic ovary syndrome.</a> Journal of Ovarian Research. 11 (1), 70(2018).</li>
<li>Zheng, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effect+of+hCG+priming+on+embryonic+development+of+immature+oocytes+collected+from+unstimulated+women+with+polycystic+ovarian+syndrome%5BTitle%5D)+AND+%22Reproductive+Biology+and+Endocrinology%22%5BJournal%5D)">Effect of hCG priming on embryonic development of immature oocytes collected from unstimulated women with polycystic ovarian syndrome.</a> Reproductive Biology and Endocrinology. 10, 40(2012).</li>
<li>Tannus, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Predictive+factors+for+live+birth+after+in+vitro+maturation+of+oocytes+in+women+with+polycystic+ovary+syndrome%5BTitle%5D)+AND+%22Archives+of+Gynecology+and+Obstetrics%22%5BJournal%5D)">Predictive factors for live birth after in vitro maturation of oocytes in women with polycystic ovary syndrome.</a> Archives of Gynecology and Obstetrics. 297 (1), 199-204 (2018).</li>
<li>Cohen, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Decreased+pregnancy+and+live+birth+rates+after+vitrification+of+in+vitro+matured+oocytes%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Assisted+Reproduction+and+Genetics%22%5BJournal%5D)">Decreased pregnancy and live birth rates after vitrification of in vitro matured oocytes.</a> Journal of Assisted Reproduction and Genetics. 35 (9), 1683-1689 (2018).</li>
<li>Yazdanpanah, F., Khalili, M. A., Eftekhar, M., Karimi, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+effect+of+vitrification+on+maturation+and+viability+capacities+of+immature+human+oocytes%5BTitle%5D)+AND+%22Archives+of+Gynecology+and+Obstetrics%22%5BJournal%5D)">The effect of vitrification on maturation and viability capacities of immature human oocytes.</a> Archives of Gynecology and Obstetrics. 288 (2), 439-444 (2013).</li>
</ol>

Autorzy nie mają nic do ujawnienia.

Opisana w tym artykule metoda OP-IVM rozszerza się na konwencjonalne zastosowania IVM i łączy IVM po pobraniu komórek jajowych z rutynową operacją ginekologiczną. Oocyty, które zostałyby utracone podczas operacji ginekologicznej, mogą być teraz wykorzystane do IVF-ET lub FP bez dodatkowego ryzyka chirurgicznego. OP-IVM został po raz pierwszy użyty do pobrania oocytów przed wierceniem jajników u pacjentek z PCOS. Jego zastosowanie wkrótce rozszerzyło się na pacjentów niepłodnych, którzy wymagają łagodnej chirurgii ginekol...

An erratum was issued for:&#160;<a href="https://www.jove.com/t/61647">OP-IVM: Combining In vitro Maturation after Oocyte Retrieval with Gynecological Surgery</a>. The Protocol and Representative Results sections were&#160;updated.
Step 3.2 of the Protocol was updated from:
Add 0.5 mL of IVM&#160;medium supplemented with 0.075 IU/mL of follicle-stimulating hormone (FSH) and 0.075 IU/mL of luteinizing hormone (LH) to each well of a 4-well plate. Cover the medium with oil.
to:
Add 0.5 mL of IVM&#160;medium supplemented with 0.75 IU/mL of follicle-stimulating hormone (FSH) and 0.75 IU/mL of luteinizing hormone (LH) to each well of a 4-well plate. Cover the medium with oil.
The legend for Figure 2 was updated from:
Figure 2:&#160;Morphological characteristics of representative images of oocytes. (A) COCs, (B) MII, (C) MI, (D) GV stage. Abbreviations: COCs = cumulus-oocyte complexes; GV = germinal vesicle; MI = metaphase I; MII = metaphase II.
to:
Figure 2:&#160;Morphological characteristics of representative images of oocytes. (A) COCs, (B) GV, (C) MI, (D) MII&#160;stage. Abbreviations: COCs = cumulus-oocyte complexes; GV = germinal vesicle; MI = metaphase I; MII = metaphase II.

An erratum was issued for:&#160;<a href="https://www.jove.com/t/61647">OP-IVM: Combining In vitro Maturation after Oocyte Retrieval with Gynecological Surgery</a>. The Protocol and Representative Results sections were&#160;updated.

Erratum: OP-IVM: Combining In vitro Maturation after Oocyte Retrieval with Gynecological Surgery

IVM to SZTUKA, w której ludzkie niedojrzałe oocyty są hodowane in vitro do dojrzałości do IVF-ET lub FP. W IVM nie stosuje się leków indukujących owulację, co zmniejsza ból, obciążenie finansowe i powikłania, takie jak zespół hiperstymulacji jajników (OHSS)1,2. Ponadto, IVM jest szczególnie przydatny w FP u pacjentów z rakiem i leczeniu niepłodności u pacjentów wrażliwych na hormony, którzy mogą nie być w stanie lub nie mieć czasu na terapię indukcji owulacji3. Dlatego, mimo że liczba pobranych oocytów, wskaźnik ciąż klinicznych (CPR) i wskaźnik żywych urodzeń (LBR) są niższe niż w przypadku IVF4,5, IVM ma swoje unikalne zalety.
Niepłodne pacjentki ze zmianami endometrium, hydrosalpinxem lub torbielami jajników zazwyczaj przechodzą operację ginekologiczną przed leczeniem ART, a ich oocyty są zazwyczaj niedojrzałe. OP-IVM wykorzystuje sterowane przezpochwowe ultrasonografie do pobierania niedojrzałych oocytów i hodowania ich in vitro aż do dojrzewania do IVF-ET lub FP. OP-IVM łączy IVM po pobraniu komórek jajowych i operacji ginekologicznej, zmniejszając w ten sposób powikłania, które są powszechne w kontrolowanych cyklach hiperstymulacji jajników oraz oszczędzając czas i pieniądze. Dla płodnych pacjentek OP-IVM może służyć jako "ubezpieczenie płodności" podczas rutynowych operacji ginekologicznych.
Ponadto, uszkodzenia spowodowane operacjami ginekologicznymi, takimi jak elektrokoagulacja6,7 i resekcja guza jajnika, mogą być zredukowane poprzez pobranie oocytów przed operacją ginekologiczną. W związku z tym, w porównaniu z rutynową chirurgią ginekologiczną, OP-IVM może zmniejszyć liczbę operacji podczas leczenia niepłodności i zapobiec utracie funkcjonalnych komórek jajowych podczas operacji jajników.
Poprzednie badanie wykazało, że dodatkowa procedura pobierania oocytów ani nie zwiększy powikłań chirurgicznych i niekorzystnych wyników ciąży, ani nie przedłuży pobytu w szpitalu8. Niektóre pacjentki rodziły żywe dzieci za pomocą OP-IVM8, co wskazuje na wykonalność tej metody. W pracy opisano charakterystykę pacjentek, u których może dojść do korzyści z OP-IVM, a także procedury i punkty krytyczne OP-IVM, a także omówiono ocenę dojrzałości oocytów człowieka.

<table><tbody><tr><td>Igły aspiracyjne 19 G jednokanałowe</td><td>Cook, Australia</td><td>K-OPS-7035-REH-ET</td><td></td></tr><tr><td>Płytka 4-dołkowa</td><td>Corning</td><td></td><td></td></tr><tr><td>70 &mu; m nylonowy sitko komórkowe</td><td>Falcon, USA</td><td>352350</td><td></td></tr><tr><td>CO2 Inkubator</td><td>Thermo</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Culture oil</td><td>Vitrolife, Szwecja</td><td>10029,OVOIL&nbsp;</td><td>Krok 3.2.</td></tr><tr><td>FSH & LH</td><td>Ferring Zdrowie Reprodukcyjne, Niemcy</td><td>MENOPUR&reg;</td><td></td></tr><tr><td>Szklana pipeta Pasteura</td><td>Hilgenberg GmbH, Niemcy</td><td>3154102-26</td><td></td></tr><tr><td>G-MOPS medium</td><td></td><td></td><td>o stabilnym pH medium do mycia igły przed nakłuciem</td></tr><tr><td>IVM medium</td><td>Origio, Dania</td><td>ART-1600-B</td><td></td></tr><tr><td>Czyste ławki z przepływem laminarnym Szalka</td> Petriego <td>ESCO</td><td></td><td></td></tr><tr><td></td><td>Thermo Fisher Scientific, Dania</td><td>263991</td><td></td></tr><tr><td>Pożywka o stabilnym pH przeznaczona do wspomagania obsługi i manipulacji oocytami i zarodkami poza inkubatorem</td><td>Vitrolife, Szwecja</td><td>10130, G-MOPS PLUS</td><td>Step 7.1.</td></tr><tr><td>Roztwór do płukania</td><td>Cook, Australia</td><td>K-SIFB-100</td><td></td></tr><tr><td>Stereoskop</td><td>Nikon</td><td></td><td></td></tr></tbody></table>

op-ivm: połączenie dojrzewania in vitro po pobraniu komórek jajowych z chirurgią ginekologiczną

OP-IVM: Combining In vitro Maturation after Oocyte Retrieval with Gynecological Surgery

Zastosowanie dojrzewania in vitro (IVM) przed operacją ginekologiczną (OP-IVM) jest rozszerzeniem konwencjonalnego IVM, które łączy IVM po pobraniu oocytów z rutynową operacją ginekologiczną. OP-IVM jest odpowiedni dla pacjentek poddawanych łagodnym zabiegom ginekologicznym, które wymagają zachowania płodności (FP) lub leczenia niepłodności, takiego jak zapłodnienie in vitro i transfer zarodków (IVF-ET). Na sali operacyjnej pacjentki poddawane łagodnym zabiegom ginekologicznym są najpierw znieczulane i poddawane zabiegowi aspiracji niedojrzałych mieszków włosowych pod kontrolą USG (IMFA). W miarę wykonywania kolejnej operacji ginekologicznej bada się kompleksy wzgórek-oocyty (COC), a niedojrzałe COC przenosi się do pożywki IVM i hoduje przez 28-32 godziny w laboratorium IVF. Po ocenie dojrzałe oocyty w stadium MII zostaną wybrane i kriokonserwowane w ciekłym azocie do FP lub zapłodnione przez docytoplazmatyczne wstrzyknięcie plemnika (ICSI) do IVF-ET. Łącząc IVM z chirurgią ginekologiczną, niedojrzałe oocyty, które zostałyby wyrzucone, mogą zostać uratowane i wykorzystane w technologii wspomaganego rozrodu (ART). Procedura, znaczenie i krytyczne aspekty OP-IVM zostały opisane w niniejszym artykule.

Do grudnia 2019 roku metoda OP-IVM była stosowana w celu zachowania płodności u 274 pacjentek. Wyniki embriologiczne i reprodukcyjne 158 pacjentek z okresu od 2014 do 2016 roku zostały opublikowane w poprzedniej pracy.8Poniższy przykład omawia procedurę zastosowaną u pacjentki z PCOS, u której w 2016 roku przeprowadzono OP-IVM. Pacjentka w wieku 28 lat zdiagnozowano z pierwotną niepłodnością, torbielą przydatków lewych oraz PCOS. 28 września poddano ją laparoskopow...

Dojrzewanie in vitro (IVM) przed operacją ginekologiczną (OP-IVM) łączy IVM po pobraniu oocytów z rutynową operacją ginekologiczną i służy jako rozszerzenie konwencjonalnych zastosowań IVM dla zachowania płodności.

OP-IVM: Połączenie dojrzewania in vitro po pobraniu komórek jajowych z chirurgią ginekologiczną

The use of in vitro maturation (IVM) before gynecological operation (OP-IVM) is an extension of conventional IVM that combines IVM following oocyte ...

Technologia OP-IVM jest rozszerzeniem konwencjonalnego protokołu IVM, który łączy IVM po pobraniu komórek jajowych z rutynową operacją ginekologiczną. Nadaje się dla kobiet niepłodnych lub z obniżoną płodnością, które muszą przejść operację ginekologiczną przed zabiegiem ART lub zachowaniem płodności, pacjentów z zespołem policystycznych jajników z opornością na klomifen, które wymagają laparoskopowej operacji wiercenia jajników, pacjentek niepłodnych, które wymagają łagodnych operacji ginekologicznych, takich jak histeroskopowa miomektomia, polipektomia, przezklatkowa resekcja przegrody i operacja rurki laparoskopowej, i ooforocystektomia przed leczeniem ART, a także pacjenci z rakiem i chorobami hematologicznymi, którzy otrzymują chemioradioterapię lub radioterapię, mogą wykonać tę operację w celu zachowania płodności. Umieść sondę ultradźwiękową wewnątrz pochwy, aby zeskanować i zarejestrować liczbę pęcherzyków w obu jajnikach.Znajdź miejsce najbliżej jajnika jako miejsce nakłucia, unikając jelita, pęcherza moczowego i dużych naczyń krwionośnych. Umyj igłę aspiracyjną o pojedynczym prześwicie o rozmiarze 19 za pomocą pożywki o stabilnym pH, a następnie wstrzyknij igłę do jajników pod kierunkiem ultradźwięków. Odessać płyn pęcherzykowy za pomocą igły pod ciśnieniem od 80 do 90 milimetrów słupa rtęci, lekko obracając igłę, aby zassać jak najwięcej płynu pęcherzykowego.Stosować heparynę, aby zmniejszyć lepkość płynu pęcherzykowego podczas aspiracji. Dostosuj pozycję sondy, aby przez cały czas znajdowała się jak najbliżej jajników i naciskaj na fornix pochwy z odpowiednią siłą, aby zmniejszyć uraz i krwawienie. Upewnij się, że aspiracja płynu pęcherzykowego została zakończona w ciągu 25 do 30 minut.Wyciągnąć igłę po zakończeniu w jednym jajniku, umyć igłę medium manipulacyjnym i nakłuć drugą stronę tą samą metodą. Pracując w mieszkaniu homotermicznym o temperaturze 37 stopni Celsjusza, przygotuj podłoże manipulacyjne, szalkę Petriego i sitko do komórek. Przepłukać probówkę hodowlaną i sitko wstępnie podgrzanym podłożem o stabilnym pH.Przefiltrować zasysany płyn pęcherzykowy za pomocą sitka z nylonowych komórek o średnicy 70 mikrometrów, kilkakrotnie przepłukując probówkę hodowlaną i sitko wstępnie podgrzanym podłożem o stabilnym pH. Upewnij się, że wszystkie niedojrzałe COC zostały całkowicie przeniesione do naczynia hodowlanego. Przenieść krew do czystego podłoża do obchodzenia się z płynem.Następnie przenieś sitko do komórek do nowego naczynia i umyj je. Odessać i przenieść pożywkę manipulacyjną z COC, komórkami ziarnistymi i tkankami do nowego naczynia. Zbadaj COC pod stereoskopem z 40-krotnym powiększeniem.Szybko przenieś niedojrzałe osobniki do wstępnie podgrzanej pożywki oocytowej IVM. Następnie zbadaj COC w skrzepie krwi i w sitku komórkowym. Przenieś COC i pożywkę manipulacyjną do wstępnie podgrzanej pożywki oocytowej IVM.Hoduj niedojrzałe COC przez 28 do 32 godzin w temperaturze 37 stopni Celsjusza w wilgotnym powietrzu zawierającym 5% dwutlenku węgla i 5% tlenu. Do grudnia 2019 r. OP-IVM zastosowano w celu zachowania płodności u 274 pacjentek. Jednym z przykładów był 28-letni pacjent, u którego zdiagnozowano niepłodność pierwotną, torbiel lewego przydatka i PCOS.We wrześniu 2016 r. poddano jej laparoskopową cystektomię i operację OP-IVM, w której uzyskano 27 niedojrzałych COC. Po 28 godzinach w hodowli wybrano siedem oocytów w stadium MII i zapłodniono je metodą ICSI. Po pięciu dniach dwie blastocysty zostały zamrożone.Jeden z nich został rozmrożony w lutym 2017 r. i przeniesiony do macicy. Pacjentka urodziła zdrową dziewczynkę w listopadzie. OP-IVM został po raz pierwszy zastosowany do pobierania komórek jajowych u niepłodnych kobiet z PCOS, które przechodzą operację wiercenia jajników, a teraz jego zastosowanie można rozszerzyć na kobiety z obniżoną płodnością, które muszą przejść łagodną operację ginekologiczną, nawet kobiety z rakiem w celu zachowania płodności.Wskazuje to, że zakres zastosowania IVM można rozszerzyć poprzez połączenie go z innymi tradycyjnymi operacjami ginekologicznymi w celu zachowania płodności kobiet.

op-ivm-combining-vitro-maturation-after-oocyte-retrieval-with

Research

JoVE Journal

Medicine

Medycyna

Opisujemy metody manipulowania niedojrzałymi oocytami Xenopus laevis, dojrzewania in vitro oocytów do komórek jajowych oraz docytoplazmatycznego wstrzykiwania plemników. Protokół ten umożliwia degradację niektórych białek matczynych i nadekspresję genów będących przedmiotem zainteresowania podczas zapłodnienia, a zatem jest cenny dla badania ról określonych czynników we wczesnym rozwoju embrionalnym.

Manipulacja i dojrzewanie in vitro oocytów Xenopus laevis, a następnie docytoplazmatyczna iniekcja plemnika w celu zbadania rozwoju embrionalnego

Ten manuskrypt opisuje eksperymentalne podejście do morfologicznego i biochemicznego charakterystyki oocytów koni. W szczególności niniejsza praca ilustruje, w jaki sposób zbierać niedojrzałe i dojrzałe oocyty koni za pomocą ultrasonograficznego pobierania komórek jajowych (OPU) oraz jak badać segregację chromosomów, morfologię wrzeciona, globalną acetylację histonów i ekspresję mRNA.

Analiza segregacji chromosomów, acetylacji histonów i morfologii wrzeciona w oocytach koni

Opisujemy procedury izolacji rosnących oocytów z pęcherzyków jajnikowych we wczesnych stadiach rozwoju, a także tworzenie systemu hodowli in vitro, który może wspierać wzrost i różnicowanie aż do fazy pełnej dojrzałości.

Strategia hodowli in vitro oocytów z wczesnego pęcherzyka antralnego u bydła

Kriokonserwacja oocytów jest uznawana przez kilka międzynarodowych towarzystw naukowych za złoty standard zachowania płodności u kobiet po okresie dojrzewania. Odpowiednie strategie kliniczne i laboratoryjne zapewniają maksymalną skuteczność, efektywność i bezpieczeństwo zabiegów zachowujących płodność.

Zachowanie płodności poprzez witryfikację oocytów: perspektywy kliniczne i laboratoryjne

Prezentujemy szczegóły procedur laboratoryjnych dla bezlekowej aktywacji in vitro (IVA) pęcherzyków jajnikowych u pacjentek z ciężką dysfunkcją jajników. Metoda ta może zwiększyć liczbę możliwych do pobrania oocytów na hiperstymulację jajników i korzystnie wpłynąć na zachowanie płodności u tych pacjentek.

Zachowanie płodności u pacjentek z ciężką dysfunkcją jajników

Dedykowany zespół może zaoferować pacjentkom Mayer-Rokitansky-Kuster-Hauser możliwość przeprowadzenia kontrolowanej stymulacji jajników i kriokonserwacji oocytów podczas laparoskopowej plastyki pochwy.

Laparoskopowe pobieranie komórek jajowych i kriokonserwacja podczas waginoplastyki w leczeniu zespołu Mayera-Rokitansky'ego-Kustera-Hausera

Tutaj prezentujemy zoptymalizowaną metodę natychmiastowego usuwania części kompleksów cumulus-oocyt po pobraniu komórek jajowych, aby przyspieszyć proces obserwacji IVF, skracając czas potrzebny na usunięcie komórek ziarnistych, minimalizując narażenie oocytów na czynniki zewnętrzne i nie utrudniając rozwoju zarodka, ostatecznie poprawiając efektywność procedur laboratoryjnych IVF.

Natychmiastowe częściowe usunięcie kompleksów cumulus-oocyty: wyrafinowane podejście do szybkiej obserwacji zapłodnienia in vitro

Protokół ten określa ustandaryzowane metody izolacji i przetwarzania płynu pęcherzykowego, komórek somatycznych oraz niedojrzałych oocytów z procedur IVF, umożliwiając wysokiej jakości analizy molekularne i komórkowe. Te podejścia wspierają badania translacyjne dotyczące płodności, starzenia się reprodukcyjnego i dysfunkcji jajników, wykorzystując materiały zwykle odrzucane w opiece klinicznej.

Pobieranie ludzkiego płynu pęcherzykowego, komórek somatycznych mieszków mieszkowych oraz niedojrzałych oocytów od osób poddawanych zapłodnieniu in vitro

Ten protokół opisuje procedury dotyczące in vitro dojrzewania oocytów mysich, in vitro zapłodnienia i późniejszej kultury embrionów do etapu blastocysty.

Dojrzewanie in vitro komórek jajowych myszy, zapłodnienie i hodowlą zarodków przedimplantacyjnych

Tutaj opisujemy, jak założyć małą stację do ćwiczeń mikrochirurgicznych oraz prostą i tanią metodę szkolenia mikrochirurgii z wykorzystaniem nieożywionych modeli zwierzęcych.

Krok po kroku: Metoda treningu z mikrosurgicalnego łącząca dwa modele zwierzęce nieżyjące

Poznaj metodę OP-IVM łączącą pobieranie komórek jajowych z chirurgią ginekologiczną w celu zachowania płodności. Technika ta umożliwia dojrzewanie in vitro oocytów pobranych podczas zabiegów operacyjnych u pacjentek z niepłodnością.

OP-IVM: Połączenie dojrzewania in vitro po pobraniu komórek jajowych z chirurgią ginekologiczną

Przeglądaj więcej filmów