Name: Opracowanie modelu raka jelita grubego u myszy i ocena efektu terapeutycznego medycyny chińskiej (Wideo) | JoVE Journal
Uploaded: 2023-10-13T12:50:00.000+00:00
Duration: 6 min 24 s
Description: Poznaj metodę tworzenia modelu raka jelita grubego u myszy i ocenę efektywności dekoktu Liujunzi w zapobieganiu nowotworowi. To podejście łączy medycynę chińską z nowoczesną onkologią.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

Ta praca była wspierana przez Departament Nauki i Technologii Prowincji Jilin (YDZJ202201ZYTS181).

Procedura na zwierzętach została zatwierdzona przez Komitet Etyki Uniwersytetu Medycyny Chińskiej w Changchun (Numer rekordu: 2021214). Wolne od specyficznych patogenów myszy C57BL/6J (8-10 tygodni, waga 18-22 g), samce i samice, trzymano w niezależnie wentylowanych klatkach w temperaturze 22 °C i wilgotności względnej 65%. Myszy rozpoczęły eksperyment po 7 dniach karmienia adaptacyjnego, podczas którego miały swobodny dostęp do wody i diety.
1. Przygotowanie leku
<ol>
	<li>Przygotowanie LJZD 
	UWAGA: Zastosowany lek chiński został zakupiony w Szpitalu Stowarzyszonym Uniwersytetu Medycyny Chińskiej w Changchun i został zidentyfikowany jako prawdziwa medycyna chińska (patrz Tabela 1).
	<ol>
		<li>Umieść Dangshen (12 g), Baizhu (12 g), Gancao (6 g), Chenpi (12 g), Jiangbanxia (9 g) do specjalistycznego ceramicznego garnka (patrz Tabela Materiałów). Dodaj 1000 ml wody destylowanej i moczyć w temperaturze pokojowej przez 1 godzinę (patrz <silna klasa="xfig">Rysunek 1A).</li>
		<li>Proszek 12 g Fuling na drobny proszek za pomocą młynka i moczyć w 300 ml wody destylowanej w innym pojemniku przez 1 godzinę w temperaturze pokojowej.</li>
		<li>Wymieszaj powyższą medycynę chińską w specjalistycznym ceramicznym garnku. Zagotuj mieszaninę, a następnie trzymaj na średnim ogniu, aż pozostanie tylko 300 ml wywaru. Do filtrowania należy użyć gazy medycznej i zachować filtrat w temperaturze pokojowej.</li>
		<li>Dodaj 1000 ml wody destylowanej i powtórz powyższą operację wywaru jeszcze raz. Przefiltruj ponownie za pomocą gazy medycznej. Połączyć filtrat i gotować go, aż pozostanie tylko 150 ml.</li>
		<li>Odwirować zagęszczoną ciecz o stężeniu 10 000 x g przez 5 minut, a następnie zagęścić otrzymany supernatant do 30 ml na średnim ogniu. Przenieś końcowy koncentrat do naczynia i wysusz go w elektrycznym piecu suszącym, aż pozostanie tylko substancja rozpuszczona w postaci proszku.</li>
		<li>Zważyć powyższą substancję stałą i rozpuścić ją w sterylnej wodzie destylowanej, aby uzyskać roztwór zawierający 22,85 mg leku na 0,2 ml (114,16 mg/ml), co stanowi dzienną dawkę myszy.</li>
	</ol>
	</li>
	<li>Preparat kwasu 5-aminosalicylowego 
	UWAGA: Kwas 5-aminosalicylowy (5-ASA; patrz tabela materiałów) ma dobre działanie zapobiegawcze na UC-CRC i był stosowany jako pozytywny lek w tym badaniu23.
	<ol>
		<li>Rozpuścić 64 mg proszku 5-ASA w 200 ml sterylnej wody destylowanej, aby uzyskać 1,82 mg/ml roztworu 5-ASA. Dzienna dawka dla pojedynczej myszy wynosiła 0,2 ml.</li>
	</ol>
	</li>
	<li>Przygotowanie roztworu do wstrzykiwań AOM
	<ol>
		<li>Dodać 2,5 ml sterylnej wody destylowanej do 25 mg proszku AOM (patrz tabela materiałów) i wymieszać za pomocą mieszalnika wirowego (patrz tabela materiałów) w celu uzyskania 10 mg/ml roztworu podstawowego AOM, przechowywać w temperaturze -20 °C do momentu użycia.</li>
		<li>Przygotować roztwór do wstrzykiwań AOM, rozcieńczając roztwór podstawowy AOM sterylną wodą destylowaną w stosunku 10:1 (1 mg/ml).</li>
	</ol>
	</li>
</ol>
2. Ustanowienie modelu UC-CRC
UWAGA: Eksperyment został podzielony na 4 grupy: kontrolną, modelową, LJZD i grupę 5-ASA, po 10 myszy w każdej grupie. Z wyjątkiem grupy kontrolnej, pozostałe grupy były leczone OZUŚ i DSS.
<ol>
	<li>Dootrzewnowe wstrzyknięcie roztworu do wstrzykiwań AOM 
	UWAGA: Po adaptacyjnym karmieniu przez 7 dni, myszom podawano roztwór do wstrzykiwań AOM (1 mg / ml) we wstrzyknięciu dootrzewnowym (patrz <silna klasa = "xfig">Ryc. 1B).
	<ol>
		<li>Trzymaj mysz brzuszkiem do góry i głową lekko w dół. Chwyć skórę pleców, aby napiąć skórę brzucha i przekłuć skórę około 1 cm na prawo od przecięcia linii korzeniowej obu ud na linii środkowej części brzucha za pomocą strzykawki o pojemności 1 ml (patrz tabela materiałów).</li>
		<li>Wcisnąć igłę strzykawki o pojemności 1 ml na odległość 3-5 mm pod skórą, trzymając ją równolegle do linii środkowej jamy brzusznej, a następnie wprowadzić igłę 0,3-0,5 mm do jamy brzusznej pod kątem 45°.</li>
		<li>Po przejściu końcówki przez mięsień brzucha operator wyczuwa nagłą utratę oporu. Następnie pociągnąć strzykawkę na zewnątrz i do tyłu, aby obserwować, czy nie dochodzi do przesiąkania cieczy. Jeśli nie, należy powoli wstrzyknąć roztwór do wstrzykiwań AOM do myszy w dawce 0,1 ml/10 g.</li>
	</ol>
	</li>
	<li>Cykliczna stymulacja 2% roztworu DSS 
	UWAGA: Każdej myszy indukowanej OZUŚ podano 500 ml roztworu DSS w 3, 6 i 9 tygodniu, a myszy piły swobodnie w tym okresie.
	<ol>
		<li>Przygotować 2% roztwór DSS, dodając 500 ml sterylnej wody destylowanej do 10 g DSS (patrz tabela materiałów). Wymieszać za pomocą mieszalnika wirowego i przechowywać w temperaturze 4 °C do momentu użycia.</li>
		<li>Każda mysz indukowana przez AOM wypija swobodnie 500 ml 2% roztworu DSS przez 7 dni w 3, 6 i 9 tygodniu po indukcji AOM.</li>
	</ol>
	</li>
</ol>
3. Leczenie odwykowe
UWAGA: Dorośli ludzie potrzebują 63 g LJZD dziennie. Zgodnie ze wzorem przeliczeniowym eksperymentalnej dawki leku dla myszy i ludzi, równoważna dawka doświadczalna dla myszy (mg/kg) = dawka dla ludzi (mg/kg)/masa ciała (60 kg) x 9,1, dawka dobowa dla myszy wynosiła około 9,6 g/kg.
<ol>
	<li>Potraktuj grupę LJZD i 5-ASA 0,1 ml/10 g przygotowanego roztworu LJZD i 5-ASA przez zgłębnik żołądka odpowiednio w 7. i 15. tygodniu.
	<ol>
		<li>W przypadku podawania dożołądkowego myszom należy wykonać następującą procedurę. Trzymaj mysz w lewej ręce, a w prawej trzymaj aparat do perfuzji żołądka. Włóż igłę strzykawki do ust i wsuń ją w dół tylnej ściany gardła myszy. Zsuń się w dół gardła, gdy myszy połykają i kontynuuj poruszanie się do przodu. Gdy pojawiło się uczucie oporu i strzykawkę można było wepchnąć do gardła, wyciągnij igłę i dokończ wstrzyknięcie.</li>
	</ol>
	</li>
	<li>Potraktuj grupę kontrolną i modelową taką samą ilością soli fizjologicznej (patrz Tabela materiałów).</li>
	<li>Myszy w każdej grupie należy leczyć odpowiednim lekiem raz dziennie o tej samej porze w okresie podawania.</li>
</ol>
4. Ocena modelu UC-CRC i skuteczności LJZD
<ol>
	<li>Wynik wskaźnika aktywności choroby 
	UWAGA: Zgodnie z tabelą 2, wynik wskaźnika aktywności choroby (DAI) oceniano, łącząc utratę wagi, lepkość kału i krwawienie ze stolca myszy.
	<ol>
		<li>Rejestruj masę ciała myszy codziennie od początku żywienia adaptacyjnego do końca leczenia farmakologicznego.</li>
		<li>Uważnie obserwuj konsystencję kału każdej eksperymentalnej myszy i rejestruj wypróżnienia jako jeden z trzech warunków: normalne, luźne stolce i wodnista biegunka.</li>
		<li>Zapisz krwawienie z kału zwierząt doświadczalnych jako jeden z trzech warunków: brak krwawienia, niewielkie krwawienie i widoczna krew w stolcu.</li>
	</ol>
	</li>
	<li>Wykrywanie poziomu IL-6 w surowicy
	<ol>
		<li>Traktuj myszy LJZD lub 5-ASA przez 9 tygodni. Napraw myszy, chwytając lewą ręką skórę szyi myszy i delikatnie naciskając stół doświadczalny, aby przyjąć boczną pozycję odleżynowa. Odetnij wąsy myszy nożyczkami. Ostrożnie odetnij wąsy myszy nożyczkami (patrz Tabela materiałów), aby zapobiec zanieczyszczeniu krwi. 
		UWAGA: Myszy, które nie mogły się swobodnie poruszać, były uważane za prawidłowo naprawione. Jeśli tak się nie stanie, myszy należy naprawić.</li>
		<li>Znieczulić mysz przez inhalację 2% izofluranu. Wysterylizuj skórę wokół gałki ocznej etanolem (patrz tabela materiałów). Delikatnie dociśnij skórę oczu z boku, aby gałka oczna była przekrwiona i wystająca.</li>
		<li>Zaciśnij gałkę oczną pęsetą łokciową i dokładnie i szybko usuń gałki oczne. Pozwól, aby krew spłynęła do rurki odśrodkowej (patrz Tabela materiałów). W tym czasie dotknij serca myszy, aby przyspieszyć pobieranie krwi.</li>
		<li>Pobraną krew należy przechowywać w temperaturze pokojowej przez 30 minut i odwirowywać przy sile 3 500 x g przez 10 minut. Zebrać supernatant i wykryć poziom IL-6 zgodnie z instrukcją zestawu do wykrywania zawartości IL-6 (patrz tabela materiałów).</li>
	</ol>
	</li>
	<li>Oddzielanie tkanki jelita grubego
	<ol>
		<li>Poddaj myszy eutanazji po pobraniu krwi, wdychając 5% przedawkowany izofluran i zwichnięcie szyjki macicy (patrz tabela materiałów) zgodnie z etyką zwierząt.</li>
		<li>Trzymaj myszy w kriogenicznym środowisku anatomicznym. Unieruchomij myszy w pozycji leżącej. Obetnij włosy w dolnej części brzucha nożyczkami i wysterylizuj je etanolem.</li>
		<li>Ściśnij punkt przecięcia między dwoma korzeniami ud a linią środkową brzucha za pomocą kleszczyków do powiek (patrz Tabela materiałów). Wytnij poprzeczne nacięcie około 1-1,5 cm nożyczkami.</li>
		<li>Przyciąć podłużne nacięcie wzdłuż środkowej linii brzucha od środka nacięcia poprzecznego w kierunku wyrostka mieczykowatego.</li>
		<li>Usuń tkanki okołojelitowe w kierunku odbytu, aby oddzielić jelito grube od otaczającej tkanki. Uważaj, aby nie uszkodzić jelita grubego.</li>
		<li>Dociśnij skórę brzucha na boki, aby w pełni odsłonić jelito grube. Usuń jelito grube z jamy brzusznej za pomocą kleszczyków do powiek i odetnij segmenty od odbytu do jelita ślepego (z wyłączeniem); Długość całkowita wynosi około 10 cm. Otrzymane tkanki jelita grubego przechowywać w soli fizjologicznej w temperaturze 4 °C.</li>
	</ol>
	</li>
	<li>Ocena długości i masy odbytnicy
	<ol>
		<li>Ekstrahować sól fizjologiczną w temperaturze 4 °C za pomocą igły o pojemności 5 ml (patrz tabela materiałów) w celu przepłukania wnętrza jelita grubego. Następnie umieść jelito grube na bibule chłonnej, aby wchłonąć wilgoć z tkanki.</li>
		<li>Zważ tkanki jelita grubego, a następnie umieść je na papierze A4, aby zmierzyć ich długość.</li>
	</ol>
	</li>
	<li>Zmierz liczbę guzów w jelitie grubym
	<ol>
		<li>Przeciąć jelito grube wzdłuż, aby w pełni je rozłożyć i obserwować liczbę i wielkość guzów w jelitie grubym.</li>
	</ol>
	</li>
	<li>Analiza patologiczna jelita grubego
	<ol>
		<li>Utrwalić jelito grube w 4% paraformaldehydzie przez 24 godziny. Utrwaloną tkankę odbytnicy zanurzyć w stopionej parafinie i ciąć w sposób ciągły o grubości 5 μm za pomocą mikrotomu do zamrażania tkanek.</li>
		<li>Zgodnie z procedurą Hou et al.24, odparafinuj skrawki w ksylenie, a następnie odwadniaj je seryjnymi stężeniami etanolu. Po barwieniu roztworem hematoksyliny przez 5 minut spłucz skrawki czystą wodą. Następnie barwić 0,5% roztworem eozyny przez 1 minutę (patrz tabela materiałów).</li>
		<li>Ponownie wykonaj odwodnienie gradientowe i zabieg przezroczysty ksylen. Uszczelnij skrawki i obserwuj je pod mikroskopem optycznym (patrz Spis materiałów) i sfotografuj, zgodnie z opisem Xie et al.25.</li>
	</ol>
	</li>
	<li>Analiza immunohistochemiczna jelita grubego
	<ol>
		<li>Odwoskować i odwodnić skrawki zgodnie z powyższą metodą. Napraw antygen w sekcjach za pomocą techniki naprawy termicznej pod wysokim ciśnieniem, zgodnie z opisem Gok et al.26.</li>
		<li>Namocz skrawki w endogennych blokerach peroksydazy w temperaturze pokojowej przez 15 minut. Uszczelnij skrawki kozią surowicą (patrz tabela materiałów).</li>
		<li>Dodać przeciwciało pierwszorzędowe ZO-1 (1:1000), Okludynę (1:1000) i KI67 (1:500; patrz Tabela Materiałów) do sekcji i inkubować przez noc w temperaturze 4 °C. Przepłukać skrawki buforem PBS (patrz Tabela Materiałów), dodać do niego przeciwciało drugorzędowe ogólnego przeznaczenia (1:5000; patrz Tabela Materiałów) i inkubować w temperaturze 37 °C przez 30 minut.</li>
		<li>Dodaj roztwór DAB (patrz Tabela materiałów) do sekcji dotyczących opracowywania kolorów. Przeciwbarwić skrawki roztworem hematoksyliny.</li>
		<li>Odwodnić, przeźroczyścić i ponownie uszczelnić sekcje. Obserwuj ekspresję białka pod mikroskopem optycznym.</li>
	</ol>
	</li>
</ol>

Liujunzi Decoction: An Effective Treatment for UC-CRC Prevention

Autorzy nie mają nic do ujawnienia.

CRC jest jednym z najczęstszych nowotworów na świecie, z około 1 148 000 nowych przypadków i ponad 576 000 zgonów każdego roku. CRC można podzielić na trzy typy w zależności od różnych przyczyn, w tym dziedziczne, sporadyczne i UC-CRC31. Częstość występowania CRC u pacjentów z chorobami zapalnymi jelit, takimi jak WZJG, jest znacznie wyższa niż w populacji ogólnej. WZJG stymuluje rozwój CRC poprzez szlak zapalno-nowotworowy, który różni się od typowego szlaku gruczolak-gruczolakorak<sup class="xre...

Rak jelita grubego (CRC) jest powszechnym nowotworem złośliwym przewodu pokarmowego, trzecim najczęstszym nowotworem złośliwym i drugą najczęstszą przyczyną zgonów na świecie, odpowiadając za 10% globalnej zachorowalności na raka i 9,4% całkowitej liczby zgonów związanych z rakiem1,2. Czynniki genetyczne, przewlekłe stany zapalne, dieta wysokotłuszczowa, cukrzyca i nieprawidłowa flora jelitowa są czynnikami ryzyka CRC3,4. Wśród nich nieswoiste zapalenie jelit, zwłaszcza wrzodziejące zapalenie jelita grubego (UC), jest wyraźnym czynnikiem ryzyka CRC5,6. UC-CRC ASSOCIATED UC (UC-CRC) to proces przejściowy stanu zapalnego, atypowego przerostu i raka oparty na przewlekłym zapaleniu jelita grubego, który różni się od typowego modelu rozwoju gruczolakoraka CRC7,8. W porównaniu z populacją ogólną, ryzyko CRC jest około 10-40 razy wyższe u pacjentów z nieswoistymi zapaleniami jelit9.
Obecnie chirurgia jest nadal standardowym sposobem leczenia CRC, a w zależności od lokalizacji i stadium nowotworu, radioterapia, ogólnoustrojowa terapia lekowa lub kombinacja obu tych metod są możliwe10. Chociaż te tradycyjne metody leczenia poczyniły ogromne postępy, ze względu na wysoką heterogeniczność i wskaźnik nawrotów CRC, rokowanie jest złe, a efekt leczenia nie jest idealny11,12. Dlatego wczesne wykrycie, wczesna diagnoza i kompleksowe leczenie są kluczem do poprawy wskaźnika przeżycia pacjentów z CRC, a szczególnie ważne jest zwrócenie uwagi na transformację WZJG w CRC. Z biegiem lat tradycyjna medycyna chińska (TCM) przyciągnęła wiele uwagi w leczeniu UC-CRC lub przewlekłego zapalenia żołądka ze względu na ograniczone skutki uboczne i znaczną skuteczność. Opierając się na leczeniu dialektycznym, słynni praktycy medycyny chińskiej różnych pokoleń stworzyli dużą liczbę klasycznych recept, takich jak Huangqi Jianzhong decoction13, Sijunzi decoction14 i Sishen pill15.
Odwar Liujunzi (LJZD) wywodzi się z dzieł Yi Xue Zheng Zhuan skompilowanych w czasach dynastii Ming i jest klasyczną receptą w TCM16. Jak pokazano w tabeli 1, LJZD składa się z sześciu tradycyjnych ziół, w tym Codonopsis pilosula (Franch.) Nannf. (Dangshen), Poria cocos (Schw.), Wolf (Fuling), Atractylodes macrocephala Koidz. (Baizhu), Glycyrrhiza uralensis Fisch. (Gancao), Citrus reticulata Blanco (Chenpi) i Pinellia ternata (Thunb.) Breit (Banxia), który ma działanie uzupełniające qi i wzmacniające śledzionę, wysuszające wilgoć i rozpuszczające flegmę. We współczesnej praktyce klinicznej jest często stosowany w leczeniu przewlekłego zapalenia błony śluzowej żołądka, wrzodów żołądka i wrzodów dwunastnicy. Nowoczesne badania farmakologiczne wykazały, że LJZD i zmodyfikowany LJZD mają wysoką wartość aplikacyjną w leczeniu uzupełniającym WZJG i raka przewodu pokarmowego17,18,19.
Obecnie istnieje wiele sposobów konstruowania mysich modeli UC-CRC, ale mysi model indukowany azoksymetanem (AOM)/siarczanem dekstranu sodu (DSS) jest najczęściej używanym modelem UC-CRC; objawy kliniczne, obserwacje morfologiczne i patologiczne dowiodły, że model jest bardzo podobny do ludzkiego UC-CRC20,21. Podstawową zasadą jest najpierw wywołanie kancerogenezy za pomocą chemicznego czynnika rakotwórczego OZUŚ, a następnie ciągłe wystawianie myszy na działanie środowiska stymulacji stanu zapalnego DSS, aby symulować ciągłe uszkodzenie i naprawę nabłonka błony śluzowej jelit, konstruując w ten sposób model myszy UC-CRC22. Celem tego badania jest ustalenie mysiego modelu UC-CRC poprzez dootrzewnowe wstrzyknięcie OZUŚ i cykliczną stymulację DSS w krótkim okresie oraz ocena wpływu leku i mechanizmu molekularnego LJZD na UC-CRC w celu zapewnienia naukowych podstaw do leczenia UC-CRC.

<table><tbody><tr><td>Azoksymetan</td><td>Sigma</td><td>A5486</td><td></td></tr><tr><td>Kwas 5-aminosalicylowy</td><td>Kuihua Pharmaceuticals Group Jiamusi Luling Pharmaceutical Co., Ltd</td><td>3819413</td><td></td></tr><tr><td>myszy C57BL/6J</td><td>Liaoning Changsheng Biotechnology Co., Ltd</td><td>NO 210726210100853716</td><td></td></tr><tr><td>Szkiełko nakrywkowe</td><td>Jiangsu Shitai Experimental Equipment Co., Ltd</td><td>10212432C</td><td></td></tr><tr><td>Kolor DAB </td><td>zestaw rozwojowy Jiangsu Shitai Experimental Equipment Co., Ltd</td><td>2005289</td><td></td></tr><tr><td>Maszyna do odwadniania&nbsp;</td><td>Wuhan Junjie Electronics Co., Ltd</td><td>JJ-12J</td><td></td></tr><tr><td>Siarczan dekstranu sodu</td><td>Dalian Meilun Biotechnology Co., Ltd</td><td>MB5535</td><td></td></tr><tr><td>Maszyna do zatapiania</td><td>Wuhan Junjie Electronics Co., Ltd</td><td>JB-P5</td><td></td></tr><tr><td>Barwnik hematoksylino-eozynowy</td><td>Wuhan Hundred Degree Biotechnology Co., Ltd</td><td>B1000</td><td></td></tr><tr><td>IL-6</td><td>Jiangsu Meimian Industrial Co., Ltd</td><td>MM-0163M2</td><td></td></tr><tr><td>Isoflurane</td><td>RWD Life Science Co., Ltd</td><td>R510-22-10</td><td></td></tr><tr><td>KI67</td> przeciwciało pierwotne <td>Google Biotechnology Inc</td><td>GB121141</td><td></td></tr><tr><td>Neutralna guma</td><td>Wuhan Hundred Degree Biotechnology Co., Ltd</td><td>10004160</td><td></td></tr><tr><td>Slajd obiektowy</td><td>Jiangsu Shitai Experimental Equipment Co., Ltd</td><td>10212432A Przeciwciało</td><td></td></tr><tr><td>pierwotne okludyny</td><td>Affnity</td><td>DF7504</td><td></td></tr><tr><td>Ortostatyczny mikroskop optyczny</td><td>Nikon</td><td>Nikon Eclipse CI</td><td></td></tr><tr><td>Patologiczny mikrotom</td><td>Shanghai Leica Instrument Co., Ltd</td><td>RM2016</td><td></td></tr><tr><td>Przeciwciało pierwotne ZO-1</td><td>Abcam</td><td>ab221547</td><td></td></tr></tbody></table>

opracowanie modelu raka jelita grubego u myszy i ocena efektu terapeutycznego medycyny chińskiej

Establishment of Coloproctitis Cancer Model in Mice and Evaluation of Therapeutic Effect of Chinese Medicine

Rak jelita grubego (CRC) jest powszechnym nowotworem układu pokarmowego i stał się trzecim najczęstszym nowotworem złośliwym na świecie i drugą najczęstszą przyczyną zgonów związanych z nowotworem złośliwym. Wrzodziejące zapalenie jelita grubo-śledziowego (UC) jest zmianą przedrakową, a CRC związane z UC (UC-CRC) jest najczęstszym podtypem CRC. Dlatego rozsądny model UC-CRC jest kamieniem węgielnym i gwarancją rozwoju nowych leków. Tradycyjna medycyna chińska (TCM) jest szeroko stosowana w leczeniu UC-CRC ze względu na swoją dobrą skuteczność. Jako klasyczna recepta tonizująca na TCM, wywar Liujunzi (LJZD) jest szeroko stosowany w leczeniu UC-CRC. W tym badaniu ustalono model UC-CRC poprzez połączenie azometanu i siarczanu dekstranu sodu, a następnie podano LJZD. Dane potwierdziły, że LJZD może skutecznie hamować przejście raka w UC-CRC za pomocą masy ciała myszy, długości jelita grubego, czynników patologicznych i zapalnych, funkcji bariery jelitowej i markerów nowotworowych. Protokół ten zapewnia system oceny skuteczności TCM w zapobieganiu i leczeniu UC-CRC.

Odwar LJZD przygotowano zgodnie z proporcjami składników leków w Tabela 1 or metoda wywaru w tradycyjnej medycynie chińskiej (TCM) w Rycina 1AZgodnie z punktem czasowym wskazanym w Rysunek 1Bmyszom domięśniowo podano AOM w stężeniu 1 mg/ml w 7.th dnia, a myszy otrzymały swobodny dostęp do wody pitnej zawierającej 2% DSS w 3.rd, 6thoraz 9th tygodniach. Model mysi UC-CRC został pomyślnie ustanowiony w 15...

Ten protokół dostarcza mysi model wrzodziejącego raka jelita grubego związanego z zapaleniem jelita grubego wywołanego przez azmetan w połączeniu z siarczanem dekstranu sodu. Model został wykorzystany do oceny skuteczności związków tradycyjnej medycyny chińskiej w profilaktyce i leczeniu raka jelita grubego.

Opracowanie modelu raka jelita grubego u myszy i ocena efektu terapeutycznego medycyny chińskiej

Colorectal cancer (CRC) is a common malignancy of the digestive system and has become the third most common malignancy worldwide and the second leading ...

Badanie to dotyczyło zapobiegania i leczenia raka jelita grubego za pomocą tradycyjnej medycyny chińskiej. Naszym celem jest stworzenie mysiego modelu raka jelita grubego i ocena stałych wskaźników tradycyjnej medycyny chińskiej. Potwierdziliśmy, że wywar Liujunzi z medycyny chińskiej jest skutecznym sposobem leczenia raka zapalenia jelita grubego i odbytu.W przyszłości będziemy pracować nad identyfikacją bardziej czułych biomarkerów raka jelita grubego i odbytnicy oraz badaniem przesiewowym wywaru Liujunzi pod kątem celów terapeutycznych. Na początek umieść Danshen, BaiZhu, Danggui, Chenpi i Jiangbanxia w specjalistycznym ceramicznym garnku. Dodaj 1000 mililitrów wody destylowanej i pozwól jej moczyć się w temperaturze pokojowej przez godzinę.Za pomocą młynka zmiel 12 gramów Fuling na drobny proszek. Następnie namocz sproszkowany Fuling w 300 mililitrach wody destylowanej w osobnym pojemniku na godzinę w temperaturze pokojowej. Przygotowaną chińską mieszankę ziołową wymieszaj w specjalistycznym ceramicznym doniczce.Zagotuj mieszaninę i utrzymuj ją na średnim ogniu, aż objętość wywaru zmniejszy się do 300 mililitrów. Połącz filtrat otrzymany z wywaru i kontynuuj gotowanie, aż objęt

establishment-coloproctitis-cancer-model-mice-evaluation-therapeutic

Research

JoVE Journal

Medicine

Medycyna

Do ustanowienia tego modelu można wykorzystać dwie techniki: wstrzyknięcie zawiesiny komórek nowotworowych w ścianę kątnicy lub przeszczepienie fragmentu guza podskórnego na kątnicę. Model ten jest przydatny do badania naturalnej progresji raka jelita grubego oraz testowania nowych środków terapeutycznych przeciwko rakowi jelita grubego.

Ortotopowy model raka jelita grubego u myszy

Przedstawiamy protokół, w którym podanie genotoksycznego czynnika azoksymetanu (AOM), a następnie trzy cykle podania prozapalnego dekstranu siarczanu sodu (DSS), pozwala na szybkie i powtarzalne wywołanie guzów okrężnicy u myszy, wykazujących podobieństwa morfologiczne i molekularne do nowotworów związanych z zapaleniem jelita grubego u ludzi.

Modelowanie raka związanego z zapaleniem jelita grubego z wykorzystaniem azoksymetanu (AOM) i dekstranu siarczanowego sodu (DSS)

W ciągu ostatnich kilku lat, endoskopy nowej generacji stały się ważnymi diagnostycznymi pomocami badawczymi do oceny mysiego zapalenia jelita grubego i guzów jelita grubego. Przedstawiamy tutaj szczegółowy protokół endoskopowej oceny stanu zapalnego i guzów jelita grubego u myszy, a także nowatorski system punktacji, który wykorzystuje identyfikatory dziesiętne do dokumentowania endoskopowego nasilenia zapalenia jelita grubego i guzów jelita grubego.

Elastyczna kolonoskopia u myszy w celu oceny ciężkości zapalenia jelita grubego i guzów jelita grubego przy użyciu zwalidowanego systemu punktacji endoskopowej

Opisujemy metody długotrwałego monitorowania skuteczności terapii w leczeniu patologii jelita grubego u myszy za pomocą sztywnego endoskopu. Protokół ten może być z łatwością wykorzystany do scharakteryzowania odpowiedzi terapeutycznej pojedynczego guza u żywych myszy, a także do monitorowania potencjalnego nawrotu choroby.

Nieinwazyjna ocena skuteczności nowych terapii patologii jelitowych za pomocą seryjnego obrazowania endoskopowego żywych myszy

Opisujemy powstawanie ortotopowych guzów jelita grubego poprzez wstrzykiwanie komórek nowotworowych lub organoidów do jelita ślepego myszy i późniejszą izolację krążących komórek nowotworowych (CTC) z tego modelu.

Izolacja krążących komórek nowotworowych w ortotopowym mysim modelu raka jelita grubego

Prezentowany protokół opisuje łatwe chirurgiczne usunięcie wyrostka robaczkowego (łaty kątniczej) u myszy, a następnie indukcję raka jelita grubego związanego z chorobą jelit grubego. Ten mysi model wyrostka robaczkowego umożliwia badanie biologicznej roli wyrostka robaczkowego w patogenezie chorób przewodu pokarmowego u ludzi.

Mysi model wycięcia wyrostka robaczkowego przewlekłego raka jelita grubego związanego z zapaleniem jelita grubego poprzez precyzyjną lokalizację łaty kątniczej

Niniejsze badanie koncentruje się na indukcji in vivo podskórnej indukcji luminescencyjnych komórek raka jelita grubego w modelu mysim oraz na późniejszym pomiarze luminescencji za pomocą systemu obrazowania. Procedura ma na celu stworzenie powtarzalnego modelu wzrostu guza do monitorowania w czasie rzeczywistym i oceny terapeutycznej.

Podskórne zastrzyki ludzkich komórek raka jelita grubego u athymicznych nagich myszy w celu oceny skuteczności przeciwnowotworowej

Opisano metodę propagacji ludzkich guzów siatkówczaka u myszy. Komórki nowotworowe są wstrzykiwane bezpośrednio do oczu myszy z niedoborem odporności. Guzy wtórne zostały pomyślnie wywołane z wykorzystaniem zarówno komórek pobranych bezpośrednio z ludzkich guzów, jak i hodowanych tumorsfer.

Ustanowienie i propagacja guzów retinoblastomy ludzkiej u myszy z niedoborem odporności

Ta metoda została opracowana w celu dostarczenia stałego roztworu leku przez tętnicę szyjną, aby ocenić farmakokinetykę nowych leków w modelach mysich.

Wlewy z tętnic szyjnych do analizy farmakokinetycznej i farmakodynamicznej taksanów u myszy

Tutaj opisana jest metoda tworzenia syngenicznego mysiego modelu ortotopowego guza pęcherza moczowego w celu oceny skuteczności przeciwnowotworowej białka bakteryjnego HP-NAP.

Ocena skuteczności białka H. pylori HP-NAP jako narzędzia terapeutycznego w leczeniu raka pęcherza moczowego w ortotopowym modelu myszy

Poznaj metodę tworzenia modelu raka jelita grubego u myszy i ocenę efektywności dekoktu Liujunzi w zapobieganiu nowotworowi. To podejście łączy medycynę chińską z nowoczesną onkologią.

Opracowanie modelu raka jelita grubego u myszy i ocena efektu terapeutycznego medycyny chińskiej

Przeglądaj więcej filmów