Name: Metoda ręcznego chowu marmozet niemowląt (Wideo) | JoVE Journal
Uploaded: 2023-06-09T13:40:00.000+00:00
Duration: 4 min 52 s
Description: Poznaj metodę ręcznego chowu marmozet niemowląt Callithrix jacchus w inkubatorze, która znacząco zwiększa przeżywalność. Technika ta umożliwia badanie rozwoju osobników o podobnym tle genetycznym w różnych warunkach.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

Autorzy chcieliby podziękować Mingxuan Li za jego edycję gramatyki i dopracowanie wczesnej wersji tego rękopisu. Prace te były wspierane przez Chińską Fundację Nauk Przyrodniczych Prowincji Zhejiang (LD22H090003); Chińska Fundacja Nauk Przyrodniczych (32170991 i 32071097), STI2030-Duże projekty 2021ZD0204100 (2021ZD0204101) i 2022ZD0205000 (2022ZD0205003); oraz MOE Frontier Science Center for Brain Science & Brain-Machine Integration, Zhejiang University.

Wszystkie procedury eksperymentalne zostały zatwierdzone przez Komitet ds. Opieki i Korzystania ze Zwierząt Uniwersytetu Zhejiang i były zgodne z wytycznymi Narodowych Instytutów Zdrowia (NIH).
1. Zakwaterowanie i pielęgnacja44
<ol>
	<li>Ustaw w pomieszczeniu hodowlanym cykl dnia i nocy 12 h:12 h, temperaturę na 26-28 °C oraz wilgotność względną na 45%-55%.</li>
	<li>Dobierz w pary samce i samice marmosetek w wieku od 2 do 6 lat i trzymaj je w klatkach (850 mm x 800 mm x 800 mm) z wystarczającą ilością miejsca i świeżym powietrzem dzięki systemowi wentylacji działającemu przez 24 h.</li>
	<li>Wyposaż klatki w półki do odpoczynku, huśtawki, żerdzie i hamaki.</li>
	<li>Podawaj parze marmosetek świeżą wodę oraz 30-40 g pokarmu dwa razy dziennie, w skład którego powinny wchodzić zboża, jaja, bataty, miód, owoce, warzywa i mączniki. 
	UWAGA: Lekarze weterynarii i eksperymentatorzy muszą kontrolować pomieszczenie zwierzęce co najmniej raz dziennie, aby zapewnić natychmiastową diagnostykę i leczenie wszelkich chorych osobników.</li>
</ol>
2. Przygotowania przed narodzinami młodych marmosetów
<ol>
	<li>Opieka nad ciężarnymi marmosetami 
	UWAGA: Czas zapłodnienia określono poprzez palpację (zazwyczaj 10–20 dni po rozpoczęciu okresu embrionalnego), odnosząc się również do historii rozrodczej zwierząt.
	<ol>
		<li>Zapewnienie większej przestrzeni oraz minimalnego zakłócania przez ludzi par hodowlanych.</li>
		<li>Dokarmianie par hodowlanych dodatkowym pokarmem, takim jak larwy mącznika, jajka, jogurt i suszone owoce, aby zagwarantować odpowiednie odżywienie samic.</li>
		<li>Opieka i częste kontrolowanie ciężarnych marmosetów w celu przygotowania do porodu. 
		UWAGA: Okres ciążowy marmosetów szacuje się na 148 dni ± 4,3 dni45.</li>
	</ol>
	</li>
	<li>Przygotowanie następujących przedmiotów: inkubatora dla zwierząt (855 mm [W] x 470 mm [L] x 440 mm [H]), jednorazowych podkładów do pieluch (rozmiary M/L), chusteczek nawilżanych dla niemowląt, pluszowych zabawek (Rysunek 1A), wałków-zabawek (Rysunek 1B), stelaży do wspinania (Rysunek 1B), kocyków (10 cm х 10 cm, Rysunek 1C) oraz wagi elektronicznej (dokładność 0,2 g, Rysunek 1F). 
	​UWAGA: Aby zapobiec zawieszeniu się zwierząt, pluszowe zabawki nie powinny posiadać elementów w formie pętli.</li>
	<li>Przygotowanie pokarmu i sprzętu do karmienia
	<ol>
		<li>Przygotowanie następujących przedmiotów: mleka modyfikowanego (odpowiedniego dla dzieci w wieku 0–12 miesięcy), ryżowej papki dla niemowląt (odpowiedniej dla dzieci w wieku 0–6 miesięcy), elektrycznego czajnika do wody, zlewki (100 mL), podkładu grzewczego, plastikowego naczynia wagowego (80 mm x 80 mm x 22 mm, Rysunek 1D), sterylnych probówek do wirówek (50 mL), jednorazowych sterylnych strzykawek (1–5 mL), kaniul do iniekcji dożylnych (do wykonania niestandardowych smoczków do karmienia) (Rysunek 1E) oraz gazików (80–100 cm). 
		UWAGA: Aby wykonać smoczek do karmienia, należy naciąć kaniulę do iniekcji dożylnej przymocowaną do strzykawki w odległości 1 cm od jej końca (Rysunek 1E).</li>
	</ol>
	</li>
	<li>Przygotowanie formularza dokumentacji
	<ol>
		<li>Przygotowanie formularza (zazwyczaj wielostronicowego) dla każdego młodego marmoseta w celu zapisywania podstawowych informacji, takich jak imię, data urodzenia, masa urodzeniowa, rodzice, inne istotne dane, takie jak obwód głowy i długość ogona, informacje o hodowli, np. data i godzina karmienia, ilość przyjętego pokarmu (mL), status defekacji (tak/nie, twardy/luźny) oraz temperatura i wilgotność w inkubatorze. 
		​UWAGA: Zazwyczaj masę ciała mierzy się i zapisuje dwa razy dziennie, raz przed pierwszym posiłkiem i raz przed ostatnim posiłkiem.</li>
	</ol>
	</li>
</ol>
<img alt="Urządzenie do wzbogacania środowiska dla makaków marmosetów z pluszowymi zabawkami i ramami do wspinania; opiekun w ŚOI podczas badania nad opieką nad zwierzętami." class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/65296/65296fig01.jpg" data-altupdatedat="1788304762000" data-alt="Rysunek 1"> 
Rysunek 1: Zdjęcia przedmiotów w inkubatorze oraz narzędzi i akcesoriów do karmienia. (A) Zabawki pluszowe; (B) wałek-zabawka i ramy do wspinania; (C) koc; (D) plastikowy naczynie do ważenia; (E) wstrzykiwacz dożylny i strzykawka z wykonanym na zamówienie smoczkiem do karmienia; (F) waga elektroniczna; (G) opiekun w środkach ochrony indywidualnej. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/65296/65296fig01large.jpg" target="_blank">Kliknij tutaj, aby zobaczyć powiększoną wersję tego rysunku.</a>
3. Procedura ręcznego wychowu
<ol>
	<li>Wyczyścić i wysterylizować pomieszczenie przed wyznaczonym terminem.
	<ol>
		<li>Spryskać podłogę i stół kwasem podchlorowym lub 75% alkoholem etylowym, pozostawić na 30 s, a następnie wytrzeć stół i umyć podłogę mopem.</li>
	</ol>
	</li>
	<li>Ustawić temperaturę inkubatora na 35 °C, a wilgotność na 40%. Zazwyczaj, aby symulować podstawowe zapotrzebowanie temperaturowe młodych marmosetów, jak pokazuje Tabela 1, przed 14. dniem po urodzeniu (P14) należy utrzymywać temperaturę inkubatora na poziomie 35 °C, a od P15 obniżać temperaturę o 0.5 °C co 3 dni. Wilgotność wewnątrz inkubatora należy utrzymywać na poziomie 40%-45%, co odpowiada wilgotności w kolonii i zapobiega zawilgoceniu futra młodych zwierząt.</li>
	<li>Wyłożyć dno inkubatora jednorazową podkładką higieniczną.</li>
	<li>Aby zminimalizować stres u młodych, przed wprowadzeniem marmosetów do inkubatora należy włożyć do niego kilka kocyków i pluszowych zabawek, które mają na celu imitowanie dorosłych osobników. 
	UWAGA: Kocyki i pluszowe zabawki powinny przebywać w klatce domowej par hodowlanych przez 1 dzień przed użyciem.</li>
	<li>Umieścić młode marmosety w inkubatorze i położyć je na pluszowych zabawkach po oddzieleniu od rodziców w klatce domowej. 
	UWAGA: Aby uniknąć izolacji społecznej i zgodnie z zasadami dobrostanu zwierząt, do ręcznego wychowu zazwyczaj wybiera się dwa młode wspólnie.
	<ol>
		<li>Przed karmieniem założyć wysterylizowane środki ochrony indywidualnej (PPE, Rysunek 1G).</li>
		<li>Ogrzać kilka kocyków do 35 °C.</li>
		<li>Delikatnie chwycić młode marmosety za pomocą ciepłych kocyków i zmierzyć masę ciała zwierzęcia jako masę urodzeniową.</li>
		<li>Przenieść młode marmosety do inkubatora w ciepłych kocykach.</li>
		<li>Dokonać zapisów, jak wspomniano w kroku 2.4.</li>
	</ol>
	</li>
	<li>Przygotować mieszankę pokarmową i nakarmić młode marmosety.
	<ol>
		<li>Rozpuścić 5 g mleka modyfikowanego w 30 mL przegotowanej wody o temperaturze 50 °C w 50 mL sterylnej probówce wirówkowej. 
		UWAGA: Młode marmosety w różnym wieku postnatalnym wymagają różnych receptur pokarmu. Tabela 2 zawiera różne dawki mleka modyfikowanego, papki ryżowej i wody dla wieku postnatalnego od P1 do P60. Dawka jest zazwyczaj wystarczająca na 1 dzień. Składniki należy wymieszać przed pierwszym posiłkiem, a resztę pokarmu przechowywać w lodówce w temperaturze 4 °C. Przed każdym posiłkiem pokarm należy podgrzać do 30-35 °C.</li>
		<li>Nabrać 1 mL pokarmu strzykawką 1 mL i założyć na strzykawkę specjalnie wykonany smoczek do karmienia. 
		UWAGA: Należy wybrać strzykawkę o odpowiednim rozmiarze, odnosząc się do Tabeli 2.</li>
		<li>Utrzymywać temperaturę pokarmu w zakresie 30-35 °C za pomocą podkładki grzejnej.</li>
		<li>Ogrzać dłonie przed karmieniem, a następnie delikatnie chwycić młode marmoseta ciepłym kocykiem w jednej ręce wewnątrz inkubatora.</li>
		<li>Wprowadzić smoczek do pyszczka młodego marmoseta, podczas gdy jego głowa jest lekko podtrzymywana kciukiem i palcem wskazującym ręki opiekuna, i powoli wypychać pokarm ze strzykawki ze stałą prędkością. 
		UWAGA: Nigdy nie należy wypychać pokarmu szybciej, niż młody marmoset go połyka. Zbyt szybkie podawanie może spowodować zadławienie i cofnięcie pokarmu z gardła przez nos. Może to prowadzić do schorzeń takich jak zapalenie płuc, a nawet do śmierci. Jeśli pokarm wypłynie, młody marmoset będzie się szamotać. W takim przypadku należy przerwać karmienie i ostrożnie wytrzeć pokarm z pyszczka zwierzęcia. Karmienie należy kontynuować po tym, jak marmoset zacznie zachowywać się normalnie.</li>
	</ol>
	</li>
	<li>Po spożyciu przez młodego marmoseta odpowiedniej ilości pokarmu, przemyć jego odbyt tamponem z ciepłą wodą, co zapewnia higienę i stymuluje defekację.</li>
	<li>Obserwować zwierzę przez kilka minut, sprawdzając jego lokomocję i defekację.</li>
	<li>Zapisywać czas karmienia, ilość (mL) przyjętego pokarmu, stan defekacji (tak/nie, twarda/luźna) oraz temperaturę i wilgotność w inkubatorze. 
	UWAGA: Podczas ważenia owinąć młodego marmoseta ciepłymi kocykami, aby zapobiec wychłodzeniu lub urazom zwierzęcia.</li>
	<li>Utrzymywać czystość dna inkubatora poprzez usuwanie stałych odchodów lub wymianę jednorazowej podkładki higienicznej na nową.</li>
	<li>Przed P50 karmić młode marmosety zgodnie z krokami 3.3-3.7, stosując dawki składników pokarmowych oraz czas i częstotliwość karmienia podane w Tabeli 2.</li>
	<li>Od P50 młode marmosety są zazwyczaj gotowe do samodzielnego jedzenia.
	<ol>
		<li>Zamiast strzykawek używać plastikowych naczyń wagowych. Przygotować pokarm, mieszając składniki bezpośrednio w naczyniu; ilości podano w Tabeli 2.</li>
		<li>Umieścić naczynie z pokarmem w inkubatorze i przymocować dno, aby zapobiec jego przewróceniu. Obserwować przez kilka minut, aby upewnić się, że młode marmosety jedzą pokarm. Przez pierwsze kilka razy zachęcać zwierzę do samodzielnego jedzenia, wabiąc je do naczynia i kilka razy kierując jego pyszczek tak, aby dotknął pokarmu. 
		​UWAGA: Nigdy nie dopuszczać do tego, aby nos zwierzęcia dotykał pokarmu. Zazwyczaj zwierzę uczy się samodzielnie jeść w ciągu 1 dnia.</li>
	</ol>
	</li>
</ol>
4. Aklimatyzacja przed powrotem młodych marmosetów do kolonii
UWAGA: Zazwyczaj ręczne wychowywanie kończy się, gdy młode marmosety nauczą się samodzielnie jeść. Przed powrotem do klatki macierzystej w kolonii marmosetów należy przeprowadzić kilka procedur adaptacyjnych.
<ol>
	<li>Przenieś młode marmosety z inkubatora dla zwierząt do małych klatek (45 cm x 45 cm x 40 cm), które przypominają klatki dla ptaków. Do każdej małej klatki zawieś butelkę z wodą (50 mL).</li>
	<li>Przenieś małe klatki z młodymi marmosetami do kolonii i ustaw je w pobliżu klatki rodzinnej.</li>
	<li>Karmij młode marmosety oddzielnie, używając plastikowego naczynia wagowego, przez 1 tydzień, przygotowując pokarm zgodnie z codziennymi recepturami opracowanymi dla całej kolonii.</li>
	<li>Odnotowuj masę ciała oraz status defekacji raz dziennie.</li>
</ol>
5. Powrót młodych marmosetów do klatki rodzinnej
UWAGA: Po przebywaniu w małej klatce przez 7-10 dni, młode marmosety zazwyczaj dobrze adaptują się do środowiska kolonii i nie wykazują już stanów lękowych.
<ol>
	<li>Wróć młode marmosety do klatki rodzinnej rano.</li>
	<li>Obserwuj zwierzęta przez co najmniej 15 min, aby upewnić się, że między członkami rodziny a nowymi osobnikami nie dochodzi do gryzienia, walk lub pogoni. 
	UWAGA: Jeśli wystąpi gryzienie, walka lub pościg, oddziel młode od pozostałych tak szybko, jak to możliwe, i spróbuj zwrócić młode do rodziny jeszcze raz w innym dniu. Jeśli niepowodzenie powtórzy się, wybierz inną rodzinę do adopcji. W pierwszej kolejności do adopcji należy wybierać grupy rodzinne z dużym doświadczeniem rodzicielskim. Jeśli żadna rodzina nie zaakceptuje młodej małpy, umieść w nowej klatce pluszową zabawkę, aby towarzyszyła ona zwierzęciu.</li>
	<li>Zaprzestań oddzielnego karmienia młodych marmosetów i zacznij karmić je dietą stosowaną w kolonii.</li>
	<li>Przez 1 tydzień po powrocie do klatki rodzinnej uważnie obserwuj aktywność młodych marmosetów.</li>
	<li>Co 2 dni mierz masę ciała młodych marmosetów i prowadź dokumentację. W przypadku utraty wagi podawaj im dodatkową żywność odżywczą za pomocą strzykawki w klatce rodzinnej.</li>
	<li>Zapewnij młodym marmosetom codzienną opiekę, analogicznie do marmosetów w kolonii.</li>
</ol>

Enhancing Survival and Development of Marmosets Using a Hand-Rearing Approach

Autorzy nie mają do ujawnienia żadnych konfliktów interesów.

Marmozeta pospolita jest bardzo przydatnym modelem NHP w badaniach biomedycznych i neurobiologicznych. Jednak zasoby marmozet są zbyt ograniczone, aby sprostać szybko rosnącym potrzebom. W niniejszej pracy opracowaliśmy metodę chowu ręcznego, która nie tylko zwiększa przeżywalność niemowląt marmozet, ale także daje możliwość zbadania ich rozwoju poporodowego. Ta metoda ręcznej hodowli jest praktyczna i łatwa do nauczenia, a zatem można ją łatwo zastosować w innych laboratoriach pracujących z marmozetami pospolitymi.
...

Marmozeta zwyczajna (Callithrix jacchus) to mała i nadrzewna małpa z Nowego Świata pochodząca z Ameryki Południowej i Środkowej. Wykorzystanie marmozet w badaniach biomedycznych gwałtownie wzrosło w ciągu ostatnich dziesięcioleci ze względu na kilka kluczowych zalet marmozet w porównaniu z innymi naczelnymi (NHP), w tym ich mniejszy rozmiar ciała, łatwiejszą obsługę i hodowlę w niewoli, krótszy czas ciąży, wcześniejsze dojrzewanie płciowe i niższe ryzyko chorób odzwierzęcych1,2,3,4,5,6. Marmozeta zwyczajna ma podobną strukturę mózgu i funkcję mózgu do ludzi i wykazuje bogaty repertuar wokalizacji i wysoce społecznych zachowań z bogatymi emocjami. Jest to przekonujący model NHP dla różnych rodzajów badań neurobiologicznych, takich jak badania nad przetwarzaniem sensorycznym7,8,9,10,11,12,13,14, komunikacja głosowa15,16,17,18,19, modele urazów rdzenia kręgowego20,21,22,23, Choroba Parkinsona24,25,26,27,28, oraz choroby związane z wiekiem29. W porównaniu z innymi NHP, marmozeta zwyczajna ma stosunkowo wysoki wskaźnik reprodukcji, co jest potencjalnie przydatne w modyfikacji transgenicznej30,31,32. Ten naczelny jest również szeroko stosowany w farmakologii, angiografii oraz badaniach nad patogenami i odpornością33,34,35,36,37,38,39. Jednak podaż marmozet pozostaje bardzo ograniczona, zwłaszcza w Chinach, i nie jest w stanie sprostać szybko rosnącym potrzebom badań naukowych.
W koloniach marmozet dorosłe zwierzęta są karmione raz lub dwa razy dziennie, a kilka instytucji zmienia dietę dla młodych marmozet40. Ogólnie rzecz biorąc, młode marmozety zwykle mocno chwytają się ciała ojca lub starszego rodzeństwa w celu codziennej pielęgnacji i są podawane matce kilka razy dziennie na mleko. Niektóre samice marmozet rodzą trojaczki, aw tym przypadku jedno lub dwoje niemowląt nie może przeżyć z powodu braku mleka; Co więcej, niektórzy rodzice nie opiekują się swoimi niemowlętami z powodu braku doświadczenia w karmieniu piersią lub z innych nieznanych powodów. To duża strata dla wielu laboratoriów. Kilka badań opisało metody zarządzania żywieniem dorosłych marmozet w warunkach niewoli40,41,42 wykorzystujące żywność i formuły o różnych składach makroskładników, witaminach i minerałach, a także różne protokoły żywieniowe w celu wzbogacenia (puree, żelowanie, oczyszczanie lub puszkowanie)2,41. Jedno z poprzednich badań opisywało metodę wspólnego wychowu trojaczków marmozet43, w której opiekunowie biorą jedno niemowlę dziennie, karmią je ręcznie przez cały dzień i wymieniają na inne trojaczki następnego dnia. Chociaż ta metoda pozwala niemowlętom na opiekę rodzicielską, wymaga doświadczonego opiekuna, który codziennie chwyta niemowlę z ciała rodziców i jest pracochłonna. Do tej pory żadne badanie nie opisało szczegółowej, krok po kroku metody ręcznej hodowli nowonarodzonych marmozet.
Celem obecnego badania jest dostarczenie metody ręcznej hodowli dla osób zainteresowanych rozwojem marmozet, ale dysponujących ograniczonymi zasobami. W przeciwieństwie do poprzedniej metody wspólnego wychowania43, obecna metoda jest alternatywą, która powoduje mniej zakłóceń w rodzinie niemowlęcia i jest łatwa do nauczenia. Opierając się na podstawowych zasadach karmienia piersią i 5-letniej praktyce, w artykule opisano metodę ręcznego chowu marmozet niemowląt, która obejmuje przygotowanie pokarmu, harmonogram karmienia, konfigurację temperatury i wilgotności inkubatora dla zwierząt, a także adaptację niemowląt do środowiska kolonii.

<table><tbody><tr><td>inkubator dla zwierząt</td><td>RCOM, Korea</td><td></td><td>MX - BL600N, 855 mm (szer.) x 470 mm (dł.) x 440 mm (wys.)</td></tr> <tr><td>mleko w proszku dla niemowląt</td><td>Meadjohnson, Ameryka</td><td></td><td>odpowiedni dla dzieci w wieku 0-12 miesięcy, standard wykonawczy - GB25596</td></tr><tr><td>pasta ryżowa</td><td>dla niemowląt HEINZ, Chiny</td><td></td><td>odpowiedni dla dzieci w wieku 0-6 miesięcy, standard wykonawczy - GB10769</td></tr><tr><td>chusteczki dla niemowląt do</td><td>pielęgnacji niemowląt, Chiny</td><td></td><td>miękkie</td></tr><tr><td>zlewka</td><td>ShuNiu, Chiny</td><td></td><td>Koce 100 ml</td></tr><tr><td></td><td>Grace, Chiny</td><td></td><td>10 cm i razy; 10 cm, miękki</td></tr><tr><td>plac zabaw</td><td>WowWee, Chiny</td><td></td><td>mocne i nie ma małych okrągłych struktur</td></tr><tr><td>jednorazowe podkładki na pieluchy</td><td>Hi Health Pet, Chiny</td><td></td><td>jednorazowa</td></tr><tr><td>sterylna strzykawka</td> w rozmiarze M lub L <td>Cofoe, Chiny</td><td></td><td>1 ml, 2,5 mL, 3 mL, 5 mL, 10 ml</td></tr><tr><td>waga elektroniczna</td><td>YouSheng, Chiny</td><td></td><td>zakres pomiarowy od 0 do 6,000 g z precyzją 0,2 g</td></tr><tr><td>wstrzykiwacz dożylny</td><td>HD, Chiny</td><td></td> Czajnik <td>igłowy 0,55 mm x 20 mm</td></tr><tr><td></td><td>FGA, Chiny</td><td></td><td>czajnik utrzymujący ciepło 1,500 ml</td></tr><tr><td>laktulozy</td><td>BELCOL, Chiny</td><td></td><td>do rozwiązywania zaparć</td></tr><tr><td>plastikowe naczynie do ważenia</td><td>SKSLAB, Chiny</td><td></td><td>80 mm x 80 mm x 22 mm, używany jako pluszowa zabawka w misce</td></tr><tr><td></td><td>Lebiyou, Chiny</td><td></td><td>miękki</td></tr><tr><td>probiotyk</td><td>w proszku G-Pet, Chiny</td><td></td><td>do regulacji środowiska żołądkowo-jelitowego</td></tr><tr><td>sterylna probówka wirówkowa</td><td>NEST, Chiny</td><td></td><td>wacik 50 ml</td></tr><tr><td></td><td>OYEAH, Chiny</td><td></td><td>80 - 100 mm</td></tr><tr><td>wałek zabawkowy</td><td>WowWee, Chiny</td><td></td><td>mocne i bez małych okrągłych struktur</td></tr></tbody></table>

metoda ręcznego chowu marmozet niemowląt

Hand-Rearing Method for Infant Marmosets

Marmozeta zwyczajna (Callithrix jacchus) to mała i bardzo towarzyska małpa z Nowego Świata o wysokich wskaźnikach reprodukcji, która okazała się być przekonującym modelem naczelnych dla badań biomedycznych i neurobiologicznych. Niektóre samice rodzą trojaczki; Rodzice nie są jednak w stanie wychować ich wszystkich. Aby uratować te niemowlęta, opracowaliśmy metodę ręcznego chowu nowonarodzonych marmozet. W tym protokole opisujemy formułę karmy, czas karmienia, konfigurację temperatury i wilgotności, a także adaptację ręcznie wychowywanych niemowląt do środowiska kolonii. Ta metoda ręcznego chowu znacznie zwiększa przeżywalność niemowląt marmozet (bez ręcznego odchowywania: 45%; z odchowywaniem ręcznym: 86%) i daje możliwość zbadania rozwoju niemowląt marmozet o podobnym pochodzeniu genetycznym, wychowywanych w różnych środowiskach poporodowych. Ponieważ metoda jest praktyczna i łatwa w użyciu, przewidujemy, że może być również zastosowana w innych laboratoriach pracujących z marmozetami pospolitymi.

Masa ciała jest kluczowym wskaźnikiem rozwoju organizmu zwierząt i w niniejszym protokole służy jako miernik stanu zdrowia marmosetek. W tej pracy masa ciała zwierząt karmionych ręcznie wzrastała stopniowo wraz z wiekiem (Rysunek 2A, n = 16), podobnie jak masa noworodków w poprzednim badaniu46. Aby zminimalizować stres rodzin hodowlanych w kolonii, nie ważyliśmy codziennie młodych marmosetek w kolonii. Masę ciała zwierząt wychowywanych przez rodziców mierzono 1 miesią...

Tutaj opisujemy metodę ręcznego chowu młodych marmozet w inkubatorze dla zwierząt. Metoda ta znacznie zwiększa przeżywalność niemowląt marmozet, co daje możliwość zbadania rozwoju niemowląt marmozet o podobnym pochodzeniu genetycznym, wychowywanych w różnych środowiskach poporodowych.

Metoda ręcznego chowu marmozet niemowląt

The common marmoset (Callithrix jacchus) is a small and highly social New World monkey with high reproduction rates, which has been proven to be a ...

Marmozeta jest bardzo głośną i bardzo towarzyską małpą z Nowego Świata o wysokim wskaźniku reprodukcji. Interesuje nas przetwarzanie dźwięku w mózgu słabych marmozet, rozwój głosu i komunikacji głosowej niemowląt marmozet, a także tworzenie modeli marmozet chorób psychicznych człowieka. Obecnie dużym wyzwaniem jest niedobór podaży marmozety, która nie jest w stanie zaspokoić potrzeb badań naukowych, a tym samym hamuje postęp badań nad marmozetami.Kolejnym wyzwaniem jest brak eksperymentów w utrzymaniu kolonii marmozet. Ta metoda ręcznego chowu znacznie zwiększa przeżywalność niemowląt marmozet i daje możliwość zbadania rozwoju niemowląt marmozet o podobnym pochodzeniu genetycznym, ale wychowywanych w różnych środowiskach poporodowych. Na początek wyczyść i wysterylizuj pomieszczenie, rozpylając kwas podchlorawy lub 75% alkohol etylowy na podłogę i stół.Po wyjściu na 30 sekund wytrzyj stół i umyj podłogę. Ustaw temperaturę inkubatora na 35 stopni Celsjusza, a wilgotność na 40%Ułóż jednorazową podkładkę na pieluchy, aby przykryć obudowę inkubatora. Aby zminimalizować stres niemowląt, umieść kilka kocyków i pluszowych zabawek w inkubatorze przed wprowadzeniem marmozet dla niemowląt.Noś wysterylizowane środki ochrony osobistej i ogrzej kilka do 35 stopni Celsjusza. Delikatnie trzymaj niemowlę marmozetę ciepłymi kocami i uzyskaj wagę zwierzęcia jako wagę urodzeniową. Przenieś zwierzę do inkubatora z ciepłymi kocami i zapisz podstawowe informacje, takie jak imię, data urodzenia, waga urodzeniowa, rodzice i inne interesujące informacje.Rozpuść pięć gramów mleka modyfikowanego dla niemowląt w 30 mililitrach przegotowanej wody w sterylnej probówce wirówkowej o pojemności 50 mililitrów i weź jeden mililitr jedzenia za pomocą strzykawki o pojemności jednego mililitra. Przykryj strzykawkę specjalnie wykonanym smoczkiem do karmienia i użyj poduszki grzewczej, aby utrzymać temperaturę żywności na poziomie od 30 do 35 stopni Celsjusza. Po ogrzaniu rączek delikatnie przytul niemowlę ciepłym kocykiem w jednej ręce, a smoczek do karmienia włóż mu do buzi, delikatnie trzymając jego główkę kciukiem i palcem wskazującym dłoni trzymającej.Powoli wypychać pokarm ze strzykawki ze stałą prędkością. Po spożyciu przez marmozetę odpowiedniej ilości pokarmu przetrzyj jej odbyt wacikiem z ciepłą wodą, aby oczyścić odbyt i ułatwić wypróżnianie. Obserwuj lokomocję zwierzęcia przez kilka minut i zapisuj te parametry.Utrzymuj ramę inkubatora w czystości, zbierając stały kał lub zmieniając go na nową jednorazową wkładkę do pieluch. Począwszy od P50, wymieszaj składniki bezpośrednio w szalkach do ważenia, aby przygotować jedzenie. Umieść naczynie na żywność w inkubatorze i przymocuj dno na wypadek, gdyby się przewróciło.Przez pierwsze kilka razy poprowadź zwierzę do dobrowolnego jedzenia, zwabiając je do naczynia z jedzeniem i kierując pyskiem, aby kilkakrotnie dotknęło jedzenia. Przed powrotem młodych marmozet do kolonii przenieś je z inkubatora dla zwierząt do małych klatek i zawieś 50-mililitrową butelkę wody na każdej małej klatce. Po powrocie niemowląt do kolonii należy karmić je oddzielnie plastikowym naczyniem wagowym przez tydzień.Rejestruj masę ciała i stan wypróżnienia raz dziennie. Uzyskano masę ciała każdego ręcznie wychowywanego niemowlęcia, która stopniowo wzrastała wraz z wiekiem. Porównania masy ciała między niemowlętami wychowywanymi ręcznie a niemowlętami wychowywanymi przez rodziców w wieku P30 i P60 nie wykazują istotnych różnic między tymi dwiema grupami.

Research

JoVE Journal

Biology

Biologia

Opisujemy metodę chirurgiczną polegającą na podawaniu leków do ucha wewnętrznego naczelnego, marmozety zwyczajnej (Callithrix jacchus), przez okrągłą błonę okienną.

Zabieg chirurgiczny polegający na podawaniu leków do ucha wewnętrznego u marmozety zwyczajnej (Callithrix jacchus) z rzędu naczelnych (Callithrix jacchus)

Opracowaliśmy całokorową matrycę elektrokortykograficzną dla marmozety pospolitej, która nieprzerwanie pokrywa prawie całą boczną powierzchnię kory, od bieguna potylicznego do bieguna skroniowego i czołowego. Protokół ten opisuje przewlekłą procedurę implantacji matrycy w przestrzeni zewnątrzoponowej mózgu marmozety.

Przewlekła implantacja całej korowej matrycy elektrokortykograficznej u marmozety zwyczajnej

Ta praca przedstawia protokół do przeprowadzenia stereotaktycznego, neurochirurgicznego wszczepienia matryc mikroelektrod u marmozety pospolitej. Metoda ta umożliwia zapisy elektrofizjologiczne u swobodnie zachowujących się zwierząt, ale może być łatwo dostosowana do każdej innej podobnej interwencji neurochirurgicznej u tego gatunku (np. kaniula do podawania leków lub elektrody do stymulacji mózgu).

Chirurgia stereotaktyczna do implantacji układów mikroelektrod w marmozecie zwyczajnej (Callithrix jacchus)

Tutaj prezentujemy model interwencji matki i dziecka u naczelnych w przypadku zaburzeń karmienia piersią w obecności ojcowskiej inhibicji i zaniedbywania matki. Film z modelem mate uzupełnia edukację mającą na celu wsparcie opiekunów naczelnych i ludzi w odniesieniu do niemowląt z problemami z karmieniem piersią, takimi jak ból.

Powszechny model marmozety interwencji matki i dziecka w zaburzeniach karmienia piersią w obecności zahamowań ojcowskich i zaniedbania matki

Specjalnie zbudowane mikronapędy umożliwiają submilimetrowe celowanie w miejsca zapisu kory mózgowej za pomocą liniowych układów krzemowych.

Elektrofizjologia aktywności kory laminarnej u marmozety zwyczajnej

Ten protokół opisuje pobieranie próbek krwi i moczu w celu pomiaru poziomu progesteronu/estradiolu i gonadotropiny kosmówkowej w celu określenia etapu cyklu jajnikowego. Poziomy hormonów są wykorzystywane do przewidywania i określania czasu owulacji, a hormony są wstrzykiwane w celu regulacji cyklu jajnikowego i wzrostu oocytów.

Pobieranie próbek krwi i pomiar hormonów w celu określenia etapu cyklu jajnikowego u marmozet

Aby zbadać ewolucję języka, ważne jest porównanie mechanizmów mózgowych u ludzi z tymi u naczelnych. Opracowaliśmy metodę nieinwazyjnego pomiaru elektroencefalografii (EEG) obudzonych zwierząt. Pozwala nam to na bezpośrednie porównywanie danych EEG między ludźmi i zwierzętami w dłuższej perspektywie, bez szkody dla nich.

Pomiary elektroencefalograficzne u obudzonych marmozet słuchających wokalizacji współgatunkowych

Pyrosequencing(R) jest jedną z najbardziej szczegółowych, a zarazem prostych metod stosowanych obecnie do analizy polimorfizmów. Metoda ta umożliwiła szybką i efektywną ocenę polimorfizmów pojedynczego nukleotydu, w tym wielu polimorfizmów o istotnym znaczeniu klinicznym. W materiale wyjaśniono technikę oraz metodologię Pyrosequencing.

Pirosekwencjonowanie: prosta metoda dokładnego genotypowania

W tym filmie zaprezentowano New culture – metodę, dzięki której zarodki kurcząt są hodowane poza jajem przez maksymalnie 24 hr. Metoda ta umożliwia badanie wczesnego rozwoju (od pręgi pierwotnej do 14 som.), co odpowiada okresowi E7-9 u myszy. Zastosowania tej techniki obejmują elektroporację, hybrydyzację in situ oraz immunohistochemię.

Metoda hodowli wczesnych zarodków kurczaka ex vivo (nowa hodowla)

W niniejszym filmie zaprezentowano immunohistochemię w preparatach całych (whole mount immunohistochemistry), czyli metodę pozwalającą na wizualizację przestrzennego i czasowego wzorca ekspresji antygenu w młodych embrionach kurczaka. Metoda ta została pierwotnie wprowadzona przez Jane Dodd i Toma Jessella.

Metoda barwienia przeciwciałami całych preparatów u kurczaka

Poznaj metodę ręcznego chowu marmozet niemowląt Callithrix jacchus w inkubatorze, która znacząco zwiększa przeżywalność. Technika ta umożliwia badanie rozwoju osobników o podobnym tle genetycznym w różnych warunkach.

Metoda ręcznego chowu marmozet niemowląt

Przeglądaj więcej filmów