Name: Podawanie Δ 9-tetrahydrokannabinolu (THC) u młodych i dorosłych myszy (Wideo) | JoVE Journal
Uploaded: 2025-08-01T13:40:00.000+00:00
Duration: 7 min 51 s
Description: Poznaj protokół podawania THC myszom w różnych stadiach rozwoju. Metoda obejmuje testy behawioralne oceniające wpływ kannabinoidów na aktywność lokomotoryczną i reakcję na ból.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

Prace te były wspierane przez National Institutes on Drug Abuse (grant nr 2P50DA044118 [do DP]).

Wszystkie procedury zostały zatwierdzone przez IACUC Uniwersytetu Kalifornijskiego w Irvine i zostały przeprowadzone w ścisłej zgodności z wytycznymi National Institutes of Health (NIH) dotyczącymi opieki i wykorzystania zwierząt doświadczalnych.
1. Procedury pozyskiwania i przechowywania THC
UWAGA: W Stanach Zjednoczonych stosowanie THC w badaniach akademickich wymaga wykonania kilku kroków wymaganych przez status prawny konopi. Zarówno konopie indyjskie, jak i THC pochodzące z konopi indyjskich są klasyfikowane jako substancje kontrolowane z Wykazu I. Z tego powodu, zanim będzie można kupić marihuanę lub THC, badacze muszą uzyskać licencję od Drug Enforcement Administration (DEA). Przegląd tego procesu, który może trwać do 6 miesięcy lub dłużej, znajduje się poniżej.
<ol>
	<li>Określenie zakresu badań: Określ cel i cele procesu badawczego oraz określ, dlaczego THC jest konieczne. Opracuj protokół badawczy szczegółowo opisujący potrzebne ilości THC, jego komercyjne źródło oraz sposób obchodzenia się z nim i przechowywania. Podaj jak najwięcej istotnych szczegółów.</li>
	<li>Otrzymanie instytucjonalnego zatwierdzenia regulacyjnego: Przedłożenie propozycji badawczej do Komitetu ds. Opieki nad Zwierzętami i Użytkowania Zwierząt (IACUC) (w przypadku prac przedklinicznych) lub Instytucjonalnej Komisji Rewizyjnej (IRB) (w przypadku prac klinicznych). Ten etap przeglądu chroni prawa uczestników badań i zapewnia, że badanie jest zgodne ze standardami etycznymi.</li>
	<li>Zgodność z przepisami stanowymi: Należy pamiętać o wszelkich przepisach stanowych dotyczących badań nad konopiami indyjskimi, ponieważ mogą się one znacznie różnić. Na przykład w Kalifornii uzyskaj zgodę Kalifornijskiego Panelu Doradczego ds. Badań (RAPC)23.</li>
	<li>Pozyskiwanie THC: Kupuj konopie indyjskie i THC od hodowców lub producentów, którzy są do tego celu licencjonowani. UWAGA: Lista zatwierdzonych hodowców jest dostępna na stronie internetowej DEA. National Institute on Drug Abuse (NIDA) dostarcza THC za pośrednictwem NIDA Drug Supply Program24. Aby ubiegać się o udział w tym programie, należy podać informacje o instytucji, szczegółowy protokół badawczy oraz dokumentację przepisów instytucjonalnych, takich jak listy zatwierdzające IACUC lub IRB. Wypełnienie formularza DEA 222, który jest jednostronicowym formularzem specjalnie przeznaczonym dla każdego numeru rejestracyjnego DEA, jest wymagane do zakupu lub przekazania substancji kontrolowanych z Wykazu 1.</li>
	<li>Odbieranie i przechowywanie THC<ol>
		<li>Przechowuj THC w bezpiecznie zamkniętym sejfie lub skarbcu, który jest zgodny z projektem zatwierdzonym przez DEA. Dostęp do obszaru badawczego powinien być kontrolowany (na przykład drzwi do budynku i/lub laboratorium powinny być zamknięte na klucz). Tylko upoważniony personel powinien mieć dostęp do THC.</li>
		<li>Przygotuj i ustal listę osób, które mają do niej dostęp, i aktualizuj tę listę. Wyraźnie oznacz pojemniki THC z nazwą, stężeniem, datą otrzymania i ostrzeżeniami o zagrożeniu.</li>
		<li>Postępuj zgodnie z ustalonymi procedurami utylizacji, które wymagają określonej dokumentacji i przestrzegania przepisów federalnych i stanowych. Utrzymuj THC na poziomie -20 °C lub niższym.</li>
	</ol>
	</li>
	<li>Zarządzanie zapasami:<ol>
		<li>Wdróż solidny system inwentaryzacji, aby śledzić ilość, użycie i lokalizację THC. Przygotuj segregator substancji kontrolowanych, który zawiera licencję z Wykazu 1, informacje o upoważnionym personelu, zapisy wszystkich wpływów, utylizacji i użycia substancji (rysunek 2).</li>
		<li>Przeprowadzaj regularne audyty praktyk w zakresie inwentaryzacji i przechowywania, wypełniając dziennik inwentaryzacji dwa razy w roku, aby zapewnić zgodność z wymogami prawnymi. Okresowo sprawdzaj dzienniki dostępu i rekordy zapasów.</li>
	</ol>
	</li>
	<li>Szkolenia i protokoły: Szkolenie powinno być zapewnione dla całego personelu, który ma do czynienia z THC. Należy ustanowić jasne protokoły przechowywania, obchodzenia się i usuwania leku. UWAGA: Wdrażając te praktyki, laboratoria akademickie mogą zapewnić zgodność z wymogami prawnymi i utrzymać bezpieczne środowisko badawcze.</li>
</ol>
2. Procedury podawania THC myszom przez wstrzyknięcie i.p.
UWAGA: Podczas obchodzenia się z THC ważne jest, aby kontrolować temperaturę i chronić związek przed światłem, aby zachować jego stabilność. THC jest wrażliwe na ciepło i powinno być przechowywane w temperaturze -20 °C lub niższej w celu długotrwałego przechowywania. W przypadku krótkotrwałego przechowywania, THC może być przechowywane w temperaturze pokojowej lub w lodówce w temperaturze 4 °C przez kilka godzin. THC jest również wrażliwe na promieniowanie ultrafioletowe (UV) i światło widzialne, które może powodować degradację poprzez utlenianie. Aby temu zapobiec, THC powinno być przechowywane w hermetycznych pojemnikach ze szkła bursztynowego lub przezroczystych pojemnikach owiniętych folią aluminiową i przechowywanych w ciemności. Zaleca się oznaczanie wszystkich próbek datami i warunkami przechowywania, aby zapewnić prawidłowe śledzenie i stabilność.
<ol>
	<li>Materiałów<ol>
		<li>Przygotuj wszystkie roztwory przy użyciu wody ultraczystej i odczynników klasy analitycznej. Uzyskaj THC od Cayman Chemical (Ann Arbor, MI) lub RTI International (Research Triangle Park, NC) lub za pośrednictwem NIDA Drug Supply Program24.</li>
	</ol>
	</li>
	<li>Sprzęt i zaopatrzenie<ol>
		<li>Upewnij się, że elementy wymienione w Tabeli Materiałów są gotowe przed rozpoczęciem procedury. UWAGA: Podczas pracy z THC konieczne jest używanie szklanych fiolek (8 ml lub podobnych) i pojemników. Tworzywa sztuczne mogą reagować lub absorbować cząsteczki hydrofobowe, takie jak THC, co może prowadzić do utraty próbki lub niespójnych stężeń. Szkło jest stabilne chemicznie i niereaktywne, co pomaga zapobiegać niepożądanym interakcjom z cząsteczkami hydrofobowymi.</li>
	</ol>
	</li>
	<li>Procedury podawania THC myszom<ol>
		<li>Wyjmij pojemnik THC ze skrytki bezpieczeństwa w zamrażarce.</li>
		<li>Trzymając pojemnik na lodzie, odbierz odpowiednią objętość THC za pomocą pipety i ostrożnie dodaj ją na dno szklanej fiolki o pojemności 8 ml. Obliczyć objętość na podstawie dawki (mg/kg) i masy ciała myszy (g).</li>
		<li>Przenieść fiolkę do dygestorium chemicznego i delikatnie odparować rozpuszczalnik do sucha za pomocą delikatnego strumienia azotu gazowego. Należy uważać, aby nie rozprysnąć roztworu zawierającego THC na boki fiolki, ponieważ spowoduje to poważne straty. Proces ten trwa około 5-10 minut.</li>
		<li>Zapisz w Dzienniku Użycia Substancji Kontrolowanej I: Zaloguj się w Spoiwie Substancji Kontrolowanej, ile THC zostało pobrane z aktualnie używanej fiolki.</li>
		<li>Gdy rozpuszczalnik całkowicie wyschnie, dodaj odpowiednią objętość Tween-80. Jest to objętość Tween-80 wymagana do uzyskania końcowego 5% stężenia Tween-80 w soli fizjologicznej, jak pokazano w kroku 2.3.8.</li>
		<li>Ogrzać fiolkę w zlewce zawierającej gorącą wodę o temperaturze lub niższej niż 60 °C. Obracać fiolkę, aby całkowicie rozpuścić THC i powtórzyć w razie potrzeby.</li>
		<li>Stopniowo dodawaj sterylną sól fizjologiczną małymi porcjami: na przykład 200 μl, 300 μl, 500 μl i 1 ml. Wiruj i podgrzej.</li>
		<li>Powtarzać kroki 2.3.6 i 2.3.7, aż do momentu, gdy całkowita objętość soli fizjologicznej zostanie dodana do uzyskania końcowego roztworu THC w 5% Tween-80 i 95% soli fizjologicznej, a roztwór zostanie całkowicie rozpuszczony.</li>
		<li>(OPCJONALNIE) Poddać sonifikację fiolki w ultradźwiękowej łaźni wodnej ustawionej na około 100% mocy przy 40 kHz i temperaturze 37 °C przez 5 minut. Sprawdzić, czy roztwór jest klarowny i wolny od jakiejkolwiek nierozpuszczonej substancji. Kolor płynu może się różnić w zależności od używanego pojazdu.</li>
		<li>Zważyć mysz i określić odpowiednią ilość do wstrzyknięcia. Objętość wstrzyknięcia powinna wynosić 10 ml/kg mc. na mysz.</li>
		<li>Kontynuuj wstrzyknięcia dootrzewnowe (i.p.). Upewnij się, że roztwory THC są świeżo przygotowane w dniu użycia.</li>
	</ol>
	</li>
</ol>
3. Procedury oceny skutków farmakologicznych THC
<ol>
	<li>Zwierzęta<ol>
		<li>Do tego badania wykorzystano myszy obu płci. UWAGA: W tym badaniu wykorzystano młodzież (dzień po urodzeniu, PND, 30-35) i dorosłych (PND 70-75) myszy C57BL / 6J obu płci z Jackson Laboratories (Farmington, CT). Procedura ma zastosowanie do innych szczepów myszy.</li>
		<li>Trzymaj myszy w wentylowanych klatkach (4-5 na klatkę) z jedzeniem i wodą dostępną ad libitum. Zwierzęta losowo należy przypisać pod względem wieku i masy ciała do grup poddanych działaniu substancji i pozwolić im zaaklimatyzować się przez co najmniej 1 tydzień przed eksperymentami.</li>
		<li>Utrzymuj pomieszczenia mieszkalne w 12-godzinnym cyklu światła/12-godzinnym ciemnym (światła włączają się o 6:30) ze stałą temperaturą (20 ± 2 °C) i wilgotnością względną (55%-60%).</li>
	</ol>
	</li>
	<li>Grupy eksperymentalne<ol>
		<li>Podziel każdą grupę wiekową i płciową na cztery grupy poddane zabiegowi: jedną grupę kontrolną nośnika i trzy grupy leczenia THC dla dawek 1, 5 i 10 mg/kg.</li>
	</ol>
	</li>
	<li>Podawanie leków<ol>
		<li>Świeżo przygotuj THC, jak opisano powyżej, w nośniku 95% soli fizjologicznej z 5% Tween-80 i podawaj przez wstrzyknięcie i.p.</li>
	</ol>
	</li>
	<li>Testy behawioralne UWAGA: W tym przykładzie każde zwierzę przeszło testy opisane poniżej, aby śledzić działanie THC22. Trzy testy behawioralne przeprowadzono kolejno na tej samej kohorcie zwierząt. Kolejność procedur była następująca: lokomocja (30 minut po THC), katalepsja (45 minut po THC) i zanurzenie w ogonie (60, 180 i 300 minut po THC) (ryc. 3). W eksperymentach z udziałem nastolatek ponownie wykorzystaliśmy tę samą grupę leczoną nośnikiem, a następnie podaliśmy 1 mg/kg lub 10 mg/kg THC tej samej kohorcie w celu przeprowadzenia testów katalepsji i zanurzenia w ogonie. Takie podejście pozwoliło nam osiągnąć wystarczającą moc statystyczną przy jednoczesnej minimalizacji liczby wykorzystywanych zwierząt, zgodnie z wytycznymi etycznymi. Zachowanie zostało zarejestrowane za pomocą kamery, a pliki filmowe zostały przeanalizowane za pomocą oprogramowania do śledzenia zachowań.<ol>
		<li>Test katalepsji UWAGA: Katalepsja u myszy jest stanem (pato)fizjologicznym charakteryzującym się brakiem dobrowolnych ruchów, sztywnością postawy i odpornością na wywołane zewnętrznie zmiany pozycji ciała. Jest uważany za jeden z czterech standardowych efektów THC, wraz z hamowaniem ruchu drogowego, antynocycepcją i obniżoną temperaturą ciała. W tym przykładzie zachowanie kataleptyczne zostało ocenione na podstawie ustalonych procedur22, jak opisano poniżej:<ol>
			<li>Konfiguracja: Przygotuj poziomy drążek (o długości 7 cm) umieszczony 4 cm nad powierzchnią czystej ławki laboratoryjnej przy normalnym oświetleniu otoczenia (160 luksów). Umieść w pobliżu elektroniczny timer, który jest gotowy do użycia.</li>
			<li>Przenieś mysz z pomieszczeń do laboratorium testowego i zaaklimatyzuj ją w klatce przez 60 minut przed badaniem. Noś czysty fartuch laboratoryjny i nie używaj perfum.</li>
			<li>Używając czystych rękawiczek lateksowych, delikatnie wyjmij mysz z klatki, bezpiecznie podaj odpowiednią ilość THC lub nośnika i umieść ją z powrotem w klatce.</li>
			<li>W odpowiednim czasie po wstrzyknięciu THC (w tym przypadku 45 minut) wyjmij mysz z klatki i delikatnie połóż jej przednie łapy na poziomym drążku.</li>
			<li>Rejestruj czas bezruchu za pomocą elektronicznego timera. UWAGA: Czas bezruchu jest definiowany jako czas, jaki upłynął od momentu umieszczenia myszy na pasku do momentu usunięcia jednej lub obu łap.</li>
			<li>Zatrzymaj stoper, gdy mysz zdejmie jedną lub obie łapy z paska lub gdy zostanie osiągnięty czas graniczny 10 s.</li>
			<li>Powtórz test dwukrotnie dla każdej myszy, z 2-minutową przerwą między próbami.</li>
			<li>Użyj średniej z dwóch czasów bezruchu do końcowej analizy danych.</li>
			<li>Miara wyniku: Użyj czasu bezruchu (w sekundach) jako wskaźnika katalepsji.</li>
		</ol>
		</li>
		<li>Test w terenie otwartym (aktywność lokomotoryczna w nowym środowisku) UWAGA: Hipolokomocja wywołana THC jest oceniana za pomocą testu na otwartym polu i zgodnie z ustalonym protokołem25.<ol>
			<li>Konfiguracja: Do tego testu użyj areny na otwartym polu wyposażonej w sprzęt do śledzenia wideo. Upewnij się, że arena na otwartym polu jest czysta i wolna od zapachów z poprzednich eksperymentów. UWAGA: Skuteczne czyszczenie można wykonać przy użyciu dostępnych na rynku produktów opisanych w Tabeli materiałów.</li>
			<li>Przenieś mysz z pomieszczeń do laboratorium testowego i zaaklimatyzuj ją w klatce przez 60 minut przed badaniem. Upewnij się, że pomieszczenie testowe jest oświetlone o niskim natężeniu (10 luksów)25. Noś czysty fartuch laboratoryjny i nie używaj perfum.</li>
			<li>Używając czystych rękawiczek, delikatnie wyjmij mysz z klatki, bezpiecznie podaj odpowiednią ilość THC lub nośnika i umieść mysz z powrotem w klatce.</li>
			<li>W odpowiednim czasie po wstrzyknięciu THC (w tym przypadku 30 minut) delikatnie umieść mysz na środku areny, uważając, aby zminimalizować stres związany z obsługą.</li>
			<li>Nagrywaj 10-minutowe sesje za pomocą kamery i oprogramowania do śledzenia zachowań.</li>
			<li>Po teście umieść mysz z powrotem w klatce domowej i dokładnie wyczyść arenę opisanym powyżej roztworem czyszczącym.</li>
			<li>Miara wyniku: Oblicz całkowitą przebytą odległość, mierzoną w metrach, jako podstawowy parametr do ilościowego określenia aktywności lokomotorycznej.</li>
		</ol>
		</li>
		<li>Test zanurzenia w ogonie (progi nocyceptywne, zwane również testem wycofania ogona gorącej wody) UWAGA: Nocycepcję ocenia się za pomocą testu zanurzenia w ogonie, jak opisano wcześniej26. Test ten służy do oceny skuteczności potencjalnych leków przeciwbólowych i oceny tolerancji na ich działanie. Podczas testu ciepło jest przykładane do ogona myszy jako bolesny bodziec i mierzony jest czas wycofania ogona ze źródła ciepła.<ol>
			<li>Konfiguracja: Przygotuj łaźnię wodną utrzymywaną w temperaturze 54 °C przy normalnym oświetleniu otoczenia (160 luksów). Umieść w pobliżu elektroniczny timer, który jest gotowy do użycia.</li>
			<li>Delikatnie przytrzymuj mysz za pomocą kieszeni na miękką tkankę wykonanej przy użyciu podkładek treningowych dla zwierząt (Glad), upewniając się, że ogon pozostaje dostępny.</li>
			<li>Zanurz dystalną jedną trzecią ogona w łaźni wodnej i jednocześnie uruchom stoper.</li>
			<li>Rejestruj opóźnienie do wycofania ogona (w sekundach), zdefiniowane jako odruchowe machanie ogonem.</li>
			<li>Ustaw maksymalny czas odcięcia 10 s, aby zapobiec uszkodzeniom tkanek i dyskomfortowi.</li>
			<li>Powtórz pomiar dwa razy dla każdej myszy w każdym punkcie czasowym (w tym przypadku 60, 180 i 300 minut po wstrzyknięciu THC), z 5-minutową przerwą między próbami.</li>
			<li>Uśrednij dwa pomiary opóźnienia na potrzeby analizy danych.</li>
			<li>Miara wyniku: Oblicz opóźnienie do wycofania ogona, mierzone w sekundach, jako główną zmienną wynikową do oceny efektów antynocyceptywnych.</li>
		</ol>
		</li>
	</ol>
	</li>
	<li>Analizy statystyczne<ol>
		<li>Wyraź wyniki jako średnie ± SEM. Określ istotność za pomocą dwukierunkowej analizy wariancji (ANOVA), a następnie testu wielokrotnych porównań Šídáka lub trójczynnikowej ANOVA, a następnie testu wielokrotnych porównań Tukeya. Rozważ różnice znaczące, jeśli P < 0,05. UWAGA: Do przeprowadzenia analizy użyto GraphPad Prism w wersji 10.4.</li>
	</ol>
	</li>
</ol>

<ol><li>Patrick, M. E., Miech, R. A., Johnston, L. D., O'Malley, P. M. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aPatrick%2C+ME+%22Monitoring+the+future+panel+study+annual+report%3A+National+data+on+substance+use+among+adults+ages+19+to+65%2C+1976-2023%22">Monitoring the future panel study annual report: National data on substance use among adults ages 19 to 65, 1976-2023</a>. , At. https://monitoringthefuture.org/wp-content/uploads/2024/07/mtfpanel2024.pdf (2024).</li>
<li>Lopez-Quintero, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Probability+and+predictors+of+transition+from+first+use+to+dependence+on+nicotine%2C+alcohol%2C+cannabis%2C+and+cocaine%3A+Results+of+the+National+Epidemiologic+Survey+on+Alcohol+and+Related+Conditions+%28NESARC%29%5BTitle%5D)+AND+%22Drug+Alcohol+Depend%22%5BJournal%5D)">Probability and predictors of transition from first use to dependence on nicotine, alcohol, cannabis, and cocaine: Results of the National Epidemiologic Survey on Alcohol and Related Conditions (NESARC).</a> Drug Alcohol Depend. 115 (1-2), 120-130 (2011).</li>
<li>Cerda, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Association+between+recreational+marijuana+legalization+in+the+United+States+and+changes+in+marijuana+use+and+cannabis+use+disorder+from+2008+to+2016%5BTitle%5D)+AND+%22JAMA+Psychiatry%22%5BJournal%5D)">Association between recreational marijuana legalization in the United States and changes in marijuana use and cannabis use disorder from 2008 to 2016.</a> JAMA Psychiatry. 77 (2), 165-171 (2020).</li>
<li>Miech, R. A., et al. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aMiech%2C+RA+%22Monitoring+the+future+national+survey+results+on+drug+use%2C+1975-2023%3A+Secondary+school+students%22">Monitoring the future national survey results on drug use, 1975-2023: Secondary school students</a>. , https://archive.org/details/mtf2023 (2023).</li>
<li>Pacek, L. R., Mauro, P. M., Martins, S. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Perceived+risk+of+regular+cannabis+use+in+the+United+States+from+2002+to+2012%3A+Differences+by+sex%2C+age%2C+and+race%2Fethnicity%5BTitle%5D)+AND+%22Drug+Alcohol+Depend%22%5BJournal%5D)">Perceived risk of regular cannabis use in the United States from 2002 to 2012: Differences by sex, age, and race/ethnicity.</a> Drug Alcohol Depend. 149, 232-244 (2015).</li>
<li>Hammond, C. J., Chaney, A., Hendrickson, B., Sharma, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cannabis+use+among+U.S.+adolescents+in+the+era+of+marijuana+legalization%3A+A+review+of+changing+use+patterns%2C+comorbidity%2C+and+health+correlates%5BTitle%5D)+AND+%22Int+Rev+Psychiatry%22%5BJournal%5D)">Cannabis use among U.S. adolescents in the era of marijuana legalization: A review of changing use patterns, comorbidity, and health correlates.</a> Int Rev Psychiatry. 32 (3), 221-234 (2020).</li>
<li>National Academies of Sciences, Engineering, and Medicine. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=%22The+health+effects+of+cannabis+and+cannabinoids%3A+The+current+state+of+evidence+and+recommendations+for+research%22">The health effects of cannabis and cannabinoids: The current state of evidence and recommendations for research</a>. , Natl Acad Press. (2017).</li>
<li>Health effects of cannabis and cannabinoids and barriers to research: Report to Congress pursuant to requirements of the Medical Marijuana and Cannabidiol Research Expansion Act. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=%22Dept+Health+Hum+Serv%22">Dept Health Hum Serv</a>. , National Institutes of Health. (2023).</li>
<li>Maccarrone, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Goods+and+bads+of+the+endocannabinoid+system+as+a+therapeutic+target%3A+Lessons+learned+after+30+years%5BTitle%5D)+AND+%22Pharmacol+Rev%22%5BJournal%5D)">Goods and bads of the endocannabinoid system as a therapeutic target: Lessons learned after 30 years.</a> Pharmacol Rev. 75 (5), 885-958 (2023).</li>
<li>Whiting, P. F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cannabinoids+for+medical+use%3A+A+systematic+review+and+meta-analysis%5BTitle%5D)+AND+%22JAMA%22%5BJournal%5D)">Cannabinoids for medical use: A systematic review and meta-analysis.</a> JAMA. 313 (24), 2456-2473 (2015).</li>
<li>Montagner, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Charting+the+therapeutic+landscape%3A+A+comprehensive+evidence+map+on+medical+cannabis+for+health+outcomes%5BTitle%5D)+AND+%22Front+Pharmacol%22%5BJournal%5D)">Charting the therapeutic landscape: A comprehensive evidence map on medical cannabis for health outcomes.</a> Front Pharmacol. 15, 1494492(2024).</li>
<li>Manzoni, O. J., Manduca, A., Trezza, V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Therapeutic+potential+of+cannabidiol+polypharmacology+in+neuropsychiatric+disorders%5BTitle%5D)+AND+%22Trends+Pharmacol+Sci%22%5BJournal%5D)">Therapeutic potential of cannabidiol polypharmacology in neuropsychiatric disorders.</a> Trends Pharmacol Sci. 46 (2), 145-162 (2025).</li>
<li>Kalant, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cannabis+control+policy%3A+No+rational+basis+yet+for+legalization%5BTitle%5D)+AND+%22Clin+Pharmacol+Ther%22%5BJournal%5D)">Cannabis control policy: No rational basis yet for legalization.</a> Clin Pharmacol Ther. 97 (6), 538-540 (2015).</li>
<li>Huestis, M. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Pharmacokinetics+and+metabolism+of+the+plant+cannabinoids%2C+delta9-tetrahydrocannabinol%2C+cannabidiol+and+cannabinol%5BTitle%5D)+AND+%22Handb+Exp+Pharmacol%22%5BJournal%5D)">Pharmacokinetics and metabolism of the plant cannabinoids, delta9-tetrahydrocannabinol, cannabidiol and cannabinol.</a> Handb Exp Pharmacol. 168, 657-690 (2005).</li>
<li>Grotenhermen, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Pharmacokinetics+and+pharmacodynamics+of+cannabinoids%5BTitle%5D)+AND+%22Clin+Pharmacokinet%22%5BJournal%5D)">Pharmacokinetics and pharmacodynamics of cannabinoids.</a> Clin Pharmacokinet. 42 (4), 327-360 (2003).</li>
<li>Jung, K. M., Piomelli, D. Cannabinoids and Endocannabinoids. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aJung%2C+KM+%22Neuroscience+in+the+21st+Century%22">Neuroscience in the 21st Century</a>. , Springer. New York. (2016).</li>
<li>Jung, K. M., Lin, L., Piomelli, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Overactivation+of+the+endocannabinoid+system+in+adolescence+disrupts+adult+adipose+organ+function+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Cells%22%5BJournal%5D)">Overactivation of the endocannabinoid system in adolescence disrupts adult adipose organ function in mice.</a> Cells. 13 (5), 461(2024).</li>
<li>Lin, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Adolescent+exposure+to+low-dose+THC+disrupts+energy+balance+and+adipose+organ+homeostasis+in+adulthood%5BTitle%5D)+AND+%22Cell+Metab%22%5BJournal%5D)">Adolescent exposure to low-dose THC disrupts energy balance and adipose organ homeostasis in adulthood.</a> Cell Metab. 35 (7), 1227-1241.e7 (2023).</li>
<li>Chandra, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((New+trends+in+cannabis+potency+in+USA+and+Europe+during+the+last+decade+%282008-2017%29%5BTitle%5D)+AND+%22Eur+Arch+Psychiatry+Clin+Neurosci%22%5BJournal%5D)">New trends in cannabis potency in USA and Europe during the last decade (2008-2017).</a> Eur Arch Psychiatry Clin Neurosci. 269 (1), 5-15 (2019).</li>
<li>Petrilli, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Association+of+cannabis+potency+with+mental+ill+health+and+addiction%3A+A+systematic+review%5BTitle%5D)+AND+%22Lancet+Psychiatry%22%5BJournal%5D)">Association of cannabis potency with mental ill health and addiction: A systematic review.</a> Lancet Psychiatry. 9 (9), 736-750 (2022).</li>
<li>Bara, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cannabis+and+synaptic+reprogramming+of+the+developing+brain%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Rev+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Cannabis and synaptic reprogramming of the developing brain.</a> Nat Rev Neurosci. 22 (7), 423-438 (2021).</li>
<li>Mabou Tagne, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Delta%289%29-tetrahydrocannabinol+alleviates+hyperalgesia+in+a+humanized+mouse+model+of+sickle+cell+disease%5BTitle%5D)+AND+%22J+Pharmacol+Exp+Ther%22%5BJournal%5D)">Delta(9)-tetrahydrocannabinol alleviates hyperalgesia in a humanized mouse model of sickle cell disease.</a> J Pharmacol Exp Ther. 391 (9), 174-181 (2024).</li>
<li>Research advisory panel. , Office of the Attorney General, State of California. At
 <a target="_blank" href="https://oag.ca.gov/research">https://oag.ca.gov/research</a> (2024).</li>
<li>NIDA drug supply program. , National Institute on Drug Abuse. At
 <a target="_blank" href="https://nida.nih.gov/research/research-data-measures-resources/nida-drug-supply-program">https://nida.nih.gov/research/research-data-measures-resources/nida-drug-supply-program</a> (2024).</li>
<li>Lee, H. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Frequent+low-impact+exposure+to+THC+during+adolescence+causes+persistent+sexually+dimorphic+alterations+in+the+response+to+viral+infection+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Pharmacol+Res%22%5BJournal%5D)">Frequent low-impact exposure to THC during adolescence causes persistent sexually dimorphic alterations in the response to viral infection in mice.</a> Pharmacol Res. 199, 107049(2024).</li>
<li>Mabou Tagne, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Persistent+exposure+to+delta%289%29-tetrahydrocannabinol+during+adolescence+does+not+affect+nociceptive+responding+in+adult+mice%5BTitle%5D)+AND+%22J+Pharmacol+Exp+Ther%22%5BJournal%5D)">Persistent exposure to delta(9)-tetrahydrocannabinol during adolescence does not affect nociceptive responding in adult mice.</a> J Pharmacol Exp Ther. 378 (3), 215-221 (2021).</li>
<li>Martin, B. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((molecular+modeling+evaluations+of+cannabinoid+analogs%5BTitle%5D)+AND+%22Pharmacol+Biochem+Behav%22%5BJournal%5D)">molecular modeling evaluations of cannabinoid analogs.</a> Pharmacol Biochem Behav. 40 (3), 471-478 (1991).</li>
<li>Fride, E., Mechoulam, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Pharmacological+activity+of+the+cannabinoid+receptor+agonist%2C+anandamide%2C+a+brain+constituent%5BTitle%5D)+AND+%22Eur+J+Pharmacol%22%5BJournal%5D)">Pharmacological activity of the cannabinoid receptor agonist, anandamide, a brain constituent.</a> Eur J Pharmacol. 231 (2), 313-314 (1993).</li>
<li>Pertwee, R. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+central+neuropharmacology+of+psychotropic+cannabinoids%5BTitle%5D)+AND+%22Pharmacol+Ther%22%5BJournal%5D)">The central neuropharmacology of psychotropic cannabinoids.</a> Pharmacol Ther. 36 (2-3), 189-261 (1988).</li>
<li>Torrens, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Comparative+pharmacokinetics+of+delta%289%29-tetrahydrocannabinol+in+adolescent+and+adult+male+mice%5BTitle%5D)+AND+%22J+Pharmacol+Exp+Ther%22%5BJournal%5D)">Comparative pharmacokinetics of delta(9)-tetrahydrocannabinol in adolescent and adult male mice.</a> J Pharmacol Exp Ther. 374 (1), 151-160 (2020).</li>
<li>Rubino, T., Parolaro, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Long+lasting+consequences+of+cannabis+exposure+in+adolescence%5BTitle%5D)+AND+%22Mol+Cell+Endocrinol%22%5BJournal%5D)">Long lasting consequences of cannabis exposure in adolescence.</a> Mol Cell Endocrinol. 286 (1-2 Suppl 1), S108-S113 (2008).</li>
<li>Schneider, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Puberty+as+a+highly+vulnerable+developmental+period+for+the+consequences+of+cannabis+exposure%5BTitle%5D)+AND+%22Addict+Biol%22%5BJournal%5D)">Puberty as a highly vulnerable developmental period for the consequences of cannabis exposure.</a> Addict Biol. 13 (2), 253-263 (2008).</li>
<li>Chadwick, B., Miller, M. L., Hurd, Y. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cannabis+use+during+adolescent+development%3A+Susceptibility+to+psychiatric+illness%5BTitle%5D)+AND+%22Front+Psychiatry%22%5BJournal%5D)">Cannabis use during adolescent development: Susceptibility to psychiatric illness.</a> Front Psychiatry. 4, 129(2013).</li>
<li>Renard, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Long-term+consequences+of+adolescent+cannabinoid+exposure+in+adult+psychopathology%5BTitle%5D)+AND+%22Front+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Long-term consequences of adolescent cannabinoid exposure in adult psychopathology.</a> Front Neurosci. 8, 361(2014).</li>
<li>Albaugh, M. D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Association+of+cannabis+use+during+adolescence+with+neurodevelopment%5BTitle%5D)+AND+%22JAMA+Psychiatry%22%5BJournal%5D)">Association of cannabis use during adolescence with neurodevelopment.</a> JAMA Psychiatry. 78 (9), 1-11 (2021).</li>
<li>Schweinsburg, A. D., Brown, S. A., Tapert, S. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+influence+of+marijuana+use+on+neurocognitive+functioning+in+adolescents%5BTitle%5D)+AND+%22Curr+Drug+Abuse+Rev%22%5BJournal%5D)">The influence of marijuana use on neurocognitive functioning in adolescents.</a> Curr Drug Abuse Rev. 1 (1), 99-111 (2008).</li>
<li>Rubino, T., Parolaro, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+impact+of+exposure+to+cannabinoids+in+adolescence%3A+Insights+from+animal+models%5BTitle%5D)+AND+%22Biol+Psychiatry%22%5BJournal%5D)">The impact of exposure to cannabinoids in adolescence: Insights from animal models.</a> Biol Psychiatry. 79 (7), 578-585 (2016).</li>
<li>Lee, H. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Frequent+low-dose+delta%289%29-tetrahydrocannabinol+in+adolescence+disrupts+microglia+homeostasis+and+disables+responses+to+microbial+infection+and+social+stress+in+young+adulthood%5BTitle%5D)+AND+%22Biol+Psychiatry%22%5BJournal%5D)">Frequent low-dose delta(9)-tetrahydrocannabinol in adolescence disrupts microglia homeostasis and disables responses to microbial infection and social stress in young adulthood.</a> Biol Psychiatry. 92 (11), 845-860 (2022).</li>
<li>Lim, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Adolescent+exposure+to+low-dose+delta9-tetrahydrocannabinol+depletes+the+ovarian+reserve+in+female+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Toxicol+Sci%22%5BJournal%5D)">Adolescent exposure to low-dose delta9-tetrahydrocannabinol depletes the ovarian reserve in female mice.</a> Toxicol Sci. 193 (1), 31-47 (2023).</li>
<li>Torrens, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Comparative+pharmacokinetics+of+delta9-tetrahydrocannabinol+in+adolescent+and+adult+female+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Cannabis+Cannabinoid+Res%22%5BJournal%5D)">Comparative pharmacokinetics of delta9-tetrahydrocannabinol in adolescent and adult female mice.</a> Cannabis Cannabinoid Res. 9 (6), 1537-1542 (2024).</li>
<li>Fride, E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Behavioral+methods+in+cannabinoid+research%5BTitle%5D)+AND+%22Methods+Mol+Med%22%5BJournal%5D)">Behavioral methods in cannabinoid research.</a> Methods Mol Med. 123, 269-290 (2006).</li>
<li>Metna-Laurent, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cannabinoid-induced+tetrad+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Curr+Protoc+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Cannabinoid-induced tetrad in mice.</a> Curr Protoc Neurosci. 80, 9.59.1-9.59.10 (2017).</li>
<li>Monory, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Genetic+dissection+of+behavioural+and+autonomic+effects+of+delta%289%29-tetrahydrocannabinol+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+Biol%22%5BJournal%5D)">Genetic dissection of behavioural and autonomic effects of delta(9)-tetrahydrocannabinol in mice.</a> PLoS Biol. 5 (9), e269(2007).</li>
</ol>

Autorzy nie informują o żadnych biomedycznych interesach finansowych ani potencjalnych konfliktach interesów.

Ten artykuł zawiera przegląd procedur uzyskiwania i przechowywania THC zgodnie z obowiązującymi przepisami amerykańskimi oraz przedstawia protokół przygotowania THC do wstrzyknięcia dootrzewnowego i podawania go młodym (PND 30-35) i młodym dorosłym myszom (PND 70-75). Bardzo ważne jest, aby pozyskiwać THC z legalnego źródła i przestrzegać wszystkich obowiązujących przepisów. W Stanach Zjednoczonych naukowcy muszą spełniać zarówno federalne, jak i stanowe wymogi regulacyjne, nawet w stanach, w których marihuana jest legalna zarówno do użytku medycznego, jak i niemedycznego. Korzystanie z certyfikowanego źródła zapewnia dostęp do THC klasy badawczej, które jest produkowane pod ścisłą kontrolą, gwarantując stałą moc i czystość. W przeciwieństwie do tego, korzystanie z nieuregulowanego lub nieautoryzowanego źródła zagraża integralności naukowej, wprowadza ryzyko przekierowania i naraża badaczy na konsekwencje prawne.
Zbadaliśmy trzy standardowe reakcje farmakologiczne na THC - katalepsję, zmniejszenie lokomocji i analgezję. Odtworzyliśmy obszerne dane literaturowe (patrz na przykład piśmiennictwo 27,28,29) pokazujące, że THC wpływa na te reakcje w sposób zależny od dawki. Testy te są wykorzystywane w badaniach przedklinicznych do oceny właściwości farmakologicznych agonistów receptorów kannabinoidowych, chociaż ich znaczenie dla doświadczeń u ludzi może się różnić. Katalepsja odnosi się do stanu, w którym podmiot doświadcza zmniejszonej zdolności do poruszania się lub angażowania się w normalne funkcje motoryczne. Objawia się to fizycznym unieruchomieniem lub sztywnością, a podmiot przyjmuje nietypowe pozycje. Zmniejszona lokomocja (lub hipolokomocja) odnosi się do spadku ogólnego poziomu poziomej aktywności motorycznej, co objawia się spowolnieniem lub rzadszym ruchem. Może to być spowodowane uspokojeniem, upośledzeniem motorycznym lub po prostu brakiem motywacji do ruchu. W badaniach na zwierzętach często obserwuje się to jako zmniejszenie zachowań eksploracyjnych lub ogólnego poziomu aktywności w nowym środowisku. Trzeci test, antynocycepcja, odnosi się do zdolności THC do zwiększania opóźnienia wycofania ogona w teście zanurzenia w ogonie. W modelach zwierzęcych, gdzie ocena subiektywnego składnika analgezji wymaga specjalistycznych testów, antynocycepcja zanurzeniowa zapewnia użyteczny, choć ograniczony, pogląd na to, jak leki wpływają na funkcję nocyceptywną.
Przedstawione wyniki pokazują, że THC w zależności od dawki wywołuje katalepsję niezależnie od płci i wieku, w szczególności przy dawkach 5 mg/kg i 10 mg/kg. Efekt specyficzny dla wieku i płci zaobserwowano u dorosłych samic myszy, które wykazywały znacznie stępioną produkcję katalepsji w porównaniu z samcami lub dorastającymi samicami. Hipolokocja wywołana THC w nowym środowisku była silniejsza u dorastających myszy w porównaniu z dorosłymi myszami, niezależnie od płci. Ta związana z wiekiem różnica była możliwa do odróżnienia od selektywnych efektów hipokomotorycznych THC u dorosłych w ich domowej klatce, znajomym środowisku30. Jeśli chodzi o ostre działanie antynocyceptywne THC, statystycznie istotne efekty stwierdzono zarówno przy dawkach 5 mg/kg, jak i 10 mg/kg u dorastających samców myszy, ale u dorosłych samców myszy tylko dawka 10 mg/kg była skuteczna. Spośród trzech badanych tutaj punktów czasowych, antynocyceptywne działanie THC było najwyższe po 60 minutach od THC i zanikało później. Dorastający mężczyźni byli najbardziej wrażliwi na antynocyceptywne działanie THC spośród czterech grup wiekowo-płciowych, a istotną różnicę między płciami zaobserwowano w grupach dorastających myszy po 60 minutach od wstrzyknięcia 10 mg/kg THC. Po 300 minutach podawania THC stwierdzono wyraźny efekt wieku, w którym zaobserwowano znaczące działanie antynocyceptywne u młodzieży, ale nie u dorosłych myszy, niezależnie od płci. Ogólnie rzecz biorąc, dorastające myszy wykazywały zwiększoną wrażliwość na THC w porównaniu z dorosłymi, szczególnie w pomiarach lokomocji i nocycepcji. Podsumowując, wyniki te wskazują, że okres dojrzewania jest wrażliwym okresem dla ostrych skutków farmakologicznych THC, chociaż może tobyć zależne od testu. Wyniki wskazują również na wpływ zarówno wieku, jak i płci na działanie THC, co sugeruje, że dorosłe kobiety są najmniej wrażliwe na THC.
Narażenie na THC w okresie dojrzewania – zwłaszcza gdy jest częste i w dużych dawkach – może zakłócić funkcjonowanie układu endokannabinoidowego w całym ciele, wtym w mózgu. Zakłócenie to może prowadzić do długotrwałych skutków zarówno dla zdrowia psychicznego, jak i fizycznego 32,33,34. Badania epidemiologiczne w ciągu ostatnich trzech dekad konsekwentnie wykazywały powiązania między używaniem konopi indyjskich przez młodzież a długotrwałymi upośledzeniami funkcji poznawczych, nastroju i funkcjonowania psychospołecznego, przy czym skutki te mogą potencjalnie rozciągać się na dorosłość, nawet po zaprzestaniu używania 32,33,34,35,36. Ponadto zgłaszano długoterminowe zmiany w masie ciała, metabolizmie i funkcji immunologicznej. Chociaż powiązania te są dobrze udokumentowane, bardzo ważne jest ustalenie związku przyczynowo-skutkowego między używaniem konopi indyjskich a jego potencjalnym wpływem na zdrowie. Różne metody, w tym niezgodna analiza bliźniąt, randomizacja mendlowska i interwencje quasi-eksperymentalne, mogą być stosowane do oceny związku przyczynowo-skutkowego w populacjach ludzkich. Jednak eksperymenty na zwierzętach laboratoryjnych również odgrywają istotną rolę w wyjaśnianiu związku przyczynowo-skutkowego37. Wyniki naszego laboratorium, finansowanego przez National Institute on Drug Abuse, wykorzystujące model gryzoni o umiarkowanej, ale częstej ekspozycji na THC w okresie dojrzewania, potwierdzają hipotezę, że okres dojrzewania jest okresem podatnym na ekspozycję na THC 17,18,25,38,39,40. Nawet umiarkowane dawki leku w tym krytycznym oknie rozwojowym mogą mieć trwały wpływ na różne składniki dorosłego układu endokannabinoidowego. Efekty te są związane ze zmianami neurobehawioralnymi, a także upośledzeniem odpowiedzi immunologicznej i zdolności do radzenia sobie ze stresem psychospołecznym. Nasze wcześniejsze badania ujawniły również nieoczekiwane zmiany w funkcjonowaniu tkanki tłuszczowej, dostarczając potencjalnego molekularnego wyjaśnienia długoterminowych zmian metabolicznych obserwowanych u regularnych użytkowników konopiindyjskich18. Poprzez niewłaściwą aktywację receptorów CB1 w mózgu podczas ważnych okresów neurorozwojowych, takich jak okres dojrzewania, THC może zakłócić równowagę wymaganą do dojrzewania mózgu, prowadząc do zmian strukturalnych i funkcjonalnych, które mogą utrzymywać się w wieku dorosłym.
U ludzi palenie i waporyzacja są najczęstszymi metodami konsumpcji konopi indyjskich we wszystkich grupach wiekowych. Nasz obecny protokół określa podawanie THC drogą dootrzewnową (i.p.), która jest praktyczna, powtarzalna i wywołuje reakcje farmakokinetyczne i farmakodynamiczne u gryzoni, które pod kilkoma względami przypominają te obserwowane u ludzi zażywających konopie indyjskie. Na przykład wykazano, że dawka IP wynosząca 5 mg/kg THC u dorastających i dorosłych samców myszy wytwarza szczytowe stężenia we krwi porównywalne z tymi, które zgłaszano u dorosłych ludzi. Dostarczanie THC w aerozolu (potocznie nazywanego "parą") jest badane jako uzupełnienie iniekcji IP. Podejście to opiera się na założeniu, że bierne wdychanie THC w aerozolu, podobnie jak palenie lub waporyzacja, prowadzi do wchłaniania płucnego, co skutkuje szybszym początkiem efektów, zmniejszonym metabolizmem wątroby pierwszego przejścia i potencjalnie wyraźnymi wynikami psychoaktywnymi w porównaniu z podawaniem pozajelitowym. Warto zauważyć, że poprzednie badania wykazały, że szczury samodzielnie podają ekstrakty z konopi indyjskich w aerozolu lub mieszaniny THC / kannabidiolu w instrumentalnych paradygmatach behawioralnych, podkreślając potencjał tej metody do badania wzmacniających właściwości THC.
Podsumowując, protokół ten opiera się na ustalonych metodach oceny zachowań tetrad wywołanych kannabinoidami41,42, które są zależne od aktywacji neuronalnych receptorów CB 143, oferując kilka kluczowych aktualizacji i udoskonaleń. Po pierwsze, opisujemy procedury, które są zgodne z obecnymi przepisami DEA i instytucjonalnymi dotyczącymi uzyskiwania, obsługi i podawania krytycznych kwestii związanych z THC dla każdego, kto nie ma praktycznego doświadczenia. Po drugie, stosujemy paradygmat tetrady do myszy dorastających (PND 30-35) i młodych dorosłych (PND 70-75), dwóch etapów rozwojowych, które są bardzo istotne dla wczesnego okresu życia i wschodzącej ekspozycji na konopie indyjskie u dorosłych, ale pozostają niedostatecznie reprezentowane w badaniach przedklinicznych. Wyniki tego badania podsumowują znane, zależne od dawki działanie THC na katalepsję, lokomocję i analgezję, ujawniając jednocześnie zwiększoną wrażliwość na THC u dorastających myszy, szczególnie w domenach nocyceptywnych i lokomotorycznych. Ten specyficzny dla wieku wgląd i dostosowanie regulacyjne sprawiają, że protokół ten jest szczególnie cenny dla nowicjuszy w badaniach nad kannabinoidami oraz dla badaczy badających wpływ kannabinoidów na rozwój.

Rozpowszechnienie używania konopi indyjskich w dorosłej populacji Stanów Zjednoczonych stale rosło w ciągu ostatnich dziesięcioleci i utrzymało się na wysokim poziomie w 2023 roku. Wśród dorosłych w wieku od 19 do 30 lat około 42% zgłosiło używanie konopi indyjskich w ciągu ostatniego roku, 29% w ciągu ostatniego miesiąca, a 10% zgłosiło codzienne lub quasi-codzienne używanie (20 lub więcej razy w ciągu ostatnich 30 dni)1. W przypadku osób dorosłych w wieku od 35 do 50 lat liczby te wynoszą odpowiednio 29%, 19% i 8%. Choć szacunki te nie różnią się statystycznie od tych uzyskanych w 2022 r., wskazują one na wzrosty na przestrzeni ostatnich 5 i 10 lat dla obu grup demograficznych1. Co ważne, obecne dowody sugerują, że około 9% osób używających konopi indyjskich rozwija tolerancję i uzależnienie od narkotyku – stan znany jako zaburzenie związane z używaniem konopi indyjskich (SUD)2 i potencjalny problem zdrowotny3.
Podobnie jak w przypadku innych środków psychoaktywnych, używanie konopi indyjskich zazwyczaj rozpoczyna się we wczesnych latach nastoletnich i stopniowo wzrasta w okresie dojrzewania. W 2023 r. 8%8-klasistów w Stanach Zjednoczonych, 18% 10-klasistów i 29% 12-klasistów zgłosiło, że zażyło narkotyk co najmniej raz4. Liczby te, choć w ciągu ostatnich kilku lat utrzymywały się na stosunkowo stabilnym poziomie, nawet w obliczu zmniejszonego postrzegania ryzyka 5,6 są nadal zbyt wysokie. Oprócz powszechnego zastosowania pozamedycznego, konopie indyjskie wykazały potencjał terapeutyczny w odniesieniu do wielu schorzeń 7,8. Syntetyczna forma jego odurzającego (psychotropowego) składnika, Δ 9-tetrahydrokannabinol (THC) (ryc. 1), jest stosowana od ponad 40 lat jako lek na receptę w leczeniu nudności i utraty apetytu u pacjentów z HIV i rakiem poddawanych chemioterapii 9,10. Zarówno THC, jak i jego analog kannabidiol (CBD) (ryc. 1), który nie jest psychotropowy, są zaangażowane w leczenie bólu, stanów zapalnych i różnych zaburzeń neurologicznych11,12. W związku z tym szybkie rozprzestrzenianie się produktów leczniczych pochodzących z konopi indyjskich – np. w epilepsji dziecięcej i autyzmie – również wprowadza nowe grupy młodych ludzi do tego narkotyku. Zmiany te są szczególnie niepokojące w kontekście społecznym, w którym zmiany legislacyjne i coraz szersza akceptacja napędzają interesy finansowe, które mogą być nadrzędne wobec obaw o zdrowie i bezpieczeństwo publiczne13.
Konopie indyjskie zawierające THC ("marihuana") są spożywane w różnych formach, w tym palenia, waporyzacji, artykułów spożywczych, nalewek i olejów. Po spożyciu, THC rozprowadza się po całym ciele i dostaje się do mózgu, gdzie wywołuje euforię, relaks, zmienioną percepcję zmysłową i zwiększony apetyt, chociaż może również powodować niepokój i paranoję u niektórych osób 14,15. THC oddziałuje z układem endokannabinoidowym (ECB) poprzez aktywację dwóch typów receptorów kannabinoidowych (CB) zlokalizowanych zarówno wewnątrz, jak i na zewnątrz mózgu15,16. W mózgu, gdzie receptory CB1 są najliczniejsze, ich aktywacja wpływa między innymi na nastrój, percepcję bólu, apetyt i funkcje poznawcze. THC aktywuje również receptory CB1 i CB2 w narządach obwodowych, wpływając na ogólnoustrojowy metabolizm energetyczny - w tym pobieranie, wchłanianie i magazynowanie składników odżywczych - a także inicjację bólu, stan zapalny i odporność17,18.
THC wywiera zarówno ostre, jak i trwałe skutki, a dodatkowe badania przedkliniczne i kliniczne nad długoterminowymi konsekwencjami używania konopi indyjskich są nadal potrzebne. Szczególny nacisk należy położyć na potencjalne działania niepożądane związane z wysokimi dawkami THC, biorąc pod uwagę, że średnie stężenie THC w konopiach indyjskich sprzedawanych w Stanach Zjednoczonych wzrosło w ciągu ostatnich dziesięcioleci z 8,9% w 2008 r. do 17,1% w 2017 r.19 , a w ostatnich latach było jeszcze wyższe. "Produkty z konopi indyjskich o dużej mocy" (produkty zawierające wysokie stężenie THC) są powszechne na wielu legalnych rynkach w całych Stanach Zjednoczonych, gdzie średnia zawartość THC w kwiatach konopi wynosi 20-35%, a niektóre produkty ekstrakcyjne osiągają nawet 90% THC. Przy tak wysokich dawkach, THC może mieć jakościowo inne efekty niż te wytwarzane przez tradycyjną "marihuanę o niskiej mocy" używaną w latach 1970. i 1980., która zawierała 6% THC lub mniej20. W związku z tym zrozumienie farmakologii produktów z konopi indyjskich o dużej mocy ma kluczowe znaczenie dla informowania o strategiach prewencyjnych i kierowania polityką regulacyjną i fiskalną. Dodatkowo, zrozumienie, w jaki sposób czynniki takie jak wiek, genetyka i istniejące wcześniej schorzenia wpływają na indywidualne reakcje na THC, może pomóc w dostosowaniu profilaktyki i leczenia do określonych populacji. W szczególności należy dokładniej zbadać konsekwencje zażywania konopi indyjskich przez nastolatków oraz kobiety w ciąży lub karmiące piersią, ponieważ narażenie na kannabinoidy w okresie prenatalnym/okołoporodowym i młodzieńczym, w których system EBC odgrywa kluczową rolę neurorozwojową, może prowadzić do trwałych negatywnych konsekwencji21. Potrzebne są również dalsze badania, aby zrozumieć, w jaki sposób THC wchodzi w interakcje z innymi lekami lub substancjami. Kompleksowe dane na temat bezpieczeństwa i skuteczności THC mogą stanowić podstawę do podejmowania decyzji regulacyjnych i polityki zdrowia publicznego, zapewniając bezpieczne stosowanie zarówno w kontekście medycznym, jak i niemedycznym.
W tym miejscu przedstawiamy standardowe procedury uzyskiwania, przechowywania i podawania THC w warunkach laboratoryjnych zgodnie z obowiązującym ustawodawstwem Stanów Zjednoczonych (Ustawa o substancjach kontrolowanych z 1971 roku). Koncentrując się na trzech dawkach THC szeroko stosowanych w literaturze naukowej (1, 5 i 10 mg/kg)22 oraz dootrzewnowej (i.p.) drodze podawania, zilustrowano trzy klasyczne efekty THC: indukcję katalepsji, hamowanie aktywności lokomotorycznej i antynocycepcję. Protokół ten może być również stosowany po wielokrotnych wstrzyknięciach THC w celu zbadania konsekwencji przewlekłego stosowania THC, co prowadzi do tolerancji i szeregu konsekwencji dla zdrowia psychicznego, które zwykle nie są obserwowane przy ostrym podawaniu u ludzi.

<table><tbody><tr><td>1 ml strzykawki TB</td><td>BD</td><td>309659</td><td>200/skrzynka; Sterylne, jednorazowego użytku.</td></tr><tr><td>8 ml szklane fiolki</td><td>Fisher Naukowy&nbsp;</td><td>W224584</td><td>144/Case, służy do przygotowania roztworu do wstrzykiwań THC.</td></tr><tr><td>Oprogramowanie ANY-maze</td><td>ANY-labirynt</td><td>6000</td><td>Służy do nagrywania filmów z testów behawioralnych i ilościowego określania elementów testów do analizy danych.</td></tr><tr><td>Myszy C57BL/6J</td><td>Laboratoria Jacksona</td><td>#000664</td><td>Myszy typu dzikiego używane do wszystkich eksperymentów; Może określić dokładny wiek i pożądaną płeć.</td></tr><tr><td>Skala kompasu CX</td><td>Ohaus powiedział:</td><td>Zobacz materiał CR221</td><td>Służy do ważenia myszy w celu określenia ilości THC do wstrzyknięcia; Maksymalnie 220 g, d = 0,1 g.</td></tr><tr><td>Płyta grzejna Corning Pyroceram</td><td>Fisher Naukowy</td><td>11500151</td><td>Służy do podgrzewania łaźni wodnej do testu Tail Flick.</td></tr><tr><td>Delta-9-tetrahydrokannabinol</td><td>Chemikalia na Kajmanach&nbsp;</td><td>12068</td><td>Przechowywany w bezpiecznie zamkniętym sejfie na leki z Wykazu 1 w -30 &ordm; C zamrażarka.</td></tr><tr><td>Rękawice nitrylowe Fisherbrand</td><td>Fisher Naukowy</td><td>19-181-610</td><td>100 w opakowaniu; Jednorazowe rękawice bezlateksowe używane do stosowania odpowiednich środków ochrony osobistej.</td></tr><tr><td>GraphPad Pryzmat v10.4</td><td>Podkładka graficzna</td><td>N/a</td><td>Oprogramowanie do analizy statystycznej służące do analizy danych eksperymentalnych i przeprowadzania testów statystycznych.</td></tr><tr><td>Zlewka o dużej wytrzymałości</td><td>Fisher Naukowy</td><td>Zobacz materiał S81280</td><td>Służy do przechowywania gorącej wody do testu Tail Flick.</td></tr><tr><td>Azot gazowy o wysokiej czystości</td><td>Gaz powietrzny</td><td>UN1066 powiedział:</td><td>&nbsp; Służy do odparowywania etanolu z roztworu podstawowego THC.</td></tr><tr><td>Kamera internetowa Logitech C920</td><td>Logitech</td><td>960-001055</td><td>Służy do rejestrowania testów behawioralnych zwierząt; Carl Zeiss 1080p/30 kl./s HD USB.</td></tr><tr><td>Otwórz pole</td><td>Stoelting Co</td><td>60101</td><td>Pudełko z nieprzezroczystymi bokami do przeprowadzania badań w terenie; Boki łatwo zdejmowane do czyszczenia.</td></tr><tr><td>Klocki treningowe dla zwierząt</td><td>Zadowolony</td><td>B088G1N2H8</td><td>85 w opakowaniu; 22 w. i ostry; 22 w.; służy do owijania i trzymania myszy do testu Tail Flick.</td></tr><tr><td>Igły PrecisionGlide</td><td>BD</td><td>305109</td><td>100 w opakowaniu zbiorczym; 0,4 mm i ostry; 13 mm; Sterylne, jednorazowego użytku.</td></tr><tr><td>Słony</td><td>Fisher Scientific (Cytiva)</td><td>Z1377</td><td>Butelki 1 l, USP Sterile Grade.</td></tr><tr><td>SCOE 1x</td><td>BioFOG (Szczepionka BioFOG)</td><td>R-SK</td><td>Roztwór czyszczący stosowany do czyszczenia materiałów do badań behawioralnych.</td></tr><tr><td>Tween-80 powiedział:</td><td>Sigma Aldrich</td><td>P8074-500ML</td><td>BioXtra, lepka ciecz; CAS # 9005-65-6.</td></tr><tr><td>Ultradźwiękowa kąpiel wodna</td><td>Fisher Scientific (Branson)</td><td>CPX2800</td><td>Kontrola temperatury; Cyfrowa myjka ultradźwiękowa.</td></tr><tr><td>Mieszalnik wirowy</td><td>Fisher Naukowy</td><td>2215365</td><td>Służy do mieszania zawartości roztworu THC do wstrzykiwań podczas jego przygotowywania.</td></tr></tbody></table>

podawanie Δ 9-tetrahydrokannabinolu (thc) u młodych i dorosłych myszy

Administration of &#916;9-Tetrahydrocannabinol (THC) in Adolescent and Adult Mice

Δ 9-tetrahydrokannabinol (THC) jest odpowiedzialny za odurzające (psychotropowe) działanie konopi indyjskich i produktów pochodnych konopi dostępnych obecnie na legalnych i nielegalnych rynkach. Efekty psychotropowe THC są wytwarzane poprzez aktywację receptorów kannabinoidowych CB1 w mózgu, które normalnie są angażowane przez endogenne substancje kannabinoidowe (endokannabinoidowe). Poza mózgiem, THC przyczynia się do regulacji szerokiego zakresu procesów fizjologicznych poprzez aktywację receptorów CB1 i CB2. Funkcje fizjologiczne pełnione przez substancje endokannabinoidowe i receptory kannabinoidowe - znane jako układ endokannabinoidowy - zmieniają się znacznie w ciągu życia, przy czym okres dojrzewania jest okresem zwiększonej wrażliwości na wkład tego kompleksu sygnałowego. W artykule opisano protokół przygotowania THC do podawania pozajelitowego i oceny jego ostrych skutków farmakodynamicznych u myszy obojga płci na dwóch etapach rozwoju: w okresie dojrzewania i wczesnej dorosłości. Koncentrując się na trzech dawkach, które są szeroko stosowane w literaturze (1, 5 i 10 mg/kg) oraz na drodze dootrzewnowej, zilustrowano dobrze znane efekty THC - indukcji katalepsji, hamowania aktywności lokomotorycznej i supresji nocycepcji. Ponadto, biorąc pod uwagę status THC jako substancji kontrolowanej w Stanach Zjednoczonych, pokrótce przedstawiono procedury jego pozyskiwania i przechowywania zgodnie z obowiązującymi przepisami.

Δ 9-tetrahydrokannabinol (THC) jest odurzającym składnikiem konopi indyjskich i substancją kontrolowaną w Stanach Zjednoczonych. W artykule przedstawiono standardowe procedury pozyskiwania, przechowywania i podawania THC myszom zgodne z obowiązującymi przepisami prawnymi oraz pokrótce przedstawiono metodę oceny podstawowych efektów farmakodynamicznych THC u gryzoni.

Podawanie Δ 9-tetrahydrokannabinolu (THC) u młodych i dorosłych myszy

&#916;9-tetrahydrocannabinol (THC) is responsible for the intoxicating (psychotropic) effects of cannabis and cannabis-derived products currently ...

Badaliśmy własną marihuanę w organizmie, tak zwany układ endokannabinoidowy, a jednym z naszych głównych celów jest zrozumienie, w jaki sposób THC, odurzający składnik konopi indyjskich, wchodzi w interakcje z tym układem. Jednym z głównych wyzwań w pracy nad konopiami indyjskimi jest zaprojektowanie eksperymentów na zwierzętach, które są istotne dla kondycji ludzkiej. Ważne są takie czynniki, jak dawka i droga podania.Na myszach odkryliśmy, że ekspozycja na THC w okresie dojrzewania ma wyraźny wpływ na inne fizjologie, nawet długo po zaprzestaniu ekspozycji. Na przykład zmienia sposób, w jaki mózg reaguje na stres społeczny. W artykule opisano protokół przygotowania THC do podawania pozajelitowego w celu oceny jego ostrego działania farmakodynamicznego u myszy obojga płci na dwóch etapach rozwoju, w okresie dojrzewania i wczesnej dorosłości.Zrozumienie, w jaki sposób wiek, genetyka i warunki zdrowotne wpływają na reakcje THC, może pomóc w ukierunkowanej profilaktyce i leczeniu. Warto zauważyć, że używanie konopi indyjskich przez młodzież wymaga dalszych badań, ponieważ narażenie podczas tej krytycznej fazy neurorozwojowej może powodować trwałe negatywne skutki. Na początek użyj pipety, aby pobrać odpowiednią objętość tetrahydrokannabinolu lub THC, w oparciu o dawkę w miligramach na kilogram i masę ciała myszy w gramach, trzymając pojemnik na lodzie.Ostrożnie dodaj roztwór na dno szklanej fiolki o pojemności 8 mililitrów. Po przeniesieniu fiolki do dygestorium chemicznego, delikatnie odparować rozpuszczalnik do sucha, używając delikatnego strumienia azotu gazowego. Zapisz ilość użytego THC w dzienniku użycia substancji kontrolowanej 1 znajdującym się w spoiwa substancji kontrolowanej.Po całkowitym wyschnięciu rozpuszczalnika dodać objętość Tween 80 wymaganą do osiągnięcia końcowego stężenia 5% w roztworze soli fizjologicznej. Ogrzać fiolkę w zlewce zawierającej gorącą wodę o temperaturze do 60 stopni Celsjusza lub niższej. Wiruj fiolkę, aby całkowicie rozpuścić THC i powtórz proces, jeśli to konieczne.Teraz stopniowo dodawaj sterylną sól fizjologiczną małymi porcjami. Wirować i podgrzewać fiolkę między każdym dodawaniem. Powtarzaj te kroki, aż wymagana objętość soli fizjologicznej zostanie dodana, aby uzyskać końcowy roztwór THC w 5%Tween 80 i 95% soli fizjologicznej, a roztwór zostanie całkowicie rozpuszczony.Poddaj sonikę w ultradźwiękowej łaźni wodnej ustawionej na około 100% mocy przy 40 kilohercach i 37 stopniach Celsjusza przez 5 minut. Upewnij się, że roztwór jest klarowny i wolny od nierozpuszczonego materiału. Następnie zważ mysz, aby obliczyć odpowiednią objętość roztworu THC do wstrzyknięcia na podstawie 10 mililitrów na kilogram na mysz.Przygotuj poziomy pręt o długości 7 centymetrów i wzniesiony 4 centymetry nad powierzchnię czystej ławki laboratoryjnej przy oświetleniu otoczenia o natężeniu 160 luksów. Umieść elektroniczny zegar w zasięgu ręki. Używając czystych rękawiczek lateksowych, wyjmij mysz z klatki laboratorium testowego.Podaj obliczoną dawkę THC lub nośnika i włóż go z powrotem do klatki. Po około 45 minutach od wstrzyknięcia delikatnie połóż przednie łapki myszy na poziomym drążku. Uruchom elektroniczny timer, aby zarejestrować czas trwania bezruchu.Zatrzymaj stoper, gdy mysz usunie jedną lub obie łapy lub gdy minie 10 sekund. Po powtórzeniu testu użyj średniej z dwóch czasów bezruchu mierzonych w sekundach jako wskaźnika katalepsji do końcowej analizy danych. Do testu w terenie otwartym użyj areny wyposażonej w sprzęt do śledzenia wideo, upewniając się, że jest czysta i wolna od wszelkich sygnałów zapachowych.Około 30 minut po wstrzyknięciu THC, delikatnie umieść mysz na środku areny, minimalizując stres związany z obsługą. Nagraj 10-minutową sesję za pomocą kamery i oprogramowania do śledzenia zachowań. Pod koniec testu umieść mysz z powrotem w klatce domowej i dokładnie wyczyść arenę na otwartym polu roztworem czyszczącym.Oblicz całkowitą przebytą odległość, mierzoną w metrach, jako podstawowy parametr do ilościowego określenia aktywności lokomotorycznej. Do testu zanurzenia ogona przygotuj kąpiel wodną ustawioną na 54 stopnie Celsjusza przy oświetleniu otoczenia o natężeniu 160 luksów. Umieść elektroniczny zegar w pobliżu i jest gotowy do użycia.Delikatnie utrzymaj mysz w kieszeni na miękką chusteczkę wykonaną z podkładek treningowych dla zwierząt, pozostawiając ogon dostępny. Zanurz dystalną jedną trzecią ogona w łaźni wodnej i jednocześnie uruchom stoper. Zapisz opóźnienie do wycofania ogona, zdefiniowane przez odruchowy ruch ogona, z czasem odcięcia wynoszącym 10 sekund, aby zapobiec uszkodzeniu tkanek.Po powtórzeniu testu uśrednij dwa pomiary opóźnienia, zarejestrowane w sekundach, aby obliczyć podstawowy wynik oceny efektów antynocyceptywnych. Katalepsja zależna od dawki THC zarówno u dorastających, jak i dorosłych samców myszy z silniejszymi reakcjami przy 10 miligramach na kilogram. Samice myszy również wykazywały katalepsję na poziomie 10 miligramów na kilogram, ale dorosłe samice reagowały słabiej niż nastolatki.Dorastające kobiety wykazywały niższą katalepsję niż mężczyźni, co wskazuje na niewielką różnicę płci. U dorosłych mężczyźni wykazywali znacznie wyższą katalepsję niż kobiety przy 10 miligramach na kilogram. THC zmniejszyło aktywność lokomotoryczną u samców myszy, przy czym młodzież była bardziej wrażliwa niż dorośli.Samice myszy wykazywały zmniejszony ruch po wyższych dawkach, z ogólnie znaczącym wpływem zarówno na dawkę, jak i wiek. THC zwiększyło opóźnienie ruchu ogona u dorastających samców i samic w dawkach 5 i 10 miligramów na kilogram. U dorosłych działanie antynocyceptywne było ograniczone do najwyższej dawki po 60 minutach od wstrzyknięcia.Po 300 minutach tylko dorastające myszy nadal wykazywały działanie antynocyceptywne.

administration-9-tetrahydrocannabinol-thc-adolescent-adult

Research

JoVE Journal

Neuroscience

Neuronauka

Paradygmat dożylnej samopodaży (IVSA) jest uważany za złoty standard w badaniu właściwości wzmacniających substancji psychoaktywnych u gryzoni. Niniejszy artykuł opisuje procedury eksperymentalne i techniki chirurgiczne niezbędne do uzyskania wiarygodnych danych IVSA. W szczególności podkreślono znaczenie starannego implantowania i utrzymywania cewników.

Metody dożylnej samopodaży w modelu mysim

Ten protokół opisuje dwie różne manipulacje środowiskowe oraz równoległy protokół infuzji mózgu do badania wywołanych przez środowisko zmian w mózgu, leżących u podstaw adaptacyjnego zachowania i naprawy mózgu u dorosłych myszy.

Środowiskowe modulacje liczby neuronów dopaminowych śródmózgowia u dorosłych myszy

Ten protokół ma na celu umożliwienie badaczom przeprowadzania eksperymentów mających na celu przetestowanie tych aspektów uzależnienia za pomocą testów warunkowej preferencji miejsca i uwrażliwienia lokomotorycznego.

Ocena uczulenia behawioralnego wywołanego kokainą i uwarunkowanej preferencji miejsca u myszy

Sugeruje się, że przejściowy potencjał receptora waniloidowego typu 1 (TRPV1) w okolicy nadrdzeniowej odgrywa pewne role w funkcjonowaniu mózgu. Opisano tutaj protokół wstrzykiwania domózgowo-komorowego resyferatoksyny w celu odczulania TRPV1 nadrdzeniowego u myszy. Przedstawiono również procedury niektórych testów bólowych.

Leczenie śródmózgowo-komorowe resynitrotoksyną i testy bólu u myszy

Tutaj prezentujemy nieprzewidywalny protokół chronicznego łagodnego stresu u myszy. Protokół ten indukuje długoterminowy fenotyp podobny do depresji i umożliwia ocenę skuteczności przypuszczalnych leków przeciwdepresyjnych w odwracaniu behawioralnych i neuromolekularnych deficytów depresyjnych.

Nieprzewidywalny protokół przewlekłego łagodnego stresu do wywoływania anhedonii u myszy

Opracowaliśmy model przyspieszonego stresu związanego z porażką społeczną dla dorastających myszy C57BL/6, który działa zarówno u samców, jak i samic i umożliwia ekspozycję podczas dyskretnych okresów dojrzewania. Ekspozycja na ten model indukuje unikanie społeczne, ale tylko w podgrupie pokonanych samców i samic myszy.

Model stresu porażki społecznej dla dorastających samców i samic myszy C57BL/6

Tutaj opisujemy podawanie leków za pomocą mikropipet (MDA) jako alternatywną metodę do doustnego podawania leków, która zachęca zwierzę badawcze do łatwego przyjmowania leków przy minimalnym stresie i dyskomforcie.

Stosowanie podawania leków pod kontrolą mikropipet jako metody alternatywnej dla doustnego podawania przez zgłębnik w modelach gryzoni

Wkłady do waporyzacji destylatów z konopi indyjskich to urządzenia zasilane bateryjnie, które aerozolują ekstrakty zawierające wysokie stężenia kannabinoidów. Brak ustalonych modeli przedklinicznych dla tych produktów stwarza wyzwania w badaniu ich skutków fizjologicznych. Aby wypełnić tę lukę, opracowano standaryzowany przedkliniczny mysi model inhalacji dla waporyzowanych destylatów konopi.

Opracowanie przedklinicznego modelu inhalacji do testowania waporyzowanych destylatów z konopi indyjskich

Doustne podanie za pomocą gavage u gryzoni może wywoływać niepokój związany z unieruchamianiem. Badaliśmy podawanie ekstraktu konopnego wzbogaconym CBD w formie oromukozalnej/policzkowej, gdzie szczury były traktowane przez 15 dni ekstraktem w dawce 3 mg/kg/dzień. Leczenie podawano doustnie za pomocą mikropipety, przy użyciu techniki dotyku czułego do obsługi zwierząt.

Oromucosal jako alternatywna metoda podawania produktów konopnych u gryzoni

Ponieważ ograniczenia prawne się zmieniają, co skutkuje zwiększoną dostępnością produktów kannabinoidowych, niezwykle ważne jest opracowanie modeli do badania wpływu tych ekspozycji, szczególnie podczas ciąży. Opracowano przedkliniczny model umiarkowanej prenatalnej ekspozycji na kannabinoidy poprzez dobrowolne spożycie, co umożliwia bardziej dogłębne badania.

Przedkliniczny model prenatalnej ekspozycji na delta-9-tetrahydrokannabinol w celu oceny jego wpływu na wyniki neurorozwojowe

Poznaj protokół podawania THC myszom w różnych stadiach rozwoju. Metoda obejmuje testy behawioralne oceniające wpływ kannabinoidów na aktywność lokomotoryczną i reakcję na ból.

Podawanie Δ 9-tetrahydrokannabinolu (THC) u młodych i dorosłych myszy

Przeglądaj więcej filmów