Name: Stworzenie szczurzego modelu osteosarkopenii poprzez owariektomię (Wideo) | JoVE Journal
Uploaded: 2025-02-21T12:40:00.000+00:00
Duration: 3 min 52 s
Description: Poznaj metodę tworzenia szczurzego modelu osteosarkopenii poprzez owariektomię. Protokół umożliwia badanie utraty masy kostnej i mięśniowej oraz testowanie terapii w kontekście starzenia.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

playerTrialDesktop

Prace te są wspierane przez granty (1) National Nature Science Foundation (82305275). (2) Program Fundacji Nauk Przyrodniczych Prowincji Liaoning (2022-YGJC-80 i 2022-YGJC-79). (3) Projekt Budowy Kluczowej Dyscypliny Medycyny Chińskiej Wysokiego Szczebla Krajowej Administracji TCM (zyyzdxk-2023040).

Samice szczurów Sprague Dawley (n = 36), w wieku 12 tygodni i ważące około 200-240 g, były trzymane indywidualnie w wentylowanych klatkach w pomieszczeniu dla zwierząt wolnym od specyficznych patogenów (SPF) z 12-godzinnym cyklem światła/ciemności. Mieli oni swobodny dostęp do paszy SPF i sterylnej wody. Szczurom pozwolono zaaklimatyzować się w środowisku przez tydzień przed eksperymentami. Stosując losową alokację, szczury podzielono na grupy po owariektomii (OVX) (każda z 6 szczurami) i grupy pozorowane (każda z 6 szczurami) przez 4, 8 i 12 tygodni po operacji. Wszystkie procedury na zwierzętach zostały przeprowadzone zgodnie z zatwierdzonymi wytycznymi komitetu ds. dobrostanu zwierząt na Uniwersytecie Tradycyjnej Medycyny Chińskiej w Liaoning (nr 21000042021040).
1. Owariektomia u szczurów
UWAGA: Aparat chirurgiczny używany w tym protokole znajduje się na rysunku 1.
<ol>
	<li>Trzymaj szczury w pomieszczeniu dla zwierząt SPF i postępuj zgodnie ze wszystkimi niezbędnymi procedurami przy użyciu wysterylizowanego sprzętu w sterylnym środowisku.</li>
	<li>Lek przeciwbólowy chlorowodorek tramadolu należy podawać w dawce 10 mg/kg (200 μl z 0,1 mg/ml) we wstrzyknięciu podskórnym 30 minut przed zabiegiem. Do znieczulenia wziewnego należy użyć 5% izofluranu rozpuszczonego w 2 l/min tlenu.</li>
	<li>Po podaniu znieczulenia uważnie monitoruj oddech szczura i uszczypnij palce u stóp, aby potwierdzić chirurgiczną płaszczyznę znieczulenia. UWAGA: Jeśli wystąpią jakiekolwiek oznaki skurczów lub drgawek, zaleca się odczekanie dłużej przed kontynuowaniem.</li>
	<li>Umieść szczura na stole warsztatowym z żywicy i zapewnij mu wsparcie grzewcze. Zabezpiecz jego kończyny i usuń sierść po obu stronach grzbietu za pomocą trymera, upewniając się, że 150% obszaru otaczającego pole operacyjne jest wolne od sierści, a następnie udrapuj zwierzę (ryc. 2A). UWAGA: Jeśli efekt depilacji nie jest idealny, do depilacji można użyć kremu do depilacji.</li>
	<li>Zdezynfekuj miejsce, w którym usunięto włosy, za pomocą wacików nasączonych zarówno na bazie jodu, jak i alkoholu. UWAGA: Proces dezynfekcji chirurgicznej polega na rozpoczęciu od środka i poruszaniu się na zewnątrz w okrągłym wzorze, zwykle powtórzonym trzy razy.</li>
	<li>Wykonaj nacięcie z tyłu, około 1,0 cm od linii środkowej. Wykonaj nacięcie blisko połączenia między krzywizną klatki piersiowej a granicą kręgosłupa, nieco niżej o 0,5-1 cm, oddzielając skórę, powięź i mięsień po obu stronach (ryc. 2B). UWAGA: Aby uzyskać dostęp do jamy brzusznej przez słabszą warstwę mięśniową tylnej ściany brzucha, nacięcie jest utrzymywane tak minimalnie, jak to możliwe.</li>
	<li>Znalezienie jajnika może być na początku trudne. Zacznij od zlokalizowania jajowodu i prześledzenia go do końcowego końca jajnika, który jest otoczony warstwą luźnej tkanki tłuszczowej. UWAGA: Prawy jajnik znajduje się z boku od 4 do 5 kręgu lędźwiowego, 7-12 mm za nerką i 15 mm od linii środkowej. Lewy jajnik znajduje się z boku od 5 do 6 kręgu lędźwiowego, 3-5 mm za nerką i 11 mm od linii środkowej.</li>
	<li>Ostrożnie wyjmij jajnik i koniec jajowodu z ciała (ryc. 2C). Zastosuj kleszcze hemostatyczne w najbardziej zwężonym obszarze między końcem macicy a jajnikiem. Użyj nici chirurgicznej, aby go związać, a następnie całkowicie wytnij jajnik nożyczkami. UWAGA: Bardzo ważne jest, aby podczas obchodzenia się z jajowodem i macicą zachować delikatność, unikając nadmiernego ciągnięcia. Podwiązanie stosowane przed owariektomią musi być mocno zabezpieczone, ponieważ miękka tkanka lipidowa wokół jajnika może łatwo spowodować jego poluzowanie. Ten środek ostrożności jest konieczny, aby zapobiec krwawieniu pooperacyjnemu, które może spowodować śmierć szczurów. W grupie pozorowanej wycięto tkankę tłuszczową o równej objętości i wielkości przylegającą do jajnika, a następnie zszyto mięsień i skórę.</li>
	<li>Zwolnij kleszcze hemostatyczne i delikatnie przywróć macicę do jamy brzusznej.</li>
	<li>Indywidualnie zszyj warstwę skóry i mięśni za pomocą wchłanialnych szwów chirurgicznych 5-0 wykonanych z glikolu polietylenowego (ryc. 2D).</li>
	<li>Umieść szczura z powrotem w odkażonej klatce i monitoruj go, aż całkowicie odzyska przytomność po znieczuleniu. UWAGA: Kontynuuj zapewnianie wsparcia cieplnego podczas zabiegu, aż zwierzę w pełni wyzdrowieje ze znieczulenia.</li>
	<li>W ciągu 48 godzin po operacji podawać Ketorolac Tromethamine w dawce 1–2 mg/kg we wstrzyknięciu podskórnym dwa razy dziennie.</li>
	<li>Aby uniknąć zakażenia rany, należy podawać szczurom w każdej grupie domięśniowe wstrzyknięcie penicyliny sodowej w dawce 80 000 jednostek / szczur raz dziennie przez 3 kolejne dni26.</li>
</ol>
2. Pobieranie tkanki kostnej i tkanki mięśniowej
UWAGA: Szczury zostały poddane eutanazji z przedawkowaniem pentobarbitalu sodu (100-200 mg / kg) po 4, 8 i 12 tygodniach po operacji modelowania. Łącznie pobrano 36 próbek.
<ol>
	<li>Odsłoń mięśnie trójgłowe, ramienne ramienia i czworogłowe lewej łydki. Ostrożnie zidentyfikuj i przeanalizuj te mięśnie w ich punktach początkowych i końcowych, aby zachować ich integralność. Następnie zapisz i oblicz średnią mokrej masy mięśni, aby określić współczynniki mokrej masy mięśni. UWAGA: Masa ciała zwierzęcia i współczynnik mokrej masy mięśni szkieletowych = mokra masa mięśni szczura/masa ciała.</li>
	<li>Całkowicie odłącz kość udową, przecinając torebkę stawową w górę wzdłuż kości udowej. Następnie wyeliminuj pobliską tkankę mięśniową i więzadłową.</li>
</ol>
3. Badanie patologiczne
<ol>
	<li>Zanurz tkanki mięśniowe w pojemniku zawierającym 10% neutralny buforowany roztwór formaliny na czas 24 godzin. Następnie dokładnie spłucz tkanki mięśniowe pod bieżącą wodą, aby usunąć utrwalacz.</li>
	<li>Umieść lewą kość udową w 4% roztworze paraformaldehydu na 1 tydzień, a następnie namocz ją w wystarczającej ilości roztworu odwapniającego kwasu etylenodiaminotetraoctowego (EDTA) w celu usunięcia złogów wapnia, przy codziennej wymianie buforu.</li>
	<li>Zmierz wartości gęstości mineralnej kości za pomocą densytometru kości z absorpcjometrią promieniowania rentgenowskiego o podwójnej energii (DXA). Umieść kość udową w promieniowaniu rentgenowskim o podwójnej energii. Ustaw dokładność pomiaru na Dokładna, dostosowując tryb do trybu specyficznego dla małych zwierząt i przeanalizuj BMD kości udowych szczurów za pomocą dołączonego oprogramowania do analizy BMD.</li>
	<li>Umieść próbkę w wosku parafinowym. Podzielić próbki na sekcje do rutynowego badania histologicznego27.</li>
</ol>
4. Analiza statystyczna
<ol>
	<li>Przedstaw zmienne ciągłe jako średnią ±± odchylenie standardowe (SD) i porównaj obie grupy za pomocą testu t dla próby niezależnej. Wszystkie analizy statystyczne przebiegały zgodnie z podejściem dwustronnym, z istotnością statystyczną ustaloną na poziomie P < 0,05. Używaj odpowiedniego oprogramowania do analizy danych do wykonywania analiz danych.</li>
</ol>

<ol><li>Binkley, N., Buehring, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Beyond+FRAX%C2%AE%3A+It%27s+time+to+consider+%26%2334%3BSarco-Osteopenia%5BTitle%5D)+AND+%22J+Clin+Densitom%22%5BJournal%5D)">Beyond FRAX®: It's time to consider &#34;Sarco-Osteopenia.</a> J Clin Densitom. 12 (4), 413-416 (2009).</li>
<li>Hirschfeld, H. P., Kinsella, R., Duque, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Osteosarcopenia%3A+where+bone%2C+muscle%2C+and+fat+collide%5BTitle%5D)+AND+%22Osteoporos+Int%22%5BJournal%5D)">Osteosarcopenia: where bone, muscle, and fat collide.</a> Osteoporos Int. 28 (10), 2781-2790 (2017).</li>
<li>Kaplan, S. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Association+of+radiologic+indicators+of+frailty+with+1-year+mortality+in+older+trauma+patients%5BTitle%5D)+AND+%22JAMA+Surg%22%5BJournal%5D)">Association of radiologic indicators of frailty with 1-year mortality in older trauma patients.</a> JAMA Surg. 152 (2), e164604(2017).</li>
<li>Nielsen, B. R., Abdulla, J., Andersen, H. E., Schwarz, P., Suetta, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Sarcopenia+and+osteoporosis+in+older+people%3A+a+systematic+review+and+meta-analysis%5BTitle%5D)+AND+%22Eur+Geriatr+Med%22%5BJournal%5D)">Sarcopenia and osteoporosis in older people: a systematic review and meta-analysis.</a> Eur Geriatr Med. 9 (4), 419-434 (2018).</li>
<li>Cruz-Jentoft, A. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Sarcopenia%3A+European+consensus+on+definition+and+diagnosis%3A+Report+of+the+European+Working+Group+on+sarcopenia+in+older+people%5BTitle%5D)+AND+%22Age+Ageing%22%5BJournal%5D)">Sarcopenia: European consensus on definition and diagnosis: Report of the European Working Group on sarcopenia in older people.</a> Age Ageing. 39 (4), 412-423 (2010).</li>
<li>Polito, A., Barnaba, L., Ciarapica, D., Azzini, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Osteosarcopenia%3A+A+narrative+review+on+clinical+studies%5BTitle%5D)+AND+%22Int+J+Mol+Sci%22%5BJournal%5D)">Osteosarcopenia: A narrative review on clinical studies.</a> Int J Mol Sci. 23 (10), 5591(2022).</li>
<li>Pourhassan, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Three-year+mortality+of+older+hospitalized+patients+with+osteosarcopenia%3A+Data+from+the+OsteoSys+study%5BTitle%5D)+AND+%22Nutrients%22%5BJournal%5D)">Three-year mortality of older hospitalized patients with osteosarcopenia: Data from the OsteoSys study.</a> Nutrients. 16 (9), 1328(2024).</li>
<li>Salech, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Osteosarcopenia+predicts+falls%2C+fractures%2C+and+mortality+in+Chilean+community-dwelling+older+adults%5BTitle%5D)+AND+%22J+Am+Med+Dir+Assoc%22%5BJournal%5D)">Osteosarcopenia predicts falls, fractures, and mortality in Chilean community-dwelling older adults.</a> J Am Med Dir Assoc. 22 (4), 853-858 (2021).</li>
<li>Yoo, J. I., Ha, Y. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Review+of+epidemiology%2C+diagnosis%2C+and+treatment+of+osteosarcopenia+in+Korea%5BTitle%5D)+AND+%22J+Bone+Metab%22%5BJournal%5D)">Review of epidemiology, diagnosis, and treatment of osteosarcopenia in Korea.</a> J Bone Metab. 25 (1), 1-7 (2018).</li>
<li>Inoue, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Related+factors+and+clinical+outcomes+of+osteosarcopenia%3A+A+narrative+review%5BTitle%5D)+AND+%22Nutrients%22%5BJournal%5D)">Related factors and clinical outcomes of osteosarcopenia: A narrative review.</a> Nutrients. 13 (2), 291(2021).</li>
<li>Teng, Z., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+analysis+of+osteosarcopenia+as+a+risk+factor+for+fractures%2C+mortality%2C+and+falls%5BTitle%5D)+AND+%22Osteoporos+Int%22%5BJournal%5D)">The analysis of osteosarcopenia as a risk factor for fractures, mortality, and falls.</a> Osteoporos Int. 32 (11), 2173-2183 (2021).</li>
<li>Scheuren, A. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Hallmarks+of+frailty+and+osteosarcopenia+in+prematurely+aged+PolgA%28D257A%2FD257A%29+mice%5BTitle%5D)+AND+%22J+Cachexia+Sarcopenia+Muscle%22%5BJournal%5D)">Hallmarks of frailty and osteosarcopenia in prematurely aged PolgA(D257A/D257A) mice.</a> J Cachexia Sarcopenia Muscle. 11 (4), 1121-1140 (2020).</li>
<li>Gasparini, S. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Continuous+corticosterone+delivery+via+the+drinking+water+or+pellet+implantation%3A+A+comparative+study+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Steroids%22%5BJournal%5D)">Continuous corticosterone delivery via the drinking water or pellet implantation: A comparative study in mice.</a> Steroids. 116, 76-82 (2016).</li>
<li>Pal, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+butanolic+fraction+from+the+standardized+stem+extract+of+Cassia+occidentalis+L+delivered+by+a+self-emulsifying+drug+delivery+system+protects+rats+from+glucocorticoid-induced+osteopenia+and+muscle+atrophy%5BTitle%5D)+AND+%22Sci+Rep%22%5BJournal%5D)">A butanolic fraction from the standardized stem extract of Cassia occidentalis L delivered by a self-emulsifying drug delivery system protects rats from glucocorticoid-induced osteopenia and muscle atrophy.</a> Sci Rep. 10 (1), 195(2020).</li>
<li>Mito, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mitochondrial+DNA+mutations+in+mutator+mice+confer+respiration+defects+and+B-cell+lymphoma+development%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+One%22%5BJournal%5D)">Mitochondrial DNA mutations in mutator mice confer respiration defects and B-cell lymphoma development.</a> PLoS One. 8 (2), e55789(2013).</li>
<li>Thomsen, J. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cancellous+bone+structure+of+iliac+crest+biopsies+following+370+days+of+head-down+bed+rest%5BTitle%5D)+AND+%22Aviat+Space+Environ+Med%22%5BJournal%5D)">Cancellous bone structure of iliac crest biopsies following 370 days of head-down bed rest.</a> Aviat Space Environ Med. 76 (10), 915-922 (2005).</li>
<li>Papadopoulou, S. K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Exercise+and+nutrition+impact+on+osteoporosis+and+sarcopenia-The+incidence+of+osteosarcopenia%3A+A+narrative+review%5BTitle%5D)+AND+%22Nutrients%22%5BJournal%5D)">Exercise and nutrition impact on osteoporosis and sarcopenia-The incidence of osteosarcopenia: A narrative review.</a> Nutrients. 13 (12), 4499(2021).</li>
<li>Du, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+hind+limb+disuse+model+inducing+extensor+digitorum+longus+atrophy+in+rats%3A+tail+suspension-immobilization%5BTitle%5D)+AND+%22Aviat+Space+Environ+Med%22%5BJournal%5D)">A hind limb disuse model inducing extensor digitorum longus atrophy in rats: tail suspension-immobilization.</a> Aviat Space Environ Med. 82 (7), 689-693 (2011).</li>
<li>Gomes, R. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Strength+training+reverses+ovariectomy-induced+bone+loss+and+improve+metabolic+parameters+in+female+Wistar+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Life+Sci%22%5BJournal%5D)">Strength training reverses ovariectomy-induced bone loss and improve metabolic parameters in female Wistar rats.</a> Life Sci. 213, 134-141 (2018).</li>
<li>Ma, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Establishment+of+a+rat+model+of+osteosarcopenia%5BTitle%5D)+AND+%22Chin+J+Osteoporos%22%5BJournal%5D)">Establishment of a rat model of osteosarcopenia.</a> Chin J Osteoporos. 28 (1), 1-5 (2022).</li>
<li>Huang, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Prevalence+and+risk+factors+of+osteosarcopenia%3A+a+systematic+review+and+meta-analysis%5BTitle%5D)+AND+%22BMC+Geriatr%22%5BJournal%5D)">Prevalence and risk factors of osteosarcopenia: a systematic review and meta-analysis.</a> BMC Geriatr. 23 (1), 369(2023).</li>
<li>Qi, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((mineral+density+and+trabecular+bone+score+in+Chinese+subjects+with+sarcopenia%5BTitle%5D)+AND+%22Aging+Clin+Exp+Res%22%5BJournal%5D)">mineral density and trabecular bone score in Chinese subjects with sarcopenia.</a> Aging Clin Exp Res. 31 (11), 1549-1556 (2019).</li>
<li>Shu, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((An+integrated+study+of+hormone-related+sarcopenia+for+modeling+and+comparative+transcriptome+in+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Front+Endocrinol%22%5BJournal%5D)">An integrated study of hormone-related sarcopenia for modeling and comparative transcriptome in rats.</a> Front Endocrinol. 14, 1073587(2023).</li>
<li>Nakaoka, K., Yamada, A., Noda, S., Goseki-Sone, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Influence+of+dietary+vitamin+D+deficiency+on+bone+strength%2C+body+composition%2C+and+muscle+in+ovariectomized+rats+fed+a+high-fat+diet%5BTitle%5D)+AND+%22Nutrition%22%5BJournal%5D)">Influence of dietary vitamin D deficiency on bone strength, body composition, and muscle in ovariectomized rats fed a high-fat diet.</a> Nutrition. 60, 87-93 (2019).</li>
<li>Chong, L., Xiaonan, Q., Hao, Z., Xiaosheng, Y. Castration method was used to construct a rat model of kidney-yang deficiency sarcopeniaosteoporosis and explore the mechanism. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aChong%2C+L+%22Chin+Arch+Tradit+Chin+Med%22">Chin Arch Tradit Chin Med</a>. , (2024).</li>
<li>Ma, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((%28S%29-10-hydroxycamptothecin+inhibits+EMT-evoked+osteosarcoma+cell+growth+and+metastasis+by+activating+the+HIPPO+signaling+pathway%5BTitle%5D)+AND+%22Combin+Chem+High+Throughput+Screen%22%5BJournal%5D)">(S)-10-hydroxycamptothecin inhibits EMT-evoked osteosarcoma cell growth and metastasis by activating the HIPPO signaling pathway.</a> Combin Chem High Throughput Screen. 27 (15), 2239-2248 (2024).</li>
<li>Yamazaki, I., Yamaguchi, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Characteristics+of+an+ovariectomized+osteopenic+rat+model%5BTitle%5D)+AND+%22J+Bone+Miner+Res%22%5BJournal%5D)">Characteristics of an ovariectomized osteopenic rat model.</a> J Bone Miner Res. 4 (4), 13-22 (1989).</li>
<li>Lee, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((MiR-141-3p+promotes+mitochondrial+dysfunction+in+ovariectomy-induced+sarcopenia+via+targeting+Fkbp5+and+Fibin%5BTitle%5D)+AND+%22Aging+%28Albany+NY%29%22%5BJournal%5D)">MiR-141-3p promotes mitochondrial dysfunction in ovariectomy-induced sarcopenia via targeting Fkbp5 and Fibin.</a> Aging (Albany NY). 13 (4), 4881-4894 (2021).</li>
<li>China, S. P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Globular+adiponectin+reverses+osteo-sarcopenia+and+altered+body+composition+in+ovariectomized+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Bone%22%5BJournal%5D)">Globular adiponectin reverses osteo-sarcopenia and altered body composition in ovariectomized rats.</a> Bone. 105, 75-86 (2017).</li>
<li>Rodgers, J. B., Monier-Faugere, M. C., Malluche, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Animal+models+for+the+study+of+bone+loss+after+cessation+of+ovarian+function%5BTitle%5D)+AND+%22Bone%22%5BJournal%5D)">Animal models for the study of bone loss after cessation of ovarian function.</a> Bone. 14 (3), 369-377 (1993).</li>
<li>Matsushita, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Age-related+changes+in+bone+mass+in+the+senescence-accelerated+mouse+%28SAM%29.+SAM-R%2F3+and+SAM-P%2F6+as+new+murine+models+for+senile+osteoporosis%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Pathol%22%5BJournal%5D)">Age-related changes in bone mass in the senescence-accelerated mouse (SAM). SAM-R/3 and SAM-P/6 as new murine models for senile osteoporosis.</a> Am J Pathol. 125 (2), 276-283 (1986).</li>
<li>Cheng, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+traditional+Chinese+herbal+preparation%2C+Er-Zhi-Wan%2C+prevent+ovariectomy-induced+osteoporosis+in+rats%5BTitle%5D)+AND+%22J+Ethnopharmacol%22%5BJournal%5D)">A traditional Chinese herbal preparation, Er-Zhi-Wan, prevent ovariectomy-induced osteoporosis in rats.</a> J Ethnopharmacol. 138 (2), 279-285 (2011).</li>
<li>Roch, P. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Ostarine+and+ligandrol+improve+muscle+tissue+in+an+ovariectomized+rat+model%5BTitle%5D)+AND+%22Front+Endocrinol%22%5BJournal%5D)">Ostarine and ligandrol improve muscle tissue in an ovariectomized rat model.</a> Front Endocrinol. 11, 556581(2020).</li>
<li>Bei, M. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Raloxifene+retards+cartilage+degradation+and+improves+subchondral+bone+microarchitecture+in+ovariectomized+rats+with+patella+baja-induced+-+patellofemoral+joint+osteoarthritis%5BTitle%5D)+AND+%22Osteoarthritis+Cartilage%22%5BJournal%5D)">Raloxifene retards cartilage degradation and improves subchondral bone microarchitecture in ovariectomized rats with patella baja-induced - patellofemoral joint osteoarthritis.</a> Osteoarthritis Cartilage. 28 (3), 344-355 (2020).</li>
<li>Wen, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Fecal+and+serum+metabolomic+signatures+and+microbial+community+profiling+of+postmenopausal+osteoporosis+mice+model%5BTitle%5D)+AND+%22Front+Cell+Infect+Microbiol%22%5BJournal%5D)">Fecal and serum metabolomic signatures and microbial community profiling of postmenopausal osteoporosis mice model.</a> Front Cell Infect Microbiol. 10, 535310(2020).</li>
<li>Shah, F. A., Stoica, A., Cardemil, C., Palmquist, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Multiscale+characterization+of+cortical+bone+composition%2C+microstructure%2C+and+nanomechanical+properties+in+experimentally+induced+osteoporosis%5BTitle%5D)+AND+%22J+Biomed+Mater+Res+A%22%5BJournal%5D)">Multiscale characterization of cortical bone composition, microstructure, and nanomechanical properties in experimentally induced osteoporosis.</a> J Biomed Mater Res A. 106 (4), 997-1007 (2018).</li>
<li>Andreollo, N. A., Santos, E. F., Araújo, M. R., Lopes, L. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Rat%27s+age+versus+human%27s+age%3A+what+is+the+relationship%5BTitle%5D)+AND+%22Arq+Bras+Cir+Dig%22%5BJournal%5D)">Rat's age versus human's age: what is the relationship.</a> Arq Bras Cir Dig. 25 (1), 49-51 (2012).</li>
<li>Fuchs, C. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Thigh+muscles+are+more+susceptible+to+age-related+muscle+loss+when+compared+to+lower+leg+and+pelvic+muscles%5BTitle%5D)+AND+%22Exp+Gerontol%22%5BJournal%5D)">Thigh muscles are more susceptible to age-related muscle loss when compared to lower leg and pelvic muscles.</a> Exp Gerontol. 175, 112159(2023).</li>
</ol>

Każdy z autorów deklaruje brak sprzecznych interesów finansowych.

Obustronny model zwierzęcy po owariektomii odgrywa zasadniczą rolę w wyjaśnianiu mechanizmów leżących u podstaw osteosarkopenii i ocenie potencjalnych interwencji terapeutycznych. Osteoporoza wywołana owariektomią u szczurów, która odzwierciedla nagły spadek poziomu estrogenów obserwowany u kobiet po menopauzie, jest powszechnie stosowana jako model do badań nad osteoporozą. Ponadto badania wykazały istotny związek między osteoporozą a sarkopenią u osób starszych, przy jednoczesnym często obserwowanym utracie mięśni i ko...

Osteosarkopenia jest wieloaspektowym stanem zwyrodnieniowym, który obejmuje objawy kliniczne zarówno osteoporozy, jak i sarkopenii 1,2,3,4. Osteoporoza, powszechne zaburzenie układu kostnego, charakteryzuje się zmniejszoną masą kostną, upośledzoną mikroarchitekturą i zwiększoną podatnością na złamania. Sarkopenia, często określana jako zespół zaniku mięśni, charakteryzuje się zmniejszeniem siły i masy mięśni 5,6. 7 wyników Maryam wykazało, że osteosarkopenia zwiększa ryzyko zgonu o 30% w porównaniu z samą sarkopenią i o 8% w porównaniu z samym niskim BMD. Badania wykazały, że osteosarkopeniadotyka 16,4% osób w wieku 60 lat i starszych8. W Korei Południowej częstość występowania osteosarkopenii wśród osób w podeszłym wieku w wieku 60 lat i starszych, które doznały złamań szyjki kości udowej, wynosi 27,2%9. Osoby z OS są bardziej narażone na upadki, złamania, hospitalizację i instytucjonalizację, co obciąża system opieki zdrowotnej i społeczeństwo10,11. Biorąc pod uwagę powagę tych konsekwencji, kluczowe znaczenie ma opracowanie i wdrożenie skutecznych środków zapobiegania i leczenia OS. Pomimo pilnej potrzeby, badania w tej dziedzinie wciąż się rozwijają, a obecnie toczą się debaty na temat kryteriów diagnostycznych i skuteczności różnych metod leczenia. Opracowanie wiarygodnych modeli zwierzęcych ma zatem zasadnicze znaczenie dla analizy patogenezy OS i odkrycia podstaw molekularnych, które mogą pomóc w opracowaniu skuteczniejszych metod leczenia.
Obecnie powszechnie stosowanymi modelami w badaniach przedklinicznych nad osteosarkopenią jest model starzenia, który symuluje proces starzenia się człowieka bez interwencji lekowej. Takie podejście jest bliższe naturalnemu procesowi i jest opłacalne; Wymaga to jednak znacznej inwestycji czasu na dojrzewanie12. Metoda wstrzykiwania leków chemicznych oferuje pewne korzyści, takie jak krótki cykl modelowania, stabilne wyniki i niski koszt. Wiąże się to jednak również z wyzwaniami, takimi jak precyzyjne określenie dawki hormonu, umiejętności techniczne wymagane do iniekcji oraz zmienne efekty interwencji hormonalnych13,14. Modele inżynierii genetycznej mogą obejmować organizmy modyfikowane genetycznie, które mogą być zarówno genetycznie wadliwe, jak i kosztowne. Chociaż modele te są bardzo specyficzne, ich produkcja jest znacznie bardziej złożona i kosztowna15. Modele niestosowania symulują skutki długotrwałego leżenia w łóżku u pacjentów klinicznych16. Modele niestosowania są skuteczne i opłacalne w przypadku utraty mięśni, ale wiążą się z powikłaniami, takimi jak zakrzepy krwi i odleżyny. Modele te są rutynowo monitorowane w celu zapobiegania martwicy kończyn17,18 i modelom z niedoborem hormonów; W środowisku naukowym panuje zgoda co do tego, że obustronna owariektomia służy jako skuteczna metoda ustalania zwierzęcego modelu osteoporozy19,20.
Badania wskazują, że tkanki kostne i mięśniowe mogą również wchodzić ze sobą w interakcje poprzez mechanizmy autokrynne, endokrynologiczne i parakrynne21. Nagromadzenie tkanki tłuszczowej w mięśniach i szpiku kostnym służy jako wskaźnik zmniejszonej masy kostnej i mięśniowej w kontekście osteosarkopenii2. Sarkopenia u osób starszych jest bezpośrednio związana ze zmniejszeniem gęstości kości i pogorszeniem mikroarchitektury kości. Dodatkowo, zmniejszona masa mięśniowa służy jako niezależny czynnik ryzyka degradacji mikrostruktury kości22. Metodologia ta została uznana za realną strategię modelowania sarkopenii23,24, która potencjalnie może służyć jako połączony model dla obu stanów25. Pomimo ograniczonej liczby badań dotyczących zastosowania owariektomii jako środka do wywoływania osteosarkopenii, podejście to wykazuje potencjalną skuteczność. Korzyści płynące z zastosowania owariektomii w badaniach przedklinicznych obejmują szybki proces modelowania, eliminację interwencji farmakologicznych, stworzenie stabilnego modelu eksperymentalnego, proste wdrożenie i opłacalność.
Niniejsze badanie ma na celu nakreślenie procedury tworzenia modelu przedklinicznego u samic szczurów poprzez usunięcie odcinka zarówno jajowodów, jak i jajników u osób niebędących w ciąży. Podejście to służy jako cenne narzędzie do badania molekularnych podstaw OS oraz do oceny korzyści terapeutycznych interwencji w kontrolowanych warunkach eksperymentalnych.

<table><tbody><tr><td>Podwójny lew Napromieniowana dieta gryzoni</td><td>Suzhou Shuangshi Eksperymentalna technologia pasz dla zwierząt Co., Ltd.</td><td>GB 14924.3</td><td>Pasza</td></tr><tr><td>Jednorazowa taca do wymiany leków</td><td>Yangzhou Chenglin Technologia medyczna Co., Ltd.</td><td>RVnpFXLc powiedział:</td><td></td></tr><tr><td>Densytometr rentgenowski kości o podwójnej energii</td><td>Xuzhou PinyuanTechnologia elektroniczna Co., Ltd.</td><td>DXA-800E</td><td></td></tr><tr><td>Jod</td><td>Szanghaj Likang Sterylizacja Hi-Tech Co., Ltd.</td><td>LK-310512</td><td></td></tr><tr><td>Klatka dla szczurów IVC</td><td>Suzhou Monkey King Animal Sprzęt eksperymentalny Technology Co., Ltd.</td><td>HH-MMB-2</td><td>Bariera dla zwierząt</td></tr><tr><td>Ketorolac trometamina do wstrzykiwań</td><td>Yunnan Longhai Naturalna Medycyna Roślin Co., Ltd.</td><td>H20233312</td><td></td></tr><tr><td>Penicylina sodowa</td><td>Odpowiedzialność North China Pharmaceutical Group Limited&nbsp; Sp. z o.o.</td><td>H13020654</td><td></td></tr><tr><td>Sterylny wacik</td><td>Henan Piaoan Group Co., Ltd</td><td>20140017</td><td></td></tr><tr><td>Proste nożyczki majonezowe</td><td>Shenzhen Huayang Biotechnology Co., Ltd.</td><td>18-0410</td><td></td></tr><tr><td>Prosty uchwyt na igłę</td><td>Szanghaj Prostota Biotechnologia Co., Ltd.</td><td>32100-14</td><td></td></tr><tr><td>Linia do szycia</td><td>Shenzhen Huayang Biotechnology Co., Ltd.</td><td>18-5902</td><td></td></tr><tr><td>Igła do szycia</td><td>Shenzhen Huayang Biotechnology Co., Ltd.</td><td>18-5036</td><td></td></tr><tr><td>Strzykawki</td><td>Shenzhen Huayang Biotechnology Co., Ltd.</td><td>21-3021</td><td></td></tr><tr><td>Chlorowodorek tramadolu</td><td>Grunenthal GmbH</td><td>H20140812</td><td></td></tr></tbody></table>

stworzenie szczurzego modelu osteosarkopenii poprzez owariektomię

The Creation of a Rat Model for Osteosarcopenia via Ovariectomy

Osteosarkopenia (OS), złożona choroba zwyrodnieniowa, charakteryzuje się jednoczesnym spadkiem masy mięśni szkieletowych i gęstości mineralnej kości (BMD), co stanowi ogromne zagrożenie dla zdrowia populacji osób starszych. Pomimo jego znaczenia klinicznego, mechanizmy patofizjologiczne leżące u podstaw OS nie są w pełni poznane, co podkreśla konieczność głębszego zrozumienia jego etiologii w celu ułatwienia skutecznych strategii leczenia. Opracowanie wiarygodnego modelu zwierzęcego ma kluczowe znaczenie w tym przedsięwzięciu. Badanie to przedstawia udoskonalony protokół indukcji osteosarkopenii po menopauzie u szczurów poprzez obustronną jajnikomię, metodę znaną z przyspieszania wystąpienia związanej z wiekiem utraty mięśni i kości. W tym badaniu szczury w wieku 12 tygodni zostały stratyfikowane według masy ciała i losowo przydzielone do grupy operacji pozorowanej lub grupy po owariektomii (OVX). Próbki tkanek z mięśnia czworogłowego i trójgłowego lewej kończyny tylnej, a także lewej kości udowej, były systematycznie pobierane po 4, 8 i 12 tygodniach od operacji. To metodyczne podejście zapewnia kompleksową ocenę wpływu wycięcia jajników na zdrowie mięśni i kości. Ocenę histologiczną zaniku włókien mięśniowych i morfologii kości udowej przeprowadzono za pomocą barwienia hematoksyliną i eozyną (HE), natomiast gęstość mineralną kości określono ilościowo za pomocą absorpcjometrii promieniowania rentgenowskiego o podwójnej energii (DXA). Postęp czasowy OS był skrupulatnie monitorowany w wyżej wymienionych odstępach czasu, dostarczając wglądu w dynamiczną interakcję między zwyrodnieniem mięśni i kości. Model ten nie tylko dokładnie odzwierciedla kliniczne objawy OS, ale także służy jako solidna platforma do badania nowych podejść terapeutycznych i ich podstawowych mechanizmów.

Niniejszy protokół zawiera szczegółowy opis procedury obustronnej owariektomii w celu opracowania szczurego modelu osteosarkopenii. Rycina 3 obrazuje spadek współczynnika masy mokrej mięśnia czworogłowego w grupie OVX w porównaniu z grupą sham. Choć 4 tygodnie po zabiegu nie stwierdzono statystycznie istotnych różnic w BMD między obiema grupami, BMD w grupie OVX była znacząco niższa niż w grupie poddanej operacji pozorowanej w 8. i 12. tygodniu po zabiegu.</p...

Ten obecny protokół przedstawia procedurę tworzenia szczurzego modelu osteosarkopenii za pomocą owariektomii.

Stworzenie szczurzego modelu osteosarkopenii poprzez owariektomię

Osteosarcopenia (OS), a complex degenerative disorder, is characterized by the concurrent decline in skeletal muscle mass and bone mineral density (BMD), ...

Zajmuję się tradycyjną medycyną chińską w odniesieniu do urazów ortopedycznych, w tym leczenia spondylozy szyjnej, przepukliny dysku lędźwiowego i osteopenii. Model ten dokładnie odzwierciedla kliniczne objawy osteopenii i służy jako solidna platforma do badania nowych podejść terapeutycznych i ich podstawowych mechanizmów.[Instruktor] Na początek umieść znieczulonego szczura i uważnie monitoruj jego oddech. Ściśnij palce u stóp, aby potwierdzić chirurgiczną płaszczyznę znieczulenia. Umieść szczura na platformie chirurgicznej wyposażonej w stożek nosowy do znieczulenia. Zdezynfekuj ogolony obszar za pomocą wacików nasączonych zarówno na bazie jodu, jak i alkoholu. Następnie wykonaj nacięcie na plecach w odległości około jednego centymetra od linii środkowej. Umieść nacięcie w pobliżu połączenia między krzywizną klatki piersiowej a granicą kręgosłupa, nieco niżej o 0,5 do jednego centymetra. Zlokalizuj jajowód i prześledź go do końcowego końca jajnika, który jest otoczony warstwą luźnej tkanki tłuszczowej. Ostrożnie wyjmij jajnik i koniec jajowodu z ciała i przyłóż kleszcze hemostatyczne w najbardziej zwężonym obszarze między końcem macicy a jajnikiem. Użyj nici chirurgicznej, aby z

the-creation-of-a-rat-model-for-osteosarcopenia-via-ovariectomy

Research

JoVE Journal

Medicine

Medycyna

Przedstawiono metodę owariektomii oraz następującego po niej uzupełniania 17β-estradiolu za pomocą kapsułek silastycznych i podawania Nutelli drogą doustną u szczurów i myszy.

Owarektomia i suplementacja 17&beta;-estradiolu u szczurów i myszy: demonstracja wizualna

Różnicowanie komórek prekursorowych w osteoklasty jest regulowane przez cytokiny i czynniki wzrostu. W tym artykule opisano nową technikę transferu genów do różnicowania osteoklastów in vivo oraz protokoły hodowli komórkowych do różnicowania komórek prekursorowych w osteoklasty in vitro jako metodę badania wpływu cytokin na osteoklastogenezę.

Nowatorska technika transferu genów in vivo i testy komórkowe in vitro do badania utraty masy kostnej w zaburzeniach układu mięśniowo-szkieletowego

Celem tego protokołu jest wygenerowanie modelu złamania kompresyjnego kręgów związanego z osteoporozą u nagich szczurów, który może być oceniany in vivo za pomocą półautomatycznej ilościowej analizy strukturalnej opartej na mikrotomografii komputerowej.

Półautomatyczna ilościowa analiza strukturalna oparta na mikrotomografii komputerowej nagiego szczura Model złamania kręgów związanego z osteoporozą

Tutaj opisana jest syngeniczna implantacja ortotopowa, po której następuje procedura amputacji kostniakomięsaka ze spontanicznymi przerzutami do płuc, która może być wykorzystana do badań przedklinicznych biologii przerzutów i rozwoju nowych terapii.

Syngeneiczny ortotopowy kostniakomięsak Sprague Dawley Rat Model z amputacją w celu kontrolowania częstości przerzutów

Tutaj prezentujemy protokół jatrogennego złamania trzonu kości udowej szczurów albinosów Wistar i śledzenia rozwoju modzela. Ten model osteotomii kości udowej może pomóc naukowcom ocenić proces gojenia się złamań i zbadać, w jaki sposób lek może wpływać na gojenie złamań.

Protokół opracowania modelu osteotomii kości udowej u szczurów albinosów Wistar

Prezentowany tutaj jest protokół pokazujący, że kapsułka Bazi Bushen (BZBS) może regulować szlak sygnałowy RANKL/OPG w modelu gryzoni po owariektomii poprzez efekt podobny do estrogenu.

Estrogenopodobny efekt kapsułki Bazi Bushen u szczurów po owariektomii

Ten protokół przedstawia ekonomiczną i efektywną metodę ilościowej oceny mikroarchitektury kości w mysim modelu osteoporozy poprzez połączenie barwienia Hematoxylin-Eosin (HE) i technik mikrotomografii komputerowej (Micro-CT).

Ocena mikroarchitektury kości beleczkowej w mysim modelu osteoporozy

Tutaj prezentujemy protokół zastosowania terapii ognistą igłą Lingnan w interwencji szczurów modelowych z osteoporozą.

Procedura operacyjna i środki ostrożności związane z terapią ognistą Lingnan u szczurów modelowych z osteoporozą

Umieszczenie implantów w modelu szczurzym jest niezbędną procedurą eksperymentalną dla badań klinicznych. W badaniu przedstawiono kompleksowy protokół chirurgiczny do wszczepiania implantów tytanowych do kości piszczelowej modeli szczurzych z cukrzycą i osteoporozą.

Technika chirurgicznej implantacji kości w modelach cukrzycy i osteoporozy kości piszczelowej szczura

Cholestaza jest stanem klinicznym często spotykanym zarówno w praktyce chirurgów, jak i gastroenterologów. Stworzenie odwracalnego modelu cholestazy u szczura może być trudne ze względu na niewielki rozmiar oraz specyficzną anatomię hepatopankreatobiliarnej tych zwierząt. Niniejszy artykuł wideo prezentuje sposób stworzenia odwracalnego modelu cholestazy.

Tworzenie odwracalnego modelu cholestazy u szczura

Poznaj metodę tworzenia szczurzego modelu osteosarkopenii poprzez owariektomię. Protokół umożliwia badanie utraty masy kostnej i mięśniowej oraz testowanie terapii w kontekście starzenia.

Stworzenie szczurzego modelu osteosarkopenii poprzez owariektomię

Przeglądaj więcej filmów