Name: Niezawodny model płata powięziowo-skórnego świni do badań bioinżynieryjnych unaczynionych kompozytowych przeszczepów allogenicznych (Wideo) | JoVE Journal
Uploaded: 2022-03-31T14:10:00.000+00:00
Duration: 5 min 34 s
Description: Poznaj technikę chirurgiczną tworzenia płatów powięziowo-skórnych u świni. Model ten zapewnia niezawodne unaczynienie skóry i stanowi wartościowe narzędzie do badań nad tkankami kompozytowymi.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

playerTrialDesktop

Ta praca została sfinansowana przez granty Shriners Hospitals for Children #85127 (BEU i CLC) oraz #84702 (AA). Autorzy pragną podziękować fundacji "Gueules Cassées" za wsparcie płacowe dla stypendystów zaangażowanych w ten projekt.

Wszystkie zwierzęta poddawano opiece zgodnie z wytycznymi National Institute of Health Guide for the Care and Use of Laboratory Animals. Instytucjonalna Komisja ds. Opieki i Korzystania ze Zwierząt zatwierdziła protokół eksperymentalny (protokół IACUC nr 2020N000015). Do wszystkich eksperymentów wykorzystano siedem samic świń rasy Yorkshire (20-25 kg).
1. Opieka przedoperacyjna
<ol>
	<li>Pozbaw zwierzę pokarmu stałego na 12 h przed zabiegiem.</li>
	<li>Zastosuj sedację u zwierzęcia za pomocą 4,4 mg/kg Telazolu, 2,2 mg/kg ksylazyny oraz 0,04 mg/kg (IM) siarczanu atropiny (patrz Tabela materiałów).</li>
	<li>Wprowadź obwodowy cewnik dożylny 18 G do żyły usznej.</li>
	<li>Wykonaj intubację świni przy użyciu odpowiedniej rurki endotrachealnej (dla świń o masie 10-200 kg można zastosować rurki 6-15 mm) i podłącz rurkę do respiratora. Podaj przedoperacyjne leki przeciwbólowe w postaci buprenorfiny (0,05 mg/kg, IM) (patrz Tabela materiałów).</li>
</ol>
2. Monitorowanie śródoperacyjne
<ol>
	<li>Utrzymuj znieczulenie za pomocą mieszaniny inhalacyjnej 1,5%-3% izofluranu przy przepływie tlenu 1,5 L/min.</li>
	<li>Hryglowo monitoruj częstość akcji serca, pulsoksymetrię oraz końcowowe CO2. Co 5 min oceniaj ciśnienie tętnicze oraz temperaturę ciała. 
	UWAGA: Docelowy zakres częstości akcji serca wynosi od 90 do 100 uderzeń/min, saturacja tlenem musi być wyższa niż 93%, a zakres końcowego CO2 wynosi od 5% do 6% CO2.</li>
	<li>W trakcie procedury podawaj 0,9% soli fizjologicznej w dawce 5-10 mL/kg na godzinę, aby utrzymać średnie ciśnienie tętnicze w przedziale od 60 mmHg do 90 mmHg.</li>
</ol>
3. Obustronny pobór FCF z żyły saphénous
<ol>
	<li>Umieść zwierzę w pozycji na plecach. Ogól i odkaź oba pachwiny oraz kończyny tylne, obejmując całe kończyny tylne polem operacyjnym, a następnie załóż sterylne obłożenie.</li>
	<li>Zbadaj palpacyjnie tętno tętnicy odłogowej, około 3 szerokości palców przyśrodkowo od rzepki, i oznacz to miejsce.</li>
	<li>Należy zidentyfikować i wyznaczyć granice płata. 
	UWAGA: Górna granica to oś równoległa do fałdy pachwinowej, znajdująca się 3 cm poniżej niej. Granica boczna to oś biegnąca od przedniej górnej grzebieni kości biodrowej do przyśrodkowej części rzepki.</li>
	<li>Narysuj owalny płat o średnicy 10 cm, wyśrodkowany na szypule żyły odpiszczelnej i mieszczący się w granicach płata opisanych wcześniej (krok 3.3).</li>
	<li>Wykonaj nacięcie skóry o długości 1,5 cm w obrębie dystalnej części szypuły w miejscu wyznaczonego punktu orientacyjnego płata.</li>
	<li>Należy naciąć powięź i przeprowadzićtępne rozczłonkowanie w celu odsłonięcia tętnicy saphrenous oraz dwóch towarzyszących jej żył (venae comitantes). Następnie należy wykonać podwójne podwiązanie i oddzielić je w jednym pęczku.</li>
	<li>Naciąć pozostałą skórę płata za pomocą skalpela.</li>
	<li>Użyj kauteryzatora, aby rozciąć tkankę podskórną i otaczającą powięź. Przeprowadź dokładną hemostazę za pomocą kleszczyków bipolarnych (patrz Tabela materiałów).</li>
	<li>Przymocuj komponent skórny płata do leżącej poniżej powięzi za pomocą niewchłanialnych szwów 3-0, aby uniknąć przypadkowego pociągnięcia i przerwania naczyń perforujących.</li>
	<li>Uwolnij płat od mięśnia smukłego, odwarstwiając powięź od mięśnia. 
	UWAGA: Dystalna część szypuły żyły saphynous biegnie w płaszczyźnie między mięśniem smukłym a powięzią. Odpowiednie napięcie oraz ostrożna bipolarna hemostaza gałęzi bocznych są kluczowymi elementami ułatwiającymi preparację szypuły.</li>
	<li>Za pomocą skalpela wykonaj nacięcie o długości 12 cm w fałdzie pachwinowym. Wykonaj nacięcie prostopadłe, łącząc fałd pachwinowy z proksymalną częścią płata. Odwarstw skórę i otwórz warstwę podskórną przy użyciu kauteryzacji.</li>
	<li>Kontynuuj preparowanie szypuły, prowadząc naczynia odpiszczelowe w dół w kierunku naczyń udowych. 
	UWAGA: Proksymalna część szypuły żyły odpiszczowej może przebiegać albo przez przegrodę międzymięśniową, albo zagłębiać się w mięsień smukły.</li>
	<li>Wypreparuj naczynia udowe i podwiąż je dystalnie względem odgałęzienia żyły odprzestronnej w dwóch oddzielnych wiązkach. Kontynuuj preparację naczyń udowych w kierunku proksymalnym, aż do poziomu więzadła pachwinowego. Użyj pęsety bipolarnej do koagulacji lub klipsów naczyniowych i nici jedwabnych 2-0 do podwiązania głębokich naczyń udowych, a następnie je przetnij. 
	UWAGA: Przed przecięciem naczyń można również zastosować klipsy naczyniowe.</li>
	<li>Powtórz kroki 3.2–3.13 na przeciwstronnej kończynie tylnej, aby pobrać drugi płat żyły odpiszczowej.</li>
	<li>Podaj zwierzęciu heparynę w formie wstrzyknięcia dożylnego (IV) w dawce 100 IU/kg na 5 min przed krokiem 3.16.</li>
	<li>Podwiązać szypułkę udową (tętnicę i żyłę) tak proksymalnie w stosunku do więzadła pachwinowego, jak to możliwe, a następnie oddzielić płat od świni dawcy.</li>
	<li>Rozszerzyć końce naczyń udowych i wprowadzić kaniulę do angiokatetera 20 G zarówno do tętnicy, jak i żyły. Użyć jedwabnych nici 3-0 do przymocowania kaniul do naczyń.</li>
	<li>Powoli przemywaj tętnicę płata powięziowo-skórnego 10 ml soli fizjologicznej z heparyną (100 IU/ml), aż do momentu zaobserwowania przejrzystego odpływu żylnego (Rycina 1).</li>
</ol>
<img alt="Porównanie tkanki przed i po decelularyzacją; obrazy histologiczne przy powiększeniu 50 μm, 25 μm." class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/63557/63557fig01.jpg" data-altupdatedat="1788282455000" data-alt="Rycina 1"> 
Rycina 1: Natywny i decelularyzowany płat powięziowo-skórny żyły saphienous. (A) Izolowany płat skóry z wprowadzonym do tętnicy udowej kaniulą 20 G, umożliwiającą wypłukanie krwi z płata i przeprowadzenie różnych eksperymentów (angiografii, decelularyzacji perfuzyjnej). (B) Decelularyzowany płat skóry. Decelularyzacja perfuzyjna prowadząca do uzyskania białych, acelularnych rusztowań po 10 dniach perfuzji detergentem. Barwione H&amp;E przekroje pełnej grubości (C) natywnego płata skóry i (D) decelularyzowanego płata skóry. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/63557/63557fig01large.jpg" target="_blank">Kliknij tutaj, aby zobaczyć powiększoną wersję tej ryciny.</a>
<ol start="19">
	<li>Uśmierć zwierzę poprzez dożylny wtrysk fenobarbitalu sodu (100 mg/kg). Śmierć potwierdź brakiem akcji serca oraz ruchów oddechowych.</li>
</ol>

<ol><li>Dubernard, J. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Human+hand+allograft%3A+Report+on+first+6+months%5BTitle%5D)+AND+%22The+Lancet%22%5BJournal%5D)">Human hand allograft: Report on first 6 months.</a> The Lancet. 353 (9161), 1315-1320 (1999).</li>
<li>Meningaud, J. P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Procurement+of+total+human+face+graft+for+allotransplantation%3A+A+preclinical+study+and+the+first+clinical+case%5BTitle%5D)+AND+%22Plastic+and+Reconstructive+Surgery%22%5BJournal%5D)">Procurement of total human face graft for allotransplantation: A preclinical study and the first clinical case.</a> Plastic and Reconstructive Surgery. 126 (4), 1181-1190 (2010).</li>
<li>Cetrulo, C. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Penis+transplantation%3A+First+US+experience%5BTitle%5D)+AND+%22Annals+of+Surgery%22%5BJournal%5D)">Penis transplantation: First US experience.</a> Annals of Surgery. 267 (5), 983-988 (2018).</li>
<li>Lantieri, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Face+transplant%3A+Long-term+follow-up+and+results+of+a+prospective+open+study%5BTitle%5D)+AND+%22Lancet%22%5BJournal%5D)">Face transplant: Long-term follow-up and results of a prospective open study.</a> Lancet. 388 (10052), London, England. 1398-1407 (2016).</li>
<li>Derek, E., Dhanireddy, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Immunosuppression%5BTitle%5D)+AND+%22Current+Opinion+in+Organ+Transplantation%22%5BJournal%5D)">Immunosuppression.</a> Current Opinion in Organ Transplantation. 17 (6), 616-618 (2012).</li>
<li>Lantieri, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((First+human+facial+retransplantation%3A+30-month+follow-up%5BTitle%5D)+AND+%22Lancet%22%5BJournal%5D)">First human facial retransplantation: 30-month follow-up.</a> Lancet. 396 (10264), London, England. 1758-1765 (2020).</li>
<li>Kauke, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Full+facial+retransplantation+in+a+female+patient-Technical%2C+immunologic%2C+and+clinical+considerations%5BTitle%5D)+AND+%22American+Journal+of+Transplantation%22%5BJournal%5D)">Full facial retransplantation in a female patient-Technical, immunologic, and clinical considerations.</a> American Journal of Transplantation. 21 (10), 3472-3480 (2021).</li>
<li>Leonard, D. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Vascularized+composite+allograft+tolerance+across+MHC+barriers+in+a+large+animal+model%5BTitle%5D)+AND+%22American+Journal+of+Transplantation%22%5BJournal%5D)">Vascularized composite allograft tolerance across MHC barriers in a large animal model.</a> American Journal of Transplantation. 14 (2), 343-355 (2014).</li>
<li>Kawai, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((HLA-mismatched+renal+transplantation+without+maintenance+immunosuppression%5BTitle%5D)+AND+%22The+New+England+Journal+of+Medicine%22%5BJournal%5D)">HLA-mismatched renal transplantation without maintenance immunosuppression.</a> The New England Journal of Medicine. 368 (19), 1850-1852 (2013).</li>
<li>Badylak, S. F., Taylor, D., Uygun, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Whole-organ+tissue+engineering%3A+Decellularization+and+recellularization+of+three-dimensional+matrix+scaffolds%5BTitle%5D)+AND+%22Annual+Review+of+Biomedical+Engineering%22%5BJournal%5D)">Whole-organ tissue engineering: Decellularization and recellularization of three-dimensional matrix scaffolds.</a> Annual Review of Biomedical Engineering. 13, 27-53 (2011).</li>
<li>Jank, B. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Creation+of+a+bioengineered+skin+flap+scaffold+with+a+perfusable+vascular+pedicle%5BTitle%5D)+AND+%22Tissue+Engineering+Part+A%22%5BJournal%5D)">Creation of a bioengineered skin flap scaffold with a perfusable vascular pedicle.</a> Tissue Engineering Part A. 23 (13-14), 696-707 (2017).</li>
<li>Jank, B. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Engineered+composite+tissue+as+a+bioartificial+limb+graft%5BTitle%5D)+AND+%22Biomaterials%22%5BJournal%5D)">Engineered composite tissue as a bioartificial limb graft.</a> Biomaterials. 61, 246-256 (2015).</li>
<li>Duisit, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Decellularization+of+the+porcine+ear+generates+a+biocompatible%2C+nonimmunogenic+extracellular+matrix+platform+for+face+subunit+bioengineering%5BTitle%5D)+AND+%22Annals+of+Surgery%22%5BJournal%5D)">Decellularization of the porcine ear generates a biocompatible, nonimmunogenic extracellular matrix platform for face subunit bioengineering.</a> Annals of Surgery. 267 (6), 1191-1201 (2018).</li>
<li>Lupon, E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Engineering+Vascularized+composite+allografts+using+natural+scaffolds%3A+A+systematic+review%5BTitle%5D)+AND+%22Tissue+Engineering+Part+B%3A+Reviews%22%5BJournal%5D)">Engineering Vascularized composite allografts using natural scaffolds: A systematic review.</a> Tissue Engineering Part B: Reviews. , (2021).</li>
<li>Duisit, J., Maistriaux, L., Bertheuil, N., Lellouch, A. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Engineering+vascularized+composite+tissues+by+perfusion+decellularization%2Frecellularization%3A+Review%5BTitle%5D)+AND+%22Current+Transplantation+Reports%22%5BJournal%5D)">Engineering vascularized composite tissues by perfusion decellularization/recellularization: Review.</a> Current Transplantation Reports. 8, 44-56 (2021).</li>
<li>Sullivan, T. P., Eaglstein, W. H., Davis, S. C., Mertz, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+pig+as+a+model+for+human+wound+healing%5BTitle%5D)+AND+%22Wound+Repair+and+Regeneration%3A+Official+Publication+of+the+Wound+Healing+Society+%5Band%5D+the+European+Tissue+Repair+Society%22%5BJournal%5D)">The pig as a model for human wound healing.</a> Wound Repair and Regeneration: Official Publication of the Wound Healing Society [and] the European Tissue Repair Society. 9 (2), 66-76 (2001).</li>
<li>Haughey, B. H., Panje, W. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+porcine+model+for+multiple+musculocutaneous+flaps%5BTitle%5D)+AND+%22The+Laryngoscope%22%5BJournal%5D)">A porcine model for multiple musculocutaneous flaps.</a> The Laryngoscope. 99 (2), 204-212 (1989).</li>
<li>Ibrahim, Z., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+modified+heterotopic+swine+hind+limb+transplant+model+for+translational+vascularized+composite+allotransplantation+%28VCA%29+research%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Visualized+Experiments%22%5BJournal%5D)">A modified heterotopic swine hind limb transplant model for translational vascularized composite allotransplantation (VCA) research.</a> Journal of Visualized Experiments. (80), e50475(2013).</li>
<li>Rosh, E. H., Vistnes, L. M., Ksander, G. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+panniculus+carnosus+in+the+domestic+pic%5BTitle%5D)+AND+%22Plastic+and+Reconstructive+Surgery%22%5BJournal%5D)">The panniculus carnosus in the domestic pic.</a> Plastic and Reconstructive Surgery. 59 (1), 94-97 (1977).</li>
<li>Alessa, M. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Porcine+as+a+training+module+for+head+and+neck+microvascular+reconstruction%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Visualized+Experiments%22%5BJournal%5D)">Porcine as a training module for head and neck microvascular reconstruction.</a> Journal of Visualized Experiments. (139), e58104(2018).</li>
<li>Minqiang, X., Jie, L., Dali, M., Lanhua, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Transmidline+abdominal+skin+flap+model+in+pig%3A+Refinements+and+advancements%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Reconstructive+Microsurgery%22%5BJournal%5D)">Transmidline abdominal skin flap model in pig: Refinements and advancements.</a> Journal of Reconstructive Microsurgery. 28 (02), 111-118 (2012).</li>
<li>Bodin, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Porcine+model+for+free-flap+breast+reconstruction+training%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Plastic%2C+Reconstructive+%26+Aesthetic+Surgery%22%5BJournal%5D)">Porcine model for free-flap breast reconstruction training.</a> Journal of Plastic, Reconstructive & Aesthetic Surgery. 68 (10), 1402-1409 (2015).</li>
<li>Kadono, K., Gruszynski, M., Azari, K., Kupiec-Weglinski, J. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Vascularized+composite+allotransplantation+versus+solid+organ+transplantation%3A+Innate-adaptive+immune+interphase%5BTitle%5D)+AND+%22Current+Opinion+in+Organ+Transplantation%22%5BJournal%5D)">Vascularized composite allotransplantation versus solid organ transplantation: Innate-adaptive immune interphase.</a> Current Opinion in Organ Transplantation. 24 (6), 714-720 (2019).</li>
<li>Kruit, A. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Rectus+Abdominis+flap+replantation+after+18+h+hypothermic+extracorporeal+perfusion-A+Porcine+Model%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Clinical+Medicine%22%5BJournal%5D)">Rectus Abdominis flap replantation after 18 h hypothermic extracorporeal perfusion-A Porcine Model.</a> Journal of Clinical Medicine. 10 (17), 3858(2021).</li>
</ol>

Autorzy nie mają nic do ujawnienia.

W artykule opisano wiarygodny i powtarzalny płat powięziowo-skórny pobrany z tylnych kończyn świń. Postępowanie zgodnie z tym protokołem chirurgicznym krok po kroku pozwoli na pobranie dwóch płatów tylko na jednym zwierzęciu w czasie krótszym niż 2 godziny. Najbardziej krytycznym etapem operacji jest szkieletyzacja szypułki naczyniowej we włóknach mięśniowych gracilis, co wymaga dokładnego wypreparowania przez wykwalifikowanego chirurga. Mocowanie skóry do powięzi za pomocą szwów skórnych jest kluczową wskazówką, aby uni...

Unaczynione kompozytowe alloprzeszczepy (VCA) zrewolucjonizowały leczenie trudnych do naprawienia ubytków części ciała, takich jak dłonie, twarz i penis1,2,3. Niestety, pierwsze długoterminowe wyniki 4 wykazały, że dożywotnie podawanie leków immunosupresyjnych w dużych dawkach może prowadzić do poważnych schorzeń ubocznych, w tym cukrzycy, infekcji, nowotworów i dysfunkcji naczyń krwionośnych5. Ostatnio zespoły ekspertów VCA musiały poradzić sobie z ryzykiem przewlekłego odrzucenia prowadzącego do utraty przeszczepu i przeprowadzić pierwsze przypadki retransplantacji twarzy6,7. Opisano różne strategie przezwyciężania ograniczeń immunosupresji w VCA. Pierwsza polega na ustaleniu długoterminowej tolerancji przeszczepu poprzez wywołanie immunologicznego stanu chimeryzmu mieszanego u biorcy przeszczepu allogenicznego8,9. Drugi polega na stworzeniu de novo przeszczepu specyficznego dla pacjenta za pomocą inżynierii tkankowej.
Ostatnio, decelularyzacja perfuzyjna tkanek biologicznych wygenerowała natywne rusztowania macierzy zewnątrzkomórkowej (ECM), co pozwala na zachowanie sieci naczyniowej i architektury tkankowej całych narządów10. W związku z tym recelularyzacja tych ECM z komórkami specyficznymi dla biorcy stworzyłaby spersonalizowany przeszczep wolny od ograniczeń immunologicznych. W badaniach nad bioinżynierią VCA wiele zespołów zdecellularyzowało i uzyskało taki ECM, zachowując całą architekturę11,12,13. Jednak proces recelularizacji pozostaje trudny i nie powiódł się w dużych modelach zwierzęcych14,15. Opracowanie tych przełomowych technologii stwarza zapotrzebowanie na wiarygodne i powtarzalne modele dużych kompozytowych tkanek zwierzęcych. Modele świń stanowią najwyższy wybór w procesie rozwoju bioinżynierii, ponieważ skóra świń ma najbliższe cechy anatomiczne i fizjologiczne ludzkiej skóry16. Zastosowanie płatów powięziowo-skórnych (FCF) jest idealne podczas pierwszych kroków w kierunku tworzenia "szytych na miarę" unaczynionych kompozytowych przeszczepów tkankowych. Rzeczywiście, FCF jest podstawowym modelem VCA zawierającym komórki skóry, tłuszczu, powięzi i śródbłonka. Opis płatów mięśniowo-skórnych świń17 i płatów kostno-skórnych18 można znaleźć w literaturze. Brakuje jednak skupienia się na technikach zbioru płatów powięziowo-skórnych.
Dlatego to badanie ma na celu dostarczenie badaczom szczegółowego opisu techniki pozyskiwania odpiszczeli od świń i przedstawienie wszystkich cech charakterystycznych klapy do jej zastosowania w wielu dziedzinach badawczych, zwłaszcza w inżynierii tkanek kompozytowych unaczynionych.

<table><tbody><tr><td>18 G angiocewnik</td><td>BD Insyte Autoguard</td><td>381409</td><td></td></tr><tr><td>20 G angiocewnik</td><td>BD Insyte Autoguard</td><td>381411</td><td></td></tr><tr><td>Kleszczyki do tkanek Adson, 11 cm, 1 x 2 zęby z platformą wiążącą</td><td>ASSI</td><td>ASSI. </td><td></td>ATK26426</tr><tr><td>Siarczan atropiny</td><td>AdvaCare</td><td>212-868</td><td></td></tr><tr><td>Sznury bipolarne</td><td>ASSI</td><td>228000C</td><td></td></tr><tr><td>Buprenorfina HCl</td><td>Pharmaceutical, Inc</td><td>42023-179-01</td><td></td></tr><tr><td>Kleszcze rozszerzające</td><td>Narzędzia do nauki precyzyjnej (FST)</td><td>18131-12</td><td></td></tr><tr><td>Rurka endotrachelowa</td><td>Jorgensen Labs</td><td>JO615X</td><td>rozmiar od 6 do 15 mm w zależności od waga świni</td></tr><tr><td>Ethilon 3-0 16 mm 3/8</td><td>Ethicon</td><td>MPVCP683H</td><td></td></tr><tr><td>Euthasol</td><td>Virbac AH</td><td>200-071</td><td></td></tr><tr><td>Heparin Lock Flush Solution, USP, 100 jednostek/ml</td><td>BD PosiFlush</td><td>306424</td><td></td></tr><tr><td>Isoflurane</td><td>Patterson Veterinary</td><td>14043-704-06</td><td></td></tr><tr><td>Jubilerzy Kleszcze bipolarne Non Stick 11 cm, końcówka spiczasta prosta, średnica końcówki 0,25 mm</td><td>ASSI</td><td>ASSI. </td><td></td>BPNS11223</tr><tr><td>Nożyczki Metzenbaum 180 mm</td><td>B Braun</td><td>BC606R</td><td></td></tr><tr><td>Microfil niebieski</td><td>Flow tech</td><td>LMV-120</td><td></td></tr><tr><td>Rozcieńczanie mikrofilu</td><td>Flow tech</td><td>LMV-112</td><td>kolorowe rozwiązanie do segregatorów</td></tr><tr><td>Nóż monopolarny</td><td>ASSI</td><td>221230C</td><td></td></tr><tr><td>N&deg; 15 ostrzy skalpela</td><td>Swann Morton</td><td>NS11</td><td></td></tr><tr><td>Omnipaque</td><td>General Electric</td><td>4080358</td><td>kontrastowy produkt</td></tr><tr><td>Perma-Hand Silk 3-0</td><td>Nożyczki Ethicon</td><td>A184H</td><td></td></tr> Small <tr><td>Ligaclip</td><td>Ethicon</td><td>MCM20</td><td></td></tr><tr><td>Stevens 115 mm</td><td>B Braun</td><td>BC008R</td><td></td></tr><tr><td>Telazol</td><td>Zoetis</td><td>106-111</td><td></td></tr><tr><td>Ksylamed (ksylazyna)</td><td>Bimeda</td><td>200-529</td><td></td></tr></tbody></table>

niezawodny model płata powięziowo-skórnego świni do badań bioinżynieryjnych unaczynionych kompozytowych przeszczepów allogenicznych

A Reliable Porcine Fascio-Cutaneous Flap Model for Vascularized Composite Allografts Bioengineering Studies

Unaczynione alloprzeszczepy kompozytowe (VCA), takie jak przeszczep dłoni, twarzy lub prącia, reprezentują najnowocześniejsze metody leczenia wyniszczających wad skóry, które nie przeszły przez pierwsze etapy drabiny rekonstrukcyjnej. Pomimo obiecujących wyników estetycznych i funkcjonalnych, głównym czynnikiem ograniczającym pozostaje potrzeba drastycznego stosowania immunosupresji przez całe życie i jej dobrze znane zagrożenia medyczne, zapobiegające szerszym wskazaniom. Dlatego zniesienie bariery immunologicznej w VCA jest niezbędne, aby przechylić szalę etyczną i poprawić jakość życia pacjentów przy użyciu najbardziej zaawansowanych technik chirurgicznych. Stworzenie de novo przeszczepu dostosowanego do potrzeb pacjenta jest nadchodzącym przełomem w transplantacji rekonstrukcyjnej. Korzystając z technik inżynierii tkankowej, VCA mogą zostać uwolnione od komórek dawcy i dostosowane do biorcy poprzez perfuzję-decelularyzację-recelularyzację. Aby opracować te nowe technologie, niezbędny jest wielkoskalowy zwierzęcy model VCA. Stąd płaty powięziowo-skórne świń, składające się ze skóry, tłuszczu, powięzi i naczyń, stanowią idealny model dla wstępnych badań VCA. Niemniej jednak większość modeli VCA opisanych w literaturze obejmuje mięśnie i kości. Praca ta przedstawia wiarygodną i powtarzalną technikę zbioru płatów powięziowo-skórnych odpiszczelowych u świń, które są praktycznym narzędziem dla różnych dziedzin badań, zwłaszcza unaczynionej inżynierii tkanek kompozytowych.

Przed rozpoczęciem prac na żywych zwierzętach określono położenie perforasomu żyły odłonowatej na trzech preparatach pośmiertnych (Rycina 2). Do tętnicy żyłowej wstrzyknięto kolorowy roztwór wypełniający, aby uwidocznić konkretną sieć naczyniową odchodzącą od tętnicy. Roztwór ten składa się z 10 ml niebieskiego środka glicerynowego zmieszanego z 10 ml środka rozcieńczającego (patrz Tabela materiałów). Pozwoliło to na wygenerowanie kolorowej mapy skóry unaczynionej przez tętn...

Obecny protokół opisuje model płata powięziowo-skórnego świń i jego potencjalne zastosowanie w badaniach nad unaczynionymi tkankami kompozytowymi.

Niezawodny model płata powięziowo-skórnego świni do badań bioinżynieryjnych unaczynionych kompozytowych przeszczepów allogenicznych

Vascularized Composite Allografts (VCA) such as hand, face, or penile transplant represents the cutting-edge treatment for devastating skin defects, ...

Nasz protokół opisuje kliniczne zdarzenie płatów powięziowo-skórnych u świń. Główną zaletą tej techniki jest niezawodność unaczynienia skóry. Technika chirurgiczna zapewnia odpowiednie narzędzie do badania unaczynionych samolotów kompozytowych w perfuzji maszynowej, inżynierii tkankowej i immunologii na dużym modelu zwierzęcym.Na początek zbadaj palpacyjnie puls tętnicy odpiszczelowej, która powinna znajdować się w odległości około trzech szerokości palca przyśrodkowego od rzepki, i oznacz ją. Zidentyfikuj i narysuj granice klapy. Górną granicą jest dostęp równoległy do bruzdy pachwinowej, trzy centymetry poniżej niej.A granica boczna to oś od przedniego górnego kręgosłupa biodrowego do przyśrodkowej części rzepki. Narysuj owalną klapę o średnicy 10 centymetrów, wyśrodkowaną na szypułce odpiszczelowej i zawartą w podanych granicach klapy. Wykonaj ośmiocentymetrowe nacięcie skóry w dystalnej części szypułki na punkcie orientacyjnym klapy.Otwórz powięź i sekcję, aby odsłonić tętnicę odpiszczelową i jej dwie żyły główne. Wykonaj podwójną ligaturę i rozdziel ją w jednym pakiecie. Naciąć pozostałą skórę płata ostrzem.Użyj kauteryzacji, aby otworzyć tkankę podskórną i otaczającą ją powię

a-reliable-porcine-fascio-cutaneous-flap-model-for-vascularized

Research

JoVE Journal

Bioengineering

Bioinżynieria

Unaczynione allotransplantacje kompozytowe (VCA) stały się kliniczną rzeczywistością. Jednak szerokie zastosowanie kliniczne VCA jest ograniczone przez przewlekłą wielolekową immunosupresję. Autorzy prezentują wiarygodny i powtarzalny duży model zwierzęcy do tłumaczenia nowych strategii immunomodulacyjnych, które mogą zminimalizować lub potencjalnie wyeliminować potrzebę immunosupresji w VCA.

Zmodyfikowany heterotopowy model przeszczepu kończyn tylnych świń do badań nad translacyjną unaczynioną allotransplantacją kompozytową (VCA)

Do tej pory, grube ubytki tkanek są zazwyczaj rekonstruowane za pomocą autologicznych płatów tkankowych lub tkanek zmodyfikowanych. W niniejszym protokole przedstawiamy nową metodę inżynierii unaczynionego płata tkankowego z autologiczną szypułką, która ma służyć jako substytut płatów autologicznych.

Zaprojektowana unaczyniona płat mięśniowa

Obecnie każdy rodzaj unaczynionej allotransplantacji kompozytowej zależy od długotrwałej immunosupresji, co jest trudne do wsparcia w przypadku wskazań niekrytycznych dla życia. Przedstawiamy nowy model VCA kości piszczelowej świni, który można wykorzystać do badania VCA kości i zademonstrowania zastosowania angiogenezy chirurgicznej w celu utrzymania żywotności kości bez konieczności długotrwałej modulacji immunologicznej.

Angiogeneza chirurgiczna w allotransplantacji kości piszczelowej świń: nowy model allotransplantacji kompozytowej z unaczynionymi kośćmi dużych zwierząt

Tutaj prezentujemy protokół użycia płata perforatora tętnicy nadbrzusza świni jako modułu uczenia się do rekonstrukcji mikrokrążenia głowy i szyi.

Świnia jako moduł treningowy do rekonstrukcji mikrokrążenia głowy i szyi

Unaczyniony kompozytowy przeszczep allogeniczny oferuje korzyści zmieniające życie biorcom przeszczepów, ale biologiczne przyczyny odrzucenia przeszczepu i waskulopatii pozostają słabo poznane. Przedstawiony tutaj model chirurgiczny gryzoni oferuje powtarzalny, klinicznie istotny model przeszczepu, umożliwiając naukowcom ocenę zdarzeń odrzucenia przeszczepu i potencjalnych strategii terapeutycznych zapobiegających ich wystąpieniu.

Zmodyfikowany heterotopowy model płata kostno-skórnego kończyn tylnych u szczura do translacyjnych badań nad allotransplantacją unaczynionych kompozytów

Protokół opisuje chirurgiczne pobieranie i późniejszą decelularyzację unaczynionych płatów świńskich poprzez perfuzję detergentu z dodecylosiarczanu sodu przez unaczynienie płata w dostosowanym bioreaktorze perfuzyjnym.

Pobieranie i perfuzja-decelularyzacja unaczynionych płatów świń w niestandardowym bioreaktorze perfuzyjnym

Ten protokół opisuje pobieranie, zszywanie i monitorowanie płatów powięziowo-skórnych u szczurów, które pozwalają na dobrą wizualizację i manipulację przepływem krwi przez powierzchowne dolne naczynia nadbrzusza za pomocą zaciskania i podwiązywania naczyń udowych. Ma to kluczowe znaczenie dla badań obejmujących wstępne kondycjonowanie niedokrwienne.

Powierzchowny dolny płat osiowy tętnicy nadbrzusza do badania efektów kondycjonowania wstępnego niedokrwiennego w modelu szczurzym

Protokół ten opisuje technikę chirurgiczną pobierania ludzkiego modelu płata perforatora opartego na głębokim dolnym szypułku tętnicy nadbrzuszkowej, przeznaczonego do badań eksperymentalnych.

Eksperymentalny ludzki model płatów DIEP do badania strategii zachowania dla naczyniowych allograftów kompozytowych i płatów wolnych

Protokół ten szczegółowo opisuje technikę chirurgiczną stosowaną do pobrania i przygotowania pełnego przeszczepu twarzy do przeszczepu u pacjentów z poważnymi zniekształceniami twarzy, koncentrując się głównie na pobieraniu tkanek miękkich z ograniczonym pobraniem kości ograniczonym do struktury nosa.

Podejście chirurgiczne do pełnego pobrania przeszczepu przeszczepów twarzy tkanek miękkich dla naczyńsko-kompozytowej allotransplantacji

Trójwymiarowa komora przepływowa to nowatorska technologia in vitro do ilościowej i stopniowej oceny kaskady wynaczynień komórek krążących w warunkach fizjologicznego stresu ścinającego. W związku z tym urządzenie spełnia krytyczną potrzebę podstawowych, przedklinicznych i klinicznych badań migracji komórek.

Nowatorskie trójwymiarowe urządzenie z komorą przepływową do badania wynaczynienia komórek krążących w fizjologicznych warunkach przepływu kierowanego przez chemokinę

Poznaj technikę chirurgiczną tworzenia płatów powięziowo-skórnych u świni. Model ten zapewnia niezawodne unaczynienie skóry i stanowi wartościowe narzędzie do badań nad tkankami kompozytowymi.

Niezawodny model płata powięziowo-skórnego świni do badań bioinżynieryjnych unaczynionych kompozytowych przeszczepów allogenicznych (Wideo) | JoVE Journal

Niezawodny model płata powięziowo-skórnego świni do badań bioinżynieryjnych unaczynionych kompozytowych przeszczepów allogenicznych

Przeglądaj więcej filmów