Ocena analizatora przyłóżkowego do pomiaru leukocytów krwi obwodowej
22 marca 2022
Protokół pomiaru leukocytów krwi obwodowej za pomocą analizatora leukocytów opartego na karcie POCT jest przedstawiony tutaj. Te same próbki krwi zostały przebadane przez dwa automatyczne analizatory hematologiczne w celu oceny spójności i dokładności wyników. Wyniki pokazały, że oceniany analizator miał dobrą korelację z układem referencyjnym.
Szczegółowy opis ustandaryzowanego działania analizatora w protokole może pomóc osobie, która nigdy nie obsługiwała analizatora, w wykonaniu eksperymentów w większości ważnych, dokładnych i z wiarygodnymi wynikami. Korzystanie z innowacyjnej technologii Jove ma takie zalety, jak dostępność zestawu do wykrywania dla jednej osoby, brak odpadów płynnych, szybkość, brak rutynowej konserwacji i przyjazna dla użytkownika obsługa. Należy najpierw zrozumieć zasadę wykrywania analizatora, a następnie zapoznać się z kilkoma krytycznymi krokami w protokole, takimi jak pobieranie krwi, podnoszenie odczynników i tak dalej.
Aby rozpocząć, uruchom analizator, przekręcając wyłącznik lub włącznik zasilania z tyłu analizatora do pozycji wewnętrznej i upewnij się, że kontrolka analizatora jest włączona. Wprowadź nazwę użytkownika i hasło w oknie dialogowym logowania i kliknij zaloguj się. System powinien przeprowadzić samokontrolę i automatycznie rozpocząć inicjalizację oraz wyświetlić stronę analizy próbki.
Przygotowanie do badania rozpocznij od kliknięcia na następną próbkę, a następnie wprowadź poprawnie płeć, imię i inne informacje kliniczne oraz wybierz odpowiednią grupę referencyjną. Później kliknij OK, aby zapisać informacje. Rozerwij cienką warstwę modułu do wykrywania krwinek, naciśnij przycisk wyjścia z magazynu i prawidłowo umieść moduł wykrywania komórek krwi w magazynie maszyny, z otworem skierowanym na zewnątrz.
Nakłuć folię sufitową odczynnika hemolitycznego końcówką pipety ilościowej. W celu pobrania krwi włośniczkowej należy raz zdezynfekować lewy palec serdeczny wacikiem zamoczonym w alkoholu w jeden sposób. Po naturalnym wyschnięciu alkoholu użyj lancetu do krwi, aby przebić skórę lewego palca serdecznego.
Delikatnie wyciśnij pierwszą kroplę krwi i przetrzyj ją bawełnianym wacikiem. Wyciśnij wystarczającą ilość krwi, aby utworzyć pełną kroplę wody i zbierz pięć mikrolitrów próbki krwi za pomocą rurki kapilarnej wewnątrz pipety ilościowej. W celu wymieszania odczynnika włóż pipetę ilościową do odczynnika hemolitycznego i mocno ją dociśnij, aby uwolnić próbkę krwi z rurki kapilarnej.
Wymieszaj krew w probówce kapilarnej i odczynnik hemolityczny, obracając ją do góry nogami 15 do 20 razy ze stałą prędkością, aż w kapilarze nie pozostanie czerwona krew. Analizę próbki należy rozpocząć od otwarcia pokrywy i wciśnięcia roztworu do modułu wykrywania krwinek. Następnie naciśnij przycisk wejścia do magazynu wyjściowego.
Po wprowadzeniu modułu wykrywania krwinek do magazynu, naciśnij przycisk liczenia. W interfejsie analizatora kliknij dwukrotnie przycisk OK, aby potwierdzić, że moduł wykrywania krwinek został wyjęty. W interfejsie analizatora kliknij przycisk drukowania, aby wydrukować wyniki testu.
Aby wyłączyć analizator, kliknij przycisk zamykania w interfejsie analizatora i wybierz tak w oknie dialogowym, które pojawi się w interfejsie. Sprawdź, czy system zaczyna wykonywać sekwencję zamykania. Ustaw przełącznik wyłączania lub włączania z tyłu komputera mainframe w pozycji wyłączonej po zakończeniu sekwencji zamykania.
Rysunek przedstawia wykres punktowy i analizę korelacji Spearmana ocenianych i referencyjnych systemów. Najsilniejszą korelację wykazuje liczba białych krwinek i liczba granulocytów. Natomiast najsłabszą korelacją między układem ocenianym a referencyjnym wykazuje liczba limfocytów.
Uzyskano wykres Blanda-Altmana w celu wizualizacji analizy spójności. Wyniki białych krwinek wykryte przez oceniany system są zgodne z systemem referencyjnym. Średnie wartości różnic we wskaźnikach leukocytów są powyżej zera, co wskazuje, że wyniki badań ocenianego układu są nieco wyższe niż wyniki układu odniesienia.
Podczas eksperymentu powinniśmy dołożyć wszelkich starań, aby pobrany przez nas nakaz krwi miał dokładnie 5 mikrolitrów, a strona w pomieszczeniu została całkowicie rozpuszczona przez odczynnik hemolityczny.
Wyświetl pełny transkrypt i uzyskaj dostęp do tysięcy filmów naukowych
Przegląd
W niniejszym artykule przedstawiono protokół pomiaru leukocytów we krwi obwodowej przy użyciu analizatora leukocytów opartego na karcie POCT. Dokładność i powtarzalność tego analizatora oceniono w porównaniu z dwoma automatycznymi analizatorami hematologicznymi.
Kluczowe elementy badania
Dziedzina nauki
- Hematologia
- Diagnostyka kliniczna
- Testy w punkcie opieki (POCT)
Wstęp
- Analiza leukocytów jest kluczowa dla diagnozowania różnych stanów medycznych.
- Automatyczne analizatory zapewniają szybkie i dokładne wyniki.
- Urządzenia POCT zwiększają dostępność i wygodę wykonywania badań.
- Zrozumienie zasady działania tych urządzeń jest niezbędne dla uzyskania wiarygodnych wyników.
Cel badania
- Ocena wydajności nowego analizatora leukocytów.
- Porównanie wyników z uznanymi zautomatyzowanymi analizatorami hematologicznymi.
- Przedstawienie szczegółowego protokołu efektywnego użytkowania analizatora.
Zastosowane metody
- Standaryzowana obsługa analizatora leukocytów.
- Pobieranie i przygotowanie próbek krwi.
- Badanie próbek na nowym analizatorze oraz analizatorach referencyjnych.
- Analiza statystyczna w celu oceny korelacji i dokładności.
Główne wyniki
- Nowy analizator wykazał dobrą korelację z systemami referencyjnymi.
- Wyniki były spójne dla różnych metod badawczych.
- Wydajność operacyjna została wskazana jako kluczowa zaleta.
- Intuicyjne funkcje ułatwiły obsługę urządzenia.
Wnioski
- Analizator leukocytów POCT jest niezawodnym narzędziem do analizy krwi.
- Oferuje on istotne zalety pod względem szybkości i łatwości użytkowania.
- Zaleca się dalszą walidację w warunkach klinicznych.
Najczęściej zadawane pytania
Znaczenie dla przemysłu
Analizatory leukocytów typu point-of-care wypełniają krytyczne luki w diagnostyce podstawowej opieki zdrowotnej, zapewniając szybką i dokładną dyferencjację białych krwinek bez konieczności posiadania scentralizowanej infrastruktury laboratoryjnej. Możliwość ta wspiera wczesną segregację pacjentów z infekcjami oraz racjonalne stosowanie środków przeciwdrobnoustrojowych w warunkach ograniczonych zasobów, bezpośrednio wpływając na przepływy pracy w walidacji biomarkerów przedklinicznych, gdzie korelacyjne zmiany hematologiczne dostarczają informacji o istotności modelu choroby. Wykazana korelacja z referencyjnymi analizatorami hematologicznymi zapewnia wiarygodność prognostyczną dla zastosowań translacyjnych w modelach chorób zapalnych.
Strategiczne zastosowania w badaniach i rozwoju biofarmaceutycznym
Wczesne odkrywanie i walidacja celu
- Wartość naukowa: Umożliwia badanie szlaków zapalnych pośredniczonych przez leukocyty w modelach chorobowych poprzez ilościowe określenie zmian w populacjach neutrofili, limfocytów i komórek pośrednich.
- Wartość operacyjna: Zapewnia powtarzalne wyniki hematologiczne dla badań walidacji celu, w których infiltracja komórek odpornościowych służy jako biomarker farmakodynamiczny.
Przesiewy i opracowywanie testów
- Wartość naukowa: Generuje ustandaryzowane dane z różnicowania leukocytów, niezbędne do screeningu gotowości do testów związków immunomodulujących w systemach krwi pełnej.
- Wartość operacyjna: Eliminuje odpady ciekłe oraz złożone przygotowanie próbek, umożliwiając kompatybilność z wysokoprzepustowym screeningiem przy minimalnej wiedzy technicznej.
Badania translacyjne i przedkliniczne
- Wartość naukowa: Wspiera walidację systemów istotnych dla przebiegu choroby poprzez korelację dynamiki leukocytów obwodowych z tkankowo specyficznymi punktami końcowymi stanu zapalnego w modelach przedklinicznych.
- Wartość operacyjna: Umożliwia monitorowanie podłużne w badaniach przedklinicznych dzięki minimalnym wymaganiom co do objętości krwi (pobór kapilarny 5 µL) oraz szybkiemu generowaniu wyników.
Integracja potoku i przepływu pracy
Analizator pełni funkcję narzędzia zapewniającego ciągłość procesu od etapu odkrywania do fazy przedklinicznej, sytuując profilowanie leukocytów pomiędzy wczesnym testowaniem hipotez dotyczących celu a fazami optymalizacji wiodących związków, w których modulacja immunologiczna stanowi kluczowy mechanizm działania.
- Biologia odkrywcza: Wspiera ograniczanie ryzyka mechanistycznego poprzez ilościowe określanie odpowiedzi komórek odpornościowych na modulatory szlaków, co redukuje liczbę wyników fałszywie dodatnich w kaskadach walidacji celów.
- Screening: Dostarcza ilościowe, skorelowane wyniki dla leukocytów (WBC, granulocyty, limfocyty), które umożliwiają porównanie efektów działania związków pomiędzy grupami badawczymi.
- Analityka: Zapewnia pomiary zwalidowane korelacją Spearmana (rs = 0,972 dla WBC/granulocytów, rs = 0,851 dla limfocytów), co gwarantuje niezawodną porównywalność między systemami w celu podejmowania decyzji w oparciu o dane.
- Badania translacyjne: Łączy profilowanie leukocytów w fazie odkrycia z ciągłością przedkliniczną dzięki spójności potwierdzonej analizą Blanda-Altmana z referencyjnymi systemami hematologicznymi.
- Wykorzystanie w przedsiębiorstwie: Stanowi możliwość wdrożenia w wielu obszarach terapeutycznych wymagających monitorowania odporności, co ogranicza redundantne wysiłki walidacyjne.
Wpływ operacyjny i przedsiębiorstwowy
- Wartość naukowa: Pewność prognostyczna w zakresie mechanizmu działania zapśredniczonego przez leukocyty, ograniczenie niejednoznaczności mechanistycznej podczas przesiewania immunomodulatorów.
- Wartość operacyjna: Standaryzacja dzięki bezobsługowemu działaniu, powtarzalność dzięki 95% granicom zgodności oraz skalowalność poprzez zestawy detekcyjne przeznaczone dla jednej osoby.
- Wartość strategiczna: Lepsze decyzje typu go/no-go w programach immunomodulacyjnych, efektywność kapitałowa dzięki unikaniu zależności od laboratoriów centralnych oraz zredukowane biologiczne ryzyko na późnych etapach dzięki wczesnemu profilowaniu immunologicznemu.
- Wpływ na portfolio: Priorytetyzacja związków skorygowana o ryzyko na podstawie profili odpowiedzi leukocytów, umożliwiająca podejmowanie decyzji o dalszym rozwoju w oparciu o przekładalne biomarkery hematologiczne.
Uwagi dotyczące wdrożenia
- Wymaga podstawowej wiedzy z zakresu hematologii w celu dokładnej interpretacji rozmazu leukocytów (neutrofili, limfocytów, komórek pośrednich).
- Wymaga przeszkolenia w zakresie pobierania krwi kapilarnej oraz biegłości w posługiwaniu się pipetą ilościową w celu uzyskania precyzyjnej objętości próbki wynoszącej 5 µL.
- Wymaga standaryzacji międzyzespołowej w zakresie wyboru grupy referencyjnej (normy dostosowane do wieku i płci) dla zapewnienia spójnego monitorowania podłużnego.
- Wymaga walidacji adaptacyjnej przy rozszerzaniu zastosowania poza pełną krew ludzką na systemy modeli przedklinicznych (np. mysie, naczelne inne niż człowiek).
- Ograniczenie praktyczne: Niższa korelacja limfocytów (rs = 0.851) wymaga walidacji ortogonalnej w przypadku immunoterapii ukierunkowanych na limfocyty.
