OP-IVM: Połączenie dojrzewania in vitro po pobraniu komórek jajowych z chirurgią ginekologiczną
9 maja 2021
Dojrzewanie in vitro (IVM) przed operacją ginekologiczną (OP-IVM) łączy IVM po pobraniu oocytów z rutynową operacją ginekologiczną i służy jako rozszerzenie konwencjonalnych zastosowań IVM dla zachowania płodności.
Technologia OP-IVM jest rozszerzeniem konwencjonalnego protokołu IVM, który łączy IVM po pobraniu komórek jajowych z rutynową operacją ginekologiczną. Nadaje się dla kobiet niepłodnych lub z obniżoną płodnością, które muszą przejść operację ginekologiczną przed zabiegiem ART lub zachowaniem płodności, pacjentów z zespołem policystycznych jajników z opornością na klomifen, które wymagają laparoskopowej operacji wiercenia jajników, pacjentek niepłodnych, które wymagają łagodnych operacji ginekologicznych, takich jak histeroskopowa miomektomia, polipektomia, przezklatkowa resekcja przegrody i operacja rurki laparoskopowej, i ooforocystektomia przed leczeniem ART, a także pacjenci z rakiem i chorobami hematologicznymi, którzy otrzymują chemioradioterapię lub radioterapię, mogą wykonać tę operację w celu zachowania płodności. Umieść sondę ultradźwiękową wewnątrz pochwy, aby zeskanować i zarejestrować liczbę pęcherzyków w obu jajnikach.
Znajdź miejsce najbliżej jajnika jako miejsce nakłucia, unikając jelita, pęcherza moczowego i dużych naczyń krwionośnych. Umyj igłę aspiracyjną o pojedynczym prześwicie o rozmiarze 19 za pomocą pożywki o stabilnym pH, a następnie wstrzyknij igłę do jajników pod kierunkiem ultradźwięków. Odessać płyn pęcherzykowy za pomocą igły pod ciśnieniem od 80 do 90 milimetrów słupa rtęci, lekko obracając igłę, aby zassać jak najwięcej płynu pęcherzykowego.
Stosować heparynę, aby zmniejszyć lepkość płynu pęcherzykowego podczas aspiracji. Dostosuj pozycję sondy, aby przez cały czas znajdowała się jak najbliżej jajników i naciskaj na fornix pochwy z odpowiednią siłą, aby zmniejszyć uraz i krwawienie. Upewnij się, że aspiracja płynu pęcherzykowego została zakończona w ciągu 25 do 30 minut.
Wyciągnąć igłę po zakończeniu w jednym jajniku, umyć igłę medium manipulacyjnym i nakłuć drugą stronę tą samą metodą. Pracując w mieszkaniu homotermicznym o temperaturze 37 stopni Celsjusza, przygotuj podłoże manipulacyjne, szalkę Petriego i sitko do komórek. Przepłukać probówkę hodowlaną i sitko wstępnie podgrzanym podłożem o stabilnym pH.
Przefiltrować zasysany płyn pęcherzykowy za pomocą sitka z nylonowych komórek o średnicy 70 mikrometrów, kilkakrotnie przepłukując probówkę hodowlaną i sitko wstępnie podgrzanym podłożem o stabilnym pH. Upewnij się, że wszystkie niedojrzałe COC zostały całkowicie przeniesione do naczynia hodowlanego. Przenieść krew do czystego podłoża do obchodzenia się z płynem.
Następnie przenieś sitko do komórek do nowego naczynia i umyj je. Odessać i przenieść pożywkę manipulacyjną z COC, komórkami ziarnistymi i tkankami do nowego naczynia. Zbadaj COC pod stereoskopem z 40-krotnym powiększeniem.
Szybko przenieś niedojrzałe osobniki do wstępnie podgrzanej pożywki oocytowej IVM. Następnie zbadaj COC w skrzepie krwi i w sitku komórkowym. Przenieś COC i pożywkę manipulacyjną do wstępnie podgrzanej pożywki oocytowej IVM.
Hoduj niedojrzałe COC przez 28 do 32 godzin w temperaturze 37 stopni Celsjusza w wilgotnym powietrzu zawierającym 5% dwutlenku węgla i 5% tlenu. Do grudnia 2019 r. OP-IVM zastosowano w celu zachowania płodności u 274 pacjentek. Jednym z przykładów był 28-letni pacjent, u którego zdiagnozowano niepłodność pierwotną, torbiel lewego przydatka i PCOS.
We wrześniu 2016 r. poddano jej laparoskopową cystektomię i operację OP-IVM, w której uzyskano 27 niedojrzałych COC. Po 28 godzinach w hodowli wybrano siedem oocytów w stadium MII i zapłodniono je metodą ICSI. Po pięciu dniach dwie blastocysty zostały zamrożone.
Jeden z nich został rozmrożony w lutym 2017 r. i przeniesiony do macicy. Pacjentka urodziła zdrową dziewczynkę w listopadzie. OP-IVM został po raz pierwszy zastosowany do pobierania komórek jajowych u niepłodnych kobiet z PCOS, które przechodzą operację wiercenia jajników, a teraz jego zastosowanie można rozszerzyć na kobiety z obniżoną płodnością, które muszą przejść łagodną operację ginekologiczną, nawet kobiety z rakiem w celu zachowania płodności.
Wskazuje to, że zakres zastosowania IVM można rozszerzyć poprzez połączenie go z innymi tradycyjnymi operacjami ginekologicznymi w celu zachowania płodności kobiet.
Wyświetl pełny transkrypt i uzyskaj dostęp do tysięcy filmów naukowych
Przegląd
OP-IVM to innowacyjne podejście łączące dojrzewanie oocytów in vitro (IVM) z rutynowymi zabiegami chirurgii ginekologicznej. Metoda ta jest szczególnie korzystna dla kobiet zmagających się z niepłodnością lub obniżoną płodnością, u których przed rozpoczęciem leczenia w ramach ART wymagana jest interwencja chirurgiczna.
Kluczowe elementy badania
Dziedzina nauki
- Medycyna reprodukcyjna
- Ginekologia
- Zachowanie płodności
Wstęp
- IVM to technika stosowana do dojrzewania oocytów poza organizmem.
- OP-IVM rozszerza zastosowania IVM o procedury chirurgiczne.
- Metoda ta odpowiada na potrzeby kobiet z różnymi problemami zdrowotnymi w obszarze rozrodu.
- Jest ona szczególnie istotna dla pacjentek poddawanych leczeniu, które może wpływać na płodność.
Cel badania
- Zapewnienie opcji zachowania płodności kobietom wymagającym interwencji chirurgicznej w obrębie narządów ginekologicznych.
- Poprawa wyników leczenia u pacjentek z schorzeniami takimi jak zespół policystycznych jajników.
- Ułatwienie przeprowadzenia zabiegów ART po operacji.
Zastosowane metody
- Pobieranie oocytów z jajników pod kontrolą USG.
- Zastosowanie igły aspiracyjnej o pojedynczym świetle rozmiaru 19 G do aspiracji płynu mieszkowego.
- Monitorowanie liczby i stanu pęcherzyków przed zabiegiem.
- Ocena kwalifikowalności pacjentki na podstawie wywiadu medycznego i potrzeb chirurgicznych.
Główne wyniki
- Skuteczne pobranie oocytów u pacjentek poddawanych zabiegom ginekologicznym.
- Poprawa wyników w zakresie zachowania płodności u pacjentek z nowotworami lub innymi schorzeniami upośledzającymi płodność.
- Wykazanie wykonalności łączenia IVM z interwencjami chirurgicznymi.
- Pozytywne opinie pacjentek dotyczące podejścia dwutorowego.
Wnioski
- OP-IVM stanowi istotny postęp w strategiach zachowania płodności.
- Metoda ta może być odpowiednią opcją dla kobiet wymagających operacji ginekologicznych.
- Dalsze badania są niezbędne w celu optymalizacji protokołów i wyników.
Najczęściej zadawane pytania
Znaczenie dla przemysłu
OP-IVM rozszerza zakres dojrzewania in vitro (IVM), integrując je z rutynowymi zabiegami ginekologicznymi, co umożliwia zachowanie płodności u pacjentek poddawanych łagodnym zabiegom chirurgicznym. Podejście to wypełnia krytyczną lukę w medycynie rozrodu poprzez pozyskiwanie niedojrzałych oocytów, które w przeciwnym razie zostałyby utylizowane podczas operacji, co zwiększa pulę żywotnych gamet dla technologii wspomaganego rozrodu (ART). Poprzez połączenie pobierania oocytów z planowymi interwencjami ginekologicznymi, OP-IVM zwiększa efektywność kliniczną i wspiera zorientowane na pacjenta strategie zachowania płodności w onkologii oraz w przypadku chorób łagodnych.
Zastosowania strategiczne w badaniach i rozwoju biofarmaceutycznym
Wczesne odkrywanie i walidacja celu
- Wartość naukowa: Umożliwia badanie szlaków dojrzewania oocytów w warunkach fizjologicznie istotnych po stresie chirurgicznym.
- Wartość operacyjna: Zapewnia powtarzalny model do badania regeneracji kompleksu cumulus-oocyt (COC) oraz wydajności dojrzewania po aspiracji.
Przesiewanie i opracowywanie testów
- Wartość naukowa: Wspiera opracowanie ustandaryzowanych testów do oceny jakości oocytów z wykorzystaniem selekcji morfonuklearnej po hodowli IVM.
- Wartość operacyjna: Ułatwia skalowalne procesy krio konserwacji dojrzałych oocytów (stadium MII) pozyskanych podczas zabiegów chirurgicznych.
Badania translacyjne i przedkliniczne
- Wartość naukowa: Oferuje system istotny z punktu widzenia jednostek chorobowych do oceny skuteczności zachowania płodności w stanach takich jak PCOS oraz podczas terapii onkologicznych.
- Wartość operacyjna: Wykazuje ciągłość translacyjną od pobrania oocytów, przez IVM i kriokonserwację, aż po późniejsze wyniki ART.
Integracja potoku i przepływu pracy
OP-IVM pozycjonuje dojrzewanie oocytów jako pomost między diagnostycznymi procedurami ginekologicznymi a późniejszymi procesami ART, umożliwiając płynną integrację zachowania płodności ze ścieżkami opieki chirurgicznej.
- Biologia odkrywcza: Wspiera testowanie hipotez dotyczących reaktywności pęcherzyków na bodźce hormonalne i chirurgiczne poprzez ocenę uzysku niedojrzałych COC oraz wskaźników dojrzewania.
- Przesiew: Umożliwia przygotowanie analizy do oceny kompetencji oocytów poprzez standaryzowaną hodowlę IVM (28–32 godziny) i selekcję stadium MII.
- Analityka: Generuje dane ilościowe, w tym uzysk oocytów, procent dojrzewania oraz wskaźniki przeżywalności po krio konserwacji w celu porównania różnych warunków.
- Badania translacyjne: Łączy interwencję chirurgiczną z ciągłością przedkliniczną poprzez walidację użyteczności oocytów w modelach IVF-ET po rozmrożeniu.
- Ponowne wykorzystanie w przedsiębiorstwie: Tworzy platformę wielokrotnego użytku dla zachowania płodności w różnych wskazaniach ginekologicznych, redukując redundancję proceduralną.
Wpływ operacyjny i przedsiębiorstwowy
- Wartość naukowa: Zwiększa pewność prognostyczną w zachowaniu płodności poprzez wykorzystanie niedojrzałych oocytów, które w przeciwnym razie zostałyby odrzucone.
- Wartość operacyjna: Standaryzuje protokoły pobierania i dojrzewania oocytów w warunkach chirurgicznych i laboratoryjnych.
- Wartość strategiczna: Usprawnia podejmowanie decyzji o kontynuacji lub przerwaniu leczenia w planowaniu terapii płodności poprzez zwiększenie dostępnej puli oocytów przed zastosowaniem ART.
- Wpływ na portfolio: Umożliwia priorytetyzację interwencji w zakresie zachowania płodności z uwzględnieniem ryzyka w grupach pacjentów onkologicznych i z chorobami łagodnymi.
Uwagi dotyczące wdrożenia
- Wymaga wiedzy specjalistycznej z zakresu endokrynologii rozrodu, aspiracji pod kontrolą USG oraz technik laboratoryjnych embriologii.
- Zależne od dostępu do inkubatorów przystosowanych do IVM, mediów do hodowli oraz narzędzi do oceny stereoskopowej.
- Wymaga koordynacji pomiędzy zespołami chirurgicznym, anestezjologicznym i laboratorium IVF w celu terminowego transferu oocytów.
- Wiąże się z koniecznością adaptacji mediów do hodowli oraz protokołów filtrowania w zależności od zmiennej objętości i lepkości płynu pęcherzykowego.
- Ograniczone przez czynniki specyficzne dla pacjentki, takie jak dostępność jajników, liczba pęcherzyków oraz ograniczenia czasowe zabiegu chirurgicznego.
