Name: Ocena funkcji prawej komory w eksperymentalnych modelach tętniczego nadciśnienia płucnego (Wideo) | JoVE Journal
Uploaded: 2025-06-27T12:45:00.000+00:00
Duration: 10 min 3 s
Description: Poznaj zintegrowaną metodę oceny funkcji prawej komory w modelu tętniczego nadciśnienia płucnego u szczurów, łączącą echokardiografię z pomiarami inwazyjnymi i analizą postmortem.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

Autorzy dziękują Panu André Benedito da Silva za wsparcie w eksperymentach, Pani Verônice Cristina dos Santos za opiekę nad zwierzętami oraz Pani Lornie O'Brien za korektę gramatyki angielskiej. Badanie to było wspierane przez Państwową Fundację Badawczą w Rio de Janeiro (FAPERJ E-26/202.766/2018, E-26/010.001488/2019).

<ol><li>Gomez-Arroyo, J. G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+monocrotaline+model+of+pulmonary+hypertension+in+perspective%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Physiol+Lung+Cell+Mol+Physiol%22%5BJournal%5D)">The monocrotaline model of pulmonary hypertension in perspective.</a> Am J Physiol Lung Cell Mol Physiol. 302 (4), L363-L369 (2012).</li>
<li>Zhu, Z., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Echocardiographic+assessment+of+right+ventricular+function+in+experimental+pulmonary+hypertension%5BTitle%5D)+AND+%22Pulm+Circ%22%5BJournal%5D)">Echocardiographic assessment of right ventricular function in experimental pulmonary hypertension.</a> Pulm Circ. 9 (2), 2045894019841987(2019).</li>
<li>Bikou, O., Sassi, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+sugen%2Fhypoxia+rat+model+for+pulmonary+hypertension+and+right+heart+failure%5BTitle%5D)+AND+%22Methods+Mol+Biol%22%5BJournal%5D)">The sugen/hypoxia rat model for pulmonary hypertension and right heart failure.</a> Methods Mol Biol. 2803, 163-172 (2024).</li>
<li>Hill, N. S., Gillespie, M. N., McMurtry, I. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Fifty+years+of+monocrotaline-induced+pulmonary+hypertension%3A+What+has+it+meant+to+the+field%5BTitle%5D)+AND+%22Chest%22%5BJournal%5D)">Fifty years of monocrotaline-induced pulmonary hypertension: What has it meant to the field.</a> Chest. 152 (6), 1106-1108 (2017).</li>
<li>Santos, R. T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Pharmacological+agents+and+potential+new+therapies+in+pulmonary+arterial+hypertension%5BTitle%5D)+AND+%22Curr+Vasc+Pharmacol%22%5BJournal%5D)">Pharmacological agents and potential new therapies in pulmonary arterial hypertension.</a> Curr Vasc Pharmacol. 22 (3), 155-170 (2024).</li>
<li>Tsai, J., Malik, S., Tjen, A. L. S. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Pulmonary+hypertension%3A+Pharmacological+and+non-pharmacological+therapies%5BTitle%5D)+AND+%22Life+%28Basel%29%22%5BJournal%5D)">Pulmonary hypertension: Pharmacological and non-pharmacological therapies.</a> Life (Basel). 14 (10), 1265(2024).</li>
<li>Suen, C. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Regenerative+cell+therapy+for+pulmonary+arterial+hypertension+in+animal+models%3A+a+systematic+review%5BTitle%5D)+AND+%22Stem+Cell+Res+Ther%22%5BJournal%5D)">Regenerative cell therapy for pulmonary arterial hypertension in animal models: a systematic review.</a> Stem Cell Res Ther. 10 (1), 75(2019).</li>
<li>Hubrecht, R. C., Carter, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+3Rs+and+humane+experimental+technique%3A+Implementing+change%5BTitle%5D)+AND+%22Animals+%28Basel%29%22%5BJournal%5D)">The 3Rs and humane experimental technique: Implementing change.</a> Animals (Basel). 9 (10), 754(2019).</li>
<li>Thibault, H. B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Noninvasive+assessment+of+murine+pulmonary+arterial+pressure%3A+validation+and+application+to+models+of+pulmonary+hypertension%5BTitle%5D)+AND+%22Circ+Cardiovasc+Imaging%22%5BJournal%5D)">Noninvasive assessment of murine pulmonary arterial pressure: validation and application to models of pulmonary hypertension.</a> Circ Cardiovasc Imaging. 3 (2), 157-163 (2010).</li>
<li>Trittmann, J. K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((PATET+ratio+by+Doppler+echocardiography%3A+noninvasive+detection+of+pediatric+pulmonary+arterial+hypertension%5BTitle%5D)+AND+%22Pediatr+Res%22%5BJournal%5D)">PATET ratio by Doppler echocardiography: noninvasive detection of pediatric pulmonary arterial hypertension.</a> Pediatr Res. 92 (3), 631-636 (2022).</li>
<li>Percie du Sert, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+ARRIVE+guidelines+2.0%3A+updated+guidelines+for+reporting+animal+research%5BTitle%5D)+AND+%22J+Cereb+Blood+Flow+Metab%22%5BJournal%5D)">The ARRIVE guidelines 2.0: updated guidelines for reporting animal research.</a> J Cereb Blood Flow Metab. 40 (9), 1769-1777 (2020).</li>
<li>Lisboa Braga, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Therapeutic+effects+of+hypoxia-preconditioned+bone+marrow-derived+mesenchymal+stromal+cells+and+their+extracellular+vesicles+in+experimental+pulmonary+arterial+hypertension%5BTitle%5D)+AND+%22Life+Sci%22%5BJournal%5D)">Therapeutic effects of hypoxia-preconditioned bone marrow-derived mesenchymal stromal cells and their extracellular vesicles in experimental pulmonary arterial hypertension.</a> Life Sci. 329, 121988(2023).</li>
<li>Heil, L. B. B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+effects+of+short-term+propofol+and+dexmedetomidine+on+lung+mechanics%2C+histology%2C+and+biological+markers+in+experimental+obesity%5BTitle%5D)+AND+%22Anesth+Analg%22%5BJournal%5D)">The effects of short-term propofol and dexmedetomidine on lung mechanics, histology, and biological markers in experimental obesity.</a> Anesth Analg. 122 (4), 1015-1023 (2016).</li>
<li>Humbert, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((ESC%2FERS+Guidelines+for+the+diagnosis+and+treatment+of+pulmonary+hypertension%5BTitle%5D)+AND+%22Eur+Heart+J%22%5BJournal%5D)">ESC/ERS Guidelines for the diagnosis and treatment of pulmonary hypertension.</a> Eur Heart J. 43 (38), 3618-3731 (2022).</li>
<li>D'Alto, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Right+heart+catheterization+for+the+diagnosis+of+pulmonary+hypertension%5BTitle%5D)+AND+%22Heart+Fail+Clin%22%5BJournal%5D)">Right heart catheterization for the diagnosis of pulmonary hypertension.</a> Heart Fail Clin. 14 (3), 467-477 (2018).</li>
<li>Fulton, R. M., Hutchinson, E. C., Jones, A. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Ventricular+weight+in+cardiac+hypertrophy%5BTitle%5D)+AND+%22Br+Heart+J%22%5BJournal%5D)">Ventricular weight in cardiac hypertrophy.</a> Br Heart J. 14 (3), 413-420 (1952).</li>
<li>Lang, R. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Recommendations+for+cardiac+chamber+quantification+by+echocardiography+in+adults%3A+an+update+from+the+American+Society+of+Echocardiography+and+the+European+Association+of+Cardiovascular+Imaging%5BTitle%5D)+AND+%22Eur+Heart+J+Cardiovasc+Imaging%22%5BJournal%5D)">Recommendations for cardiac chamber quantification by echocardiography in adults: an update from the American Society of Echocardiography and the European Association of Cardiovascular Imaging.</a> Eur Heart J Cardiovasc Imaging. 16 (3), 233-270 (2015).</li>
<li>Stenmark, K. R., Meyrik, B., Galie, N., Mooi, W. J., McMurtry, I. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Animal+models+of+pulmonary+arterial+hypertension%3A+the+hope+for+etiological+discovery+and+pharmacological+cure%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Physiol+Lung+Cell+Mol+Physiol%22%5BJournal%5D)">Animal models of pulmonary arterial hypertension: the hope for etiological discovery and pharmacological cure.</a> Am J Physiol Lung Cell Mol Physiol. 297 (6), L1013-L1032 (2009).</li>
<li>Mukherjee, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Guidelines+for+the+echocardiographic+assessment+of+the+right+heart+in+adults+and+special+considerations+in+pulmonary+hypertension%3A+Recommendations+from+the+American+Society+of+Echocardiography%5BTitle%5D)+AND+%22J+Am+Soc+Echocardiogr%22%5BJournal%5D)">Guidelines for the echocardiographic assessment of the right heart in adults and special considerations in pulmonary hypertension: Recommendations from the American Society of Echocardiography.</a> J Am Soc Echocardiogr. 38 (3), 141-186 (2025).</li>
<li>Spyropoulos, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Echocardiographic+markers+of+pulmonary+hemodynamics+and+right+ventricular+hypertrophy+in+rat+models+of+pulmonary+hypertension%5BTitle%5D)+AND+%22Pulm+Circ%22%5BJournal%5D)">Echocardiographic markers of pulmonary hemodynamics and right ventricular hypertrophy in rat models of pulmonary hypertension.</a> Pulm Circ. 10 (2), 2045894020910976(2020).</li>
<li>Rajaram, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Comparison+of+the+diagnostic+utility+of+cardiac+magnetic+resonance+imaging%2C+computed+tomography%2C+and+echocardiography+in+assessment+of+suspected+pulmonary+arterial+hypertension+in+patients+with+connective+tissue+disease%5BTitle%5D)+AND+%22J+Rheumatol%22%5BJournal%5D)">Comparison of the diagnostic utility of cardiac magnetic resonance imaging, computed tomography, and echocardiography in assessment of suspected pulmonary arterial hypertension in patients with connective tissue disease.</a> J Rheumatol. 39 (6), 1265-1274 (2012).</li>
<li>Chin, K. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Association+of+N-terminal+pro+brain+natriuretic+peptide+and+long-term+outcome+in+patients+with+pulmonary+arterial+hypertension%5BTitle%5D)+AND+%22Circulation%22%5BJournal%5D)">Association of N-terminal pro brain natriuretic peptide and long-term outcome in patients with pulmonary arterial hypertension.</a> Circulation. 139 (21), 2440-2450 (2019).</li>
</ol>

Autorzy nie mają do zadeklarowania konfliktu interesów.

TNP jest postępującą chorobą charakteryzującą się nadmierną przebudową naczyń krwionośnych, która sprzyja wzrostowi oporu naczyniowego płuc, co skutkuje zwiększonym obciążeniem następczym RV14. W związku z tym RVSP stanowi zmienną funkcjonalną, która bezpośrednio koreluje z ciężkością WWA15. Z biegiem czasu reakcją adaptacyjną RV jest kompensacyjny przerost koncentryczny (mierzony wskaźnikiem Fultona)16 i rozszerzenie komór (mierzone średnicą odpływu...

Właściwy pomiar czynnościowy funkcji prawej komory (RV) u małych zwierząt stał się niezbędny ze względu na wzrost liczby badań z wykorzystaniem modeli zwierzęcych w naukach o układzie oddechowym i sercowo-naczyniowym. Istnieje kilka modeli zwierzęcych nadciśnienia płucnego (PH), wykorzystujących monokrotalinę1, hipoksję2 lub Sugen + hipoksję3. Służyły one skutecznie do odkrywania nowych szlaków patofizjologicznych1,4 oraz badania nowych potencjalnych metod leczenia farmakologicznego5 i niefarmakologicznego6 w przypadku PH. Niemniej jednak, niezależnie od czynnika sprawczego prowadzącego do fenotypu PH, istnieją obawy dotyczące pomiaru czynnościowego wydolności RV, głównie dlatego, że funkcja RV zazwyczaj (1) stanowi główny punkt końcowy przyjmowany w badaniach przedklinicznych7; (2) dostępne są różne rodzaje sprzętu do przeprowadzania echokardiografii i inwazyjnej punkcji komory RV; (3) wymagane jest doświadczenie w znieczulaniu i pewna wiedza na temat inwazyjnej wentylacji mechanicznej u małych zwierząt, a także umiejętność rozpoznania odpowiedniego okna do oceny RV.
Zgodnie z zasadą 3R w badaniach przedklinicznych (replacement, reduction, refinement), redukcja (reduction) dąży do rozszerzenia metod pomagających w uzyskaniu porównywalnych poziomów informacji, co zwiększa powtarzalność8. W związku z tym liczba zwierząt w badaniach zostanie ograniczona przede wszystkim dzięki strategiom takim jak odpowiedni projekt doświadczenia, prawidłowa ocena statystyczna oraz wymiana praktyk i wiedzy. W niniejszym badaniu metodologicznym przedstawiono trzy różne techniki stosowane po indukcji PAH (Rycina 1). Pierwszą z nich jest nieinwazyjny pomiar funkcji RV za pomocą echokardiografii przezklatkowej. Obrazy uzyskuje się w przekrojach długiej i krótkiej osi przyściannej. Średnicę drogi odpływu RV, czas przyspieszenia przepływu w tętnicy płucnej (PAT) oraz czas wyrzutu płucnego (PET) ocenia się za pomocą dopplerowskiego pomiaru fali impulsowej. Oblicza się stosunek PAT/PET, który służy jako pośredni wskaźnik nadciśnienia tętniczego płucnego (PAH)9,10. Drugą metodą jest inwazyjna punkcja RV. Zazwyczaj wykorzystuje się system akwizycji danych fizjologicznych, który stale rejestruje dane na komputerze z dedykowanym oprogramowaniem. Inwazyjne ciśnienie skurczowe prawej komory (RVSP) oraz średnie ciśnienie w tętnicy płucnej są często stosowane jako główne punkty końcowe w różnych badaniach7. Trzecią metodą jest wskaźnik przerostu prawej komory, nazywany również wskaźnikiem Fulton'a11, który stanowi stosunek masy RV do sumy masy lewej komory (LV) i przegrody międzykomorowej (S) (RV/LV + S), skorygowany o masę ciała zwierzęcia. Przedstawienie szczegółowych metod oceny funkcji RV podniesie jakość i wiarygodność badań nad PH, oferując solidne ramy dla przyszłych analiz i zwiększając powtarzalność wyników w różnych laboratoriach.
<img alt="Schemat blokowy procesu modelu nadciśnienia płucnego; obejmuje metody indukcji PAH, ECHO, RVSP oraz indeks RVH." class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/68248/68248fig01.jpg" data-altupdatedat="1788304762000" data-alt="Rysunek 1"> 
Rysunek 1: Schemat blokowy. Ilustracja podsumowująca protokoły opisane w niniejszym artykule. Skróty: ECHO = echokardiografia; LV = lewa komora; PAH = nadciśnienie tętnicze płucne; RV = prawa komora; RVH = przerost prawej komory; RVSP = prawokomorowe ciśnienie skurczowe; S = przegroda międzykomorowa. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/68248/68248fig01large.jpg" target="_blank">Kliknij tutaj, aby wyświetlić powiększoną wersję tego rysunku.</a>

<table><tbody><tr><td>Odczynniki</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Alcohol 70%</td><td>Czarnogóra</td><td>ALC70-001</td><td></td></tr><tr><td>Żel przewodzący</td><td>Mercor</td><td>CG-002</td><td></td></tr><tr><td>Roztwór soli fizjologicznej (NaCl 0,9%)</td><td>BioPharma</td><td>SAL-009</td><td></td></tr><tr><td>Instruments</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>19 G zestaw</td> <td>żył skóry głowyDescarpack</td><td>SVS-19G</td><td></td></tr><tr><td>Zakrzywione kleszcze kelly</td><td>ABC instrumentos cirurgicos</td><td>CKF-003</td><td></td></tr><tr><td>Kleszcze Kelly</td><td>ABC instrumentos cirurgicos</td><td>KF-004</td><td></td></tr><tr><td>Igły (18, 22 i 26 G)</td><td>Descarpack</td><td>NDL-MIX</td><td></td></tr><tr><td>szalka Petriego</td><td>GlassLab</td><td>PD-150</td><td></td></tr><tr><td>Żyletka</td><td>ABC instrumentos cirurgicos</td><td>RB-005</td><td></td></tr><tr><td>Skalpel</td><td>ABC instrumentos cirurgicos</td><td>SC-006</td><td></td></tr><tr><td>Nożyczki</td><td>ABC instrumentos cirurgicos</td><td>SCIS-007</td><td></td></tr><tr><td>Linia do szwów</td><td>ABC instrumentos cirurgicos</td><td>SUT-008</td><td></td></tr><tr><td>Strzykawki (1, 3 i 5 ml)</td><td>Descarpack</td><td>SYR-135</td><td></td></tr><tr><td>Kaniula tracheostomijna</td><td>Pęseta MedTech</td><td>TC-010</td><td></td></tr><tr><td></td><td>ABC instrumentos cirurgicos</td><td>TWZ-011</td><td></td></tr><tr><td>Drugs</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Dextroketamina chlorowodorek 5%</td><td>Crist&aacute; lia</td><td>DXT-005</td><td>87,5 mg/kg dootrzewnowy</td></tr><tr><td>Izofluran 1 ml/ml 240 mL</td><td>Crist&aaostry; lia</td><td>ISO-240</td><td>2,5% roztwór do inhalacji</td></tr><tr><td>Chlorowodorek lidokainy 1%</td><td>Crist&aacute; lia</td><td>LID-001</td><td>400 &mikro; L podskórnie miejscowo</td></tr><tr><td>Monocrotaline</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>C2401</td><td>60 mg/kg dootrzewnowy</td></tr><tr><td>bromek Pancuronium 2 mg/ml</td><td>Crist&aaacute; lia</td><td>PAN-002</td><td>2 mg/kg dożylnie</td></tr><tr><td>Heparyna sodowa 5000 j.m./ml</td><td>Crist&aaostry; lia</td><td>HEP-5000</td><td>rozcieńczony 1:4 w 1 ml</td></tr><tr><td>chlorowodorku ksylazyny 2%</td><td>Syntec</td><td>XYL-002</td><td>12,5 mg/kg dootrzewnowo</td></tr><tr><td><silny>Sprzęt</silny></td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>GraphPad Prism 9 GraphPad</td><td>Software, Inc</td><td>GP9</td><td></td></tr><tr><td>Sieciowy wieloparametrowy monitor weterynaryjny LifeWindow 9x</td><td>Digicare Zdrowie zwierząt</td><td>LW9x</td><td></td></tr><tr><td>Oprogramowanie LabView</td><td>National Instruments, Corp.</td><td>Oprogramowanie LV-2019</td><td></td></tr><tr><td>MATLAB R2019a (wersja)</td><td>MathWorks, Inc.</td><td>MATLAB-2019</td><td></td></tr><tr><td>Monitor i przetwornik sygnału</td><td>MedTech</td><td>MST-015</td><td></td></tr><tr><td>Waga precyzyjna</td><td>Sartorius</td><td>PS-020</td><td></td></tr><tr><td>R540 Myszy& Maszyna do znieczulenia szczurów</td><td>RWD Life Schience Co., LTD</td><td>R540-ANA</td><td></td></tr><tr><td>Scale</td><td>Ohaus</td><td>SCL-025</td><td></td></tr><tr><td>Wentylator mechaniczny Servo-i&nbsp;</td><td>Getinge AB</td><td>SERVO-I</td><td>FiO2 = 21%; objętość oddechowa = 8 ml/kg, częstość oddechów = 70 uderzeń na minutę i PEEP = 3 cmH2O</td></tr><tr><td>Oprogramowanie SonoView</td><td>System SONOTEC Ultraschallsensorik Halle GmbH</td><td>SV-2020</td><td></td></tr><tr><td>UGEO HM70A&nbsp;</td><td>Samsung Eletr&ocirc; nica da Amaz&ocirc; nia LTDA</td><td>HM70A</td><td></td></tr><tr><td>G*Power 3.1.9.7</td><td>Uniwersytet D&uuml; sseldorf, Niemcy</td><td>gpower</td><td></td></tr></tbody></table>

ocena funkcji prawej komory w eksperymentalnych modelach tętniczego nadciśnienia płucnego

Evaluation of Right Ventricular Function in Experimental Models of Pulmonary Arterial Hypertension

Nadciśnienie płucne (PH) jest przewlekłym schorzeniem związanym ze zmniejszonym przeżyciem, co czyni go krytycznym obszarem badań. Eksperymentalne modele PH znacznie poszerzyły naszą wiedzę na temat jego patofizjologii i ułatwiły projektowanie małych badań obserwacyjnych i klinicznych. Kluczowe znaczenie ma jednak ustanowienie ustandaryzowanych metodologii w celu zapewnienia porównywalności między różnymi badaniami eksperymentalnymi i grupami badawczymi. Standaryzacja nie tylko zwiększa odtwarzalność, ale także sprzyja współpracy między zespołami badawczymi.
W tym filmie przedstawiamy kroki metodologiczne wymagane do dokładnej analizy parametrów funkcjonalnych PH. Obejmują one ocenę echokardiograficzną, inwazyjne nakłucie prawej komory (RV) i obliczenie wskaźnika Fultona. W odniesieniu do echokardiografii szczegółowo przedstawiono pomiar czasu przyspieszenia tętnicy płucnej i współczynnika czasu wyrzutu płucnego, a także obliczanie wydajności RV. Jeśli chodzi o pomiary inwazyjne, opisano podstawowe procedury, w tym protokoły znieczulenia, optymalne ułożenie zwierząt, konfigurację wentylacji mechanicznej, precyzyjne otwieranie ściany klatki piersiowej, wizualizację RV i techniki nakłuwania RV.
Metodologia rozwarstwiania komór (wskaźnik Fultona) jest szczegółowo wyjaśniona, podobnie jak obliczanie stosunku RV do lewej komory do przegrody, skorygowane o masę ciała zwierzęcia. Wierzymy, że szczegółowa prezentacja tych metod poprawi jakość i wiarygodność badań nad pH, oferując solidne ramy dla przyszłych badań i zwiększając odtwarzalność w różnych laboratoriach.

Do analiz statystycznych każda zmienna została poddana testowi normalności i wariancji za pomocą testu Shapiro-Wilka. Dane przedstawiono jako średnie ± odchylenie standardowe. Do porównania stężeń cząstek w grupie kontrolnej (CTRL) i grupie z nadciśnieniem tętniczym płuc (PAH) zastosowano nieparowany test t (p&lt;0,05).
Zmiany echokardiograficzne w modelu zwierzęcym PAH 
Rysunek 4 pokazuje, że stosunek PAT/PET był niższy u zwierząt z P...

Prezentacja szczegółowych metod oceny funkcji prawej komory poprawi jakość i wiarygodność badań nad nadciśnieniem płucnym, oferując solidne ramy dla przyszłych badań i zwiększając odtwarzalność w różnych laboratoriach.

Ocena funkcji prawej komory w eksperymentalnych modelach tętniczego nadciśnienia płucnego

Pulmonary hypertension (PH) is a chronic condition associated with reduced survival, making it a critical area of research. Experimental models of PH have ...

Badamy terapie regeneracyjne, w szczególności mezenchymalne komórki macierzyste i mitochondria, w celu odwrócenia przebudowy naczyń krwionośnych i poprawy funkcji krążeniowo-oddechowej w eksperymentalnym tętniczym nadciśnieniu płucnym. Zabiegi inwazyjne, takie jak nakłucie prawej komory serca i rozwarstwienie serca, są śmiertelne, co ogranicza badania podłużne. Ponadto zmienność pomiarów echokardiograficznych może wpływać na odtwarzalność u różnych operatorów i punktów czasowych. Nasz protokół łączy nieinwazyjną echokardiografię z inwazyjnymi pomiarami hemodynamicznymi i analizą pośmiertną, zapewniając kompleksową ocenę progresji nadciśnienia płucnego i przebudowy prawej komory u szczurów. To zintegrowane podejście zwiększa wiarygodność danych i zmniejsza liczbę potrzebnych zwierząt. W przyszłości zamierzamy lepiej zrozumieć interakcję mózg-serce-płuca oraz deficyty poznawcze u pacjentów z tętniczym nadciśnieniem płucnym, aby zrozumieć znaczenie kliniczne i potencjalne mechanizmy leżące u ich podstaw.[Instruktor] Na początek użyj opatrunku z gazy nasączonego detergentem i wodą, aby zwilżyć sierść na klatce piersiowej znieczulonego zwierzęcia. Za pomocą żyletki przymocowanej do kleszczy Kelly'ego ogol futro z klatki piersiowej zwierzęcia. Nałóż dużą ilość żelu przewodzącego na klatkę piersiową zwierzęcia. Naciśnij przycisk 2D na panelu sterowania. Umieść przetwornik między trzecią a piątą przestrzenią międzyżebrową, aby uzyskać widok z krótkiej osi. Następnie skieruj przetwornik w stronę lewego ramienia zwierzęcia pod kątem 90 stopni w stosunku do mostka, aby uchwycić przekrój poprzeczny podstawy serca, pokazujący prawą komorę, zastawkę aortalną, zastawkę płucną i lewy przedsionek. Naciśnij przycisk zamrażania na panelu sterowania, aby zamrozić obraz, a następnie naciśnij przycisk zapisywania na panelu sterowania, aby zapisać obraz. Po ustaleniu prawidłowego kąta przytrzymaj tę pozycję i naciśnij przycisk fali pulsacyjnej PW, aby aktywować tryb spektralnego dopplera fali tętna. Użyj trackballa na panelu sterowania, aby przesunąć żółty kursor w dowolnym kierunku na ekranie i umieść go nad zastawką płucną. Naciśnij przycisk pięć na panelu sterowania, aby uzyskać krzywą przepływu krwi przez zastawkę płucną. Teraz umieść przetwornik między trzecią a piątą przestrzenią międzyżebrową, aby uzyskać widok z długiej osi. Skieruj przetwornik w stronę prawego ramienia zwierzęcia pod kątem od 45 do 60 stopni w stosunku do mostka, przechwytując przekrój podłużny pokazujący lewą komorę, prawą komorę, lewy przedsionek, zastawkę mitralną i zastawkę aortalną. Naciśnij przycisk zamrażania na panelu sterowania, aby zablokować obraz, a następnie naciśnij przycisk zapisywania na panelu sterowania, aby zapisać obraz. Naciśnij przycisk zakończenia badania na panelu sterowania, aby zakończyć sesję obrazowania i zapisać obrazy w bazie danych pacjenta. W przypadku echokardiografii wybierz wyszukiwanie na ekranie i wybierz odpowiedni identyfikator zwierzęcia z bazy danych, aby rozpocząć analizę. Naciśnij przycisk SonoView na panelu sterowania. Kliknij raz wewnątrz obszaru obrazu na ekranie, aby rozpocząć analizę. Użyj trackballa, aby wybrać obraz krótkiej osi w trybie dopplerowskim widma fali pulsacyjnej. Teraz naciśnij przycisk kalkulatora i wybierz tętno HR na ekranie. Użyj trackballa, aby narysować linie kursora od szczytu do wierzchołka dwóch krzywych. Powtórz to trzy razy, aby uzyskać średnią. Naciśnij ponownie przycisk kalkulatora i wybierz na ekranie zastawkę płucną, PV, a następnie czas przyspieszenia PV/czas wyrzutu. Użyj trackballa, aby umieścić kursor od początku do szczytu, a następnie od początku do końca tej samej krzywej. Powtórz trzy razy, aby uzyskać średnią. Naciśnij przycisk zapisywania na panelu sterowania, aby zapisać wyniki. Za pomocą trackballa wybierz obraz długiej osi w prawej górnej części ekranu. Naciśnij przycisk kalkulatora na panelu sterowania i wybierz na ekranie odpowiedni śledzony odpływ komorowy, parametr RVOT, a następnie średnicę RVOT. Za pomocą trackballa przesuń kursor od jednej ściany prawej komory do przeciwległej ściany. Wykonaj to trzy razy, aby uzyskać średnią. W przypadku nakłucia prawej komory najpierw należy wykonać tracheostomię znieczulonego zwierzęcia. Upewnij się, że komputer jest włączony, oprogramowanie LabVIEW jest otwarte, a linia bazowa jest skonfigurowana do akwizycji sygnału. Po zlokalizowaniu prawej komory w oprogramowaniu sprawdź, czy rozpoczęła się akwizycja sygnału. Kliknij przycisk Zapisz na ekranie i wprowadź identyfikator zwierzęcia. Użyj heparynizowanej żyły skóry głowy wypełnionej solą fizjologiczną o rozmiarze 19 ustawionym tak, aby nakłuwać nieco powyżej anatomicznego punktu odniesienia, uważając, aby nie wbić igły zbyt głęboko. Sprawdź dokładność nakłucia, obserwując wartości ciśnienia. Rejestruj co najmniej 10 stabilnych szczytów fal ciśnienia, aby zapewnić wiarygodność danych. Pod koniec akwizycji sygnału podać heparynę za pomocą strzykawki z heparyną do pobierania krwi poprzez nakłucie lewej komory lub żyły głównej jamy brzusznej. W celu analizy danych otwórz program MATLAB, kliknij przycisk przeglądaj w poszukiwaniu wklejenia i wybierz plik na wewnętrznym dysku twardym komputera, który zawiera poprawny kod. Po lewej stronie ekranu MATLAB obserwuj listę plików, które zawierają kody dla każdego kanału rozpoznawanego przez przetwornik. Wybierz kod odpowiadający wybranej konfiguracji kanału użytej wcześniej w eksperymencie. Naciśnij przycisk uruchamiania i wybierz plik .bin na zewnętrznym dysku twardym do analizy. Wybierz najbardziej jednolity przekrój krzywej, klikając raz na początku i raz na końcu, identyfikując część z wizualnie równymi szczytami i dołkami. Następnie wybierz dziesięciosekundowy segment krzywej, klikając raz na zero sekund i raz na 10 sekund. Dostosuj linię bazową, odejmując najniższą wartość minimalną w oknie poleceń i naciskając Enter na klawiaturze. Oprogramowanie automatycznie wygeneruje wszystkie istotne dane. Obserwuj dane w dwóch kolumnach, które są czasem szczytu i wartością ciśnienia. Skopiuj i wklej wartości ciśnienia skurczowego do pliku .txt i usuń wartości czasu. Zastąp wszystkie kropki przecinkami w pliku, aby umożliwić obliczenie średniej. Wybierz 10 szczytowych wartości ciśnienia i oblicz ich średnią. Aby uzyskać wskaźnik przerostu prawej komory, zmierz i zapisz masę ciała zwierzęcia na początku eksperymentu. Zmierz ciśnienie skurczowe w prawej komorze, a następnie poddaj eutanazji i usuń narządy klatki piersiowej. Wypreparuj aortę, tętnicę płucną, żyłę główną i żyły płucne od podstawy serca, a następnie osusz całe serce gazą i zapisz suchą masę za pomocą wagi precyzyjnej. Po wypreparowaniu i usunięciu przedsionków należy oddzielić prawą komorę od lewej komory wraz z przegrodą. Za pomocą wagi precyzyjnej należy oddzielnie rejestrować masy wysuszonej prawej komory i lewej komory wraz z przegrodą. Stosunek PAT do PET był znacznie zmniejszony u zwierząt z tętniczym nadciśnieniem płucnym w porównaniu z grupą kontrolną, co wskazuje na zwiększony opór naczyniowy płuc i zmieniony wzorzec przepływu krwi w tętnicy płucnej. Średnica odpływu z prawej komory była zwiększona u zwierząt z tętniczym nadciśnieniem płucnym w porównaniu z grupą kontrolną, co odzwierciedla stopień przerostu komorowego jako odpowiedź adaptacyjną prawej komory, zastępującą rozwój choroby. Reprezentatywne obrazy echokardiograficzne wykazały widocznie powiększone średnice odpływu z prawej komory i zmienione wzorce przepływu u zwierząt z tętniczym nadciśnieniem płucnym w porównaniu z grupą kontrolną. Ciśnienie skurczowe prawej komory było znacznie podwyższone u zwierząt z tętniczym nadciśnieniem płucnym w porównaniu z grupą kontrolną, co odzwierciedlało zwiększony opór naczyniowy płuc. Zapisy przebiegu ciśnienia wykazały wyższe szczyty u zwierząt z tętniczym nadciśnieniem płucnym, zgodne z podwyższonym RVSP. Wskaźnik przerostu prawej komory był znacznie podwyższony u zwierząt z tętniczym nadciśnieniem płucnym w porównaniu z grupą kontrolną.

evaluation-right-ventricular-function-experimental-models-pulmonary

Research

JoVE Journal

Biology

Biologia

Ten artykuł zawiera protokół do echokardiograficznej oceny wielkości prawej komory i nadciśnienia płucnego u myszy.  Zastosowania obejmują określanie fenotypu i seryjną ocenę w transgenicznych i indukowanych toksynami mysich modelach kardiomiopatii i chorób naczyń płucnych.

Echokardiograficzna ocena prawego serca u myszy

Dysfunkcja prawej komory (RV) jest kluczowa dla patogenezy chorób sercowo-naczyniowych, jednak dostępne są ograniczone metodologie jej oceny. Ostatnie postępy w obrazowaniu ultrasonograficznym zapewniają nieinwazyjną i dokładną opcję podłużnego badania RV. W tym artykule szczegółowo opisujemy krok po kroku metodę echokardiograficzną wykorzystującą mysi model przeciążenia ciśnienia RV.

Ocena struktury i funkcji prawej komory serca w mysim modelu zwężenia tętnicy płucnej za pomocą echokardiografii przezklatkowej

Tętnicze nadciśnienie płucne (PAH) to choroba tętniczek płucnych, która prowadzi do ich zatarcia i rozwoju niewydolności prawej komory. Modele WWA u gryzoni mają kluczowe znaczenie dla zrozumienia patofizjologii WWA. Tutaj pokazujemy charakterystykę hemodynamiczną, z cewnikowaniem prawego serca i echokardiografią, u myszy i szczura.

Charakterystyka hemodynamiczna modeli tętniczego nadciśnienia płucnego u gryzoni

Ten protokół opisuje procedurę chirurgiczną mającą na celu stworzenie modelu tętniczego nadciśnienia płucnego wywołanego przepływem (PAH) u szczurów oraz procedury analizy głównych hemodynamicznych i histologicznych punktów końcowych w tym modelu.

Chirurgia zastawkowa, cewnikowanie prawego serca i morfometria naczyniowa w modelu szczurzym dla tętniczego nadciśnienia płucnego wywołanego przepływem

Prezentujemy protokół do wywołania i fenotypowania ostrej niewydolności prawego serca w dużym modelu zwierzęcym z przewlekłym nadciśnieniem płucnym. Model ten może być wykorzystany do testowania interwencji terapeutycznych, opracowywania wskaźników prawego serca lub lepszego zrozumienia patofizjologii ostrej prawej niewydolności serca.

Indukcja i fenotypowanie ostrej niewydolności prawego serca w dużym modelu zwierzęcym przewlekłego zakrzepowo-zatorowego nadciśnienia płucnego

Tutaj oferujemy użyteczne podejście do badania mechanizmu niewydolności prawej komory. Wygodniejsze i skuteczniejsze podejście do zwężenia tętnicy płucnej ustala się za pomocą narzędzi chirurgicznych wykonanych we własnym zakresie. Ponadto przedstawiono metody oceny jakości tego podejścia za pomocą echokardiografii i cewnikowania.

Indukcja niewydolności prawej komory przez zwężenie tętnicy płucnej i ocena funkcji prawej komory u myszy

Tutaj prezentujemy protokół do przeprowadzenia inwazyjnej oceny hemodynamicznej prawej komory i tętnicy płucnej u myszy przy użyciu metody chirurgicznej na otwartej klatce piersiowej.

Inwazyjna ocena hemodynamiczna układu prawej komory i tętniczego nadciśnienia płucnego wywołanego niedotlenieniem u myszy

Ten manuskrypt opisuje technikę chirurgiczną i eksperymentalne podejście do rozwoju ciężkiego przeciążenia ciśnienia w prawej komorze w celu modelowania ich adaptacyjnych i nieadaptacyjnych fenotypów.

Duży model zwierzęcy nadciśnienia płucnego i niewydolności prawej komory: podwiązanie lewej tętnicy płucnej i postępujące prążki głównej tętnicy płucnej u owiec

Niniejszy protokół opisuje echokardiograficzną charakterystykę morfologii i funkcji prawej komory w szczurzym modelu tętniczego nadciśnienia płucnego.

Kompleksowa echokardiograficzna ocena funkcji prawej komory serca w szczurzym modelu tętniczego nadciśnienia płucnego

Opisujemy mysi model przeciążenia ciśnienia w prawej komorze wywołanego przez opaski na pniu płucnym. Szczegółowe protokoły intubacji, chirurgii i fenotypowania za pomocą echokardiografii znajdują się w artykule. Do intubacji i chirurgii wykorzystywane są instrumenty wykonane na zamówienie, co pozwala na szybkie i niedrogie odtworzenie modelu.

Mysi model przerostu prawej komory serca wywołanego przeciążeniem ciśnieniowym i niewydolności przez opaski pnia płucnego

Niewydolność prawego serca (RHF) charakteryzuje się prawostronnym rozszerzeniem i przerostem serca, co prowadzi do nieprawidłowego funkcjonowania komór i przedsionków. Chorobom krążeniowo-oddechowym związanym z RHF towarzyszy zwiększone ryzyko zaburzeń rytmu serca. W artykule opisano standaryzowany model RHF indukowanego pasmami tętnic płucnych związanego ze zwiększoną arytmogenezą komorową i przedsionkową.

Szczurzy model prawostronnej przebudowy serca i arytmii z wykorzystaniem pasma tętnicy płucnej

Poznaj zintegrowaną metodę oceny funkcji prawej komory w modelu tętniczego nadciśnienia płucnego u szczurów, łączącą echokardiografię z pomiarami inwazyjnymi i analizą postmortem.

Ocena funkcji prawej komory w eksperymentalnych modelach tętniczego nadciśnienia płucnego

Przeglądaj więcej filmów