Prosty i skuteczny zabieg na hemostazę w tętnicach myszy
28 listopada 2025
Celem tego badania jest opracowanie skutecznej metody osiągania hemostazy w tętnicach myszy.
Badania te opracowują metodę uszczelniania nakłuć tętnic przy jednoczesnym zachowaniu przepływu krwi. Bada, czy owijanie tłuszczu zapobiega niedokrwieniu po nakłuciu tętnic. Kluczowym wyzwaniem eksperymentalnym w tym zabiegu jest osiągnięcie skutecznej hemostazy po nakłuciu tętnicy bez powodowania okluzji tętnic.
Na początek ustaw znieczuloną mysz na stole chirurgicznym. Po potwierdzeniu znieczulenia usuń owłosienie z okolic szyjnych i czaszkowych za pomocą depilatora. Dezynfekuj odsłoniętą skórę jodem povidonowym, a następnie 75% etanolu, aby usunąć wszelkie pozostałości.
Połóż mysz na termoforze ustawionej na 37 stopni Celsjusza i trzymaj ją tam przez cały czas trwania eksperymentalnych procedur. Przestaw mysz na poduszce grzewczej, leżącej na plecach. Po wykonaniu nacięcia w linii środkowej szyjki szyjnej wyciąć podskórny przeszczep tkanki tłuszczowej o wymiarach trzy na trzy na jeden milimetr do przyszłego użytku.
Wykonaj tępe rozwarstwienie gruczołu podżuchwy, mięśnia gnykowego mostka i mięśnia sterno-klesno-domostoidowego, aby odsłonić obie wspólne tętnice szyjne. Następnie ostrożnie uwolnić tętnicę szyjną wspólną, aby odsłonić tętnice wewnętrzne i zewnętrzne. Załóż zacisk naczyniowy jeden na dalszy koniec tętnicy szyjnej, a następnie zacisk naczyniowy numer dwa na bliższym końcu tętnicy.
Następnie przekłuj wspólną tętnicę szyjną pomiędzy dwoma klamrami za pomocą igły 23-gauge. Po usunięciu igły owiń wspólną tętnicę szyjną w miejscu nakłucia, używając przeciętej powierzchni lub nie-serozowej strony wcześniej pobranego tłuszczu. Umieść szew 4-0 pod tętnicą owiniętą tłuszczem.
Delikatnie przywiąż pojedynczy przerzut na powierzchni tłuszczu, aby wywierać nacisk i zapewnić bezpieczny kontakt między poduszką tłuszczową a ścianą naczynia. Następnie stopniowo regulować wiązanie, aby zrównoważyć ciśnienie i osiągnąć hemostazę. Unieś dalszą tętnicę szyjną za pomocą nawilżonego wacika.
Zwolnij zacisk naczyniowy jeden i powoli wyjmij wymaz, aby umożliwić stopniowy powrót krwi w kierunku miejsca nakłucia. Teraz sprawdź przepływ krwi w miejscu nakłucia. Jeśli zauważysz aktywne krwawienie, ponownie załóż zacisk naczyniowy jeden na dalszą tętnicę szyjną wspólną.
Po minucie powoli zwolnij zacisk naczyniowy numer jeden. Jeśli krwawienie się utrzymuje, przesuń poduszkę tłuszczową lub lekko zaciśnij więź, aby zwiększyć ciśnienie aż do pełnej hemostazy. Unieś bliższą tętnicę szyjną za pomocą nawilżonego wacika.
Następnie zwolnij drugi zacisk naczyniowy i powoli wyjmij wymaz, aby umożliwić kontrolowany przepływ krwi w kierunku miejsca nakłucia. Jeśli wystąpi krwawienie, ponownie załóż zacisk naczyniowy numer dwa na dalszą tętnicę szyjną wspólną. Teraz lekko dokręć pojedynczy ruch szwu, aby zwiększyć ciśnienie i odczekaj minutę.
Następnie unieś bliższą tętnicę szyjną wspólną i zwolnić zacisk naczyniowy numer dwa, powoli przesuwając wilgotny wymaz w stronę miejsca ukłucia. Dodaj kolejny rzut tym samym szwem, aby utworzyć podwójny węzeł na pierwszym rzucie, poprawiając utrwalanie tłuszczu i wspierając zrównoważoną hemostazę. Potwierdź, że wspólne tętnice szyjne po obu stronach poduszki tłuszczowej są wypełnione i utrzymują stałą średnicę naczynia, co wskazuje na pomyślną przywrócenie przepływu krwi.
Na koniec zszyj nacięcie szyjki macicy i nałóż środek antyseptyczny na miejsce rany. Przed- i pooperacyjne laserowe obrazowanie z kontrastem plamkowym oraz pomiary jednostek perfuzji zarówno u myszy fikcyjnych, jak i operowanych nie wykazały istotnych zmian, co potwierdza, że przepływ krwi w mózgu nie został osłabiony przez technikę hemostazy tętniczej. Histologiczne badania tkanki mózgowej za pomocą barwienia hematoksyliny i eozyny w 7, 14 i 28 dniach po operacji u operowanych myszy oraz u myszy fikcyjnych wykazały nienaruszoną strukturę tkanek w korze, hipokampie i wzgórzu bez zmian patologicznych.
Barwienie Nissl wykazało zorganizowane wyrównanie neuronów, prawidłową strukturę komórkową oraz zachowane ciała Nissl we wszystkich grupach i punktach czasowych, co wskazuje na brak uszkodzeń strukturalnych spowodowanych zamknięciem tętnic. Obecna metoda ma na celu uszczelnienie miejsca wkłucia po zabiegu, przy jednoczesnym zachowaniu prawidłowego przepływu krwi, co zapobiega niedokrwieniu pooperacyjnemu.
Wyświetl pełny transkrypt i uzyskaj dostęp do tysięcy filmów naukowych
Przegląd
Niniejsze badanie opracowuje metodę uszczelniania miejsc nakłuć tętniczych przy jednoczesnym zachowaniu przepływu krwi. Badano, czy owijanie tkanką tłuszczową zapobiega niedokrwieniu po nakłuciu tętnicy.
Kluczowe elementy badania
Dziedzina nauki
- Neuronauka
- Biologia naczyniowa
- Techniki chirurgiczne
Wprowadzenie
- Skuteczna hemostaza jest kluczowa po nakłuciu tętnicy.
- Zator tętniczy może prowadzić do poważnych powikłań.
- Opasanie tłuszczem może stanowić mechanizm ochronny.
- Modele mysie są powszechnie stosowane w badaniach chirurgicznych.
Cel badania
- Opracowanie skutecznej metody uzyskiwania hemostazy w tętnicach myszy.
- Ocena roli owijania tłuszczem w zapobieganiu niedokrwieniu.
- Rozwiązanie problemów związanych z utrzymaniem przepływu krwi podczas procedur.
Zastosowane metody
- Upozycjonowanie znieczulonych myszy na stole chirurgicznym.
- Usunięcie owłosienia z obszarów szyjnych i czaszkowych.
- Dezynfekcja skóry za pomocą powidonu jodowego i etanolu.
- Przygotowanie układu eksperymentalnego do punkcji i uszczelnienia tętnicy.
Główne wyniki
- Przedstawiono metodę uszczelniania miejsc nakłuć tętniczych.
- Zbadano skuteczność owijania tkanką tłuszczową.
- Oceniono zachowanie przepływu krwi po wykonaniu procedury.
- Zidentyfikowano trudności w osiągnięciu skutecznej hemostazy.
Wnioski
- Opracowana metoda rokuje zastosowania w chirurgii.
- Otulanie tłuszczem może być korzystne w zapobieganiu niedokrwieniu.
- Dalsze badania są niezbędne w celu optymalizacji technik.
Najczęściej Zadawane Pytania
Znaczenie dla przemysłu
Osiągnięcie niezawodnej hemostazy w tętniczych modelach małych zwierząt jest kluczowe dla translacyjnych badań naczyniowych oraz przedklinicznej walidacji interwencji chirurgicznych. Technika owijania tkanką tłuszczową umożliwia zachowanie drożności tętnicy i fizjologicznego przepływu krwi, ograniczając zakłócający wpływ urazów niedokrwiennych oraz powikłań wtórnych w modelach istotnych dla przebiegu chorób. Metoda ta zwiększa wiarygodność prognostyczną w badaniach naczyniowych i neurologicznych poprzez minimalizację artefaktów proceduralnych, które mogą naruszać integralność danych.
Strategiczne zastosowania w badaniach i rozwoju biofarmaceutycznym
Wczesne etapy odkrywania leków i walidacja celu
- Umożliwia mechanistyczną analizę uszkodzenia i naprawy naczyń bez wprowadzania czynników zakłócających związanych z niedokrwieniem.
- Wspiera walidację funkcjonalną celów zaangażowanych w hemostazę i perfuzję tkankową.
- Ułatwia biologiczną redukcję ryzyka poprzez utrzymanie naturalnego przepływu krwi podczas badań interwencyjnych.
Przesiewanie i opracowanie testu
- Zapewnia powtarzalny model do oceny środków hemostatycznych lub urządzeń naczyniowych in vivo.
- Standaryzuje wyniki pozabiegowe poprzez zapobieganie zmiennym uszkodzeniom niedokrwiennym.
- Umożliwia ilościową ocenę przywrócenia przepływu krwi z wykorzystaniem metod obrazowania.
Badania translacyjne i przedkliniczne
- Jest zgodne z punktami końcowymi istotnymi dla przebiegu choroby dzięki zachowaniu żywotności i architektury tkanki.
- Zapewnia ciągłość od etapu odkrywania po walidację przedkliniczną w modelach naczyniowych i neurologicznych.
- Zmniejsza ryzyko wystąpienia powikłań wtórnych, które mogą maskować efekty terapeutyczne.
Integracja potoku i przepływu pracy
Technika ta integruje się z przepływem pracy przedklinicznej w badaniach nad interwencjami naczyniowymi, łącząc wczesną fazę odkryć z fazą badań translacyjnych.
- Biologia odkrywcza: Umożliwia testowanie hipotez dotyczących mechanizmów naprawy naczyniowej bez wpływu błędu niedokrwiennego.
- Przesiew: Zapewnia zestandaryzowaną platformę do oceny skuteczności hemostatycznej i drożności naczyń.
- Analityka: Wspiera ilościowe pomiary przepływu krwi i odczyty histologiczne w celu rzetelnego porównania danych.
- Badania translacyjne: Zachowuje integralność tkanki dla badań nad biomarkerami i wynikami istotnymi dla chorób ludzkich.
- Zastosowanie w przedsiębiorstwie: Oferuje szeroko stosowalny model dla portfeli badań naczyniowych, neurologicznych i chirurgicznych.
Wpływ operacyjny i przedsiębiorczy
- Wartość naukowa: Zwiększa pewność prognostyczną poprzez minimalizację artefaktów proceduralnych i zachowanie punktów końcowych fizjologicznych.
- Wartość operacyjna: Poprawia powtarzalność i standaryzację w różnych badaniach i zespołach.
- Wartość strategiczna: Poprawia jakość decyzji go/no-go poprzez redukcję ryzyka biologicznego na późnych etapach.
- Wpływ na portfolio: Umożliwia priorytetyzację zasobów naczyniowych i neurologicznych z uwzględnieniem ryzyka.
Wskazówki dotyczące wdrożenia
- Wymaga doświadczenia chirurgicznego w zakresie procedur naczyniowych u małych zwierząt.
- Wymaga dostępu do technik obrazowania w celu ilościowej oceny przepływu krwi.
- Wymaga standaryzacji kroków proceduralnych i miar efektów końcowych pomiędzy zespołami.
- Możliwość adaptacji do różnych odcinków tętnic i modeli chorób poprzez optymalizację procedury.
- Potencjalne ograniczenia obejmują zmienność techniczną oraz potrzebę adaptacji do konkretnego modelu.
