12 lipca 2024
Opisujemy mysi model pooperacyjnej niedrożności jelit generowany przez manipulację jelitową. Funkcję pasażu pokarmowego, zmiany patologiczne i aktywację komórek odpornościowych oceniano 24 godziny po zabiegu.
Przedmiotem naszego badania jest odporność jelitowa. Staramy się zilustrować patofizjologię i mechanizm powstawania POI w celu opracowania nowych terapii. Jednym z wyzwań jest ustanowienie spójnych i powtarzalnych modeli eksperymentalnych POI u myszy.
Obejmuje to kontrolowanie zmiennych, takich jak techniki chirurgiczne i ocena protokołów opieki nad zwierzętami w celu zminimalizowania zmienności między grupami eksperymentalnymi. Kolejnym wyzwaniem jest zilustrowanie mechanizmów patofizjologicznych leżących u podstaw POI u myszy. Nasz protokół ma na celu ustanowienie powtarzalnego modelu z minimalną zmiennością do badania patofizjologii POI i oceny nowych strategii przeciwzapalnych.
Naszym celem jest wypełnienie luki między wynikami przedklinicznymi w modelach mysich a tym, że mają one znaczenie kliniczne u ludzi, zwiększając w ten sposób potencjał wyników eksperymentalnych do przełożenia się na skuteczne metody leczenia POI. Aby rozpocząć, umieść znieczuloną mysz na platformie chirurgicznej. Użyj elektrycznej golarki do włosów, aby usunąć włosy z brzucha.
Następnie użyj wacika zwilżonego solą fizjologiczną, aby zetrzeć wszystkie luźne włosy na brzuchu. Całkowicie wyprostuj kończyny, aby odsłonić brzuch i ustaw głowę myszy tak, aby utrzymać czyste drogi oddechowe. Następnie za pomocą wacika nasączonego 75% alkoholem należy dwukrotnie zdezynfekować skórę pola operacyjnego.
Następnie użyj suchej, sterylnej gazy medycznej, aby usunąć nadmiar alkoholu z brzucha. Następnie wykonaj nacięcie przez skórę. Za pomocą pęsety unieś mięsień prosty brzucha na środku brzucha i wykonaj małe nacięcie wzdłuż linii środkowej.
Upewnij się, że górny brzeg nacięcia znajduje się od sześciu do ośmiu milimetrów od wyrostka mieczykowatego mostka, a dolny brzeg znajduje się od sześciu do ośmiu milimetrów od zewnętrznych narządów płciowych. Następnie umieść gazę wstępnie zwilżoną solą fizjologiczną po obu stronach nacięcia brzucha. Przymocuj gazę za pomocą kleszczy hemostatycznych na górnej i dolnej krawędzi nacięcia, aby ją odsłonić.
Po prawidłowym zamocowaniu gazy delikatnie dociśnij do obu stron ściany brzucha dwoma wacikami zwilżonymi solą fizjologiczną. Następnie wyciśnij niewielką ilość rurki jelitowej przez nacięcie i umieść ją na gazie, aby ją odsłonić. Zlokalizuj jelito ślepe.
I wyjmij jelito wacikami zwilżonymi solą fizjologiczną do dwóch centymetrów przed żołądkiem, aby uniknąć dotykania trzustki. Przedłuż jelito od bliższego końca więzadła trzustkowo-dwudniowego do dystalnego końca okolicy krętniczo-kątniczej. Następnie wywieraj stały nacisk wzdłuż całego jelita cienkiego od bliższego do dystalnego przez pięć minut, aż pojawią się małe krwawiące plamki.
Następnie użyj wstępnie zwilżonych bawełnianych wacików, aby ostrożnie umieścić całe jelito cienkie z powrotem w jamie brzusznej. Następnie delikatnie masuj brzuch po gazie i ścianie brzucha przez trzy do pięciu sekund, aby zapewnić normalne ułożenie jelit i zapobiec niedrożności lub skrętowi pooperacyjnemu. Następnie wstrzyknij 100 mikrolitrów soli fizjologicznej do jamy brzusznej, aby zastąpić utracone płyny i nasmarować tkankę brzuszną.
Następnie zdejmij gazę i wykonaj dwuwarstwowe zamknięcie w miejscu nacięcia brzucha. Po zszyciu delikatnie przetrzyj obszar w pobliżu nacięcia brzucha suchą, sterylną gazą medyczną, aby był suchy i czysty z krwi, płynu tkankowego lub zwykłej soli fizjologicznej. Nałóż niewielką ilość medycznego kleju do nacięć na nacięcie i wokół niego, aby uniknąć pękania po operacji.
Po wyschnięciu kleju umieść mysz na podgrzewanym kocu w temperaturze 37.5 stopni Celsjusza i monitoruj mysz, aż w pełni się zregeneruje.
To badanie przedstawia mysi model pooperacyjnego nieprzemakalnego jelita (POI) wygenerowany poprzez manipulację jelitową. Badania koncentrują się na zrozumieniu odporności jelitowej i patofizjologii POI w celu opracowania nowych terapii.
Reproducible murine models of postoperative ileus (POI) are essential for de-risking early discovery of anti-inflammatory and pro-motility therapeutics targeting gastrointestinal dysfunction after surgery. This model enables mechanistic interrogation of neuronal, epithelial, and immune pathways implicated in POI, supporting predictive confidence for translational advancement. Consistent experimental outputs facilitate portfolio triage and prioritization of candidate interventions for gastrointestinal recovery.
This murine POI model integrates into the discovery-to-preclinical continuum, supporting target validation, lead identification, and translational research for gastrointestinal therapeutics.