Name: Test pustej przestrzeni w czasie rzeczywistym (Wideo) | JoVE Journal
Uploaded: 2023-02-10T12:00:00.000+00:00
Duration: 6 min 39 s
Description: Poznaj metodę RT-VSA do badania zachowań mikcyjnych myszy w czasie rzeczywistym. Technika ta dostarcza szczegółowych danych czasowych, przestrzennych i objętościowych o oddawaniu moczu w fazie światła i ciemności.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

Praca ta była wspierana przez R01DK119183 grantu NIH (dla GA i MDC), nagrodę za projekt pilotażowy za pośrednictwem P30DK079307 (dla MGD), nagrodę American Urology Association Career Development i grant Fundacji Winters (dla NM) oraz przez Cell Physiology and Model Organisms Kidney Imaging Cores z Pittsburgh Center for Kidney Research (P30DK079307).

<ol><li>Dalghi, M. G., Montalbetti, N., Carattino, M. D., Apodaca, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+urothelium%3A+life+in+a+liquid+environment%5BTitle%5D)+AND+%22Physiological+Reviews%22%5BJournal%5D)">The urothelium: life in a liquid environment.</a> Physiological Reviews. 100 (4), 1621(2020).</li>
<li>de Groat, W. C., Griffiths, D., Yoshimura, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Neural+control+of+the+lower+urinary+tract%5BTitle%5D)+AND+%22Comprehensive+Physiology%22%5BJournal%5D)">Neural control of the lower urinary tract.</a> Comprehensive Physiology. 5 (1), 327(2015).</li>
<li>Dalghi, M. G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Functional+roles+for+PIEZO1+and+PIEZO2+in+urothelial+mechanotransduction+and+lower+urinary+tract+interoception%5BTitle%5D)+AND+%22JCI+Insight%22%5BJournal%5D)">Functional roles for PIEZO1 and PIEZO2 in urothelial mechanotransduction and lower urinary tract interoception.</a> JCI Insight. 6 (19), (2021).</li>
<li>Montalbetti, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Bladder+infection+with+uropathogenic+Escherichia+coli+increases+the+excitability+of+afferent+neurons%5BTitle%5D)+AND+%22American+Journal+of+Physiology.+Renal+Physiology%22%5BJournal%5D)">Bladder infection with uropathogenic Escherichia coli increases the excitability of afferent neurons.</a> American Journal of Physiology. Renal Physiology. 322 (1), 1(2022).</li>
<li>Montalbetti, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Increased+urothelial+paracellular+transport+promotes+cystitis%5BTitle%5D)+AND+%22American+Journal+of+Physiology.+Renal+Physiology%22%5BJournal%5D)">Increased urothelial paracellular transport promotes cystitis.</a> American Journal of Physiology. Renal Physiology. 309 (12), 1070(2015).</li>
<li>Montalbetti, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Urothelial+tight+junction+barrier+dysfunction+sensitizes+bladder+afferents%5BTitle%5D)+AND+%22eNeuro%22%5BJournal%5D)">Urothelial tight junction barrier dysfunction sensitizes bladder afferents.</a> eNeuro. 4 (3), (2017).</li>
<li>Montalbetti, N., Stocker, S. D., Apodaca, G., Bastacky, S. I., Carattino, M. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Urinary+K%2B+promotes+irritative+voiding+symptoms+and+pain+in+the+face+of+urothelial+barrier+dysfunction%5BTitle%5D)+AND+%22Scientific+Reports%22%5BJournal%5D)">Urinary K+ promotes irritative voiding symptoms and pain in the face of urothelial barrier dysfunction.</a> Scientific Reports. 9 (1), 5509(2019).</li>
<li>Kim, A. K., Hamadani, C., Zeidel, M. L., Hill, W. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Urological+complications+of+obesity+and+diabetes+in+males+and+females+of+three+mouse+models%3A+temporal+manifestations%5BTitle%5D)+AND+%22American+Journal+of+Physiology.+Renal+Physiology%22%5BJournal%5D)">Urological complications of obesity and diabetes in males and females of three mouse models: temporal manifestations.</a> American Journal of Physiology. Renal Physiology. 318 (1), 160(2020).</li>
<li>Bartolone, S. N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Micturition+defects+and+altered+bladder+function+in+the+klotho+mutant+mouse+model+of+aging%5BTitle%5D)+AND+%22American+Journal+of+Clinical+and+Experimental+Urology%22%5BJournal%5D)">Micturition defects and altered bladder function in the klotho mutant mouse model of aging.</a> American Journal of Clinical and Experimental Urology. 8 (3), (2020).</li>
<li>de Rijk, M. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Aging-associated+changes+in+oxidative+stress+negatively+impacts+the+urinary+bladder+urothelium%5BTitle%5D)+AND+%22International+Neurourology+Journal%22%5BJournal%5D)">Aging-associated changes in oxidative stress negatively impacts the urinary bladder urothelium.</a> International Neurourology Journal. 26 (2), 111(2022).</li>
<li>Coyne, K. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+prevalence+of+lower+urinary+tract+symptoms+%28LUTS%29+and+overactive+bladder+%28OAB%29+by+racial%2Fethnic+group+and+age%3A+results+from+OAB-POLL%5BTitle%5D)+AND+%22Neurourology+and+Urodynamics%22%5BJournal%5D)">The prevalence of lower urinary tract symptoms (LUTS) and overactive bladder (OAB) by racial/ethnic group and age: results from OAB-POLL.</a> Neurourology and Urodynamics. 32 (3), 230(2013).</li>
<li>Wittig, L., Carlson, K. V., Andrews, J. M., Crump, R. T., Baverstock, R. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Diabetic+bladder+dysfunction%3A+a+review%5BTitle%5D)+AND+%22Urology%22%5BJournal%5D)">Diabetic bladder dysfunction: a review.</a> Urology. 123, (2019).</li>
<li>Irwin, D. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Population-based+survey+of+urinary+incontinence%2C+overactive+bladder%2C+and+other+lower+urinary+tract+symptoms+in+five+countries%3A+results+of+the+EPIC+study%5BTitle%5D)+AND+%22European+Urology%22%5BJournal%5D)">Population-based survey of urinary incontinence, overactive bladder, and other lower urinary tract symptoms in five countries: results of the EPIC study.</a> European Urology. 50 (6), 1314(2006).</li>
<li>Bogart, L. M., Berry, S. H., Clemens, J. Q. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Symptoms+of+interstitial+cystitis%2C+painful+bladder+syndrome+and+similar+diseases+in+women%3A+a+systematic+review%5BTitle%5D)+AND+%22The+Journal+of+Urology%22%5BJournal%5D)">Symptoms of interstitial cystitis, painful bladder syndrome and similar diseases in women: a systematic review.</a> The Journal of Urology. 177 (2), 450(2007).</li>
<li>Foxman, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Urinary+tract+infection+syndromes%3A+occurrence%2C+recurrence%2C+bacteriology%2C+risk+factors%2C+and+disease+burden%5BTitle%5D)+AND+%22Infectious+Disease+Clinics+of+North+America%22%5BJournal%5D)">Urinary tract infection syndromes: occurrence, recurrence, bacteriology, risk factors, and disease burden.</a> Infectious Disease Clinics of North America. 28 (1), 1(2014).</li>
<li>Fall, M., Logadottir, Y., Peeker, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Interstitial+cystitis+is+bladder+pain+syndrome+with+Hunner%27s+lesion%5BTitle%5D)+AND+%22International+Journal+of+Urology%22%5BJournal%5D)">Interstitial cystitis is bladder pain syndrome with Hunner's lesion.</a> International Journal of Urology. 21, 79(2014).</li>
<li>Birder, L. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Urinary+bladder%2C+cystitis+and+nerve%2Furothelial+interactions%5BTitle%5D)+AND+%22Autonomic+Neuroscience%3A+Basic+%26+Clinical%22%5BJournal%5D)">Urinary bladder, cystitis and nerve/urothelial interactions.</a> Autonomic Neuroscience: Basic & Clinical. 182, 89(2014).</li>
<li>Rosen, J. M., Klumpp, D. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mechanisms+of+pain+from+urinary+tract+infection%5BTitle%5D)+AND+%22International+Journal+of+Urology.+21+Suppl%22%5BJournal%5D)">Mechanisms of pain from urinary tract infection.</a> International Journal of Urology. 21 Suppl. 1, 26(2014).</li>
<li>Birder, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Neural+control+of+the+lower+urinary+tract%3A+peripheral+and+spinal+mechanisms%5BTitle%5D)+AND+%22Neurourology+and+Urodynamics%22%5BJournal%5D)">Neural control of the lower urinary tract: peripheral and spinal mechanisms.</a> Neurourology and Urodynamics. 29 (1), 128(2010).</li>
<li>Desjardins, C., Maruniak, J. A., Bronson, F. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Social+rank+in+house+mice%3A+differentiation+revealed+by+ultraviolet+visualization+of+urinary+marking+patterns%5BTitle%5D)+AND+%22Science%22%5BJournal%5D)">Social rank in house mice: differentiation revealed by ultraviolet visualization of urinary marking patterns.</a> Science. 182 (4115), 939(1973).</li>
<li>Sugino, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Voided+stain+on+paper+method+for+analysis+of+mouse+urination%5BTitle%5D)+AND+%22Neurourology+and+Urodynamics%22%5BJournal%5D)">Voided stain on paper method for analysis of mouse urination.</a> Neurourology and Urodynamics. 27 (6), 548(2008).</li>
<li>Hill, W. G., Zeidel, M. L., Bjorling, D. E., Vezina, C. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Void+spot+assay%3A+recommendations+on+the+use+of+a+simple+micturition+assay+for+mice%5BTitle%5D)+AND+%22American+Journal+of+Physiology.+Renal+Physiology%22%5BJournal%5D)">Void spot assay: recommendations on the use of a simple micturition assay for mice.</a> American Journal of Physiology. Renal Physiology. 315 (5), (2018).</li>
<li>Rajandram, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Intact+urothelial+barrier+function+in+a+mouse+model+of+ketamine-induced+voiding+dysfunction%5BTitle%5D)+AND+%22American+Journal+of+Physiology.+Renal+Physiology%22%5BJournal%5D)">Intact urothelial barrier function in a mouse model of ketamine-induced voiding dysfunction.</a> American Journal of Physiology. Renal Physiology. 310 (9), (2016).</li>
<li>Ruetten, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+uropathogenic+E.+coli+UTI89+model+of+prostatic+inflammation+and+collagen+accumulation+for+use+in+studying+aberrant+collagen+production+in+the+prostate%5BTitle%5D)+AND+%22American+Journal+of+Physiology.+Renal+Physiology%22%5BJournal%5D)">A uropathogenic E. coli UTI89 model of prostatic inflammation and collagen accumulation for use in studying aberrant collagen production in the prostate.</a> American Journal of Physiology. Renal Physiology. 320 (1), 31(2021).</li>
<li>Wegner, K. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Void+spot+assay+procedural+optimization+and+software+for+rapid+and+objective+quantification+of+rodent+voiding+function%2C+including+overlapping+urine+spots%5BTitle%5D)+AND+%22American+Journal+of+Physiology.+Renal+Physiology%22%5BJournal%5D)">Void spot assay procedural optimization and software for rapid and objective quantification of rodent voiding function, including overlapping urine spots.</a> American Journal of Physiology. Renal Physiology. 315 (4), (2018).</li>
<li>Wood, R., Eichel, L., Messing, E. M., Schwarz, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Automated+noninvasive+measurement+of+cyclophosphamide-induced+changes+in+murine+voiding+frequency+and+volume%5BTitle%5D)+AND+%22The+Journal+of+Urology%22%5BJournal%5D)">Automated noninvasive measurement of cyclophosphamide-induced changes in murine voiding frequency and volume.</a> The Journal of Urology. 165 (2), 653(2001).</li>
<li>Dmochowski, R. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Bladder+outlet+obstruction%3A+etiology+and+evaluation.+Reviews+in+Urology%5BTitle%5D)+AND+%227+%28Suppl+6%29%2C+S3%E2%80%93S13%22%5BJournal%5D)">Bladder outlet obstruction: etiology and evaluation. Reviews in Urology.</a> 7 (Suppl 6), S3–S13. , (2005).</li>
<li>Aizawa, N., Homma, Y., Igawa, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Influence+of+high+fat+diet+feeding+for+20+weeks+on+lower+urinary+tract+function+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Lower+Urinary+Tract+Symptoms%22%5BJournal%5D)">Influence of high fat diet feeding for 20 weeks on lower urinary tract function in mice.</a> Lower Urinary Tract Symptoms. 5 (2), 101(2013).</li>
<li>Wang, Z., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Void+sorcerer%3A+an+open+source%2C+open+access+framework+for+mouse+uroflowmetry%5BTitle%5D)+AND+%22American+Journal+of+Clinical+and+Experimental+Urology%22%5BJournal%5D)">Void sorcerer: an open source, open access framework for mouse uroflowmetry.</a> American Journal of Clinical and Experimental Urology. 7 (3), 170(2019).</li>
<li>Verstegen, A. M., Tish, M. M., Szczepanik, L. P., Zeidel, M. L., Geerling, J. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Micturition+video+thermography+in+awake%2C+behaving+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Neuroscience+Methods%22%5BJournal%5D)">Micturition video thermography in awake, behaving mice.</a> Journal of Neuroscience Methods. 331, 108449(2020).</li>
<li>Keller, J. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Voluntary+urination+control+by+brainstem+neurons+that+relax+the+urethral+sphincter%5BTitle%5D)+AND+%22Nature+Neuroscience%22%5BJournal%5D)">Voluntary urination control by brainstem neurons that relax the urethral sphincter.</a> Nature Neuroscience. 21 (9), (2018).</li>
<li>Hou, X. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Central+control+circuit+for+context-dependent+micturition%5BTitle%5D)+AND+%22Cell%22%5BJournal%5D)">Central control circuit for context-dependent micturition.</a> Cell. 167 (1), 73(2016).</li>
<li>Negoro, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Involvement+of+urinary+bladder+Connexin43+and+the+circadian+clock+in+coordination+of+diurnal+micturition+rhythm%5BTitle%5D)+AND+%22Nature+Communication%22%5BJournal%5D)">Involvement of urinary bladder Connexin43 and the circadian clock in coordination of diurnal micturition rhythm.</a> Nature Communication. 3, (2012).</li>
<li>Montalbetti, N., Carattino, M. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Acid-sensing+ion+channels+modulate+bladder+nociception%5BTitle%5D)+AND+%22American+Journal+of+Physiology.+Renal+Physiology%22%5BJournal%5D)">Acid-sensing ion channels modulate bladder nociception.</a> American Journal of Physiology. Renal Physiology. 321 (5), (2021).</li>
<li>Chen, H., Zhang, L., Hill, W. G., Yu, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Evaluating+the+voiding+spot+assay+in+mice%3A+a+simple+method+with+complex+environmental+interactions%5BTitle%5D)+AND+%22American+Journal+of+Physiology.+Renal+Physiology%22%5BJournal%5D)">Evaluating the voiding spot assay in mice: a simple method with complex environmental interactions.</a> American Journal of Physiology. Renal Physiology. 313 (6), (2017).</li>
<li>Dalghi, M. G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Expression+and+distribution+of+PIEZO1+in+the+mouse+urinary+tract%5BTitle%5D)+AND+%22American+Journal+of+Physiology.+Renal+Physiology%22%5BJournal%5D)">Expression and distribution of PIEZO1 in the mouse urinary tract.</a> American Journal of Physiology. Renal Physiology. 317 (2), 303(2019).</li>
<li>Birder, L., Andersson, K. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Animal+modelling+of+interstitial+cystitis%2Fbladder+pain+syndrome%5BTitle%5D)+AND+%22International+Neurourology+Journal%22%5BJournal%5D)">Animal modelling of interstitial cystitis/bladder pain syndrome.</a> International Neurourology Journal. 22, (2018).</li>
<li>Okinami, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Altered+detrusor+gap+junction+communications+induce+storage+symptoms+in+bladder+inflammation%3A+a+mouse+cyclophosphamide-induced+model+of+cystitis%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+One%22%5BJournal%5D)">Altered detrusor gap junction communications induce storage symptoms in bladder inflammation: a mouse cyclophosphamide-induced model of cystitis.</a> PLoS One. 9 (8), (2014).</li>
<li>Tungtur, S. K., Nishimune, N., Radel, J., Nishimune, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mouse+Behavior+Tracker%3A+An+economical+method+for+tracking+behavior+in+home+cages%5BTitle%5D)+AND+%22Biotechniques%22%5BJournal%5D)">Mouse Behavior Tracker: An economical method for tracking behavior in home cages.</a> Biotechniques. 63 (5), (2017).</li>
<li>Negoro, H., Kanematsu, A., Yoshimura, K., Ogawa, O. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Chronobiology+of+micturition%3A+putative+role+of+the+circadian+clock%5BTitle%5D)+AND+%22The+Journal+of+Urology%22%5BJournal%5D)">Chronobiology of micturition: putative role of the circadian clock.</a> The Journal of Urology. 190 (3), (2013).</li>
</ol>

Autorzy nie mają nic do ujawnienia.

Zastosowanie monitoringu wizyjnego jest opłacalną modyfikacją, która ma kilka zalet w porównaniu z klasycznym VSA. W klasycznym VSA, który jest zwykle używany jako test punktu końcowego, trudno jest odróżnić nakładające się na siebie puste miejsca. Nie jest to błahy problem, ponieważ myszy mają tendencję do wielokrotnego oddawania moczu w tym samym obszarze, gdy test jest przedłużony o kilka godzin, zwykle w rogach klatki. Tak więc pierwszą zaletą RT-VSA jest to, że badacz może łatwo zidentyfikować poszczególne miejsca, ...

Magazynowanie moczu i oddawanie moczu są koordynowane przez centralny obwód (ośrodkowy układ nerwowy), który otrzymuje informacje o stanie napełnienia pęcherza przez nerwy miednicy i podbrzusza. Nabłonek dróg moczowych wyściełający drogi moczowe od miedniczki nerkowej do bliższej cewki moczowej tworzy ścisłą barierę dla produktów przemiany materii i patogenów obecnych w moczu. Jest to integralny składnik sieci czuciowej, która wyczuwa i komunikuje stan wypełnienia pęcherza moczowego do leżących poniżej tkanek i nerwów doprowadzających1,2. Przerwanie bariery urotelialnej lub zmiany w szlakach mechanotransdukcji urotelialnej mogą prowadzić do dysfunkcji oddawania moczu wraz z objawami ze strony dolnych dróg moczowych, takimi jak częstotliwość, parcie naglące, moczenie nocne i nietrzymanie moczu3,4,5,6,7. Podobnie starzenie się, cukrzyca, infekcje dolnych dróg moczowych, śródmiąższowe zapalenie pęcherza moczowego i inne procesy chorobowe, które wpływają na pęcherz moczowy lub związane z nim obwody kontrolujące jego funkcję, są znane z powodowania dysfunkcji pęcherza moczowego8,9,10,11,12,13,14,15,16,17,18,19. Lepsze zrozumienie normalnych i nieprawidłowych zachowań związanych z oddawaniem moczu zależy od opracowania metod, które mogą niezawodnie rozróżniać różne wzorce oddawania moczu. 
Tradycyjnie, dobrowolne oddawanie moczu przez myszy było badane za pomocą testu mimicznego miejsca (VSA), opracowanego przez Desjardinsa i współpracowników20, i szeroko przyjętego ze względu na jego prostotę, niski koszt i nieinwazyjne podejście8,21,22,23,24. Ten test jest zwykle wykonywany jako test końcowy, w którym mysz spędza określoną ilość czasu w klatce wyłożonej bibułą filtracyjną, która jest następnie analizowana poprzez zliczenie liczby i ocenę wielkości plamek moczu, gdy bibuła filtracyjna jest umieszczana w świetle ultrafioletowym (UV) (plamki moczu fluoryzują w tych warunkach)20. Pomimo tych wielu zalet, tradycyjny VSA ma pewne poważne ograniczenia. Ponieważ myszy często oddają mocz w tych samych miejscach, badacze muszą ograniczyć czas trwania testu do stosunkowo krótkiego okresu czasu (≤4 godziny)25. Nawet jeśli VSA jest wykonywany w krótszych okresach czasu, prawie niemożliwe jest usunięcie małych pustych plamek (SVS), które opadają na duże puste miejsca, lub odróżnienie SVS od przenoszenia moczu przylegającego do ogonów lub łap. Bardzo trudno jest również odróżnić, czy SVS są konsekwencją częstych, ale indywidualnych zdarzeń związanych z oddawaniem moczu (fenotyp, który często obserwuje się w odpowiedzi na zapalenie pęcherza moczowego4,26), czy też z powodu dryblingu po mikcji (fenotyp związany z niedrożnością ujścia pęcherza moczowego27). Co więcej, chęć wykonania testu w godzinach pracy, w połączeniu z trudnościami w dostępie do pomieszczeń mieszkalnych przy wyłączonym świetle, często ogranicza te testy do okresu świetlnego 24-godzinnego cyklu okołodobowego. W związku z tym te ograniczenia czasowe uniemożliwiają ocenę zachowania myszy w zakresie oddawania moczu podczas ich aktywnej fazy nocnej, zmniejszając zdolność do analizowania określonych genów lub zabiegów, które są regulowane przez rytmy okołodobowe. 
Aby przezwyciężyć niektóre z tych ograniczeń, badacze opracowali alternatywne metody oceny zachowania związanego z oddawaniem moczu w czasie rzeczywistym26,28,29,30,31,32. Niektóre z tych podejść obejmują użycie drogiego sprzętu, takiego jak klatki metaboliczne26,28,29, lub użycie kamer termowizyjnych30; Jednak one również mają ograniczenia. Na przykład w klatkach metabolicznych mocz ma tendencję do przylegania do drutów dna siatkowego i do ścianek lejka, zmniejszając ilość moczu, który jest zbierany i mierzony. W związku z tym dokładne zbieranie danych o małych pustkach może być trudne. Co więcej, klatki metaboliczne nie dostarczają informacji o przestrzennym rozkładzie zdarzeń mikcji (tj. oddawanie moczu w rogach w porównaniu ze środkiem komory). Biorąc pod uwagę, że promieniowanie podczerwone o dużej długości fali używane przez kamery termograficzne nie przenika do ciał stałych, aktywność mikcji oceniana za pomocą termografii wideo musi być wykonywana w systemie otwartym, co może być trudne w przypadku aktywnych myszy, ponieważ mogą one skakać na kilka cali w powietrzu. Innym systemem jest zautomatyzowane podejście do usuwania plam na papierze (aVSOP), 33, które składa się ze zwiniętej bibuły filtracyjnej, która zwija się ze stałą prędkością poniżej podłogi z siatki drucianej klatki dla myszy. Takie podejście zapobiega uszkodzeniom papieru i nakładaniu się plam moczowych, które występują w klasycznym VSA, a jego wdrożenie pozwala badaczowi na przeprowadzanie eksperymentów przez kilka dni. Nie zapewnia jednak badaczowi dokładnego czasu zdarzeń związanych z mikcją, a także nie ma możliwości zbadania zachowania i tego, jak koreluje ono z wykrywaniem. Aby uzyskać te informacje, naukowcy włączyli monitoring wideo do testów mikcji, podejście, które umożliwia jednoczesną ocenę aktywności myszy i zdarzeń związanych z oddawaniem moczu31,32. Jedno z podejść polega na umieszczeniu diody elektroluminescencyjnej (LED) i kamery wideo z filtrem białkowym z zielonej fluorescencji pod eksperymentalną klatką w celu wizualizacji zdarzeń mikcji, a także diody LED na podczerwień i kamery wideo nad klatką w celu uchwycenia pozycji myszy32. Ta konfiguracja została wykorzystana do monitorowania zachowania pustki podczas wykonywania fotometrii światłowodowej; Jednak jasno oświetlone otoczenie tego systemu wymagało od badaczy potraktowania myszy środkiem moczopędnym w celu stymulacji mikcji. W innym eksperymentalnym projekcie kamery szerokokątne umieszczono powyżej i poniżej eksperymentalnej klatki, aby zobrazować odpowiednio aktywność motoryczną myszy i zdarzenia oddawania moczu. W tym przypadku plamy moczu osadzone na bibule filtracyjnej wyściełającej podłogę klatki zostały ujawnione poprzez oświetlenie bibuły filtracyjnej lampami UV umieszczonymi pod klatką31. Ta konfiguracja została wykorzystana w krótkich testach, trwających 4 minuty, podczas lekkiej fazy dnia, w celu zbadania neuronów pnia mózgu zaangażowanych w dobrowolne zachowanie związane z mikcją31. Nie podano przydatności tego systemu do stosowania w fazie ciemnej lub w okresach czasu >4 min. 
W tym artykule opisana jest metoda, która rozszerza tradycyjne VSA, pozwalając na długoterminowe monitorowanie wideo zachowania myszy podczas mikowania. To ekonomiczne podejście dostarcza czasowych, przestrzennych i wolumetrycznych informacji o zdarzeniach opróżniania przez dłuższy czas w jasnych i ciemnych fazach dnia, wraz ze szczegółami związanymi z zachowaniem myszy3,4,34. Podane są szczegółowe informacje dotyczące budowy komór opróżniania, wdrożenia VSA W CZASIE RZECZYWISTYM (RT-VSA) oraz analizy danych. RT-VSA jest cenny dla badaczy dążących do zrozumienia mechanizmów fizjologicznych kontrolujących funkcję układu moczowego, do opracowania farmakologicznych podejść do kontroli mikcji oraz do zdefiniowania molekularnych podstaw procesów chorobowych, które wpływają na dolne drogi moczowe.

<table><tbody><tr><td>1,00" X 1,00 cala Profil z rowkiem teowym - cztery otwarte rowki teowe &ndash; &nbsp; cięte do 10 cali</td><td>80/20</td><td>1010</td><td>Ilość: 20</td></tr><tr><td>1.00" X 1,00 cala Profil z rowkiem teowym - cztery otwarte rowki teowe &ndash; &nbsp; cięte do 12 cali</td><td>80/20</td><td>1010</td><td>Ilość: 6</td></tr><tr><td>1.00" X 1,00 cala Profil z rowkiem teowym - cztery otwarte rowki teowe &ndash; &nbsp; cięte do 40 cali</td><td>80/20</td><td>1010</td><td>Ilość: 4</td></tr><tr><td>1.00" X 1,00 cala Profil z rowkiem teowym - cztery otwarte rowki teowe &ndash; cięte do 14,75 cala</td><td>80/20</td><td>1010</td><td>Ilość: 12</td></tr><tr><td>1,00" X 1,00 cala Profil z rowkiem teowym - cztery otwarte rowki teowe &ndash; Przyciąć do 32 cali</td><td>80/20</td><td>1010</td><td>Ilość: 5</td></tr><tr><td>1/4-20 Podwójnie wsuwana ekonomiczna nakrętka teowa</td><td>80/20</td><td>3280</td><td>Ilość: 16</td></tr><tr><td>1/4-20 Potrójnie wsuwana ekonomiczna nakrętka teowa</td><td>80/20</td><td>3287</td><td>Ilość: 18</td></tr><tr><td>10 i 25 Seria 2 Otwór - 18mm Kątownik narożny z rowkiem wewnętrznym z podwójnym wspornikiem</td><td>80/20</td><td>14061</td><td>Ilość: 6</td></tr><tr><td>10 Otwór serii 3 - prosta płaska płyta</td><td>80/20</td><td>4118</td><td>Ilość: 8</td></tr><tr><td>10 Seria 5 Otwór - Płaska płyta "L"</td><td>80/20</td><td>4081</td><td>Ilość: 8</td></tr><tr><td>10 Seria 5 Otwór - Płaska płyta "T"</td><td>80/20</td><td>4080</td><td>Ilość: 8</td></tr><tr><td>10 Seria 5 Otwór - Trójnik Płaski</td><td>80/20</td><td>4140</td><td>Ilość: 2</td></tr><tr><td>Standardowy zawias podnoszony serii 10 - prawy</td><td>80/20</td><td>2064</td><td>Ilość: 2</td></tr><tr><td>10 do 15 Seria 2 otwory - Lite Transition Inside Corner Bracket</td><td>80/20</td><td>4509</td><td>Ilość: 6</td></tr><tr><td>24-calowych lamp UV</td><td>ADJ Products LLC</td><td>T8-F20BLB24</td><td>Ilość: 2 Żarówka 20 W & ndash; 24" Długość fali: 365nm</td></tr><tr><td>Akrylowy arkusz lustra</td><td>Profesional Plastics</td><td></td><td>Ilość: 1 82,5 cm x 26,5 cm</td></tr><tr><td>Akrylowy arkusz lustra</td><td>Profesional Plastics</td><td></td><td>Ilość: 2 26,5 cm X 30,5 cm</td></tr><tr><td>Akrylowy arkusz lustra</td><td>Profesional Plastics</td><td></td><td>Ilość: 2 82,5 cm x 30,5 cm</td></tr><tr><td>Poliwęglan AR (odporność na promieniowanie UV)</td><td>80/20</td><td>65-2641</td><td>Ilość: 2 4,5 mm gruby, przezroczysty, 38,5 cm x 26,5 cm</td></tr><tr><td>Poliwęglan AR (odporny na promieniowanie UV)</td><td>80/20</td><td>65-2641</td><td>Ilość: 4 4,5 mm gruby, przezroczysty, 38,5 cm x 21,5 cm</td></tr><tr><td>Poliwęglan AR (odporny na promieniowanie UV)</td><td>80/20</td><td>65-2641</td><td>Ilość: 4 4,5 mm gruby, przezroczysty, 26,5 cm x 21,5 cm</td></tr><tr><td>Poliwęglan AR (odporny na promieniowanie UV)</td><td>80/20</td><td>65-2641</td><td>Ilość: 4 Grubość 4,5 mm, przezroczysty 37,5 cm x 23,9 cm</td></tr><tr><td>Poliwęglan AR (odporność na promieniowanie UV)</td><td>80/20</td><td>65-2641</td><td>Ilość: 4 Grubość 4,5 mm, przezroczysty, 24,4 cm x 23,9 cm</td></tr><tr><td>Bibuła chromatograficzna (cienki papier)</td><td>&nbsp; Bibuła Thermo Fisher Scientific</td><td>57144</td><td></td></tr><tr><td>Cosmos (gruby papier)</td><td>Blick Art Materials</td><td>10422-1005</td><td></td></tr><tr><td>Excel</td><td>Microsoft Corporation</td><td></td><td></td></tr><tr><td>GraphPad Prism</td><td>GraphPad Software</td><td>Wersja 9.4.0</td><td>oprogramowanie do tworzenia wykresów i statystyk</td></tr><tr><td>ImageJ FIDŻI</td><td>NIH</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Parafilm</td><td>Merck</td><td></td><td>folia przezroczysta</td></tr><tr><td>Oprogramowanie Quick Time Player 10.5&nbsp;</td><td>Odtwarzacz multimedialny</td> <td>Apple</td><td></td></tr><tr><td>Szpieg</td><td>bezpieczeństwa Oprogramowanie</td><td></td> Ben <td>system oprogramowania do nadzoru wideo</td></tr><tr><td>Standardowe zapięcie końcowe, 1/4-20</td><td>80/20</td><td>3381</td><td>Ilość: 80</td></tr><tr><td>Akryl przepuszczający promieniowanie UV</td><td>Spartech</td><td>Polycast Solacryl SUVT</td><td>Ilość: 2 38,5 cm x 26,5 cm&nbsp;</td></tr><tr><td>Żel wodny: HydroGel</td><td>ClearH2O&nbsp;</td><td>&nbsp; 70-01-5022</td><td>(https://www.clearh2o.com/product/hydrogel/)</td></tr><tr><td>Kamerka internetowa</td><td>Logitech</td><td>C930e</td><td>Ilość: 4</td></tr></tbody></table>

test pustej przestrzeni w czasie rzeczywistym

Real-Time Void Spot Assay

Normalne zachowanie związane z oddawaniem moczu jest wynikiem skoordynowanej funkcji pęcherza, cewki moczowej i zwieraczy cewki moczowej pod właściwą kontrolą układu nerwowego. Aby zbadać dobrowolne zachowania związane z oddawaniem moczu w modelach mysich, naukowcy opracowali test pustki (VSA), metodę, która mierzy liczbę i obszar plam moczu osadzonych na bibule filtracyjnej wyściełającej podłogę klatki zwierzęcia. Chociaż technicznie prosty i niedrogi, test ten ma ograniczenia, gdy jest stosowany jako test punktu końcowego, w tym brak czasowej rozdzielczości zdarzeń mikcji i trudności w ilościowym określeniu nakładających się plam moczu. Aby przezwyciężyć te ograniczenia, opracowaliśmy monitorowany wideo VSA, który nazywamy VSA W CZASIE RZECZYWISTYM (RT-VSA) i który pozwala nam określić częstotliwość mikcji, ocenić objętość mikcji i wzorce mikcji oraz dokonywać pomiarów w ciągu 6-godzinnych okien czasowych zarówno w ciemnej, jak i jasnej fazie dnia. Metoda opisana w tym raporcie może być zastosowana do szerokiej gamy badań na myszach, które badają fizjologiczne i neurobehawioralne aspekty dobrowolnego oddawania moczu w stanach zdrowotnych i chorobowych.

Zachowanie podczas mikcji u myszy z knockoutem Piezo1/2 urotelium
Zakłada się, że podczas fazy magazynowania w cyklu mikcji urotel wykrywa napięcie wywierane przez mocz zgromadzony w pęcherzu i przekształca ten bodziec mechaniczny w odpowiedzi komórkowe, takie jak uwalnianie ATP na stronę surowiczą1,3. Wykazaliśmy wcześniej, że mechanicznie aktywowane kanały PIEZO1 i PIEZO2 są ekspresjonowane w urotelium myszy...

Ten artykuł opisuje nową metodę badania zachowania myszy podczas mikcji poprzez włączenie monitoringu wideo do konwencjonalnego testu pustego miejsca. Takie podejście dostarcza czasowych, przestrzennych i wolumetrycznych informacji na temat zdarzeń mikcji i szczegółów zachowania myszy podczas jasnych i ciemnych faz dnia.

Test pustej przestrzeni w czasie rzeczywistym

Normal voiding behavior is the result of the coordinated function of the bladder, the urethra, and the urethral sphincters under the proper control of the ...

Metoda opisana w tym raporcie może być wykorzystana do zrozumienia fizjologicznych i neurobehawioralnych aspektów dobrowolnego oddawania moczu w stanach zdrowotnych i chorobowych. Ta technika pozwala nam monitorować zachowanie głośności myszy w jasnych i ciemnych fazach dnia oraz dostarcza informacji czasowych, przestrzennych i wolumetrycznych na temat zdarzeń mikcji. Aby przygotować test pustej przestrzeni w czasie rzeczywistym lub komorę rejestracyjną RT-VSA, umieść cienką lub grubą bibułę filtracyjną, w zależności od pory dnia, na dnie klatki rejestrującej RT-VSA.Na bibule filtracyjnej umieść plastikowe igloo jako miejsce do spania; sterylna probówka do mikrowirówek o pojemności 1,5 ml do celów wzbogacenia; oraz plastikowe naczynie o wymiarach 60 mm x 15 mm zawierające dwa lub trzy kawałki suszonej karmy dla myszy; i od 14 do 16 gramów wody w postaci żelowego okładu. Gdy komora zapisu będzie gotowa, delikatnie umieść mysz na bibule filtracyjnej. Upewnij się, że przeniesienie myszy z klatki obudowy do klatki nagrywającej odbywa się przy minimalnym naprężeniu.Gdy mysz znajdzie się w klatce nagrywającej, umieść pokrywę i przykryj górną część pokrywy chłonną niebieską podkładką, aby zminimalizować bezpośrednie odbicia światła otoczenia na powierzchni pokrywy z pleksiglasu. Włącz światła ultrafioletowe w dolnej komorze. Aby nagrywać wideo RT-VSA z górnej i dolnej kamery, użyj oprogramowania do nagrywania wideo skonfigurowanego do jednoczesnego nagrywania z wielu kamer internetowych lub kamer sieciowych.Rozpocznij nagrywanie, naciskając Cmd R w oknie programu. Wykonuj nagrania wideo z prędkością jednej klatki na sekundę. Natychmiast po rozpoczęciu nagrywania wyjdź z pomieszczenia i delikatnie zamknij drzwi.Upewnij się, że w pomieszczeniu panuje cisza przez cały czas trwania eksperymentu. Zatrzymaj nagrywanie, naciskając Cmd T. Wyłącz światła ultrafioletowe. Po zatrzymaniu nagrywania, oprogramowanie automatycznie generuje plik filmowy w formacie m4v dla każdej kamery i zapisuje go pod nazwą kamery w wybranym wcześniej folderze docelowym.Sprawdź, czy w folderze każdej kamery eksperymenty są uporządkowane w folderach według daty. Sprawdź, czy w każdym folderze z datą lub eksperymentem znajduje się jeden plik m4v i wszystkie poszczególne pliki jpeg odpowiadające każdej klatce filmu. Utwórz folder na pulpicie z nazwą i datą eksperymentu i przenieś pliki m4v do tego folderu.Skopiuj folder z filmem na dysk flash w celu analizy na komputerze zewnętrznym. Otwórz plik filmowy zebrany przez dolną kamerę w fazie światła lub górną kamerę w fazie ciemnej w celu analizy. Po ocenie jakości filmu przeanalizuj eksperymenty, przechodząc do odpowiedniego okna czasu za pomocą polecenia szybkiego przewijania do przodu lub suwaka paska czasu.Aktywność mikcji w fazie światła jest rejestrowana między godziną 11:00 a 17:00, a w fazie ciemnej między północą a 6:00. Odtwórz film w trybie szybkiego przewijania do przodu, klikając ikonę szybkiego przewijania do przodu lub ręcznie przewijaj film, szukając dowodów na to, że mysz jest puszona. Zwróć uwagę na nagłe pojawienie się jasnych plam moczu na bibule filtracyjnej lub zmiany w zachowaniu, w tym ruch do rogów klatki i krótki okres bezczynności, gdy mysz oddaje moc. Zarejestruj czas, w którym występuje każde puste miejsce.Zgodnie z konwencją, czas pustki jest rejestrowany przy pierwszych oznakach wykrycia moczu. Aby wykonać pomiary pustki, najpierw użyj paska przewijania, aby poruszać się do przodu lub do tyłu w czasie, szukając punktu, w którym nastąpiła maksymalna dyfuzja plamki moczu. Zatrzymaj film w tym momencie i umieść strzałkę myszy komputerowej w analizowanym miejscu, aby zaznaczyć interesujące Cię miejsce na zrzucie ekranu.Nazwij plik zrzutu ekranu, używając liczb korelacyjnych, aby uwzględnić kolejność pojawiania się w filmie. Po przeanalizowaniu wszystkich pustych przestrzeni zmierz całkowitą powierzchnię bibuły filtracyjnej, wykonując zrzut ekranu i wyznaczając granicę bibuły filtracyjnej. Oblicz procentową powierzchnię każdej z plam moczu.Przekształć wartości procentowej powierzchni w objętość moczu dla każdego pustego miejsca za pomocą krzywych kalibracyjnych i funkcji interpolacji w oprogramowaniu do tworzenia wykresów. Zachowanie mikcji samic i samców myszy Piezo1, 2, nokautujących i kontrolnych zarejestrowano w ciemnej i jasnej fazie dnia. Podczas ich nieaktywnej fazy świetlnej nie zaobserwowano istotnych różnic w żadnych parametrach analizowanych dla samic lub samców myszy z nokautem w porównaniu z kontrolą.Jednak w aktywnej ciemnej fazie samice i samce myszy z nokautem wykazywały zmieniony fenotyp mikcji, charakteryzujący się znacznym wzrostem liczby i całkowitej objętości małych pustych plamek. Nie stwierdzono istotnych różnic w pierwotnych pustkach lub liczbie PVS, średniej objętości na PVS lub całkowitej objętości PVS u samic lub samców myszy z nokautem w porównaniu z myszami kontrolnymi. Zachowanie mikcji samic myszy testowano w warunkach podstawowych i po leczeniu cyklofosfamidem.W porównaniu z warunkami podstawowymi, ilość uwalnianego moczu na puste miejsce jest mniejsza po leczeniu cyklofosfamidem, a zdarzenia mikcji są znacznie częstsze. Jednym z kluczowych aspektów odtwarzalności testu jest jak najdelikatniejsze manipulowanie zwierzętami i utrzymywanie ich w minimalnym stresie przez cały okres badania. Ponieważ jest to test nieinwazyjny, można później wykonać dodatkowe procedury, w tym cytometrię i elektromiografię, aby ocenić odpowiednio funkcje pęcherza moczowego i zewnętrznego zwieracza cewki moczowej.Wdrożenie tej techniki pozwoli naukowcom określić udział określonych ścieżek w zachowaniach związanych z oddawaniem moczu w stanach zdrowotnych i chorobowych.

Research

JoVE Journal

Behavior

Zachowanie

Identyfikacja mikrobiologicznych celów odporności adaptacyjnej w chorobach idiopatycznych może zostać przeprowadzona przy użyciu testu ELISpot (enzyme-linked immunospot assay).

Test immunospot z enzymatycznym sprzężeniem (ELISPOT): Ilościowe oznaczenie komórkowych odpowiedzi immunologicznych Th-1 przeciwko antygenom mikrobiologicznym

Opisujemy metodę ilościowego pomiaru aktywności glikozylazy DNA oraz endonukleazy AP w czasie rzeczywistym w lizatach jąder komórkowych. Analiza ta pozwala na wyznaczenie szybkości aktywności naprawy DNA umożliwiającej analizę kinetyczną i może być dostosowana do ilościowego oznaczania aktywności naprawy DNA w lizatach tkanek i nowotworów lub z użyciem oczyszczonych białek.

Ilościowa analiza w czasie rzeczywistym aktywności naprawy przez wycinanie zasad w lizatach komórkowych z wykorzystaniem specyficznych dla uszkodzeń sond molekularnych (molecular beacons)

Ten film demonstruje różnicowe promieniste działanie kapilarne testu ligandowego - techniki systematycznego, wysokoprzepustowego badania przesiewowego białek wiążących drugi przekaźnik nukleotydów wewnątrzkomórkowych. Technika ta pozwala na bezpośrednie wiązanie przekaźników z nadekspresyjnym białkiem docelowym w lizacie komórkowym - z pominięciem konieczności oczyszczania białka.

Różnicowe promieniste działanie kapilarne testu ligandowego: wysokoprzepustowa technika identyfikacji wewnątrzkomórkowych białek wiążących drugi przekaźnik nukleotydu bakteryjnego

Demonstrujemy technologię chipową do wykonywania testów immunologicznych typu sandwich bez reaktywności krzyżowej, po prostu pstrykając dwa slajdy. Aparat zatrzaskowy służy do niezawodnego przenoszenia odczynników z mikromacierzy do mikromacierzy. Chip zatrzaskowy może być stosowany do wszelkich reakcji biochemicznych wymagających kolokalizacji różnych odczynników bez zanieczyszczenia krzyżowego.

Snap Chip do multipleksowanych testów immunologicznych typu sandwich wolnych od reaktywności krzyżowej i Spotterów

Nieoznakowana, nieradio-izotopowa metoda korekty polimerazy DNA i testu naprawy DNA została opracowana przy użyciu spektrometrii mas MALDI-TOF o wysokiej rozdzielczości i strategii przedłużania pojedynczego nukleotydu. Test okazał się bardzo specyficzny, prosty, szybki i łatwy do wykonania w przypadku korekty i naprawy łatek krótszych niż 9-nukleotydy.

Korekta i test naprawy DNA przy użyciu przedłużenia pojedynczego nukleotydu i analizy spektrometrii mas MALDI-TOF

Tutaj opisujemy metodę oczyszczania enzymów pirofosfokinazy znakowanych histydyną i wykorzystanie chromatografii cienkowarstwowej radioznakowanych substratów i produktów do badania aktywności enzymatycznej in vitro. Test aktywności enzymatycznej ma szerokie zastosowanie do dowolnej kinazy, cyklazy nukleotydowej lub reakcji przenoszenia fosforu, której mechanizm obejmuje hydrolizę trifosforanu nukleotydów.

Test oczyszczania i aktywności in vitro dla syntetazy (p)ppGpp z Clostridium difficile

Tutaj reprezentujemy protokół do w pełni zautomatyzowanego znakowania radioaktywnego [11C]SNAP-7941 i analizy kinetyki w czasie rzeczywistym tego znacznika PET na komórkach wykazujących ekspresję i nieeksprymujących P-gp.

Techniczny aspekt automatycznej syntezy i oceny kinetycznej w czasie rzeczywistym [11C]SNAP-7941

Wprowadzamy protokół do mierzenia reakcji na lek w czasie rzeczywistym w organotypowych wycinkach tkanki nowotworowej. Przedstawiona tutaj strategia eksperymentalna stanowi platformę do przeprowadzania średnio-wysokoprzepustowych badań przesiewowych leków na wycinkach tkanek pochodzących z nowotworów klinicznych lub mysich w warunkach ex vivo.

Pomiar reakcji na lek w czasie rzeczywistym w organotypowych wycinkach tkanki nowotworowej

Ten protokół przedstawia szybki test wrażliwości na środki przeciwdrobnoustrojowe (AST) w ciągu 2,5 godziny poprzez stymulowane pojedynczymi komórkami obrazowanie metabolizmu D2O. Metoda ta ma zastosowanie do bakterii w moczu lub środowisku krwi pełnej, które są transformujące dla szybkiego jednokomórkowego fenotypowego AspAT w klinice.

Szybkie badanie wrażliwości na środki przeciwdrobnoustrojowe za pomocą obrazowania stymulowanego rozpraszania Ramana indukcji deuteru w pojedynczej bakterii

Nieoznakowana, nieradio-izotopowa metoda oznaczania aktywności glikozylazy uracylo-DNA została opracowana przy użyciu spektrometrii mas MALDI-TOF do bezpośredniej analizy produktu zawierającego miejsce apurinowe/apirymidynowe. Test okazał się dość prosty, specyficzny, szybki i łatwy w użyciu do pomiaru glikozylazy DNA.

Test glikozylazy uracylo-DNA za pomocą spektrometrii mas z desorpcją/jonizacją laserową wspomaganą matrycą

Opisujemy niedawno opracowaną platformę testów immunologicznych opartą na zasadach bezkomórkowej biologii syntetycznej i technice dot-blot do konfigurowalnego wykrywania odpowiedzi przeciwciał w surowicach ludzkich i zwierzęcych.

Bezkomórkowa plama punktowa jako praktyczna i elastyczna platforma testów immunologicznych do wykrywania odpowiedzi przeciwciał w surowicach ludzkich i zwierzęcych

Poznaj metodę RT-VSA do badania zachowań mikcyjnych myszy w czasie rzeczywistym. Technika ta dostarcza szczegółowych danych czasowych, przestrzennych i objętościowych o oddawaniu moczu w fazie światła i ciemności.

Test pustej przestrzeni w czasie rzeczywistym

Przeglądaj więcej filmów