Name: Zabezpieczenie skręconego jądra: szczurczy model uszkodzenia wywołanego niedokrwieniem-reperfuzją jądra (Wideo) | JoVE Journal
Uploaded: 2025-11-14T12:30:00.000+00:00
Duration: 5 min 11 s
Description: Poznaj uproszczony szczurczy model uszkodzenia jądra wywołanego niedokrwieniem-reperfuzją. Metoda umożliwia badanie patofizjologii i potencjalnych terapii antyoksydacyjnych w kontekście skrętu jądra.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

Niniejszym wyrażamy uznanie dla pomocy pana Ojenirana, szefa jednostki audio-wizualnej Kolegium Nauk o Zdrowiu, który pomagał w filmowaniu i montażu procedury.

Badanie zostało zatwierdzone przez Komitet Etyczny Wydziału Nauk Medycznych Podstawowych, Uniwersytet Technologiczny Ladoke Akintola, Ogbomoso, Oyo State, Nigeria (ERCFBMSLAUTECH:033/05/2024). W badaniu użyto dwudziestu samców białych szczurów Wistar, w wieku 10-12 tygodni i ważących 180 ± 10 g. Szczury były aklimatyzowane przez 2 tygodnie, a następnie losowo przydzielone do grupy szamowanych (SO) lub grupy torsji/detorsji (T/D) (n = 10 szczurów w każdej grupie). Szczury SO przeszły podobną operację, jak szczury T/D, ale jądra nie zostały skręcone ani zakotwiczone, aby wywołać T/D.
1. Przygotowanie przedoperacyjne i anestezja
<ol>
	<li>Nastąpiło narażenie zwierząt (grupy SO i T/D) na nocny post przez 12 godzin przed operacją.</li>
	<li>W dniu operacji szczury (grupy SO i T/D) zostały znieczulone środkiem złożonym z 50 mg/kg ketaminy i 10 mg/kg xylazy dootrzewnowo i potwierdzono odpowiedni poziom głębokości znieczulenia poprzez obserwację braku reakcji zwierząt na ucisk poduszeczki łapki i stymulację świetlną wąsików.</li>
	<li>Ogolono lewe skrotum, okolicę krocza i pachwinę u zwierząt (grupy SO i T/D) i następnie oczyszczono je metylowanym spirytusem i roztworem przeciwsepticznym povidon-jodu lub zgodnie z lokalnymi wytycznymi instytucjonalnymi dotyczącymi dezynfekcji.</li>
</ol>
2. Wywołanie niedokrwienia jądra
<ol>
	<li>Mobilizacja jądra
	<ol>
		<li>Delikatnie wywierać ucisk na brzuchu, aby przesunąć lewe jądro (zarówno z grupy SO jak i T/D) do moszny.</li>
		<li>Mocno chwycić lewe jądro (zarówno z grupy SO jak i T/D) i wykonać wysokie nacięcie skrotalne, o długości około 1,5 cm, aby odsłonić leżące pod nim jądro w osłonie pochwowatej jądra (TV).</li>
		<li>Zlokalizować dolny biegun jądra (zarówno z grupy SO jak i T/D), szczególnie ogon wyrostka jądra i wykonać małe nacięcie w osłonie pochwowatej jądra (TV) za pomocą małych nożyczek do przecinania.</li>
		<li>Umieścić nożyczki pod osłoną pochwowatą jądra (TV) i lekko je rozszerzyć, aby pokazać dwie krawędzie osłony pochwowatej jądra (TV), a następnie chwycić krawędzie po każdej stronie za pomocą zakrzywionych kleszczyków moskiciarskich. Odnosi się to zarówno do grupy SO jak i T/D. 
		UWAGA: Ten krok jest bardzo ważny, ponieważ ustanawia płaszczyznę tkankową, która umożliwi łatwe zwrócenie jądra do moszny po wywołaniu torsji.</li>
		<li>Rozszerzyć nacięcie (zarówno z grupy SO jak i T/D) w osłonie pochwowatej jądra (TV) proksymalnie o około 0,5 cm.</li>
		<li>Wywierać delikatny ucisk na dolnej części brzucha, aby wypchnąć jądro (zarówno z grupy SO jak i T/D) na zewnątrz.</li>
		<li>Tylko dla grupy T/D zmobilizować jądro i zidentyfikować gubernaculum jądra, a następnie przeciąć je, aby oddzielić jądro od dna moszny. 
		UWAGA: Ten krok jest ważny, ponieważ pozwala na skręcenie jądra. Gubernaculum jest identyfikowane jako więzadło, które rozciąga się od końca ogonowego jądra do kanału pachwinowego i kończy się guzowatym rozszerzeniem19,20.</li>
		<li>Chwycić jądro (u zwierząt z grupy T/D) na jego dolnym biegunie (gdzie znajduje się ogon wyrostka jądra) i skręcić je o 720° w kierunku wskazówek zegara, a następnie odnotować czas (oznaczając początek niedokrwienia).</li>
	</ol>
	</li>
	<li>Zakotwiczenie niedokrwieniającego jądra
	<ol>
		<li>Utworzyć torebkę skrotalną, trzymając skręcone jądro (u zwierząt z grupy T/D) na miejscu i przesuwając długie nożyczki do dołu wzdłuż płaszczyzny tkankowej pod osłoną pochwowatą jądra (TV) do moszny, aby utworzyć torebkę.</li>
		<li>Tylko dla zwierząt z grupy T/D, włożyć szyty kotwiczący, trzymając nożyczki w miejscu i wstawiając szyty kotwiczący za pomocą nici chromowej 2-0 od zewnątrz najniższego punktu torebki skrotalnej stworzonej wcześniej. Włożyć szyt do tkanki łącznej na dolnym biegunie jądra i wrócić z powrotem do torebki i na zewnątrz obok początkowego punktu wejścia.</li>
		<li>Zakotwiczać jądro do podstawy moszny, ciągnąc skręcone jądro (u zwierząt z grupy T/D) do moszny i delikatnie wywierając siłę ciągnąca na dwa końce szwu, a następnie mocno zawiązać dwa końce szwu na skórze moszny.</li>
		<li>Zamknij nacięcie skrotalne (u zwierząt z grupy SO i T/D) ciągłym szwem workowym za pomocą nici chromowej 2-0. 
		UWAGA: Zaleca się to dla łatwego usunięcia, gdy ma nastąpić reperfuzja.</li>
	</ol>
	</li>
</ol>
3. Badania biochemiczne i histopatologiczne
UWAGA: Up

<ol><li>Obi, A. O., Okeke, C. J., Ugwuidu, E. I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Acute+testicular+torsion%3A+A+critical+analysis+of+presentation%2C+management%2C+and+outcome+in+southeast+Nigeria%5BTitle%5D)+AND+%22Niger+J+Clin+Pract%22%5BJournal%5D)">Acute testicular torsion: A critical analysis of presentation, management, and outcome in southeast Nigeria.</a> Niger J Clin Pract. 23 (11), 1536-1541 (2020).</li>
<li>Yang, C., Song, B., Tan, J., Liu, X., Wei, G. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Testicular+torsion+in+children%3A+a+20-year+retrospective+study+in+a+single+institution%5BTitle%5D)+AND+%22Sci+World+J%22%5BJournal%5D)">Testicular torsion in children: a 20-year retrospective study in a single institution.</a> Sci World J. 14 (11), 362-368 (2011).</li>
<li>Ganjiani, V., Ahmadi, N., RaayatJahromi, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Protective+effects+of+Stevia+rebaudiana+aqueous+extract+on+experimental+unilateral+testicular+ischaemia%2Freperfusion+injury+in+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Andrologia%22%5BJournal%5D)">Protective effects of Stevia rebaudiana aqueous extract on experimental unilateral testicular ischaemia/reperfusion injury in rats.</a> Andrologia. 52 (2), e13469(2020).</li>
<li>Afolabi, O., Alabi, B., Omobowale, T., Oluranti, O., Iwalewa, O. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cysteamine+mitigates+torsion%2Fdetorsion-induced+reperfusion+injury+via+inhibition+of+apoptosis%2C+oxidative+stress+and+inflammatory+responses+in+experimental+rat+model%5BTitle%5D)+AND+%22Andrologia%22%5BJournal%5D)">Cysteamine mitigates torsion/detorsion-induced reperfusion injury via inhibition of apoptosis, oxidative stress and inflammatory responses in experimental rat model.</a> Andrologia. 54 (1), e14243(2022).</li>
<li>Taskinen, S., Taskinen, M., Rintala, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Testicular+torsion%3A+orchiectomy+or+orchiopexy%5BTitle%5D)+AND+%22J+Ped+Urol%22%5BJournal%5D)">Testicular torsion: orchiectomy or orchiopexy.</a> J Ped Urol. 4 (3), 210-213 (2008).</li>
<li>Cost, N. G., Bush, N. C., Barber, T. D., Huang, R., Baker, L. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Pediatric+testicular+torsion%3A+demographics+of+national+orchiopexy+versus+orchiectomy+rates%5BTitle%5D)+AND+%22J+Urol%22%5BJournal%5D)">Pediatric testicular torsion: demographics of national orchiopexy versus orchiectomy rates.</a> J Urol. 185 (6S), 2459-2463 (2011).</li>
<li>Akhigbe, R. E., Odetayo, A. F., Akhigbe, T. M., Hamed, M. A., Ashonibare, P. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Pathophysiology+and+management+of+testicular+ischemia%2Freperfusion+injury%3A+Lessons+from+animal+models%5BTitle%5D)+AND+%22Heliyon%22%5BJournal%5D)">Pathophysiology and management of testicular ischemia/reperfusion injury: Lessons from animal models.</a> Heliyon. 10, e27760(2024).</li>
<li>Kehinde, E. O., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Significance+of+determining+the+point+of+reperfusion+failure+in+experimental+torsion+of+testis%5BTitle%5D)+AND+%22Int+J+Urol%22%5BJournal%5D)">Significance of determining the point of reperfusion failure in experimental torsion of testis.</a> Int J Urol. 12 (1), 81-89 (2005).</li>
<li>Dokmeci, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Protective+effect+of+L-carnitine+on+testicular+ischaemia-reperfusion+injury+in+rats%3A+Cellular+biochemistry+and+its+modulation+by+active+agents+or+disease%5BTitle%5D)+AND+%22Cell+Biochem+Funct%22%5BJournal%5D)">Protective effect of L-carnitine on testicular ischaemia-reperfusion injury in rats: Cellular biochemistry and its modulation by active agents or disease.</a> Cell Biochem Funct. 25 (6), 611-618 (2007).</li>
<li>Ellati, R. T., Kavoussi, P. K., Turner, T. T., Lysiak, J. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Twist+and+shout%3A+a+clinical+and+experimental+review+of+testicular+torsion%5BTitle%5D)+AND+%22Kor+J+Urol%22%5BJournal%5D)">Twist and shout: a clinical and experimental review of testicular torsion.</a> Kor J Urol. 50 (12), 1159-1167 (2009).</li>
<li>Ranade, A. V., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effect+of+vitamin+E+administration+on+histopathological+changes+in+rat+testes+following+torsion+and+detorsion%5BTitle%5D)+AND+%22Sing+Med+J%22%5BJournal%5D)">Effect of vitamin E administration on histopathological changes in rat testes following torsion and detorsion.</a> Sing Med J. 52 (10), 742-746 (2011).</li>
<li>Jafari, A., Ghasemnejad-Berenji, H., Nemati, M., Ghasemnejad-Berenji, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Topiramate%3A+A+novel+protective+agent+against+ischemia+reperfusion-induced+oxidative+injury+after+testicular+torsion%2Fdetorsion%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Em+Med%22%5BJournal%5D)">Topiramate: A novel protective agent against ischemia reperfusion-induced oxidative injury after testicular torsion/detorsion.</a> Am J Em Med. 44, 257-261 (2021).</li>
<li>Turner, T. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Acute+experimental+testicular+torsion%3A+no+effect+on+the+contralateral+testis%5BTitle%5D)+AND+%22J+Androl%22%5BJournal%5D)">Acute experimental testicular torsion: no effect on the contralateral testis.</a> J Androl. 6 (1), 65-72 (1985).</li>
<li>Baker, L. A., Turner, T. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Leydig+cell+function+after+experimental+testicular+torsion+despite+loss+of+spermatogenesis%5BTitle%5D)+AND+%22J+Androl%22%5BJournal%5D)">Leydig cell function after experimental testicular torsion despite loss of spermatogenesis.</a> J Androl. 16 (1), 12-17 (1995).</li>
<li>Salmasi, A. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effect+of+morphine+on+ischemia-reperfusion+injury%3A+experimental+study+in+testicular+torsion+rat+model%5BTitle%5D)+AND+%22Urology%22%5BJournal%5D)">Effect of morphine on ischemia-reperfusion injury: experimental study in testicular torsion rat model.</a> Urology. 66 (6), 1338-1342 (2005).</li>
<li>Karakaya, E., Ateş, O., Akgür, F. M., Olguner, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Rosuvastatin+protects+tissue+perfusion+in+the+experimental+testicular+torsion+model%5BTitle%5D)+AND+%22Int+Urol+Nephrol%22%5BJournal%5D)">Rosuvastatin protects tissue perfusion in the experimental testicular torsion model.</a> Int Urol Nephrol. 42 (2), 357-360 (2010).</li>
<li>Ikebuaso, A. D., Yama, O. E., Duru, F. I., Oyebadejo, S. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Experimental+testicular+torsion+in+a+rat+model%3A+effects+of+treatment+with+Pausinystalia+macroceras+on+testis+functions%5BTitle%5D)+AND+%22J+Repro+Infertil%22%5BJournal%5D)">Experimental testicular torsion in a rat model: effects of treatment with Pausinystalia macroceras on testis functions.</a> J Repro Infertil. 13 (4), 218(2012).</li>
<li>Esmaeilsani, Z., Barati, F., Mohammadi, R., Shams-Esfandabadai, N., Karimi, I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effects+of+curcumin+nanoparticles+on+the+tissue+oxidative+stress+following+testicular+torsion+and+detorsion+in+rat+model%5BTitle%5D)+AND+%22Iran+J+Vet+Surg%22%5BJournal%5D)">Effects of curcumin nanoparticles on the tissue oxidative stress following testicular torsion and detorsion in rat model.</a> Iran J Vet Surg. 14 (2), 97-104 (2019).</li>
<li>Samy, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+potential+protective+and+therapeutic+effects+of+platelet-rich+plasma+on+ischemia%2Freperfusion+injury+following+experimental+torsion%2Fdetorsion+of+testis+in+the+Albino+rat+model%5BTitle%5D)+AND+%22Life+Sci%22%5BJournal%5D)">The potential protective and therapeutic effects of platelet-rich plasma on ischemia/reperfusion injury following experimental torsion/detorsion of testis in the Albino rat model.</a> Life Sci. 256, 117982(2020).</li>
<li>Schumacher, J. Testis. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aSchumacher%2C+J+%22Equine+Surgery%22">Equine Surgery</a>. Auer,, Stick, J. A., Saunders, J. A. W. B. , 775-810 (2006).</li>
<li>Desser, R. K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Guinea+pig+heterophil+and+eosinophil+peroxidase%5BTitle%5D)+AND+%22Arch+Biochem+Biophys%22%5BJournal%5D)">Guinea pig heterophil and eosinophil peroxidase.</a> Arch Biochem Biophys. 148 (2), 452-465 (1972).</li>
<li>Hp, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+role+of+superoxide+anion+in+the+autoxidation+of+epinephrine+and+a+simple+assay+for+superoxide+dismutase%5BTitle%5D)+AND+%22J+Biol+Chem%22%5BJournal%5D)">The role of superoxide anion in the autoxidation of epinephrine and a simple assay for superoxide dismutase.</a> J Biol Chem. 247, 3170-3175 (1972).</li>
<li>Euler, H. V., Josephson, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Uber+catalase.+IS+European%5BTitle%5D)+AND+%22J+Org+Chem%22%5BJournal%5D)">Uber catalase. IS European.</a> J Org Chem. 452, 158-181 (1972).</li>
<li>Rotruck, J. T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Selenium%3A+biochemical+role+as+a+component+of+glutathione+peroxidase%5BTitle%5D)+AND+%22Science%22%5BJournal%5D)">Selenium: biochemical role as a component of glutathione peroxidase.</a> Science. 179 (4073), 588-590 (1973).</li>
<li>Akhigbe, R. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Testicular+toxicity+in+cisplatin-treated+Wistar+rats+is+mitigated+by+Daflon+and+associated+with+modulation+of+Nrf2%2FHO-1+and+TLR4%2FNF-kB+signaling%5BTitle%5D)+AND+%22J+Trace+Elem+Med+Biol%22%5BJournal%5D)">Testicular toxicity in cisplatin-treated Wistar rats is mitigated by Daflon and associated with modulation of Nrf2/HO-1 and TLR4/NF-kB signaling.</a> J Trace Elem Med Biol. 85, 127489(2024).</li>
<li>Ricken, A. M., Hamed, M. A., Akhigbe, R. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Histopathological+evaluation+of+infertility%3A+Lessons+from+laboratory+rodents%5BTitle%5D)+AND+%22Histol+Histopathol%22%5BJournal%5D)">Histopathological evaluation of infertility: Lessons from laboratory rodents.</a> Histol Histopathol. 39, 671-690 (2024).</li>
<li>Ajayi, A. F., Akhigbe, R. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((In+vivo+exposure+to+codeine+induces+reproductive+toxicity%3A+role+of+HER2+and+p53%2FBcl-2+signaling+pathway%5BTitle%5D)+AND+%22Heliyon%22%5BJournal%5D)">In vivo exposure to codeine induces reproductive toxicity: role of HER2 and p53/Bcl-2 signaling pathway.</a> Heliyon. 6 (11), e05589(2020).</li>
<li>Ricken, A. M., Hamed, M. A., Akhigbe, R. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Histopathological+evaluation+of+infertility%3A+Lessons+from+laboratory+rodents%5BTitle%5D)+AND+%22Histol+Histopathol%22%5BJournal%5D)">Histopathological evaluation of infertility: Lessons from laboratory rodents.</a> Histol Histopathol. 39, 671-690 (2024).</li>
<li>Aldhabaan, S., Hudise, J. Y., ALqarny, M., Alarfaj, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Catgut+versus+polypropylene+sutures+for+transcolumellar+incision+closure+in+open+rhinoplasty%3A+a+retrospective+cohort+study%5BTitle%5D)+AND+%22Cureus%22%5BJournal%5D)">Catgut versus polypropylene sutures for transcolumellar incision closure in open rhinoplasty: a retrospective cohort study.</a> Cureus. 8, e9769(2020).</li>
<li>Afolabi, O. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Atorvastatin-mediated+downregulation+of+VCAM-1+and+XO%2FUA%2Fcaspase+3+signaling+averts+oxidative+damage+and+apoptosis+induced+by+ovarian+ischaemia%2Freperfusion+injury%5BTitle%5D)+AND+%22Redox+Rep%22%5BJournal%5D)">Atorvastatin-mediated downregulation of VCAM-1 and XO/UA/caspase 3 signaling averts oxidative damage and apoptosis induced by ovarian ischaemia/reperfusion injury.</a> Redox Rep. 27 (1), 212-220 (2022).</li>
<li>Akhigbe, R. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Omega-3+fatty+acid+rescues+ischaemia%2Fperfusion-induced+testicular+and+sperm+damage+via+modulation+of+lactate+transport+and+xanthine+oxidase%2Furic+acid+signaling%5BTitle%5D)+AND+%22Biomed+Pharmacother%22%5BJournal%5D)">Omega-3 fatty acid rescues ischaemia/perfusion-induced testicular and sperm damage via modulation of lactate transport and xanthine oxidase/uric acid signaling.</a> Biomed Pharmacother. 142, 111975(2021).</li>
<li>Wei, S. M., Yan, Z. Z., Zhou, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Curcumin+attenuate+ischemia-reperfusion+injury+in+rat+testis%5BTitle%5D)+AND+%22Fertil+Steril%22%5BJournal%5D)">Curcumin attenuate ischemia-reperfusion injury in rat testis.</a> Fertil Steril. 91, 271-277 (2009).</li>
<li>Ritchey, M. L., Bloom, D. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Modified+dartos+pouch+orchiopexy%5BTitle%5D)+AND+%22Urology%22%5BJournal%5D)">Modified dartos pouch orchiopexy.</a> Urology. 45 (1), 136-138 (1995).</li>
</ol>

Autorzy nie mają żadnych konfliktów interesów do zadeklarowania.

Niniejszy artykuł i towarzyszące mu wideo dają szczegółowy krok po kroku opis chirurgicznego wywołania TT do badania IRI jąder za pomocą podejścia zaczepowego. Metoda ta jest szczególnie przydatna, ponieważ eliminuje przedłużające się zewnętrzne wydobywanie jądra, które jest spowodowane technikami zacisku7 i jednocześnie bardziej dokładnie naśladuje kliniczne przedstawienie TT u ludzi10,12.
Gdy niedokrwienie zos...

Torsja jąder (TT) to nagła urazowo-urologiczna sytuacja, w której się skręca worek najądrza wraz z towarzyszącymi mu naczyniami, powodując niedokrwienie jądra. Charakteryzuje się silnym bólem brzucha, mdłościami i wymiotami1. Niedokrwienie, jeśli nie zostanie usunięte przez terminową detorsję, prowadzi do martwicy i utraty zainteresowanego jądra2. Jednak terminowe wdrożenie interwencji chirurgicznej poprzez odkręcenie i przywrócenie przepływu krwi do jądra powoduje uszkodzenie jądra związane z niedokrwieniem i ponownym naczynieniem (IRI), które powoduje histologiczne i biochemiczne zaburzenia jądra i jego funkcji3,4.
Zwierzęce modele TT były szeroko stosowane do badania mechanizmów IRI, które zawsze wynikają z prób zapobiegania progresji TT do martwicy5,6. Istnieją dwa modele TT, zaciskanie woreczka najądrza i skręcanie go. Oba są wykonywane w warunkach sterylnych i odpowiedniej znieczulenia. Powszechnie stosowane środki znieczulające obejmują ketaminę samą lub w połączeniu z ksylazyną7. Inne często stosowane środki znieczulające to uretan i tiopental sodu, zwykle podawany dootrzewnowo7. Mimo to, oba modele mają swoje ograniczenia.
Chociaż bezpośrednie zaciskanie tętnicy jądrowej za pomocą mikrochirurgicznych klipsów8,9 było używane jako sposób wywołania niedokrwienia na określony czas (zwykle 1 godzinę) przed indukcją ponownego naczynienia poprzez usunięcie klipsów, metoda ta nie dokładnie odwzorowuje klinicznego obrazu torsji jądra10. Ponadto, choć chirurgiczne skręcanie woreczka najądrza w celu osiągnięcia niedokrwienia11,12 jest bardziej reprezentatywne dla prezentacji klinicznej, jest obciążone wieloma trudnościami technicznymi, które nie zostały rozwiązane przez krótkie opisy spotykane w sekcji metod artykułów na ten temat.
Jedną z często spotykanych trudności technicznych było umieszczenie i zamocowanie jądra na dnie moszny, aby zapobiec jego odkręceniu podczas okresu niedokrwienia. Podczas gdy niektórzy badacze nie wspominają o zamocowywaniu jądra do ściany moszny13,14, inni polecają zamocowanie jądra do ściany moszny poprzez uszycie toniki albuginei do niej15,16,17. Opisy procesu zamocowania jądra do ściany moszny były w większości bardzo krótkie i niejasne7,18. Próby powielenia procedur opisanych w sekcjach metod poprzednich artykułów spotkały się z poważnymi trudnościami praktycznymi, takimi jak uraz jądra przez przebicie toniki albuginei i niemożność umieszczenia jądra w mosznie bez wywierania nadmiernej presji. Co więcej, z praktycznego punktu widzenia, umieszczenie jądra z powrotem w woreczku moszny po wywołaniu torsji było głównym wyzwaniem w naszych próbach chirurgicznego wywołania doświadczalnej TT. Takie trudności techniczne skutkowały brakiem możliwości skonsekwentnego odtworzenia modelu wśród różnych badaczy.
Zatem procedura opisana w niniejszym badaniu do wywołania modelu TT u szczurów identyfikuje trudności techniczne napotkane w poprzednich modelach i oferuje dla nich rozwiązania. Ten model zapewnia prostą technikę, którą łatwo jest powielić i która naśladuje ludzkie doświadczenia. Model jest zatem niezawodnym i powtarzalnym punktem wyjścia w badaniach nad patologicznymi mechanizmami wynikającymi z IRI.

<table><tbody><tr><td>1 cc syringes</td><td>Nie dotyczy</td><td>Nie dotyczy</td><td>na anestetyk</td></tr><tr><td>2-0 chromic suture</td><td>Nie dotyczy</td><td>Nie dotyczy</td><td>Do zabiegu</td></tr><tr><td>Bard Parker knife handle</td><td>Nie dotyczy</td><td>Nie dotyczy</td><td>Do zabiegu</td></tr><tr><td>Curved Mosquito artery forceps</td><td>Nie dotyczy</td><td>Nie dotyczy</td><td>Do zabiegu</td></tr><tr><td>Dissecting scissors</td><td>Nie dotyczy</td><td>Nie dotyczy</td><td>Do zabiegu</td></tr><tr><td>GraphPad Prism (version 8.0.2)</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Ketamine injection</td><td>Swiss Parenterals LTD Gujarat India</td><td>2321154</td><td>Anestetyk</td></tr><tr><td>Paracetamol injection</td><td>Shanxi Zhongbao Pharmaceuticals, China</td><td>220637</td><td>Środek przeciwbólowy</td></tr><tr><td>Povidone</td><td>JAWA International limited Nigeria&nbsp;</td><td>135S</td><td>Płukanka antyseptyczna</td></tr><tr><td>Procaine penicillin powder</td><td>Anhui Chengshi Pharmaceutical Co Ltd China</td><td>201906</td><td>Do zabiegu</td></tr><tr><td>Surgical blade</td><td>Nie dotyczy</td><td>Nie dotyczy</td><td>Do zabiegu</td></tr><tr><td>Surgical gloves</td><td>Zhenjiang huayang latex products China</td><td>210325</td><td></td></tr><tr><td>Stitch scissors</td><td>Nie dotyczy</td><td>Nie dotyczy</td><td>Do zabiegu</td></tr><tr><td>Toothed dissecting forceps</td><td>Nie dotyczy</td><td>Nie dotyczy</td><td>Do zabiegu</td></tr><tr><td>Xylazine injection</td><td>Bioveta Czech Republic</td><td>396228A</td><td>Anestetyk</td></tr><tr><td>Light Microscope</td><td>Novel Microscope, China</td><td>Nie dotyczy</td><td>Do oceny histopatologicznej</td></tr><tr><td>Digital Camera</td><td>Hayear, China</td><td>Nie dotyczy</td><td>Do oceny histopatologicznej</td></tr><tr><td>TNF-&alpha; kit</td><td>Elabscience, USA</td><td>E-EL-H0109</td><td>Do badania</td></tr><tr><td>Thermo Fischer kit (anti-mouse caspase 3 monoclonal for caspase 3 expression )</td><td>Thermo Fischer Scientific Inc., USA</td><td>Nie dotyczy</td><td>Do immunohistologii (kaspaza 3)</td></tr></tbody></table>

zabezpieczenie skręconego jądra: szczurczy model uszkodzenia wywołanego niedokrwieniem-reperfuzją jądra

Anchorage of Twisted Testis: A Rat Model of Ischemia-Reperfusion Injury of the Testis

Urazy ischemia-reperfuzja (IR) są związane z kilkoma patologiami, w tym z uszkodzeniem jąder. Wcześniejsze modele zwierzęce jąder IR, które polegają na skręceniu szyjki nasiennej w celu osiągnięcia niedokrwienia, obarczone są wieloma trudnościami technicznymi, które powodują niemożność konsekwentnego odtworzenia modelu. Dlatego przedstawiamy prostą metodę wywoływania jądrowego IR u szczurów, która może być łatwo powtórzona.
Ta metoda polega na oddzieleniu gubernaculum od jądra, utworzeniu torebki mosznowej, skręceniu jądra o 720° w kierunku wskazówek zegara na dolnym biegunie i zakotwiczeniu jądra u podstawy moszny. Ten model skutecznie zwęża naczynia jądrowe i wywołuje niedokrwienie jądra. Po 1 godzinie niedokrwienia szyjące szwy są usuwane, a jądro odkręcane. Przewód i towarzyszące mu naczynia są sprawdzane w celu zapewnienia przepuszczalności. Po IR jądro jest pobierane i przecinane w celu oceny histopatologicznej.
Badano histologię jąder pod kątem ogniskowych zmian krwotocznych, przekrwienia naczyniowego, poszerzonej przestrzeni międzykomórkowej i infiltracji komórek zapalnych. Ponadto oznaczono markery stresu oksydacyjnego (malonodialdejd, zmniejszone glutation, katalaza i supertlenek dysmutaza), stanu zapalnego (MPO, TNF-α, IL-1β) i apoptozy (ekspresja kaspazy 3). Ta metoda zapewnia prostszy i łatwo powtarzalny model do badania patofizjologii urazu jąder IR. Co więcej, ten model otwiera okno na badanie potencjalnych środków terapeutycznych w leczeniu urazu jąder IR.

Aktywność XO, poziom MDA oraz aktywności SOD, katalazy i GPx w jądrach zostały zastosowane jako markery stresu oksydacyjnego. Torsja/destorcja (T/D) znacząco zwiększyła aktywność XO i poziom MDA oraz zmniejszyła aktywności SOD, katalazy i GPx w jądrach u szczurów T/D w porównaniu z szczurami przebytego zabiegu szamowego (Rysunek 1), co obrazuje rolę stresu oksydacyjnego w uszkodzeniu wywołanym T/D.
...

Ten artykuł opisuje krok po kroku procedurę tworzenia modelu niedokrwienia/nawrócenia krążenia jądra w celu wytworzenia możliwego do powtórzenia modelu skrętu jądra w badaniach nad patologicznymi mechanizmami uszkodzenia niedokrwienia-nawrócenia krążenia w jądrze.

Zabezpieczenie skręconego jądra: szczurczy model uszkodzenia wywołanego niedokrwieniem-reperfuzją jądra

Ischemia-reperfusion (IR) injuries are associated with several pathologies, including testicular injury. Earlier animal models of testicular IR, which ...

To video przedstawia model szczura zawałowo-reperfuzyjnego uszkodzenia jądra. Ostatnie badania pokazują poprawione wyniki detorsji jądra przy użyciu uzupełniających terapii przeciwutleniających, aby zmniejszyć uszkodzenie zawałowo-reperfuzyjne i zachować ogólną funkcję tkanki. Na początek wykonaj lekkie naciśnięcie na brzuch znieczulonego samca szczura, aby przeprowadzić lewe jądro do moszny.Mocno uchwyć lewe jądro obu grup i wykonaj wysokie nacięcie moszny o długości około 1,5 centymetra, aby odsłonić jądro wewnątrz pochwę łącznotkankową. Zlokalizuj ogon najądrza w dolnym biegunie jądra w obu grupach i użyj małych nożyczek sekcujących, aby nakłuć pochwę łącznotkankową. Umieść nożyczki pod pochewą łącznotkankową i lekko je otwórz, aby oddzielić krawędzie.Następnie chwyć każdą krawędź zakrzywionymi kleszczami tętniczymi. Przedłuż nacięcie pochewę łącznotkankową w kierunku proksymalnym o około 0,5 centymetra w obu grupach. Następnie wykonaj lekkie naciśnięcie na dolnej części brzucha, aby zewnętrznić jądro w obu grupach.Mobilizuj jądro tylko dla grupy z torsją i detorsją. Zlokalizuj gubernaculum i przetnij je, aby odłączyć jądro od podstawy moszny. Następnie uchwyć dolny biegun jądra u zwierząt z torsją i detorsją.Przekręć je o 720 stopni w kierunku wskazówek zegara i odnotuj czas, aby zaznaczyć początek zawału. Aby zakotwić niedokrwione jądro, stwórz woreczek moszny, trzymając przekręcone jądro grupy z torsją i detorsją na miejscu i wstawiając długie nożyczki sekcujące w dół wzdłuż płaszczyzny tkanki pod pochewą łącznotkankową do moszny. Trzymając nożyczki na miejscu, wprowadź szydełkową szydełkową chromic 2-0 od najniższego punktu woreczka moszny do tkanki łącznej na dolnym biegunie jądra.Następnie przynieś go z powrotem w dół i na zewnątrz worka obok początkowego punktu wejścia. Wciągnij przekręcone jądro do moszny i łagodnie wykonaj siłę uciągu na końcach szwu w dół. Następnie mocno zwiń je na skórze moszny, aby zakotwić jądro.Zamknij nacięcie moszny w obu grupach sham-operowanych i z torsją i detorsją za pomocą ciągłego szwu portowego z chromic 2-0. Aktywność enzymu oksydazy ksantynowej i stężenie malondialdehydu były znacznie wyższe w grupie z torsją i detorsją w porównaniu z grupą sham-operowaną. Aktywność superoksydylodismutazy i katalazy w tkankach jądra były znacznie obniżone w grupie z torsją i detorsją w porównaniu z grupą sham-operowaną.Aktywność glutationu peroksydazy była również znacznie obniżona w grupie z torsją i detorsją w porównaniu z grupą sham-operowaną. Ponadto stężenie czynnika nekrozującego guzów alfa i aktywność mieloperoksydazy były znacznie podwyższone w tkankach jądra grupy z torsją i detorsją w porównaniu z grupą sham-operowaną. Torsja i detorsja zniekształciła histoarchitekturę jądra, w tym zdegenerowanie kanalików nasiennych, utratę komórek zarodkowych i przerost międzypłciowy, podczas gdy grupa sham-operowana zachowała normalne cechy histologiczne.Ekspresja kaspazy-3 była znacznie zwiększona w tkankach jądra grupy z torsją i detorsją, co wskazuje na zwiększoną aktywność apoptotyczną. Ustalono wiarygodny model torsji i detorsji jądra, który dokładnie naśladuje ludzkie zdarzenia patologiczne, umożliwiając dokładne zbadanie mechanizmów uszkodzeń. Ten model oferuje prostą, powtarzalną technikę, która naśladuje warunki ludzkie, zapewniając niezawodne podstawy do badania patologicznych mechanizmów leżących u podstaw IRI.Te odkrycia wznoszą nowe pytania dotyczące ścieżek molekularnych napędzających wczesne reakcje na uszkodzenia i czynników, które rządzą powtarzalnością wśród modeli torsji jądra.

anchorage-twisted-testis-rat-model-ischemia-reperfusion-injury

Research

JoVE Journal

Biology

Biologia

Opisujemy modele umiarkowanego i ciężkiego uszkodzenia nerek wywołanego niedokrwieniem i reperfuzją, w których myszy przechodzą jednostronne zaciskanie szypułki nerki, po którym następuje równoczesna lub opóźniona nefrektomia przeciwległa. Modele te konsekwentnie powodują dysfunkcję nerek i zwłóknienie pourazowe, ale ciężkość urazu i przeżycie zależą od pochodzenia myszy, wieku i sprzętu chirurgicznego.

Model niedokrwienno-reperfuzyjny ostrego uszkodzenia nerek i zwłóknienia pourazowego u myszy

To badanie demonstruje technikę tworzenia minimalnie inwazyjnego i łatwego do odtworzenia modelu niedokrwienia rdzenia kręgowego u szczurów. Różne stopnie deficytu motorycznego kończyn tylnych mogą być wytwarzane przez kontrolowanie czasu zgryzu aorty.

Powtarzalny deficyt motoryczny po niedrożności aorty w szczurzym modelu niedokrwienia rdzenia kręgowego

Tutaj opisujemy przedkliniczny model zwierzęcy do badania patofizjologii uszkodzenia niedokrwienno-reperfuzyjnego w mikrochirurgii rekonstrukcyjnej. Ten model wolnego płata skóry oparty na powierzchownych naczyniach nadbrzusza ogonowego u szczura może również pozwolić na ocenę różnych terapii i związków przeciwdziałających uszkodzeniom związanym z uszkodzeniem niedokrwienno-reperfuzyjnym.

Przedkliniczny model szczurzy do badania uszkodzenia niedokrwienno-reperfuzyjnego w mikrochirurgii rekonstrukcyjnej

Uszkodzenie niedokrwienno-reperfuzyjne nerek wiąże się z wysoką zachorowalnością i śmiertelnością u hospitalizowanych pacjentów. W tym miejscu przedstawiamy prosty i skuteczny mysi model jednostronnego uszkodzenia niedokrwienno-reperfuzyjnego nerek i zapewniamy sekwencyjny przegląd reprezentatywnych zmian patologicznych obserwowanych w nerkach.

Skuteczny mysi model jednostronnego uszkodzenia niedokrwienno-reperfuzyjnego nerek

Model ortotopowego przeszczepu nerki u szczurów przyczynia się do zbadania mechanizmu odrzucania alloprzeszczepu nerki. Obecny model zwiększa przeżywalność biorców bez zakłóceń w ukrwieniu i refluksu żylnego dolnej części ciała za pomocą zespolenia end-to-end implantacji nerki oraz metody "tunelowej" zespolenia moczowód-pęcherz moczowy.

Ortotopowy model przeszczepu nerki u szczura do odrzucania alloprzeszczepu nerki

Model niedokrwienno-reperfuzyjny serca szczura został ulepszony dzięki zastosowaniu samodzielnie wykonanego retraktora, rurki z polichlorku winylu i unikalnej metody wiązania. Wyniki elektrokardiogramu, chlorku trifenylotetrazolu i barwienia histologicznego oraz analizy procentowej przeżycia wykazały, że ulepszona grupa modelowa ma wyższe wskaźniki sukcesu i przeżycia niż już istniejąca grupa modelowa.

Ulepszony model niedokrwienia mięśnia sercowego i uszkodzenia reperfuzyjnego u gryzoni

Opisujemy, jak wygenerować powszechnie stosowany model chirurgiczny uszkodzenia niedokrwienno-reperfuzyjnego jelit (IRI) u gryzoni. Zabieg polega na zamknięciu tętnicy krezkowej górnej, a następnie przywróceniu przepływu krwi. Model ten jest przydatny w badaniach nad okluzyjnymi przyczynami jelitowego IRI zarówno w medycynie weterynaryjnej, jak i ludzkiej.

Model gryzoni uszkodzenia niedokrwienno-reperfuzyjnego jelit poprzez niedrożność tętnicy krezkowej górnej

Obecny protokół opisuje szczurzy model okluzji/reperfuzji tętnicy środkowej mózgu, który zachowuje anatomiczną strukturę naczyń mózgowych bez powodowania uszkodzeń.

Szczurzy model niedrożności/reperfuzji tętnicy środkowej mózgu bez uszkadzania struktury anatomicznej naczyń mózgowych

Procedura ta demonstruje transport poprzeczny kory piszczelowej u szczurów, umożliwiając wizualizację i analizę rewaskularyzacji podczas niedokrwienia kończyny.

Model szczura transportu poprzecznego kory piszczelowej do leczenia niedokrwienia kończyn dolnych

Test rotarod jest wykorzystywany do oceny stanu motorycznego w ruchu chodu u szczurów w modelu hemi-Parkinsona.

Wykorzystanie rotarod jako metody jakościowej analizy chodu u szczura

Poznaj uproszczony szczurczy model uszkodzenia jądra wywołanego niedokrwieniem-reperfuzją. Metoda umożliwia badanie patofizjologii i potencjalnych terapii antyoksydacyjnych w kontekście skrętu jądra.

Zabezpieczenie skręconego jądra: szczurczy model uszkodzenia wywołanego niedokrwieniem-reperfuzją jądra

Przeglądaj więcej filmów