Name: Szczurzy model trądziku złożonego (Wideo) | JoVE Journal
Uploaded: 2024-11-01T12:20:00.000+00:00
Duration: 3 min 10 s
Description: Poznaj metodę indukcji trądziku u szczurów za pomocą kwasu oleinowego i Cutibacterium acnes. Złożony model lepiej odzwierciedla kliniczne zmiany skórne niż metody pojedyncze.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

To badanie było wspierane przez Narodową Fundację Nauk o Przyrodzie w Chinach (nr 81974572 i nr 82274523) oraz Pekiński Uniwersytet Medycyny Chińskiej (nr 202310026002).

Ten protokół otrzymał etyczną aprobatę od Pekińskiego Uniwersytetu Medycyny Chińskiej (No.2023033103-1183). W protokole wykorzystano dwanaście samców szczurów rasy Sprague-Dawley (waga, 208 g ± 5 g), które podzielono na cztery grupy: grupę NC (n = 3), grupę OA (n = 3), grupę C. acnes (n = 3) i grupę OA + C. acnes (n = 3).
1. Opracowanie modelu trądziku
<ol>
	<li>Zmierz i zapisz grubość uszu szczura za pomocą elektronicznej suwmiarki z noniuszem (patrz Tabela materiałów) przed modelowaniem.
	<ol>
		<li>Umieść zewnętrzną szczękę suwmiarki z noniuszem elektronicznym w środku zewnętrznej krawędzi ucha i wysuń ją do kanału słuchowego. Zapisz grubość 2/3 punktów i grubość 1/2 punktów wzdłuż linii. Zmierz każdy punkt 3x i oblicz średnie wartości grubości dwóch punktów, które należy uznać za grubość ucha.</li>
	</ol>
	</li>
	<li>Przechyl głowę szczura na bok, skieruj ucho do góry i równomiernie nałóż 50 μl kwasu oleinowego (patrz Tabela Materiałów) na brzuszną i grzbietową stronę ucha raz dziennie przez 25 dni.</li>
	<li>Od 21 do 25 dnia, codziennie przed zastosowaniem kwasu oleinowego, znieczulić szczury za pomocą 4% izofluranu, a następnie wstrzyknąć 50 μl zawiesiny 1 × 107 CFU C. acnes (patrz tabela materiałów) śródskórnie w brzuszną powierzchnię ucha za pomocą strzykawki o pojemności 1 ml wyposażonej w igłę 34 G lub 36 G (patrz tabela materiałów). 
UWAGA: Należy uważać, aby uniknąć naczyń krwionośnych w uchu podczas wstrzykiwania śródskórnego. Wymagana jest mikrostrzykawka z igłą 34 G lub 36 G (patrz tabela materiałów). Aby zapewnić prawidłowe wstrzyknięcie śródskórne, igłę należy nakłuć pod kątem od 10 do 15 stopni, na głębokość około 1 mm.</li>
	<li>W 25 dniu zmierz i zapisz grubość uszu, jak opisano w kroku 1.1. 
	UWAGA: Grupa zwyrodnieniowa stawów była smarowana tylko kwasem oleinowym, jak opisano w kroku 1.2 i wstrzykiwano jej sól fizjologiczną od 21 do 25 dnia. Grupa C. acnes była wstrzykiwana tylko śródskórnie za pomocą zawiesiny C. acnes, jak opisano w kroku 1.3. Grupa OA + C. acnes była leczona kwasem oleinowym i zawiesiną C. acnes, jak opisano w krokach 1.2 i 1.3.</li>
</ol>
2. Pobieranie i analiza tkanek
<ol>
	<li>W 26 dniu, po humanitarnej eutanazji szczurów przy użyciu metody zatwierdzonej przez instytucję, należy wywiercić stały rozmiar na obustronnych uszach za pomocą wiertła pierścieniowego o średnicy 8 mm.</li>
	<li>Zanurz tkanki ucha w 4% paraformaldehydzie na 24 godziny, a następnie zanurz parafinę i pokrój na plastry o grubości 5 μm w celu barwienia hematoksyliną i eozyną (HE)20. Obserwuj skrawki pod mikroskopem świetlnym i zapisz zmiany patologiczne do dalszej oceny przez patologa. Przypisz punkty do zmian patologicznych zgodnie z Tabelą 1 (zobacz również <silna klasa="xfig">Rysunek 1).</li>
	<li>Odparafinować, ponownie nawodnić i podgrzać sekcje w celu pobrania antygenu. Dezaktywować endogenne peroksydazy przez inkubację z 0,3% H2O2 w metanolu przez 15 minut w temperaturze pokojowej.</li>
	<li>Przemyć skrawki solą fizjologiczną buforowaną fosforanami (PBS), a następnie inkubować je z 3% BSA przez 30 minut w temperaturze pokojowej.</li>
	<li>Inkubować skrawki z przeciwciałem monoklonalnym TNF-α (rozcieńczenie 1:800) (patrz tabela materiałów) w temperaturze 4 °C przez noc.</li>
	<li>Ponownie przemyć skrawki PBS i inkubować z przeciwciałem drugorzędowym sprzężonym z peroksydazą chrzanową (patrz tabela materiałów) przez 50 minut.</li>
	<li>Po kolejnym płukaniu PBS nanieść mieszaninę 3,3'-diaminobenzydyny (DAB) na szkiełka i monitorować proces barwienia pod mikroskopem, zatrzymując reakcję z PBS po osiągnięciu pożądanej intensywności.</li>
	<li>Przeciwbarwij skrawki hematoksyną Meyera przez 1 minutę, spłucz je bieżącą wodą, a następnie odwodnij i zamontuj sekcje. Obserwuj skrawki pod mikroskopem i zapisz zmiany patologiczne do dalszej oceny przez patologa.</li>
</ol>
3. Analiza statystyczna
<ol>
	<li>Przeprowadzanie analiz statystycznych.</li>
	<li>Przedstaw dane jako średnią ± odchylenie standardowe. Uzyskaj dostęp do normalności wszystkich danych za pomocą testu Shapro-Wilkego. Jeśli jest zgodny z rozkładem normalnym, użyj jednoczynnikowej ANOVA, aby ocenić znaczące różnice. W przypadku danych o rozkładzie innym niż normalnie należy zastosować test Kruskala-Wallisa, a następnie wielokrotne porównania Dunna. Wartość p mniejsza niż 0,05 jest uważana za statystycznie istotną.</li>
</ol>

Establishing a Compound Acne Model in Rats Using Oleic Acid and C. acnes

<ol><li>Cooper, A. J., Harris, V. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Modern+management+of+acne%5BTitle%5D)+AND+%22The+Medical+Journal+of+Australia%22%5BJournal%5D)">Modern management of acne.</a> The Medical Journal of Australia. 206 (1), 41-45 (2017).</li>
<li>Vos, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Years+lived+with+disability+%28YLDs%29+for+1160+sequelae+of+289+diseases+and+injuries+1990-2010%3A+a+systematic+analysis+for+the+Global+Burden+of+Disease+Study+2010%5BTitle%5D)+AND+%22Lancet%22%5BJournal%5D)">Years lived with disability (YLDs) for 1160 sequelae of 289 diseases and injuries 1990-2010: a systematic analysis for the Global Burden of Disease Study 2010.</a> Lancet. 380 (9859), London, England. 2163-2196 (2012).</li>
<li>Layton, A. M., Thiboutot, D., Tan, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Reviewing+the+global+burden+of+acne%3A+how+could+we+improve+care+to+reduce+the+burden%5BTitle%5D)+AND+%22The+British+Journal+of+Dermatology%22%5BJournal%5D)">Reviewing the global burden of acne: how could we improve care to reduce the burden.</a> The British Journal of Dermatology. 184 (2), 219-225 (2021).</li>
<li>Hazarika, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Acne+vulgaris%3A+new+evidence+in+pathogenesis+and+future+modalities+of+treatment%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Dermatological+Treatment%22%5BJournal%5D)">Acne vulgaris: new evidence in pathogenesis and future modalities of treatment.</a> Journal of Dermatological Treatment. 32 (3), 277-285 (2021).</li>
<li>Das, S., Reynolds, R. V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Recent+advances+in+acne+pathogenesis%3A+implications+for+therapy%5BTitle%5D)+AND+%22American+Journal+of+Clinical+Dermatology%22%5BJournal%5D)">Recent advances in acne pathogenesis: implications for therapy.</a> American Journal of Clinical Dermatology. 15 (6), 479-488 (2014).</li>
<li>Dréno, B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cutibacterium+acnes+%28Propionibacterium+acnes%29+and+acne+vulgaris%3A+a+brief+look+at+the+latest+updates%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+the+European+Academy+of+Dermatology+and+Venereology%3A+JEADV%22%5BJournal%5D)">Cutibacterium acnes (Propionibacterium acnes) and acne vulgaris: a brief look at the latest updates.</a> Journal of the European Academy of Dermatology and Venereology: JEADV. 32, Suppl 2 5-14 (2018).</li>
<li>Marples, R. R., Downing, D. T., Kligman, A. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Control+of+free+fatty+acids+in+human+surface+lipids+by+Corynebacterium+acnes%5BTitle%5D)+AND+%22The+Journal+of+Investigative+Dermatology%22%5BJournal%5D)">Control of free fatty acids in human surface lipids by Corynebacterium acnes.</a> The Journal of Investigative Dermatology. 56 (2), 127-131 (1971).</li>
<li>Katsuta, Y., Iida, T., Hasegawa, K., Inomata, S., Denda, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Function+of+oleic+acid+on+epidermal+barrier+and+calcium+influx+into+keratinocytes+is+associated+with+N-methyl+D-aspartate-type+glutamate+receptors%5BTitle%5D)+AND+%22The+British+Journal+of+Dermatology%22%5BJournal%5D)">Function of oleic acid on epidermal barrier and calcium influx into keratinocytes is associated with N-methyl D-aspartate-type glutamate receptors.</a> The British Journal of Dermatology. 160 (1), 69-74 (2009).</li>
<li>Kurokawa, I., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((New+developments+in+our+understanding+of+acne+pathogenesis+and+treatment%5BTitle%5D)+AND+%22Experimental+Dermatology%22%5BJournal%5D)">New developments in our understanding of acne pathogenesis and treatment.</a> Experimental Dermatology. 18 (10), 821-832 (2009).</li>
<li>Clayton, R. W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Homeostasis+of+the+sebaceous+gland+and+mechanisms+of+acne+pathogenesis%5BTitle%5D)+AND+%22The+British+Journal+of+Dermatology%22%5BJournal%5D)">Homeostasis of the sebaceous gland and mechanisms of acne pathogenesis.</a> The British Journal of Dermatology. 181 (4), 677-690 (2019).</li>
<li>Cong, T. X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((From+pathogenesis+of+acne+vulgaris+to+anti-acne+agents%5BTitle%5D)+AND+%22Archives+of+dermatological+research%22%5BJournal%5D)">From pathogenesis of acne vulgaris to anti-acne agents.</a> Archives of dermatological research. 311 (5), 337-349 (2019).</li>
<li>Ji, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Analgesic+and+anti-inflammatory+effects+and+mechanism+of+action+of+borneol+on+photodynamic+therapy+of+acne%5BTitle%5D)+AND+%22Environmental+Toxicology+and+Pharmacology%22%5BJournal%5D)">Analgesic and anti-inflammatory effects and mechanism of action of borneol on photodynamic therapy of acne.</a> Environmental Toxicology and Pharmacology. 75, 103329(2020).</li>
<li>Ou-Yang, X. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Nontargeted+metabolomics+to+characterize+the+effects+of+isotretinoin+on+skin+metabolism+in+rabbit+with+acne%5BTitle%5D)+AND+%22Frontiers+in+Pharmacology%22%5BJournal%5D)">Nontargeted metabolomics to characterize the effects of isotretinoin on skin metabolism in rabbit with acne.</a> Frontiers in Pharmacology. 13, 963472(2022).</li>
<li>Zhu, Z., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Skin+microbiome+reconstruction+and+lipid+metabolism+profile+alteration+reveal+the+treatment+mechanism+of+Cryptotanshinone+in+the+acne+rat%5BTitle%5D)+AND+%22Phytomedicine%22%5BJournal%5D)">Skin microbiome reconstruction and lipid metabolism profile alteration reveal the treatment mechanism of Cryptotanshinone in the acne rat.</a> Phytomedicine. 101, 154101(2022).</li>
<li>Jang, Y. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((HR-1+mice%3A+A+new+inflammatory+acne+mouse+model%5BTitle%5D)+AND+%22Annals+of+Dermatology%22%5BJournal%5D)">HR-1 mice: A new inflammatory acne mouse model.</a> Annals of Dermatology. 27 (3), 257-264 (2015).</li>
<li>De Young, L. M., Young, J. M., Ballaron, S. J., Spires, D. A., Puhvel, S. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Intradermal+injection+of+Propionibacterium+acnes%3A+a+model+of+inflammation+relevant+to+acne%5BTitle%5D)+AND+%22The+Journal+of+Investigative+Dermatology%22%5BJournal%5D)">Intradermal injection of Propionibacterium acnes: a model of inflammation relevant to acne.</a> The Journal of Investigative Dermatology. 83 (5), 394-398 (1984).</li>
<li>Chen, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+skin+lipidomics+study+reveals+the+therapeutic+effects+of+Tanshinones+in+a+rat+model+of+acne%5BTitle%5D)+AND+%22Frontiers+in+Pharmacology%22%5BJournal%5D)">A skin lipidomics study reveals the therapeutic effects of Tanshinones in a rat model of acne.</a> Frontiers in Pharmacology. 12, 675659(2021).</li>
<li>Cao, J., Xu, M., Zhu, L., Xiao, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Viaminate+ameliorates+Propionibacterium+acnes-induced+acne+via+inhibition+of+the+TLR2%2FNF-%CE%BAB+and+MAPK+pathways+in+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Naunyn-Schmiedeberg%27s+Archives+of+Pharmacology%22%5BJournal%5D)">Viaminate ameliorates Propionibacterium acnes-induced acne via inhibition of the TLR2/NF-κB and MAPK pathways in rats.</a> Naunyn-Schmiedeberg's Archives of Pharmacology. 396 (7), 1487-1500 (2023).</li>
<li>Kolar, S. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Propionibacterium+acnes-induced+immunopathology+correlates+with+health+and+disease+association%5BTitle%5D)+AND+%22JCI+insight%22%5BJournal%5D)">Propionibacterium acnes-induced immunopathology correlates with health and disease association.</a> JCI insight. 4 (5), e124687(2019).</li>
<li>Zhong, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Inhibition+of+protein+glycosylation+is+a+novel+pro-angiogenic+strategy+that+acts+via+activation+of+stress+pathways%5BTitle%5D)+AND+%22Nature+Communications%22%5BJournal%5D)">Inhibition of protein glycosylation is a novel pro-angiogenic strategy that acts via activation of stress pathways.</a> Nature Communications. 11 (1), 6330(2020).</li>
<li>O'Neill, A. M., Gallo, R. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Host-microbiome+interactions+and+recent+progress+into+understanding+the+biology+of+acne+vulgaris%5BTitle%5D)+AND+%22Microbiome%22%5BJournal%5D)">Host-microbiome interactions and recent progress into understanding the biology of acne vulgaris.</a> Microbiome. 6 (1), 177(2018).</li>
<li>Moradi Tuchayi, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Acne+vulgaris%5BTitle%5D)+AND+%22Nature+Reviews.+Disease+Primers%22%5BJournal%5D)">Acne vulgaris.</a> Nature Reviews. Disease Primers. 1, 15029(2015).</li>
<li>American Academy of Dermatology. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((American+Academy+of+Dermatology+invitational+symposium+on+comedogenicity%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+the+American+Academy+of+Dermatology%22%5BJournal%5D)">American Academy of Dermatology invitational symposium on comedogenicity.</a> Journal of the American Academy of Dermatology. 20 (2), Pt 1 272-277 (1989).</li>
<li>Katsambas, A. D., Cunliffe, W. J., Zoubolis, C. C. Clinical aspects of acne vulgaris. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aKatsambas%2C+AD+%22Pathogenesis+and+treatment+of+acne+and+rosacea%22">Pathogenesis and treatment of acne and rosacea</a>. Zouboulis, C. C., Katsambas, A. D., Kligman, A. M. , Springer. Berlin, Heidelberg. 213-221 (2014).</li>
<li>Williams, H. C., Dellavalle, R. P., Garner, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Acne+vulgaris%5BTitle%5D)+AND+%22Lancet%22%5BJournal%5D)">Acne vulgaris.</a> Lancet. 379 (9813), London, England. 361-372 (2012).</li>
<li>Rocha, M. A., Bagatin, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Skin+barrier+and+microbiome+in+acne%5BTitle%5D)+AND+%22Archives+of+Dermatological+Research%22%5BJournal%5D)">Skin barrier and microbiome in acne.</a> Archives of Dermatological Research. 310 (3), 181-185 (2018).</li>
</ol>

Wszyscy autorzy oświadczają, że nie pozostają w konflikcie interesów.

Ponieważ metodologia i kryteria oceny modelu trądziku nie były jasne, protokół ten miał na celu zapewnienie odniesienia dla badaczy zajmujących się trądzikiem. Ze względu na mały rozmiar ucha myszy i zakłócenia spowodowane rosnącymi włosami na plecach, stosowanie kremu do depilacji i golarki, ucho szczura może być lepszą alternatywą dla ustalenia modelu trądziku u gryzoni. Próbowaliśmy stworzyć model trądziku na skórze grzbietu szczurów, ale efekt nie był tak dobry, jak te obserwowane na uchu szczura.
Niektórzy badacze przyjmują tylko jedną metodologię wywoływania zapalenia trądzikowego, taką jak stosowanie olejków lub wstrzykiwanie drobnoustrojów14,16. Jednak badania wykazały, że zwiększone wydzielanie sebum będzie sprzyjać nadmiernej proliferacji C. acnes w zatkanych mieszkach włosowych, podczas gdy C. acnes z kolei stymuluje nieprawidłowe wydzielanie gruczołów łojowych; Wzajemne oddziaływanie między nimi może nasilać zapalenie trądziku. W związku z tym model złożony indukowany przez oleje i C. acnes może być bardziej zgodny ze zmianami klinicznymi trądziku 10,21,22. Aby obiektywnie ocenić zmiany patologiczne w różnych grupach eksperymentalnych, opracowaliśmy system punktacji inspirowany wcześniejszymi badaniami, który obejmuje akumulację keratyny i wynikające z tego rozszerzenie kanałów mieszków włosowych oraz proliferację nabłonka, naciek komórek zapalnych w skórze właściwej, a nawet dalszy rozwój ropnia (Tabela 1 i Rycina 1)16, Lokal mieszkalny 23. Wykorzystując tę metodę punktacji, wraz z analizami histopatologicznymi i immunohistochemicznymi (IHC), stwierdziliśmy, że stosowanie C. acnes i kwasu oleinowego do uszu prowadziło do bardziej znaczących zaburzeń skórnych i stanów zapalnych. Odkrycia te odzwierciedlają objawy obserwowane w umiarkowanych przypadkach trądziku ludzkiego, podkreślając wartość tego złożonego modelu w naśladowaniu rozwoju trądziku (Figura 4 i Rycina 5)24.
Aby lepiej ocenić model, konieczne jest zarejestrowanie grubości uszu przed nałożeniem oleju i C. acnes. Biorąc pod uwagę, że zewnętrzna i wewnętrzna grubość ucha są różne, zarejestrowaliśmy dwa konkretne punkty, aby upewnić się, że wyniki lepiej reprezentują grubość uszu, a dwóch operatorów współpracowało podczas pomiaru uszu. Podczas nakładania kwasu oleinowego do ucha należy zwrócić uwagę na fakt, że płynność kwasu oleinowego sprawia, że łatwo przepływa on do kanału słuchowego i podrażnia szczury; Dlatego konieczne jest przechylenie głowy szczurów, aby uniknąć przedostania się kwasu oleinowego do kanału słuchowego.
Zaskórniki obserwowano w 7 dniu, a zmiany nadal się nasilały aż do końca eksperymentu. Stymulacja C. acnes jest kolejnym ważnym czynnikiem wpływającym na trądzik. C. acnes nie tylko wspomaga syntezę lipidów w gruczołach łojowych, ale także reaguje z komórkami zapalnymi wokół mieszka włosowego i gruczołami łojowymi w skórze właściwej w celu wywołania czynników zapalnych; To dodatkowo nasila odpowiedź zapalną 6,25. Dlatego stosujemy śródskórne wstrzyknięcie C. acnes w celu przyspieszenia stanu zapalnego. Biorąc pod uwagę, że uszy szczurów są niezwykle cienkie, potrzebne są mikroigły, aby uniknąć ich przekłuwania. Aby zapewnić prawidłowe wstrzyknięcie śródskórne, igłę należy nakłuć pod kątem od 10 do 15 stopni, na głębokość około 1 mm. Ponadto, gdy jeden operator wykonuje wstrzyknięcie śródskórne, inny operator musi przymocować głowę szczura, aby zapobiec przekłuciu uszu. Aby zapobiec krwotokowi, miejsce wstrzyknięcia musi omijać powierzchowne naczynia krwionośne szczurów. Po wstrzyknięciu C. acnes uszy były znacznie bardziej szorstkie, bardziej czerwone i bardziej opuchnięte oraz znajdowały się z grudkami (ryc. 3).
Zastosowania sebum/składników sebum i C. acnes różnią się w różnych eksperymentach. Niektórzy badacze przyjęli metodę jednorazowego wstrzykiwania C. acnes, a następnie aplikacji z sebum przez siedem dni, co wywołało ropień, rumień i stwardnienie na grzbiecie szczurów19. Niektórzy inni badacze wstrzykiwali C. acnes przez 4 dni i smarowali sebum przez 30 dni uszyszczurów. Nie ma ujednoliconego standardu, ponieważ zapalenie trądziku jest związane z zastosowaniem składników sebum/sebum, aktywnością i stężeniem C. acnes oraz tkankami do modelu. W tym eksperymencie zamiast sztucznego sebum użyto kwasu oleinowego do symulacji sebum, biorąc pod uwagę, że kwas oleinowy nie tylko indukuje keratynizację mieszków włosowych, stymuluje stany zapalne naskórka, ale także sprzyja wzrostowi C. acnes 6,7,8. W eksperymencie 7 dni po zastosowaniu kwasu oleinowego uszy szczurów wykazywały zaczerwienienie i obrzęk. Od 7 do 14 dnia na uszach szczura zaczęły pojawiać się łuski i zaskórniki. Od 15 do 21 dnia zaskórniki wzrosły, ale nie zaobserwowano dalszych objawów trądziku. W 21 dniu zaczęliśmy wstrzykiwać śródskórnie 1 × 107 CFU C. ACNES, szeroko stosowane podejście udokumentowane w poprzednich badaniach19.
Na początku efekty nie były oczywiste, ale później znaleźliśmy grudki w uszach szczurów, którym wstrzyknięto C. trądzik. Biorąc pod uwagę, że grubość ucha nie wykazywała znaczących zmian w czasie między grupami, zdecydowaliśmy się zakończyć eksperyment w 25 dniu (ryc. 2 i tabela 2). Ten protokół nadal ma pewne ograniczenia. Mały rozmiar okolicy ucha może mieć wpływ na dalsze leczenie farmakologiczne. C. acnes nie jest jedyną mikrobiotą zaangażowaną w patologiczny proces trądziku, dlatego lepszym rozwiązaniem może być stosowanie różnych bakterii do wywoływania trądziku, aby naśladować stan kliniczny26.

Trądzik pospolity to powszechna przewlekła choroba skóry charakteryzująca się obecnością zaskórników, grudek i krost na twarzy, szyi i klatce piersiowej, które w ciężkich przypadkach mogą przekształcić się w guzki, torbiele i trwałe blizny1. Badania epidemiologiczne donoszą, że trądzik dotyka 9,4% światowej populacji, a wynikające z niego objawy stanowią poważne wyzwanie fizyczne i psychospołeczne2,3.
Patogeneza trądziku jest wieloczynnikowa, obejmuje cztery kluczowe procesy: nadmierną produkcję sebum, tworzenie zaskórników, kolonizację mieszków włosowych przez mikrobiotę skóry oraz uwalnianie mediatorów stanu zapalnego wokół jednostki włosowo-łojowej4,5. Zwiększone wydzielanie sebum, skutkujące gromadzeniem się nadmiaru nienasyconych wolnych kwasów tłuszczowych (UFFA), przyczynia się do nieprawidłowej reprodukcji mikrobioty skóry, z której jedną jest Cutibacterium acnes, jak wykazano w badaniach genomicznych6. Tymczasem mikrobiota skóry rozkłada sebum i zwiększa stężenie UFFA, co prowadzi do błędnego koła7. Ponadto nadmiar UFFA powoduje nadmierne rogowacenie mieszków włosowych, co z kolei wywołuje trądzik8. Mikrobiota skóry i zwiększone wydzielanie sebum aktywują receptory Toll-podobne (TLR) do produkcji wielu cytokin prozapalnych, takich jak interleukina (IL)-1 i TNF-α9,10. Ta kaskada stanów zapalnych, w połączeniu ze zwiększonym sebum i przerostem drobnoustrojów, kończy się wyraźnym nadmiernym rogowaceniem mieszka włosowego i wystąpieniem trądziku11.
Szybki rozwój w dziedzinie badań nad trądzikiem i związanymi z nim wymaganiami klinicznymi doprowadził do stworzenia serii zwierzęcych modeli zapalenia trądziku na uchu szczura, grzbietach szczurów lub myszy oraz uchu królika12,13,14,15. Metody obejmują śródskórne wstrzyknięcie C. trądzik, stosowanie olejków na skórę w celu symulacji nieprawidłowego wydzielania gruczołów łojowych i nadmiernego rogowacenia lub kombinacja obu w celu przyspieszenia stanu zapalnego skóry w celu powstania trądziku16,17,18,19. Jednak stosowanie i dawkowanie środków chemicznych i biologicznych różni się między poprzednimi badaniami, co może zmylić badaczy zamierzających ustalić odpowiedni model trądziku. Badanie to miało na celu ustanowienie łatwej w obsłudze i skutecznej metody tworzenia złożonego modelu gryzoni trądzikowych i zapewnienie wzorca dla naukowców zajmujących się trądzikiem pospolitym.

<table><tbody><tr><td>Wskaźnik anaaerodynamiczny&nbsp;</td><td>Mitsubishi, Japonia</td><td>C-22</td><td></td></tr><tr><td>AnaeroPack</td><td>Mitsubishi, Japonia</td><td>C-11, C-41</td><td></td></tr><tr><td>Columbia Płytka z agarem do krwi</td><td>BeNa Cuture Collection, Chiny</td><td>BNCC330605</td><td></td></tr><tr><td>Inkubator do stałej temperatury</td><td>SHANGCHENG, Chiny</td><td>303-0</td><td></td></tr><tr><td>Wacik bawełniany</td><td>HYNAUT, Chiny</td><td>_</td><td></td></tr><tr><td>Cutibacterium acnes</td><td>Kolekcja BeNa Cuture, Chiny</td><td>BNCC330605</td><td></td></tr><tr><td>System wykrywania Dako REAL EnVision, peroksydaza / DAB +, królik / mysz</td><td>DAKO, Dania</td><td>K5007</td><td></td></tr><tr><td>jednorazowa sterylna igła do wstrzykiwań</td><td>Aparat medyczny Zhejiang Oujian, Chiny_</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Waga elektroniczna</td><td>JINXUAN, Chiny</td><td>A017</td><td></td></tr><tr><td>Elektroniczna suwmiarka z noniuszem</td><td>Deli, Chiny</td><td>DL90150</td><td></td></tr><tr><td>Kwas oleinowy (odczynnik analityczny, AR)</td><td>Fangzheng, Chiny_</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Chlorek sodu do wstrzykiwań</td><td>CR Double CRANE, Chiny</td><td>Y2212241</td><td></td></tr><tr><td>SPSS Statistics</td><td>IBM, USA</td><td>26.0</td><td></td></tr><tr><td>sterylne strzykawki podskórne</td><td>Polimer medyczny grupy Shandong Weigao, Chiny_</td><td></td><td></td></tr><tr><td>TNF Alfa przeciwciało monoklonalne</td><td>Proteintech Group, int, Stany Zjednoczone</td><td>60291-1-lg</td><td></td></tr></tbody></table>

szczurzy model trądziku złożonego

A Rat Model of Compound Acne

Trądzik pospolity to powszechna przewlekła choroba skóry charakteryzująca się obecnością zaskórników, grudek i krost na twarzy, szyi i klatce piersiowej. Aby symulować zapalenie trądziku pospolitego, protokół ten szczegółowo opisuje podejście do ustanowienia złożonego modelu gryzoni trądzikowych poprzez wywołanie zapalenia trądziku w uszach szczurów za pomocą kwasu oleinowego i Cutibacterium acnes (C. acnes). Szczury zostały losowo podzielone na cztery grupy: normalna grupa kontrolna (NC), uszy leczone grupą kwasu oleinowego (OA), uszy leczone grupą C. acnes (C. acnes), uszy leczone kwasem oleinowym i C. acnes (OA + C. acnes). Aby naśladować nadmierną produkcję sebum, kwas oleinowy smarowano uszami szczurów w grupach OA i OA + C. acnes przez 25 dni.
Od 21 do 25 dnia, zawiesina C. acnes była wstrzykiwana śródskórnie do uszu szczurów w grupach C. acnes i OA + C. acnes w celu zaostrzenia stanu zapalnego trądziku. Grubość ucha mierzono co tydzień jako wskaźnik nasilenia stanu zapalnego. Przeprowadzono obserwację ogólną, barwienie hematoksyliną i eozyną oraz immunohistochemię (IHC), a wyniki wykazały, że uszy grupy OA i grupy OA + C. acnes były pogrubione i utwardzone, czemu towarzyszył rumień i obecność zaskórników. Dodatkowo grudki obserwowano w grupach C. acnes i OA + C. acnes. W badaniu histopatologicznym stwierdzono hiperkeratynizację i rozszerzone lejki mieszków włosowych w grupach OA i OA + C. acnes. Naciekanie komórek zapalnych i ropni stwierdzono w skórze właściwej grup C. acnes i OA + C. acnes. Wyniki IHC potwierdziły podwyższony poziom czynnika martwicy nowotworu (TNF)-α w skórze właściwej grup C. acnes i OA + C. acnes. Wszystkie powyższe wyniki łącznie wskazują na pomyślne ustanowienie złożonego modelu gryzoni z trądzikiem.

Grubość i wygląd skóry 
Od 7. do 21. dnia uszy w grupie OA oraz w grupie OA + C. acnes były znacznie grubsze niż w grupach NC i C. acnes. W 25. dniu uszy w grupie OA, grupie C. acnes oraz grupie OA + C. acnes były znacznie grubsze niż w grupie NC (p &lt; 0.05). Średnią grubość uszu w trakcie eksperymentu przedstawiono na Rysunku 2 oraz w Tabeli 2.
Od 7. do 25. dnia uszy w grupie OA oraz w grupie OA + C. acnes były pogrubione i stwardniałe, czemu towarzyszyły rumień, łuski i zaskórniki. Zaobserwowano, że szczury od czasu do czasu drapią uszy, co powodowało krwawienie. W 25. dniu w uszach zwierząt z grupy C. acnes oraz grupy OA + C. acnes stwierdzono obecność grudek (Rysunek 3).
Histopatologia 
W mieszkach włosowych uszu w grupie OA oraz grupie OA + C. acnes zaobserwowano parakeratozę i hiperkeratozę, wraz z przerostem warstwy ziarnistej i kolczystej oraz poszerzeniem lejka mieszka włosowego. W skórze właściwej grup C. acnes oraz OA + C. acnes stwierdzono naciek mieszanych komórek zapalnych, w tym limfocytów i neutrofili. Ponadto w skórze właściwej grup C. acnes i OA + C. acnes wystąpiła znacząca ekstrawasacja erytrocytów oraz ropnie (Rysunek 4). Jak pokazano na Rysunku 5, ocena patologiczna wykazała wzrost punktacji w grupie C. acnes oraz grupie OA w porównaniu z grupą NC, a wynik był istotnie wyższy w grupie OA + C. acnes niż w grupach NC i OA (p &lt; 0.05).
IHC 
Jak pokazano na Rysunku 6, TNF-α wykazano w wysokim stopniu w skórze właściwej grup C. acnes oraz OA + C. acnes.
<img alt="Przetwory histopatologiczne tkanki skóry, barwione do analizy mikroskopowej, przedstawiające strukturę komórkową." class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/65859/65859fig01.jpg" data-altupdatedat="1788304762000" data-alt="Rycina 1"> 
Rycina 1: Przykładowe obrazy punktacji patologicznej. Komórki zapalne zaznaczono czerwonymi strzałkami. Przypisywanie punktacji znajduje się w Tabeli 1. (A) Wynik = 0, brak keratyny w lejku; (B) wynik = 1, hiperplazja nabłonka i gęsta, jednolita akumulacja keratyny rozszerzająca kanał mieszka, jednak bez znacznego nasilenia; (C) wynik = 1, niewielka liczba komórek zapalnych wokół mieszków; (D) wynik = 2, rozległa infiltracja komórek zapalnych w skórze właściwej; (E) wynik = 3, akumulacja gęstej keratyny rozszerzającej lejek i wnikającej do przewodów gruczołów łojowych, przypominająca zaskórniki w przypadkach klinicznych; (F) obecność ropni wokół lejka, które mogą potencjalnie prowadzić do powstania grudek lub krost. Paski skali = 100 µm. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/65859/65859fig01large.jpg" target="_blank">Kliknij tutaj, aby wyświetlić większą wersję tej ryciny.</a>
<img alt="Analiza grubości małżowiny usznej w ciągu 25 dni; wykres liniowy; wyniki grup NC, OA, C. acnes, OA+C. acnes." class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/65859/65859fig02.jpg" data-altupdatedat="1788304762000" data-alt="Rycina 2"> 
Rycina 2: Trendy zmian grubości małżowiny usznej od dnia 0 do dnia 25. Grupę NC oznacza linia czerwona, grupę OA linia niebieska, grupę C. acnes linia zielona, a grupę OA i C. acnes linia żółta. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/65859/65859fig02large.jpg" target="_blank">Kliknij tutaj, aby wyświetlić powiększoną wersję tej ryciny.</a>
<img alt="Postęp leczenia uszu, kwas oleinowy, C. acnes i kontrola. Porównawcza analiza stanu zapalnego." class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/65859/65859fig03.jpg" data-altupdatedat="1788304762000" data-alt="Rycina 3"> 
Rycina 3: Wygląd makroskopowy uszu. Zaskórniki i grudki zostały zaznaczone czerwonymi strzałkami. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/65859/65859fig03large.jpg" target="_blank">Kliknij tutaj, aby wyświetlić powiększoną wersję tej ryciny.</a>
<img alt="Analiza histologiczna, wyniki barwienia preparatów w grupach NC, OA, C. acnes, OA+C. acnes; warstwy skóry." class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/65859/65859fig04.jpg" data-altupdatedat="1788304762000" data-alt="Rysunek 4"> 
Rysunek 4: Histologia uszu szczura. (▲) Hiperkeratoza; (■) parakeratoza; (•) poszerzony lejek mieszka włosowego; (♦) Infiltracja komórek zapalnych. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/65859/65859fig04large.jpg" target="_blank">Kliknij tutaj, aby wyświetlić powiększoną wersję tego rysunku.</a>
<img alt="Wykres słupkowy wyników patologicznych porównujący grupy NC, OA, C. acnes oraz OA z C. acnes wraz z markerami istotności." class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/65859/65859fig05.jpg" data-altupdatedat="1788304762000" data-alt="Rysunek 5"> 
Rysunek 5: Wynik patologiczny. @ oznacza statystycznie istotną różnicę między grupą NC a grupą C. acnes; # oznacza istotną różnicę między grupą NC a grupą OA + C. acnes; * oznacza istotną różnicę między grupą OA + C. acnes a grupą OA (p &lt; 0.05). <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/65859/65859fig05large.jpg" target="_blank">Kliknij tutaj, aby wyświetlić powiększoną wersję tego rysunku.</a>
<img alt="Analiza histologiczna, grupy NC, OA, C. acnes, przekroje skóry, 400μm, 200μm, porównanie mikroskopowe." class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/65859/65859fig06.jpg" data-altupdatedat="1788304762000" data-alt="Rysunek 6"> 
Rysunek 6: Obrazy IHC ekspresji TNF-α w uszach szczurów. (♦) Infiltracja komórek zapalnych. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/65859/65859fig06large.jpg" target="_blank">Kliknij tutaj, aby wyświetlić większą wersję tego rysunku.</a>
<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>Wynik</td>
			<td colspan="3">Charakterystyka</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>0</td>
			<td colspan="3">Niekomedogenny. (patrz Rysunek 1 A)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>1</td>
			<td colspan="3">Hiperplazja nabłonka oraz gęste, jednolite nagromadzenie keratyny rozpoczynające rozszerzanie kanału mieszkowego (patrz Rycina 1 B).</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>1</td>
			<td colspan="3">Obecność niewielkiej liczby komórek zapalnych, szczególnie wokół mieszków włosowych lub przewodów gruczołów łojowych (patrz rysunek 1 C).</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>2</td>
			<td colspan="3">Rozległa infiltracja dużą liczbą komórek zapalnych (patrz Rysunek 1 D).</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>3</td>
			<td colspan="3">Obecność nagromadzenia gęstej keratyny, która poszerza lejek i rozprzestrzenia się do przewodów gruczołów łojowych, wraz z wyraźną hiperplazją nabłonka mieszkowego (patrz Rysunek 1 E).</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>3</td>
			<td colspan="3">Występowanie ropni (patrz Rycina 1 F).</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>
Tabela 1: Przypisywanie punktacji patologicznej. Przykładowe obrazy przedstawiono na Rysunku 1.
<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>Czas</td>
			<td> grupa NC (mm)</td>
			<td>grupa OA (mm)</td>
			<td>C. acnes grupa (mm)</td>
			<td>OA + C. acnes grupa (mm)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dzień 0</td>
			<td>0.4000±0.0250</td>
			<td>0.4167±0.0144</td>
			<td>0.4500±0.0000</td>
			<td>0.4667±0.0382</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dzień 7</td>
			<td>0.5250±0.0661</td>
			<td>0.7667±0.0878*▲</td>
			<td>0.4500±0.0000</td>
			<td>0.7917±0.0764*▲</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dzień 14</td>
			<td>0.5083±0.0289</td>
			<td>0.8167±0.1233*▲</td>
			<td>0.6083±0.0382</td>
			<td>0.9333±0.0804*▲</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dzień 21</td>
			<td>0.5250±0.0433</td>
			<td>1.0667±0.2241*▲</td>
			<td>0.5583±0.0144</td>
			<td>0.9417±0.0722*▲</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dzień 25</td>
			<td>0.5750±0.0500</td>
			<td>0.8250±0.1392*</td>
			<td>0.9500±0.1639*</td>
			<td>1.0583±0.0804*</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>
Tabela 2: Grubość małżowin usznych. Dane przedstawiono jako średnia ± odchylenie standardowe. Symbol „*” oznacza różnicę statystycznie istotną w porównaniu z grupą NC; symbol „▲” oznacza różnicę statystycznie istotną w porównaniu z grupą C. acnes (p &lt; 0,05).

Ten protokół opisuje procedurę wywoływania zapalenia trądzikowego na skórze szczura za pomocą kwasu oleinowego i Cutibacterium acnes.

Szczurzy model trądziku złożonego

Acne vulgaris is a prevalent chronic skin condition characterized by the presence of comedones, papules, and pustules on the face, neck, and chest. To ...

Badanie to ma na celu ustalenie łatwej w obsłudze i skutecznej metody tworzenia złożonego modelu gryzoni trądzikowych. Potwierdzamy, że ten złożony model gryzoni z trądzikiem jest lepszy niż modele indukowane tylko przez Cutibacterium acnes lub kwas oleinowy. Niektórzy badacze przyjęli tylko jedną metodologię wywoływania zapalenia trądzikowego, taką jak stosowanie olejków lub wstrzykiwanie drobnoustrojów.Jednak badania pokazują, że wzajemne oddziaływanie między nimi zaostrza stan zapalny trądziku. Protokół ten ma na celu zapewnienie metody i kryteriów oceny dla modelu trądziku, który łączy C.acnes z kwasami oleinowymi. Nasze odkrycia pokazują, że model złożony indukowany przez oleje i C.acnes może być bardziej zgodny z kliniczną zmianą trądziku w porównaniu z rozmazywaniem samego kwasu oleinowego lub wstrzykiwaniem samego C.acnes.Ponadto staramy się ustalić kryteria oceny stanu zapalnego trądziku. Aby rozpocząć, weź elektroniczną suwmiarkę z noniuszem. Umieść jego zewnętrzną szczękę w środku zewnętrznej krawędzi ucha i wysuń go do kanału słuchowego.Zmierz i zapisz grubość w 2/3 i 1/2 punktach wzdłuż linii. Następnie przechyl głowę szczura na bok, kierując ucho do góry. Nakładaj 50 mikrolitrów kwasu oleinowego równomiernie na brzuszną i grzbietową stronę ucha raz dziennie przez 25 dni.Za pomocą jednomililitrowej strzykawki wyposażonej w igłę o rozmiarze 34 lub 36 wstrzyknąć śródskórnie 50 mikrolitrów zawiesiny Cutibacterium acnes w brzuszną powierzchnię ucha. W 25 dniu zmierz i zapisz grubość uszu. Po przecięciu uszu szczura poddanego eutanazji wywierć otwory w uszach o stałym rozmiarze za pomocą ośmiomilimetrowego wiertła pierścieniowego.Po przygotowaniu i zabarwieniu odcinków uszu obserwuj je pod mikroskopem świetlnym. Zapisz zmiany patologiczne do dalszej oceny przez patologa i przypisz wyniki tym zmianom zgodnie z przedstawioną tutaj tabelą. Uszy w grupach kwasu oleinowego i kwasu oleinowego z Cutibacterium acnes wykazywały zgrubienia, stwardnienie, rumień, łuski i zaskórniki z okazjonalnymi krwawieniami z powodu drapania.Analiza histopatologiczna wykazała parakeratozę, hiperkeratozę i przerost kwasu oleinowego i kwasu oleinowego z grupami Cutibacterium acnes. Ocena patologiczna wskazywała na zwiększone nasilenie w tych grupach w porównaniu z grupą kontrolną. Immunohistochemia wykazała wyższą ekspresję TNF-alfa w skórze właściwej Cutibacterium acnes i kwasu oleinowego z grupami Cutibacterium acnes.

Research

JoVE Journal

Medicine

Medycyna

Ten film opisuje procedurę wywoływania dwuetapowej kancerogenezy skóry w celu zbadania inicjacji guza poprzez miejscowe stosowanie chemikaliów. W pierwszym etapie na skórę modelu mysiego nakłada się mutagen, DMBA, który inicjuje powstawanie nowotworu poprzez powodowanie mutacji w komórkach macierzystych, a następnie stosuje się stymulator wzrostu, TPA, który przyspiesza powstawanie brodawczaka skóry.

Indukowany chemicznie dwuetapowy model kancerogenezy skóry: eksperymentalny mysi model raka skóry in vivo

Szczur, ze względu na swoje rozmiary, dostępność i raczej łagodne zachowanie, był wykorzystywany jako model badawczy przez wiele lat. Celem tego protokołu jest wykorzystanie szczura jako niedokrwiennego modelu gojenia się ran skóry, aby zapewnić cenny wgląd w patofizjologię ran przewlekłych.

Demonstracja modelu rany na skórze z niedokrwieniem skóry u szczura

Opisujemy tutaj metody leczenia noworodków kapsaicyną w celu wywołania atopowego zapalenia skóry u szczurów oraz ekspozycję na odparowany formaldehyd, aby zbadać wpływ inhalacji formaldehydu na atopowe zapalenie skóry.

Skutki narażenia na działanie formaldehydu na szczurzy model atopowego zapalenia skóry wywołanego leczeniem kapsaicyną u noworodków

Przedstawiony tutaj protokół pozwala na reprodukcję rozległej demielinizacji istoty szarej obu półkul korowych u dorosłych samców szczurów Dark Agouti. Metoda polega na domózgowym wszczepieniu cewnika, subklinicznej immunizacji przeciwko glikoproteinie mielinowych oligodendrocytów oraz domózgowej iniekcji prozapalnej mieszaniny cytokin przez wszczepiony cewnik.

Szczurzy model rozległej demielinizacji kory mózgowej indukowanej przez domózgowe wstrzyknięcie cytokin prozapalnych

Prezentujemy protokoły do generowania ostrych i przewlekłych eksperymentalnych modeli ekspresji tików u swobodnie zachowujących się szczurów. Modele opierają się na implantacji kaniuli prążkowia, a następnie zastosowaniu antagonisty GABAA. Model ostry wykorzystuje przejściowe zastrzyki, podczas gdy model przewlekły wykorzystuje przedłużone wlewy za pomocą podskórnej wszczepionej mini-pompy osmotycznej.

Generowanie ostrych i przewlekłych eksperymentalnych modeli ekspresji tików motorycznych u szczurów

Wysoka platforma może bez ograniczeń naprawiać szczury i całkowicie odsłaniać punkty akupunkturowe na plecach podczas manipulacji akupunkturą. W artykule opisano metody wytwarzania wysokiej platformy, ustanowiono szczurzy model astmy i zmierzono zmiany w funkcji oddechowej za pomocą nieinwazyjnego systemu pletyzmografii całego ciała (WBP) w czasie rzeczywistym.

Akupunktura w szczurzym modelu astmy

Model naśladujący kliniczny scenariusz oparzeń i infekcji jest niezbędny do prowadzenia dalszych badań nad oparzeniami. Niniejszy protokół przedstawia prosty i powtarzalny model zakażenia oparzeniami szczurów, porównywalny do tego u ludzi. Ułatwia to badanie oparzeń i infekcji po oparzeniu w celu opracowania nowych miejscowych antybiotyków.

Model oparzeń szczurów do badania oparzeń termicznych skóry o pełnej grubości i infekcji

Ten protokół opisuje wielobarwną technikę immunofluorescencji do oceny szczurzego modelu alergicznego nieżytu nosa.

Znakowanie immunofluorescencyjne w skrawkach tkanki błony śluzowej nosa alergicznych szczurów z nieżytem nosa za pomocą wielokolorowego testu immunologicznego

Tutaj tworzymy szczurzy model dysfunkcji gruczołów łzowych, aby zapewnić podstawę do badania suchego oka z niedoborem wody wodnistej.

Model suchego oka szczura z dysfunkcją gruczołów łzowych wywołaną przez skopolaminę

Opisano zostało szczurze modele rany skóry, które umożliwiają ocenę różnych środków terapeutycznych w warunkach fizjologicznych lub patologicznych na różnych etapach procesu gojenia. Ponadto szczegółowo opisano protokół do wykonywania manualnej planimetrji w celu monitorowania szybkości kurczenia się rany w trakcie naprawy tkanki.

Model szczurzych ran chirurgicznych: podejście do badań nad gojeniem się ran i oceną biomateriałów

Poznaj metodę indukcji trądziku u szczurów za pomocą kwasu oleinowego i Cutibacterium acnes. Złożony model lepiej odzwierciedla kliniczne zmiany skórne niż metody pojedyncze.

Szczurzy model trądziku złożonego

Przeglądaj więcej filmów