Name: Model odwróconej przebudowy naczyń krwionośnych w nadciśnieniu płucnym spowodowanym chorobą lewego serca przez odcięcie aorty u szczurów (Wideo) | JoVE Journal
Uploaded: 2022-03-01T14:45:00.000+00:00
Duration: 7 min 41 s
Description: Poznaj technikę chirurgicznego usuwania opaski aortalnej u szczurów w modelu nadciśnienia płucnego. Metoda umożliwia badanie mechanizmów odwróconej przebudowy krążenia płucnego i prawej komory serca.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

To badanie było wspierane przez granty DZHK (Niemieckiego Centrum Badań Sercowo-Naczyniowych) dla CK i WMK, BMBF (Niemieckie Ministerstwo Edukacji i Badań) dla CK w ramach VasBio, oraz dla WMK w ramach VasBio, SYMPATH i PROVID, oraz Niemiecka Fundacja Badawcza (DFG) dla WMK (SFB-TR84 A2, SFB-TR84 C9, SFB 1449 B1, SFB 1470 A4, KU1218/9-1 i KU1218/11-1).

Wszystkie procedury zostały wykonane zgodnie z "Przewodnikiem opieki i użytkowania zwierząt laboratoryjnych" (Instytut Zasobów Zwierząt Laboratoryjnych, wydanie 8 2011) i zatwierdzone przez lokalny rządowy komitet ds. opieki i użytkowania zwierząt niemieckiego Krajowego Urzędu Zdrowia i Spraw Socjalnych (Landesamt für Gesundheit und Soziales (LaGeSO), Berlin; protokół nr G0030/18). Po pierwsze, zastoinowa niewydolność serca została wywołana chirurgicznie u młodych szczurów Sprague-Dawley o masie ciała ~100 g (bw) (patrz Tabela materiałów) poprzez umieszczenie tytanowego klipsa o średnicy wewnętrznej 0,8 mm na aorcie wstępującej (pasmo aorty, AoB), jak opisano wcześniej29,30. W 3 tygodniu po AoB (<silna klasa = "xfig" >Ryc. 1) przeprowadzono operację usunięcia opaski (Deb) w celu usunięcia klipsa z aorty. Przeprowadzone zabiegi chirurgiczne i walidacja odwrócenia pH u szczurów AoB są schematycznie przedstawione w <silna klasa="xfig">Rysunek 1.
1. Przygotowania chirurgiczne
<ol>
	<li>Wysterylizuj wymagane narzędzia chirurgiczne (<silna klasa="xfig">Rysunek 2) przez autoklawowanie.</li>
	<li>Wstrzyknąć szczurowi karprofen (5 mg/kg masy ciała) (patrz tabela materiałów) dootrzewnowo (i.p.) w celu znieczulenia 30 minut przed zabiegiem.</li>
	<li>Znieczulić szczura przez wstrzyknięcie dożylnie ketaminy (87 mg/kg masy ciała) i ksylazyny (13 mg/kg masy ciała).</li>
	<li>Usuń sierść z szyi i klatki piersiowej zwierzęcia za pomocą golarki elektrycznej.</li>
	<li>Zastosuj kroplę maści do oczu, aby chronić oczy podczas zabiegu.</li>
	<li>Umieść szczura w pozycji leżącej na wysterylizowanym stole chirurgicznym. Ostrożnie przymocuj brzuch i kończyny zwierzęcia za pomocą taśmy klejącej. 
	UWAGA: Aby utrzymać temperaturę ciała, pod stołem operacyjnym umieść matę grzewczą o temperaturze 37 °C. Unikaj ogrzewania okolicy głowy, aby zapobiec wysuszeniu oczu.</li>
	<li>Zdezynfekuj skórę zwierzęcia roztworem jodu powidonu/jodoforu. Zwróć uwagę na blizny i szwy po pierwotnej operacji AoB i udrapuj pole operacyjne.</li>
	<li>Zapewnić odpowiednią głębokość znieczulenia poprzez szczypanie palców. 
	UWAGA: Głębokość znieczulenia musi być regularnie kontrolowana podczas zabiegu.</li>
</ol>
2. Tracheotomia i wentylacja mechaniczna
UWAGA: Podczas zabiegu zmieniaj rękawiczki po kontakcie z niesterylnym sprzętem.
<ol>
	<li>Cienkimi nożyczkami (<silna klasa="xfig">Ryc. 2A) wykonaj nacięcie linii środkowej szyjki macicy o długości 7-10 mm (<silna klasa="xfig">Ryc. 3A).</li>
	<li>Za pomocą pary kleszczy (<silna klasa="xfig">Rysunek 2B') wypreparuj tkankę miękką szyjki macicy, aby odsłonić mięśnie podgnykowe. Rozdziel mięśnie w linii środkowej, aby uwidocznić tchawicę. Wytnij i usuń szew z pierwotnej operacji AoB.</li>
	<li>Wykonaj nacięcie tchawicy ~2 mm między dwoma chrzęstnymi pierścieniami za pomocą kątowych nożyczek sprężynowych Noyes (<silna klasa = "xfig" >Rysunek 2C,3B). Włóż kaniulę tchawicy o średnicy zewnętrznej 2 mm (<klasa silna = "xfig" >Rysunek 2D) do tchawicy i zabezpiecz ją jedwabnym szwem 4-0 (<klasa mocna = "xfig">Rysunek 2E,3C).</li>
	<li>Podłącz kaniulę tchawicy do respiratora mechanicznego (patrz Tabela materiałów), ograniczając martwą przestrzeń do minimum (<silna klasa = "xfig" >Rysunek 3D-E). Utrzymuj okołooperacyjną wentylację płuc na poziomie 90 oddechów/min przy objętości oddechowej (Vt) 8,5 ml/kg masy ciała.</li>
</ol>
3. Odcięcie aorty
<ol>
	<li>Wykonaj nacięcie skóry o długości ~20 mm między drugim a trzecim żebrem za pomocą cienkich nożyczek (<silna klasa="xfig">Rysunek 3F).</li>
	<li>Za pomocą mniejszych nożyczek chirurgicznych (<silna klasa="xfig">Rysunek 2F), ostrożnie rozłóż mięśnie i tnij je warstwa po warstwie (<silna klasa="xfig">Rysunek 3G). Wykonać 10 mm boczne nacięcie wzdłuż przestrzeni międzyżebrowej między drugim a trzecim żebrem. 
	UWAGA: Należy ostrożnie zbliżać się do linii środkowej mostka, aby uniknąć krwawienia.</li>
	<li>Użyj rozpieracza żeber (<silna klasa="xfig">Rysunek 2G), aby rozszerzyć przestrzeń międzyżebrową między drugim a trzecim żebrem, aby utworzyć okno chirurgiczne (<silna klasa="xfig">Rysunek 3H).</li>
	<li>Za pomocą kleszczy (<silna klasa="xfig">Rysunek 2B,B'), ostrożnie oddziel grasicę od serca i tętnic przewodowych, aby uwidocznić aortę za pomocą klipsa (<silna klasa="xfig">Rysunek 4A).</li>
	<li>Przytrzymaj klips za pomocą kleszczy i ostrożnie usuń tkankę łączną wokół klipsa, aby ją odsłonić. 
	UWAGA: Unikaj trzymania lub podnoszenia aorty za pomocą kleszczy, ponieważ może to spowodować uszkodzenie aorty, powodując krwawienie i śmiertelny wynik.</li>
	<li>Za pomocą uchwytu na igłę (<silna klasa = "xfig" >Rysunek 2H) otwórz klips (<silna klasa = "xfig" >Rysunek 4B) i wyjmij go z jamy klatki piersiowej.</li>
	<li>Przed zamknięciem klatki piersiowej otwórz niedodmę płuc, zapewnij odpowiednią rekrutację płuc bez nadmiernego rozdęcia, kontynuuj wentylację mechaniczną z Vt 9,5 ml/kg masy ciała przez kolejne 10 minut i wróć do Vt 8,5 ml/kg masy ciała, aby rekrutować płuca i rozwiązać ewentualną odmę opłucnową.</li>
	<li>Zamknij mięśnie głębokie za pomocą prostego przerwanego szwu za pomocą jedwabiu 4-0. Następnie połącz górne mięśnie i skórę prostym ciągłym szwem (<silna klasa="xfig">Rysunek 5A,B).</li>
</ol>
4. Ekstubacja tchawicy
<ol>
	<li>Odłączyć kaniulę tchawicy od urządzenia wentylacyjnego. Uważnie obserwuj szczura, aż spontaniczny oddech zostanie przywrócony. Jeśli zwierzę nie oddycha spontanicznie po odłączeniu, podłącz ponownie respirator i kontynuuj wentylację przez dodatkowe 5 minut. Następnie powtórz procedurę.</li>
	<li>Po przywróceniu spontanicznego oddychania wyjmij kaniulę z tchawicy i oczyść płyn wokół tchawicy punktami gąbki (<silna klasa = "xfig" >Rysunek 2I) (patrz Tabela materiałów).</li>
	<li>Zamknij tchawicę prostym szwem za pomocą prolenu 6-0 (<silna klasa = "xfig" > Rysunek 2E' i <silna klasa = "xfig" > Rysunek 5C). Następnie zamknij mięśnie podgnykowe w prostym przerywanym szwie za pomocą jedwabiu 4-0 (<silna klasa = "xfig" >Ryc. 5D) i połącz skórę w prostym ciągłym szwie (<silna klasa = "xfig">Rysunek 5E). Oczyść i zdezynfekuj mięśnie i skórę podczas procesu roztworem powidonu-jodu/jodoforu.</li>
</ol>
5. Opieka pooperacyjna
<ol>
	<li>Po zakończeniu zabiegu chirurgicznego ostrożnie przenieś zwierzę do klatki rekonwalescencji z dodatkowym tlenem i lampą na podczerwień, aby utrzymać zwierzęta w cieple i wystarczająco natlenione w fazie rekonwalescencji. Umieść maskę tlenową blisko pyska szczura. W danym momencie należy trzymać tylko jedno zwierzę w klatce regeneracyjnej.</li>
	<li>Po przebudzeniu zwierzęcia ostrożnie przenieś je do zwykłej klatki zaopatrzonej w wodę i jedzenie. Przez kolejne 12 godzin należy kontrolować stan zdrowia operowanego zwierzęcia w odstępach 2-godzinnych.</li>
	<li>Po zakończeniu zabiegu chirurgicznego należy codziennie stosować środek przeciwbólowy poprzez wstrzyknięcie i.p. karprofenu (5 mg/kg masy ciała) przez jeden tydzień.</li>
	<li>Aby uniknąć infekcji bakteryjnej, amoksycylinę (500 mg/l) należy podawać w wodzie do picia przez tydzień po operacji.</li>
</ol>

<ol><li>Rosenkranz, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Pulmonary+hypertension+due+to+left+heart+disease%3A+Updated+recommendations+of+the+cologne+consensus+conference+2011%5BTitle%5D)+AND+%22International+Journal+of+Cardiology%22%5BJournal%5D)">Pulmonary hypertension due to left heart disease: Updated recommendations of the cologne consensus conference 2011.</a> International Journal of Cardiology. 154, Suppl 1 34-44 (2011).</li>
<li>Rosenkranz, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Left+ventricular+heart+failure+and+pulmonary+hypertension%5BTitle%5D)+AND+%22European+Heart+Journal%22%5BJournal%5D)">Left ventricular heart failure and pulmonary hypertension.</a> European Heart Journal. 37 (12), 942-954 (2016).</li>
<li>Fayyaz, A. U., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Global+Pulmonary+vascular+remodeling+in+pulmonary+hypertension+associated+with+heart+failure+and+preserved+or+reduced+ejection+fraction%5BTitle%5D)+AND+%22Circulation%22%5BJournal%5D)">Global Pulmonary vascular remodeling in pulmonary hypertension associated with heart failure and preserved or reduced ejection fraction.</a> Circulation. 137 (17), 1796-1810 (2018).</li>
<li>Hunt, J. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Pulmonary+veins+in+the+normal+lung+and+pulmonary+hypertension+due+to+left+heart+disease%5BTitle%5D)+AND+%22The+American+Journal+of+Physiology+-+Lung+Cellular+and+Molecular+Physiology%22%5BJournal%5D)">Pulmonary veins in the normal lung and pulmonary hypertension due to left heart disease.</a> The American Journal of Physiology - Lung Cellular and Molecular Physiology. 305 (10), 725-736 (2013).</li>
<li>Bursi, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Pulmonary+pressures+and+death+in+heart+failure%3A+A+community+study%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+the+American+College+of+Cardiology%22%5BJournal%5D)">Pulmonary pressures and death in heart failure: A community study.</a> Journal of the American College of Cardiology. 59 (3), 222-231 (2012).</li>
<li>Ryan, J. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Right+ventricular+adaptation+and+failure+in+pulmonary+arterial+hypertension%5BTitle%5D)+AND+%22Canadian+Journal+of+Cardiology%22%5BJournal%5D)">Right ventricular adaptation and failure in pulmonary arterial hypertension.</a> Canadian Journal of Cardiology. 31 (4), 391-406 (2015).</li>
<li>Miller, W. L., Mahoney, D. W., Enriquez-Sarano, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Quantitative+Doppler-echocardiographic+imaging+and+clinical+outcomes+with+left+ventricular+systolic+dysfunction%3A+Independent+effect+of+pulmonary+hypertension%5BTitle%5D)+AND+%22Circulation%3A+Cardiovascular+Imaging%22%5BJournal%5D)">Quantitative Doppler-echocardiographic imaging and clinical outcomes with left ventricular systolic dysfunction: Independent effect of pulmonary hypertension.</a> Circulation: Cardiovascular Imaging. 7 (2), 330-336 (2014).</li>
<li>Kjaergaard, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Prognostic+importance+of+pulmonary+hypertension+in+patients+with+heart+failure%5BTitle%5D)+AND+%22The+American+Journal+of+Cardiology%22%5BJournal%5D)">Prognostic importance of pulmonary hypertension in patients with heart failure.</a> The American Journal of Cardiology. 99 (8), 1146-1150 (2007).</li>
<li>Shah, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Pulmonary+hypertension+after+heart+transplantation+in+patients+bridged+with+the+total+artificial+heart%5BTitle%5D)+AND+%22ASAIO+Journal%22%5BJournal%5D)">Pulmonary hypertension after heart transplantation in patients bridged with the total artificial heart.</a> ASAIO Journal. 62 (1), 69-73 (2016).</li>
<li>Tracy, G. P., Proctor, M. S., Hizny, C. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Reversibility+of+pulmonary+artery+hypertension+in+aortic+stenosis+after+aortic+valve+replacement%5BTitle%5D)+AND+%22The+Annals+of+Thoracic+Surgery%22%5BJournal%5D)">Reversibility of pulmonary artery hypertension in aortic stenosis after aortic valve replacement.</a> The Annals of Thoracic Surgery. 50 (1), 89-93 (1990).</li>
<li>Lindelow, B., Andersson, B., Waagstein, F., Bergh, C. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((High+and+low+pulmonary+vascular+resistance+in+heart+transplant+candidates.+A+5-year+follow-up+after+heart+transplantation+shows+continuous+reduction+in+resistance+and+no+difference+in+complication+rate%5BTitle%5D)+AND+%22European+Heart+Journal%22%5BJournal%5D)">High and low pulmonary vascular resistance in heart transplant candidates. A 5-year follow-up after heart transplantation shows continuous reduction in resistance and no difference in complication rate.</a> European Heart Journal. 20 (2), 148-156 (1999).</li>
<li>Martin, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Implantable+left+ventricular+assist+device+for+treatment+of+pulmonary+hypertension+in+candidates+for+orthotopic+heart+transplantation-a+preliminary+study%5BTitle%5D)+AND+%22European+Journal+of+Cardio-Thoracic+Surgery%22%5BJournal%5D)">Implantable left ventricular assist device for treatment of pulmonary hypertension in candidates for orthotopic heart transplantation-a preliminary study.</a> European Journal of Cardio-Thoracic Surgery. 25 (6), 971-977 (2004).</li>
<li>Gallagher, R. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Univentricular+support+results+in+reduction+of+pulmonary+resistance+and+improved+right+ventricular+function%5BTitle%5D)+AND+%22ASAIO+Transactions%22%5BJournal%5D)">Univentricular support results in reduction of pulmonary resistance and improved right ventricular function.</a> ASAIO Transactions. 37 (3), 287-288 (1991).</li>
<li>Beyersdorf, F., Schlensak, C., Berchtold-Herz, M., Trummer, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Regression+of+%26%2334%3Bfixed%26%2334%3B+pulmonary+vascular+resistance+in+heart+transplant+candidates+after+unloading+with+ventricular+assist+devices%5BTitle%5D)+AND+%22The+Journal+of+Thoracic+and+Cardiovascular+Surgery%22%5BJournal%5D)">Regression of &#34;fixed&#34; pulmonary vascular resistance in heart transplant candidates after unloading with ventricular assist devices.</a> The Journal of Thoracic and Cardiovascular Surgery. 140 (4), 747-749 (2010).</li>
<li>Hoffmann, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mast+cells+promote+lung+vascular+remodelling+in+pulmonary+hypertension%5BTitle%5D)+AND+%22European+Respiratory+Journal%22%5BJournal%5D)">Mast cells promote lung vascular remodelling in pulmonary hypertension.</a> European Respiratory Journal. 37 (6), 1400-1410 (2011).</li>
<li>Litwin, S. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Serial+echocardiographic-Doppler+assessment+of+left+ventricular+geometry+and+function+in+rats+with+pressure-overload+hypertrophy.+Chronic+angiotensin-converting+enzyme+inhibition+attenuates+the+transition+to+heart+failure%5BTitle%5D)+AND+%22Circulation%22%5BJournal%5D)">Serial echocardiographic-Doppler assessment of left ventricular geometry and function in rats with pressure-overload hypertrophy. Chronic angiotensin-converting enzyme inhibition attenuates the transition to heart failure.</a> Circulation. 91 (10), 2642-2654 (1995).</li>
<li>Rockman, H. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Segregation+of+atrial-specific+and+inducible+expression+of+an+atrial+natriuretic+factor+transgene+in+an+in+vivo+murine+model+of+cardiac+hypertrophy%5BTitle%5D)+AND+%22Proceedings+of+the+National+Academy+of+Sciences+of+the+United+States+of+America%22%5BJournal%5D)">Segregation of atrial-specific and inducible expression of an atrial natriuretic factor transgene in an in vivo murine model of cardiac hypertrophy.</a> Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. 88 (18), 8277-8281 (1991).</li>
<li>de Montgolfier, O., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((High+Systolic+blood+pressure+induces+cerebral+microvascular+endothelial+dysfunction%2C+neurovascular+unit+damage%2C+and+cognitive+decline+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Hypertension%22%5BJournal%5D)">High Systolic blood pressure induces cerebral microvascular endothelial dysfunction, neurovascular unit damage, and cognitive decline in mice.</a> Hypertension. 73 (1), 217-228 (2019).</li>
<li>Breitling, S., Ravindran, K., Goldenberg, N. M., Kuebler, W. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+pathophysiology+of+pulmonary+hypertension+in+left+heart+disease%5BTitle%5D)+AND+%22American+Journal+of+Physiology+-+Lung+Cellular+and+Molecular+Physiology%22%5BJournal%5D)">The pathophysiology of pulmonary hypertension in left heart disease.</a> American Journal of Physiology - Lung Cellular and Molecular Physiology. 309 (9), 924-941 (2015).</li>
<li>Ranchoux, B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Metabolic+syndrome+exacerbates+pulmonary+hypertension+due+to+left+heart+disease%5BTitle%5D)+AND+%22Circulation+Research%22%5BJournal%5D)">Metabolic syndrome exacerbates pulmonary hypertension due to left heart disease.</a> Circulation Research. 125 (4), 449-466 (2019).</li>
<li>Zhang, H., Huang, W., Liu, H., Zheng, Y., Liao, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mechanical+stretching+of+pulmonary+vein+stimulates+matrix+metalloproteinase-9+and+transforming+growth+factor-beta1+through+stretch-activated+channel%2FMAPK+pathways+in+pulmonary+hypertension+due+to+left+heart+disease+model+rats%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+One%22%5BJournal%5D)">Mechanical stretching of pulmonary vein stimulates matrix metalloproteinase-9 and transforming growth factor-beta1 through stretch-activated channel/MAPK pathways in pulmonary hypertension due to left heart disease model rats.</a> PLoS One. 15, 0235824(2020).</li>
<li>Yin, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Sildenafil+preserves+lung+endothelial+function+and+prevents+pulmonary+vascular+remodeling+in+a+rat+model+of+diastolic+heart+failure%5BTitle%5D)+AND+%22Circulation%3A+Heart+Failure%22%5BJournal%5D)">Sildenafil preserves lung endothelial function and prevents pulmonary vascular remodeling in a rat model of diastolic heart failure.</a> Circulation: Heart Failure. 4 (2), 198-206 (2011).</li>
<li>Yin, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Inhaled+nitric+oxide+versus+aerosolized+iloprost+for+the+treatment+of+pulmonary+hypertension+with+left+heart+disease%5BTitle%5D)+AND+%22Critical+Care+Medicine%22%5BJournal%5D)">Inhaled nitric oxide versus aerosolized iloprost for the treatment of pulmonary hypertension with left heart disease.</a> Critical Care Medicine. 37 (3), 980-986 (2009).</li>
<li>Breitling, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+mast+cell-B+cell+axis+in+lung+vascular+remodeling+and+pulmonary+hypertension%5BTitle%5D)+AND+%22American+Journal+of+Physiology+-+Lung+Cellular+and+Molecular+Physiology%22%5BJournal%5D)">The mast cell-B cell axis in lung vascular remodeling and pulmonary hypertension.</a> American Journal of Physiology - Lung Cellular and Molecular Physiology. 312 (5), 710-721 (2017).</li>
<li>Kerem, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Lung+endothelial+dysfunction+in+congestive+heart+failure%3A+Role+of+impaired+Ca2%2B+signaling+and+cytoskeletal+reorganization%5BTitle%5D)+AND+%22Circulation+Research%22%5BJournal%5D)">Lung endothelial dysfunction in congestive heart failure: Role of impaired Ca2+ signaling and cytoskeletal reorganization.</a> Circulation Research. 106 (6), 1103-1116 (2010).</li>
<li>Goncalves-Rodrigues, P., Miranda-Silva, D., Leite-Moreira, A. F., Falcao-Pires, I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Studying+left+ventricular+reverse+remodeling+by+aortic+debanding+in+rodents%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Visualized+Experiments%22%5BJournal%5D)">Studying left ventricular reverse remodeling by aortic debanding in rodents.</a> Journal of Visualized Experiments. (173), e60036(2021).</li>
<li>Miranda-Silva, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Characterization+of+biventricular+alterations+in+myocardial+%28reverse%29+remodelling+in+aortic+banding-induced+chronic+pressure+overload%5BTitle%5D)+AND+%22Scientific+Reports%22%5BJournal%5D)">Characterization of biventricular alterations in myocardial (reverse) remodelling in aortic banding-induced chronic pressure overload.</a> Scientific Reports. 9, 2956(2019).</li>
<li>Chou, S. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+effects+of+debanding+on+the+lung+expression+of+ET-1%2C+eNOS%2C+and+cGMP+in+rats+with+left+ventricular+pressure+overload%5BTitle%5D)+AND+%22Experimental+Biology+and+Medicine%22%5BJournal%5D)">The effects of debanding on the lung expression of ET-1, eNOS, and cGMP in rats with left ventricular pressure overload.</a> Experimental Biology and Medicine. 231 (6), 954-959 (2006).</li>
<li>Hentschel, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Inhalation+of+the+phosphodiesterase-3+inhibitor+milrinone+attenuates+pulmonary+hypertension+in+a+rat+model+of+congestive+heart+failure%5BTitle%5D)+AND+%22Anesthesiology%22%5BJournal%5D)">Inhalation of the phosphodiesterase-3 inhibitor milrinone attenuates pulmonary hypertension in a rat model of congestive heart failure.</a> Anesthesiology. 106 (1), 124-131 (2007).</li>
<li>Gs, A. K., Raj, B., Santhosh, K. S., Sanjay, G., Kartha, C. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Ascending+aortic+constriction+in+rats+for+creation+of+pressure+overload+cardiac+hypertrophy+model%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Visualized+Experiments%22%5BJournal%5D)">Ascending aortic constriction in rats for creation of pressure overload cardiac hypertrophy model.</a> Journal of Visualized Experiments. (88), e50983(2014).</li>
<li>Angermann, C. E., Ertl, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Natriuretic+peptides--new+diagnostic+markers+in+heart+disease%5BTitle%5D)+AND+%22Herz%22%5BJournal%5D)">Natriuretic peptides--new diagnostic markers in heart disease.</a> Herz. 29 (6), 609-617 (2004).</li>
<li>Ordodi, V. L., Paunescu, V., Mic, F. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Optimal+access+to+the+rat+heart+by+transverse+bilateral+thoracotomy+with+double+ligature+of+the+internal+thoracic+arteries%5BTitle%5D)+AND+%22American+Association+for+Laboratory+Animal+Science%22%5BJournal%5D)">Optimal access to the rat heart by transverse bilateral thoracotomy with double ligature of the internal thoracic arteries.</a> American Association for Laboratory Animal Science. 47 (5), 44-46 (2008).</li>
<li>Fay, D. S., Gerow, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+biologist%27s+guide+to+statistical+thinking+and+analysis%5BTitle%5D)+AND+%22WormBook%22%5BJournal%5D)">A biologist's guide to statistical thinking and analysis.</a> WormBook. , 1-54 (2013).</li>
<li>Etz, C. D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Medically+refractory+pulmonary+hypertension%3A+treatment+with+nonpulsatile+left+ventricular+assist+devices%5BTitle%5D)+AND+%22The+Annals+of+Thoracic+Surgery%22%5BJournal%5D)">Medically refractory pulmonary hypertension: treatment with nonpulsatile left ventricular assist devices.</a> The Annals of Thoracic Surgery. 83 (5), 1697-1705 (2007).</li>
<li>Mikus, E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Reversibility+of+fixed+pulmonary+hypertension+in+left+ventricular+assist+device+support+recipients%5BTitle%5D)+AND+%22European+Journal+of+Cardio-Thoracic+Surgery%22%5BJournal%5D)">Reversibility of fixed pulmonary hypertension in left ventricular assist device support recipients.</a> European Journal of Cardio-Thoracic Surgery. 40 (4), 971-977 (2011).</li>
<li>Zelt, J. G. E., Chaudhary, K. R., Cadete, V. J., Mielniczuk, L. M., Stewart, D. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Medical+therapy+for+heart+failure+associated+with+pulmonary+hypertension%5BTitle%5D)+AND+%22Circulation+Research%22%5BJournal%5D)">Medical therapy for heart failure associated with pulmonary hypertension.</a> Circulation Research. 124 (11), 1551-1567 (2019).</li>
</ol>

Autorzy nie mają do zadeklarowania konfliktu interesów. Wszyscy współautorzy zapoznali się z treścią manuskryptu i zgadzają się z nią.

W tym miejscu przedstawiono szczegółową technikę chirurgiczną usuwania pasma aorty w szczurzym modelu AoB, którą można wykorzystać do zbadania odwracalności PH-LHD oraz mechanizmów komórkowych i molekularnych, które napędzają odwrotną przebudowę w unaczynieniu płuc i RV. Trzy tygodnie zwężenia aorty u młodych szczurów powodują PH-LHD objawiające się zwiększonym ciśnieniem lewej komory, przerostem lewej komory i jednocześnie zwiększonym ciśnieniem RV i przerostem RV. Odwiązanie aorty w 3. tygodniu po AoB było w stanie roz...

Niewydolność serca jest główną przyczyną zgonów w krajach rozwiniętych i oczekuje się, że wzrośnie o 25% w ciągu następnej dekady. Nadciśnienie płucne (PH) - patologiczny wzrost ciśnienia krwi w krążeniu płucnym - dotyka około 70% pacjentów ze schyłkową niewydolnością serca; Światowa Organizacja Zdrowia klasyfikuje PH jako nadciśnienie płucne spowodowane chorobą lewego serca (PH-LHD)1. PH-LHD jest inicjowany przez upośledzoną skurczową i/lub rozkurczową funkcję lewej komory (LV), która powoduje podwyższone ciśnienie napełniania i bierne przekrwienie krwi do krążenia płucnego2. Chociaż początkowo odwracalny, PH-LHD stopniowo utrwala się dzięki aktywnej przebudowie naczyń płucnych we wszystkich przedziałach krążenia płucnego, tj. tętnicach, naczyniach włosowatych i żyłach3,4. Zarówno odwracalne, jak i stałe PH zwiększają obciążenie następcze RV, początkowo prowadząc do adaptacyjnego przerostu mięśnia sercowego, ale ostatecznie powodując rozszerzenie RV, hipokinezę, zwłóknienie i dekompensację, które stopniowo prowadzą do awarii RV1,2,5,6. W związku z tym PH przyspiesza postęp choroby u pacjentów z niewydolnością serca i zwiększa śmiertelność, szczególnie u pacjentów poddawanych leczeniu chirurgicznemu poprzez wszczepienie urządzeń wspomagających lewą komorę (LVAD) i/lub przeszczepienie serca7,8,9. Obecnie nie istnieją żadne terapie lecznicze, które mogłyby odwrócić proces przebudowy naczyń płucnych, dlatego potrzebne są podstawowe badania mechanistyczne w odpowiednich systemach modelowych.
Co ważne, badania kliniczne pokazują, że PH-LHD jako częste powikłanie u pacjentów ze zwężeniem zastawki aortalnej może szybko ulec poprawie we wczesnym okresie pooperacyjnym po wymianie zastawki aortalnej10. Analogicznie, wysoki (>3 jednostki drewna) przedoperacyjny opór naczyniowy płuc (PVR), który był jednak odwracalny po zastosowaniu nitroprusydku, został trwale znormalizowany po przeszczepie serca w 5-letnim badaniu kontrolnym11. Podobnie, odpowiednie zmniejszenie zarówno odwracalnego, jak i stałego PVR oraz poprawa funkcji RV u pacjentów z LHD może zostać osiągnięta w ciągu kilku miesięcy poprzez odciążenie lewej komory za pomocą wszczepialnych pulsacyjnych i niepulsacyjnych urządzeń wspomagających komorę12,13,14. Obecnie mechanizmy komórkowe i molekularne, które napędzają odwrotną przebudowę krążenia płucnego i mięśnia sercowego RV, są niejasne. Jednak ich wiedza może dostarczyć ważnych informacji na temat szlaków fizjologicznych, które mogą być terapeutycznie wykorzystane do odwrócenia przebudowy naczyń krwionośnych płuc i RV w PH-LHD i innych formach PH.
Odpowiedni model przedkliniczny, który odpowiednio odtwarza patofizjologiczne i molekularne cechy PH-LHD, może być wykorzystany do badań translacyjnych w zastoinowej niewydolności serca wywołanej przeciążeniem ciśnieniowym spowodowanej chirurgicznym pasmem aorty (AoB) u szczurów4,15,16. W porównaniu z podobną niewydolnością serca spowodowaną przeciążeniem ciśnieniem w mysim modelu poprzecznego zwężenia aorty (TAC)17, prążkowanie aorty wstępującej powyżej korzenia aorty u szczurów AoB nie powoduje nadciśnienia w lewej tętnicy szyjnej, ponieważ miejsce pasma znajduje się proksymalnie od odpływu lewej tętnicy szyjnej z aorty. W rezultacie, AoB nie powoduje lewostronnego uszkodzenia neuronów w korze mózgowej, co jest charakterystyczne dla TAC18, a co może mieć wpływ na wynik badania. W porównaniu z innymi modelami gryzoni z chirurgicznie indukowanym PH-LHD, modele szczurze w ogóle, a AoB w szczególności, okazują się bardziej wytrzymałe, powtarzalne i odtwarzają przebudowę krążenia płucnego charakterystyczną dla pacjentów z PH-LHD. Jednocześnie śmiertelność okołooperacyjna jest niska19. Zwiększone ciśnienie LV i dysfunkcja LV u szczurów AoB indukują rozwój PH-LHD, co skutkuje podwyższonym ciśnieniem RV i Remodeling RV. W związku z tym szczurzy model AoB okazał się niezwykle przydatny w serii wcześniejszych badań przeprowadzonych przez niezależne grupy, w tym naszą, w celu zidentyfikowania patomechanizmów przebudowy naczyń płucnych i przetestowania potencjalnych strategii leczenia PH-LHD4,15,20,21,22,23,24,25.
W obecnym badaniu, szczurzy model AoB został wykorzystany do przeprowadzenia chirurgicznej procedury odklejania aorty w celu zbadania mechanizmów odwrotnej przebudowy w układzie naczyniowym płuc i RV. Wcześniej, modele odwrotnej przebudowy mięśnia sercowego, takie jak odpasowanie aorty u myszy26 i rats27 zostały opracowane w celu zbadania komórkowych i molekularnych mechanizmów regulujących regresję przerostu lewej komory serca oraz przetestowania potencjalnych opcji terapeutycznych wspomagających powrót do zdrowia mięśnia sercowego. Co więcej, ograniczona liczba wcześniejszych badań dotyczyła wpływu odpasowania aorty na PH-LHD u szczurów i wykazała, że odpasowanie aorty może odwrócić przerost przyśrodkowy w tętniczkach płucnych, normalizować ekspresję pre-pro-endoteliny 1 i poprawiać hemodynamikę płuc27,28, dostarczając dowodów na odwracalność PH u szczurów z niewydolnością serca. W tym przypadku procedury techniczne operacji usuwania opaski są zoptymalizowane i ustandaryzowane, np. poprzez zastosowanie tracheotomii zamiast intubacji dotchawiczej lub poprzez użycie tytanowych klipsów o określonej średnicy wewnętrznej do opaski aortalnej zamiast szwów polipropylenowych z igłą26,27, zapewniając w ten sposób lepszą kontrolę procedur chirurgicznych, zwiększoną powtarzalność modelu i lepszy wskaźnik przeżycia.
Z naukowego punktu widzenia, znaczenie modelu debandingu PH-LHD nie polega wyłącznie na wykazaniu odwracalności fenotypu sercowo-naczyniowego i płucnego w niewydolności serca, ale co ważniejsze, na identyfikacji molekularnych czynników, które wywołują i/lub podtrzymują odwrotną przebudowę tętnic płucnych, jako obiecujących kandydatów do przyszłego ukierunkowania terapeutycznego.

<table><tbody><tr><td>Amoksycylina</td><td>Ratiopharm</td><td>PC: 04150075615985</td><td>Antybiotyk</td></tr><tr><td>Przeciwciało anty-BNP</td><td>Abcam</td><td>ab239510</td><td>Western Blotting</td></tr><tr><td>Aquasonic 100 Żel do ultradźwięków</td><td>Parker Laboratories</td><td>BT-025-0037L</td><td>Materiały eksploatacyjne do echokardiografii</td></tr><tr><td>Bepanthen</td><td>Bayer</td><td>6029009.00.00</td><td>Maść do oczu</td></tr><tr><td>Karprosol (Carprofen)</td><td>CP-Pharma</td><td>401808.00.00</td><td>Przeciwbólowy</td></tr><tr><td>uchwyt na klips</td><td>Weck nierdzewny USA</td><td>523140S</td><td>Narzędzia chirurgiczne</td></tr><tr><td>Drobne nożyczki Węglik wolframu</td><td>Narzędzia do nauki</td><td>14568-12</td><td>Nożyczki chirurgiczne</td></tr><tr><td>Cienkie nożyczki Węglik wolframu</td><td>Fine Science Tools</td><td>14568-09</td><td>Nożyczki chirurgiczne</td></tr><tr><td>System obrazowania o wysokiej rozdzielczości</td><td>FUJIFILM VisualSonics, Amsterdam, Holandia</td><td>VeVo 3100</td><td>Aparat do echokardiografii. Obrazy uzyskano w trybie Dopplera fali tętna, trybie M i trybie B</td></tr><tr><td>Izofluran</td><td>CP-Pharma</td><td>400806.00.00</td><td>Znieczulająca</td></tr><tr><td>Ketamina</td><td>CP-Pharma</td><td>401650.00.00</td><td>Anestezjologiczny</td></tr><tr><td>uchwyt igły Mathieu</td><td>Fine Science Tools</td><td>12010-14</td><td>Narzędzia chirurgiczne</td></tr><tr><td>Respirator mechaniczny (respirator dla gryzoni)</td><td>UGO Basile S.R.L.</td><td>7025</td><td>Respirator o regulowanej objętości</td></tr><tr><td>Metalowy klips</td><td>Hemoclip</td><td>523735</td><td>Materiały eksploatacyjne chirurgiczne</td></tr><tr><td>Mikroskop</td><td>Leica</td><td>M651</td><td>Ręczny mikroskop chirurgiczny do zabiegów mikrochirurgicznych</td></tr><tr><td>Cewniki ciśnieniowe Millar Mikro-Tip</td><td>ADInstruments</td><td>SPR-671</td><td>Ocena hemodynamiki</td></tr><tr><td>Kleszcze Moria Iris</td><td>Fine Science Tools</td><td>11373-12</td><td>Kleszcze chirurgiczne</td></tr><tr><td>Nożyczki sprężynowe Noyes</td><td>Fine Science Tools</td><td>15013-12</td><td>Nożyczki chirurgiczne</td></tr><tr><td>Powidon roztwór jodu/jodoforu</td><td>B/Braun</td><td>16332M01</td><td>Dezynfekcja</td></tr><tr><td>Instrumenty PowerLab</td><td>ADInstruments</td><td>4_35</td><td>Ocena hemodynamiki</td></tr><tr><td>Szew prolenowy, 4-0</td><td>Ethicon</td><td>EH7830</td><td>Materiały eksploatacyjne chirurgiczne</td></tr><tr><td>Rozpieracz żeber (samozatrzymujący się retraktor Alm,, 70 mm, 2 3/4&Prime;)</td><td>Austos</td><td>AE-BV010R</td><td>Narzędzia chirurgiczne</td></tr><tr><td>Ząbkowane kleszcze Graefe</td><td>Fine Science Tools</td><td>11052-10</td><td>Kleszcze chirurgiczne</td></tr><tr><td>Szew jedwabny, 4-0</td><td>Ethicon</td><td>K871</td><td>Materiały eksploatacyjne chirurgiczne</td></tr><tr><td>Roztwór do dezynfikacji skóry (kolorowy)</td><td>B/Braun</td><td>19412M07</td><td>Dezynfekcja</td></tr><tr><td>Spectra 360 Żel elektrodowy</td><td>Parker Laboratories</td><td>TB-250-0241H</td><td>Materiały eksploatacyjne do echokardiografii</td></tr><tr><td>Tkanka z gąbką Sugi</td><td></td><td>REF 30601</td><td>Materiały eksploatacyjne chirurgiczne</td></tr><tr><td>Sprague-Dawley rat</td><td>Janvier Labs, Le Genest-Saint-Isle, Francja</td><td></td><td>Badane zwierzęta</td></tr><tr><td>Kaniula tchawicy</td><td></td><td></td><td>Średnica zewnętrzna 2 mm</td></tr><tr><td>Xylazin</td><td>CP-Pharma</td><td>401510.00.00</td><td>Znieczulenie</td></tr></tbody></table>

model odwróconej przebudowy naczyń krwionośnych w nadciśnieniu płucnym spowodowanym chorobą lewego serca przez odcięcie aorty u szczurów

A Model of Reverse Vascular Remodeling in Pulmonary Hypertension Due to Left Heart Disease by Aortic Debanding in Rats

Nadciśnienie płucne spowodowane chorobą lewego serca (PH-LHD) jest najczęstszą formą PH, jednak jego patofizjologia jest słabo scharakteryzowana niż tętnicze nadciśnienie płucne (PAH). W rezultacie brakuje zatwierdzonych interwencji terapeutycznych w leczeniu lub profilaktyce PH-LHD. Leki stosowane w leczeniu PH u pacjentów z TNP nie są zalecane w leczeniu PH-LHD, ponieważ zmniejszony opór naczyniowy płuc (PVR) i zwiększony przepływ krwi w płucach w obecności zwiększonego ciśnienia wypełnienia po lewej stronie mogą powodować dekompensację lewego serca i obrzęk płuc. Należy opracować nowe strategie odwracania pH u pacjentów z LHD. W przeciwieństwie do TNP, PH-LHD rozwija się w wyniku zwiększonego obciążenia mechanicznego spowodowanego przekrwieniem krwi do krążenia w płucach podczas niewydolności lewego serca. Klinicznie mechaniczne odciążenie lewej komory (LV) poprzez wymianę zastawki aortalnej u pacjentów ze zwężeniem zastawki aortalnej lub poprzez wszczepienie urządzeń wspomagających lewą komorę u pacjentów ze schyłkową niewydolnością serca normalizuje nie tylko ciśnienie w tętnicy płucnej i prawej komorze (RV), ale także PVR, dostarczając w ten sposób pośrednich dowodów na odwrotną przebudowę w układzie naczyniowym płuc. Korzystając z ustalonego szczurzego modelu PH-LHD spowodowanego niewydolnością lewego serca wywołaną przeciążeniem ciśnieniowym, a następnie rozwojem PH, opracowano model do badania molekularnych i komórkowych mechanizmów tego fizjologicznego procesu przebudowy wstecznej. W szczególności przeprowadzono operację odbandażowania aorty, w wyniku której przeprowadzono odwrotną przebudowę mięśnia sercowego lewej komórki i jego odciążenie. Równolegle wykryto całkowitą normalizację ciśnienia skurczowego RV i znaczące, ale niepełne odwrócenie przerostu RV. Model ten może stanowić cenne narzędzie do badania mechanizmów fizjologicznej przebudowy odwrotnej krążenia płucnego i RV, mając na celu opracowanie strategii terapeutycznych w leczeniu PH-LHD i innych postaci PH.

Najpierw, za pomocą echokardiografii przezklatkowej przeprowadzonej przed i po zabiegu usunięcia opaski w grupie zwierząt AoB, potwierdzono sukces operacji debandingu (Rycina 6). W tym celu oceniono łuk aorty w widoku B-mode wzdłużnej osi przymostkowej (PLAX). Zwizualizowano położenie klipsa na aorcie wstępującej u zwierząt AoB oraz jego brak po operacji Deb (Rycina 6A,B). Następnie przepływ krwi w aorcie oceniono za pomocą obrazowania Dopplerow...

Obecny protokół opisuje zabieg chirurgiczny mający na celu usunięcie pasma aorty wstępującej w szczurzym modelu nadciśnienia płucnego spowodowanego chorobą lewego serca. Technika ta bada endogenne mechanizmy odwrotnej przebudowy krążenia płucnego i prawego serca, dostarczając w ten sposób informacji o strategiach odwracania nadciśnienia płucnego i/lub dysfunkcji prawej komory.

Model odwróconej przebudowy naczyń krwionośnych w nadciśnieniu płucnym spowodowanym chorobą lewego serca przez odcięcie aorty u szczurów

Pulmonary hypertension due to left heart disease (PH-LHD) is the most common form of PH, yet its pathophysiology is poorly characterized than pulmonary ...

Nasz protokół opisuje zabieg chirurgiczny mający na celu usunięcie pasma aorty wstępującej w szczurzym modelu nadciśnienia płucnego spowodowanego chorobą lewego serca, co prowadzi do odwrócenia nadciśnienia płucnego. Technika ta stanowi cenne narzędzie do badania mechanizmów fizjologicznej przebudowy odwrotnej krążenia płucnego i prawej komory. Może pomóc w opracowaniu strategii leczenia nadciśnienia płucnego.Po przygotowaniu narzędzi chirurgicznych umieść znieczulonego szczura w pozycji leżącej na wysterylizowanym stole operacyjnym. Następnie przymocuj brzuch i kończyny zwierzęcia taśmą klejącą i zdezynfekuj skórę zwierzęcia roztworem powidonu-jodu/jodoforu. Zwróć uwagę na blizny i szwy po pierwotnej chirurgicznej operacji opaski aortalnej lub AoB.Po zapewnieniu odpowiedniej głębokości znieczulenia ze szczypnięciem palca u nogi, należy usunąć szwy z pierwotnej operacji AoB. Następnie wykonaj tracheotomię, wykonując cienkimi nożyczkami nacięcie linii środkowej szyjki macicy o długości od 7 do 10 milimetrów. Za pomocą pary kleszczy wypreparuj tkankę miękką szyjki macicy, aby odsłonić mięśnie podgnykowe.Następnie, dzieląc mięśnie w linii środkowej, uwidocznij tchawicę. Po zakończeniu wykonaj dwumilimetrowe nacięcie tchawicy między dwoma chrzęstnymi pierścieniami za pomocą kątowych nożyczek sprężynowych Noyes, aby wprowadzić kaniulę tchawicy o średnicy zewnętrznej dwóch milimetrów do tchawicy. Następnie zabezpiecz kaniulę jedwabnym szwem 4-0.Podłącz drugi koniec kaniuli tchawicy do respiratora mechanicznego, zachowując minimalną martwą przestrzeń. Utrzymuj okołooperacyjną wentylację płuc na poziomie 90 oddechów na minutę przy objętości oddechowej 8,5 mililitra na kilogram masy ciała. W celu usunięcia opaski aorty wykonaj 20-milimetrowe nacięcie skóry między drugim a trzecim żebrem za pomocą cienkich nożyczek.Za pomocą mniejszych nożyczek chirurgicznych rozłóż i przetnij mięśnie warstwa po warstwie, a następnie wykonaj 10-milimetrowe nacięcie boczne wzdłuż przestrzeni międzyżebrowej między drugim a trzecim żebrem. Użyj rozpieracza żeber, aby rozszerzyć przestrzeń międzyżebrową między drugim a trzecim żebrem, aby stworzyć okno chirurgiczne. Za pomocą kleszczy oddziel grasicę od serca i tętnic przewodowych, aby uwidocznić aortę za pomocą klipsa.Przytrzymaj klips za pomocą kleszczy, a następnie usuń tkankę łączną wokół klipsa, aby odsłonić aortę. Otwórz klips za pomocą uchwytu na igłę i wyjmij klips z jamy piersiowej. Przed zamknięciem klatki piersiowej otwórz niedodmę płuc i zapewnij odpowiednią rekrutację płuc bez nadmiernego rozdęcia za pomocą wentylacji mechanicznej, z objętością oddechową 9,5 mililitra na kilogram masy ciała przez 10 minut i powróć do objętości oddechowej 8,5 mililitra na kilogram masy ciała.Później zamknij mięśnie głębokie prostym przerywanym szwem za pomocą jedwabiu 4-0 i połącz górne mięśnie prostym ciągłym szwem. Następnie zamknij skórę prostym ciągłym szwem. Odłącz kaniulę tchawicy od aparatu wentylacyjnego, obserwując szczura pod kątem spontanicznego oddychania.Jeśli zwierzę nie oddycha spontanicznie po odłączeniu, ponownie podłącz respirator i kontynuuj wentylację przez dodatkowe pięć minut przed powtórzeniem procedury. Po przywróceniu spontanicznego oddychania wyjmij kaniulę z tchawicy i oczyść płyn wokół tchawicy za pomocą gąbek. Zamknij tchawicę prostym szwem za pomocą 6-0 Prolenu i zamknij mięśnie podgnykowe prostym przerywanym szwem za pomocą jedwabiu 4-0.Połącz skórę w prostym, ciągłym szwie, a następnie oczyścić i zdezynfekować mięśnie i skórę za pomocą roztworu powidonu-jodudu/jodoforu. Po zakończeniu zabiegu chirurgicznego przenieś pojedyncze zwierzę do klatki rekonwalescencji z dodatkowym tlenem i lampą na podczerwień, a następnie umieść maskę tlenową blisko pyska szczura. W badaniu uwidoczniono położenie klipsa na aorcie wstępującej u zwierząt z AoB i jego brak po operacji odbandażowania lub Deb.Ponadto przepływ krwi w aorcie oceniano za pomocą obrazowania dopplerowskiego falą pulsacyjną przed i po klipsie u zwierząt AoB przed odbandażowaniem i w odpowiednich odcinkach aorty po operacji Deb. Wyniki wykazały wyraźne osłabienie gradientu przepływu krwi zgodnie z funkcjonalnym odbandażowaniem. W piątym tygodniu szczury Deb wykazywały ekspresję peptydu natriuretycznego mózgu lub BNP na poziomach porównywalnych do zwierząt pozorowanych, co wskazuje na odwrócenie niewydolności lewej komory lub LV przez odprążenie aorty.Ocena funkcji lewej komory za pomocą echokardiografii przezklatkowej wykazała zwiększoną frakcję wyrzutową lewej komory i objętość lewej komory u zwierząt Deb w porównaniu ze szczurami AoB. Operacja usunięcia pasma przeprowadzona w trzecim tygodniu po AoB spowodowała znaczne obniżenie ciśnienia skurczowego lewej komory i przerostu lewej komory w porównaniu ze zwierzętami AoB. W porównaniu ze szczurami AoB w trzecim i piątym tygodniu, zwierzęta Deb wykazały również znaczne obniżenie ciśnienia skurczowego prawej komory i przerostu prawej komory, wykazując pomyślne odwrócenie nadciśnienia płucnego z powodu choroby lewego serca.Najważniejszymi etapami tej procedury są usunięcie klipsa i rekrutacja płuca po odzespoleniu aorty. Te kroki, jeśli są wykonywane prawidłowo, zwiększają przeżywalność zwierząt.

a-model-reverse-vascular-remodeling-pulmonary-hypertension-due-to

Research

JoVE Journal

Medicine

Medycyna

Ten film demonstruje technikę odklejania aorty, która może prowadzić do odwrotnej przebudowy, aby ograniczyć postęp w kierunku niewydolności serca w modelu mysim. Po odzespoleniu znaczne zmniejszenie obciążenia następczego komór powoduje regresję przerostu komór i zwłóknienia, powodując poprawę funkcji serca.

Chirurgiczne odpaskowywanie aorty: procedura badania odwrotnej przebudowy lewej komory w mysim modelu zwężenia aorty

Opisujemy stopniową procedurę tworzenia przeciążenia ciśnieniowego i przerostu lewej komory u szczurów Wistar poprzez zwężenie aorty wstępującej za pomocą małego metalowego klipsa. Model ten jest szeroko stosowany do badania zmian przebudowy podczas przerostu mięśnia sercowego oraz do identyfikacji i oceny strategii regresji takich zmian.

Zwężenie aorty wstępującej u szczurów w celu stworzenia modelu przerostu mięśnia sercowego spowodowanego przeciążeniem ciśnieniem

Opisany jest szczurzy model zwężenia aorty brzusznej, który wywołuje przerost i przebudowę mięśnia sercowego. Skuteczna, wysoce powtarzalna i minimalnie inwazyjna metoda jest stosowana w celu zapewnienia prostej, ale użytecznej platformy do badań nad przerostem i dysfunkcją mięśnia sercowego.

Model przebudowy serca poprzez zwężenie aorty brzusznej u szczurów

Ten protokół opisuje procedurę chirurgiczną mającą na celu stworzenie modelu tętniczego nadciśnienia płucnego wywołanego przepływem (PAH) u szczurów oraz procedury analizy głównych hemodynamicznych i histologicznych punktów końcowych w tym modelu.

Chirurgia zastawkowa, cewnikowanie prawego serca i morfometria naczyniowa w modelu szczurzym dla tętniczego nadciśnienia płucnego wywołanego przepływem

Tutaj oferujemy użyteczne podejście do badania mechanizmu niewydolności prawej komory. Wygodniejsze i skuteczniejsze podejście do zwężenia tętnicy płucnej ustala się za pomocą narzędzi chirurgicznych wykonanych we własnym zakresie. Ponadto przedstawiono metody oceny jakości tego podejścia za pomocą echokardiografii i cewnikowania.

Indukcja niewydolności prawej komory przez zwężenie tętnicy płucnej i ocena funkcji prawej komory u myszy

Tutaj opisujemy krok po kroku protokół chirurgicznego usuwania aorty w dobrze znanym mysim modelu zwężenia aorty. Procedura ta pozwala nie tylko na zbadanie mechanizmów leżących u podstaw odwrotnej przebudowy lewej komory i regresji przerostu, ale także na przetestowanie nowych opcji terapeutycznych, które mogą przyspieszyć powrót do zdrowia mięśnia sercowego.

Badanie odwrotnej przebudowy lewej komory przez odpasowanie aorty u gryzoni

Opisujemy tworzenie szczurzego modelu umiarkowanego przemodelowania wywołanego przeciążeniem ciśnieniem i wczesnej dysfunkcji skurczowej, gdzie aktywowane są szlaki transdukcji sygnału zaangażowane w inicjację procesu przebudowy. Ten model zwierzęcy pomoże w identyfikacji celów molekularnych do zastosowania wczesnych strategii terapeutycznych zapobiegających przebudowie niewydolności serca.

Szczurzy model przeciążenia ciśnieniem wywołał umiarkowaną przebudowę i dysfunkcję skurczową, w przeciwieństwie do jawnej skurczowej niewydolności serca

Niniejszy protokół opisuje echokardiograficzną charakterystykę morfologii i funkcji prawej komory w szczurzym modelu tętniczego nadciśnienia płucnego.

Kompleksowa echokardiograficzna ocena funkcji prawej komory serca w szczurzym modelu tętniczego nadciśnienia płucnego

To badanie demonstruje powtarzalną technikę heterotopowego przeszczepu serca w jamie brzusznej u szczurów, którą początkujący mogą nauczyć się i wykonywać. Dodatkowo, nowy model niedomykalności zastawki aortalnej u szczurów jest generowany poprzez wykonanie heterotopowego przeszczepu serca w jamie brzusznej i uszkodzenie zastawki aortalnej dawcy za pomocą prowadnika po pobraniu.

Zmodyfikowany heterotopowy przeszczep serca w jamie brzusznej i nowy model niedomykalności zastawki aortalnej u szczurów

Niewydolność prawego serca (RHF) charakteryzuje się prawostronnym rozszerzeniem i przerostem serca, co prowadzi do nieprawidłowego funkcjonowania komór i przedsionków. Chorobom krążeniowo-oddechowym związanym z RHF towarzyszy zwiększone ryzyko zaburzeń rytmu serca. W artykule opisano standaryzowany model RHF indukowanego pasmami tętnic płucnych związanego ze zwiększoną arytmogenezą komorową i przedsionkową.

Szczurzy model prawostronnej przebudowy serca i arytmii z wykorzystaniem pasma tętnicy płucnej

Tutaj przedstawiono metodę wywoływania tętniczego nadciśnienia płucnego związanego ze zwłóknieniem płuc (PF-PH) model szczurzy poprzez wstrzykiwanie bleomycyny do dróg oddechowych. Zapewniamy również podejście krok po kroku do walidacji tego modelu zwierzęcego.

Ustalenie i walidacja szczurzego modelu tętniczego nadciśnienia płucnego związanego ze zwłóknieniem płuc

Poznaj technikę chirurgicznego usuwania opaski aortalnej u szczurów w modelu nadciśnienia płucnego. Metoda umożliwia badanie mechanizmów odwróconej przebudowy krążenia płucnego i prawej komory serca.

Model odwróconej przebudowy naczyń krwionośnych w nadciśnieniu płucnym spowodowanym chorobą lewego serca przez odcięcie aorty u szczurów (Wideo) | JoVE Journal

Model odwróconej przebudowy naczyń krwionośnych w nadciśnieniu płucnym spowodowanym chorobą lewego serca przez odcięcie aorty u szczurów

Przeglądaj więcej filmów