Name: Opracowanie i walidacja metodologii ustalania modeli otyłych szczurów z typową stłuszczeniową trzustką (Wideo) | JoVE Journal
Uploaded: 2025-11-11T15:00:00.000+00:00
Duration: 3 min 7 s
Description: Poznaj metodologię tworzenia modeli otyłych szczurów ze stłuszczeniową trzustką oraz protokoły pobierania tkanek i immunohistochemii. Standaryzowane procedury zapewniają powtarzalność w badaniach nad otyłością.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

Prace te były wspierane przez Projekt Dziedziców i Instruktorów ds. Dziedziczenia Doświadczenia Akademickiego siódmej grupy uznanych krajowych ekspertów medycyny chińskiej; Projekt Funduszu Młodych Naukowców Narodowej Fundacji Nauk Przyrodniczych Chin [grant numer 82305376]; Projekt wspierający młode talenty naukowe i technologiczne w prowincji Jiangsu w 2024 roku [numer grantu JSTJ -2024-380].
Schematy blokowe zostały opracowane za pomocą FigDraw, Biorender.

Autorzy nie mają żadnych konfliktów interesów do ujawnienia.

Jako główny czynnik wywołujący zespół metaboliczny, niepowikłana otyłość stanowi początkowy przejaw systemowej dysregulacji metabolizmu lipidów. Bez interwencji może przekształcić się w T2DM i ciężkie powikłania cukrzycowe, co podkreśla konieczność wczesnej korekty metabolicznej30. Steatoza trzustki (stłuszczona trzustka), wczesny marker odkładania lipidów pozamacicznych w otyłości, redefiniuje trzustkę jako nieklasyczny narząd tłuszczowy, kwestionując konwencjonalny paradygmat osi tłuszczowo-tłus...

Prosta otyłość definiowana jest jako otyłość występująca niezależnie od innych współistniejących chorób, głównie przypisywana zaburzeniom energii wynikającym z niezdrowego stylu życia, takiego jak nieprawidłowe nawyki żywieniowe i niewystarczająca aktywność fizyczna1. Otyłość znacząco przyczynia się do wzrostu częstości chorób niezakaźnych wśród młodszych populacji, charakteryzujących się wysokim wskaźnikiem rozpowszechnienia, wczesnym początkiem i powikłaniami wielosystemowymi, co czyni ją kluczowym globalnym wyzwaniem zdrowia publicznego2. Stłuszczona trzustka to stan charakteryzujący się osadzeniem lipidów pozamacicznych w tym nietłuszczowym narządzie podczas zaburzeń metabolicznych. Tłuszczowa trzustka odzwierciedla kluczową współpracę między tkanką tłuszczową a patofizjologią trzustki. Nadmierne nagromadzenie tłuszczu trzustkowego wypiera prawidłowe tkanki acynarne i wysepkowe, powodując podwójne zaburzenia funkcjonalne zarówno w funkcjach egzokrynnych, jak i endokrynnych 3,4. Ten proces patologiczny zakłóca stosunki α/β-komórki, sprzyja dediwersencjacji β-komórek z utratą funkcji wydzielania insuliny5 oraz pośredniczy w bezpośrednim lipotoksycznym uszkodzeniu komórekβ-6. Równocześnie proliferacja α komórek i zaburzenia uwalniania insuliny pogłębiają niestabilność glikemiczną, przyspieszając postęp cukrzycy typu 2 (T2DM) i powiązanych powikłań7.
Badanie patogenezy stłuszczonej trzustki ujawnia nowe mechanizmy leżące u podstaw progresji choroby metabolicznej8. Podczas gdy wcześniejsze badania nad otyłością podkreślały steatozą wątroby, pojawiające się dowody wskazują, że deponowanie lipidów trzustki jest wcześniejszym zdarzeniem w zaburzeniach metabolicznych9. Ta zmiana paradygmatu umożliwia stworzenie modelu patologii dwunarządowej dla prostej otyłości, integrującego steatozą trzustki i wątroby10. Badanie ich wzajemnych rozmów może wyjaśnić kluczowe ścieżki chorobowe obejmujące zaburzenia metabolizmu lipidów, otyłość, insulinooporność i cukrzycę, dostarczając świeżych wglądów w mechanizmy choroby11. W procesie patologicznym trzustki początkowym objawem jest znaczne odkładanie tłuszczu trzustkowego, któremu towarzyszy znaczne rozszerzenie adipocytów trzustkowych. Występuje to głównie w brzusznej części głowy, szyi i ciała trzustki, a także w obszarach międzymiąższowych między komórkami acinarnymi a wysepkami. Równocześnie obecny jest przewlekły, niski stan zapalny trzustki, podczas gdy funkcje endokrynologiczne i egzokrynowe pozostają w dużej mierze nienaruszone na tym etapie12,13. Rozległa infiltracja tłuszczowa dodatkowo osłabia funkcję β komórek trzustki poprzez lipotoksyczność i hamuje aktywność insuliny. W tej fazie komórki acynarowe są stopniowo zastępowane przez adipocyty, co przyczynia się do rozwoju T2DM14,15. Chociaż cukrzyca nie jest niezależnym czynnikiem ryzyka raka trzustki, pacjenci z wywiadem ostrego zapalenia trzustki i cukrzycy wykazują znacząco podwyższone ryzyko rozwoju raka trzustki16.
Makroskopowe analizy anatomiczne określają nasilenie i wzorce infiltracji steatozy trzustki, natomiast oceny IHC na poziomie mikroskopowym charakteryzują morfologię komórek acynarycznych, położenie jądrowe, częstotliwość wakuolizacji oraz dynamikę populacji komórkowej17. To podejście multimodalne, obejmujące obserwację anatomiczną całkowitą aż po IHC o rozdzielczości komórkowej, umożliwia kompleksowe zaawansowanie patologii trzustki w przebiegu choroby. Niniejsze badanie opisuje ustandaryzowany protokół obejmujący tygodniową aklimatyzację, 14-tygodniową indukcję otyłości u dorosłych szczurów oraz zoptymalizowane przetwarzanie tkanek trzustkowych do analizy morfologicznej, ustanawiając solidne ramy do badania zaburzeń metabolicznych związanych ze steatozą.

<table><tbody><tr><td><silny>materiałowy</silny></td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>1,5 mL rurki mikrowirówki</td><td>Biosharp Bioengineering Co. Ltd</td><td>BS-15-M</td><td>WB</td></tr><tr><td>2ml probówka zamrażająca</td><td>LABSELECT</td><td>CV-002-200-EX</td><td>WB</td></tr><tr><td>2 ml rurka mielna</td><td>Wuhan Servicebio Technology Co., Ltd</td><td>HT-200-M</td><td>WB</td></tr><tr><td>3% H2O2</td><td>Booster Electronics Technology Co., Ltd.</td><td>20A23C</td><td>IHC</td></tr><tr><td>4% paraformaldehydu</td><td>Biosharp Bioengineering Co. Ltd</td><td>BL539A</td><td>Operacja przecięcia trzustki perfuzyjnej</td></tr><tr><td>Rozwiązanie 5% BSA</td><td>Biofroxx</td><td>4240GR100</td><td>IHC</td></tr><tr><td>50 mL rurki wirówkowej i nie do rozmów;</td><td>Biosharp Bioengineering Co. Ltd</td><td>BS-500-M</td><td>Zachowanie tkanek</td></tr><tr><td>AccuWest ECL Plus, Raegent A</td><td>Nanjing Gene Easy Biotechnology Co., Ltd.</td><td>Q201220</td><td>WB</td></tr><tr><td>AccuWest ECL Plus, Raegent B</td><td>Nanjing Gene Easy Biotechnology Co., Ltd.</td><td>Q201220</td><td>WB</td></tr><tr><td>Bezwodny etanol</td><td>Shanghai SCR-Biotech Co., Ltd.</td><td>10009257</td><td>IHC</td></tr><tr><td>Przeciwciało IgG przeciw królikom i HRP</td><td>Cell Signaling Technology.Inc,</td><td>7074</td><td>WB</td></tr><tr><td>Koktajl inhibitorów proteazy cOmplete</td><td>Hoffmann-La Roche Ltd&nbsp;</td><td>82256300</td><td>WB</td></tr><tr><td>Slip pokrywowy</td><td>CITOTEST LABWARE MANUFACTURING Co., LTD</td><td>10212450C</td><td>IHC</td></tr><tr><td>Chromogeniczny roztwór DAB</td><td>Booster Electronics Technology Co., Ltd.</td><td>AR2017-1</td><td>IHC</td></tr><tr><td>Kleszcze</td><td>Shenzhen RWD Life Science Co., Ltd.</td><td>SP0007-M</td><td>sekcja szczura SD</td></tr><tr><td>szklane slajdy&nbsp;</td><td>CITOTEST LABWARE MANUFACTURING Co., LTD</td><td>188105</td><td>IHC</td></tr><tr><td>Szklany słoik do bejcowania</td><td>Shanghai Beyotime Biotechnology Co., Ltd.</td><td>FG010</td><td>IHC</td></tr><tr><td>Hematoksylyna</td><td>Shanghai Beyotime Biotechnology Co., Ltd.</td><td>ST2067-20g</td><td>IHC</td></tr><tr><td>Dieta wysokotłuszczowa</td><td>Suzhou Shuangshi Laboratory Animal Feed Technology Co., Ltd.</td><td>Tabela1</td><td>Żywienie na zwierzętach doświadczalnych</td></tr><tr><td>Alkohol kwasu solnego</td><td>Shanghai Beyotime Biotechnology Co., Ltd.</td><td>C0163M</td><td>IHC</td></tr><tr><td>izofluran</td><td>Shenzhen RWD Life Science Co., Ltd.</td><td>R510-22-10</td><td>Znieczulone szczury</td></tr><tr><td>metanol&nbsp;</td><td>Biofroxx</td><td>67-56-1</td><td>WB</td></tr><tr><td>MOPS Biegnie z płynem buforowym 20 razy;</td><td>Nanjing Genscript Biotechnology Co., Ltd.&nbsp;</td><td>C36842504</td><td>WB</td></tr><tr><td>Neutralny balsam</td><td>Pekin Solarbio Science & Technology Co., Ltd.</td><td>G8590</td><td>IHC</td></tr><tr><td>Żywica neutralna</td><td>Shanghai SCR-Biotech Co., Ltd.</td><td>G8590</td><td>IHC</td></tr><tr><td>Rozwiązanie PBS</td><td>Jiangsu Keygen Biotech Corp., Ltd</td><td>KGL2206-500</td><td>Zachowanie tkanek</td></tr><tr><td>Pierce BCA Protein Astest Kit & nbsp;</td><td>Thermo Fisher Scientific Inc, Waltham, USA.</td><td>ZB382867</td><td></td></tr><tr><td>Pierce BCA Protein Astest Kit & nbsp;</td><td>hermo Fisher Scientific Inc, Waltham, USA</td><td>ZB382867</td><td>WB</td></tr><tr><td>Koktajl inhibitorów proteazy</td><td>Hoffmann-La Roche Ltd&nbsp;</td><td>82256300</td><td></td></tr><tr><td>Błona PVDF (Immobilon-P Transfer Membrane, Millipore, 0000380346) &nbsp;</td><td>Merck Millipore</td><td>0000380346</td><td>WB</td></tr><tr><td>Bufor lizy RIPA</td><td>Biosharp Bioengineering Co. Ltd</td><td>BL504A, 70096436</td><td>WB</td></tr><tr><td>SABC</td><td>Booster Electronics Technology Co., Ltd.</td><td>20C03A</td><td>IHC</td></tr><tr><td>sól fizjologiczna</td><td>SHANXI SHENGAO ANIMAL PHARMACEUTICAL CO., LTD.&nbsp;</td><td>270071460</td><td>Zachowanie tkanek</td></tr><tr><td>SD samce szczurów</td><td>Jiangsu GemPharmatech Co., Ltd.&nbsp;</td><td>D000017</td><td>szczury</td></tr><tr><td>Cytrynian sodu</td><td>Merck Life Science</td><td>S1804</td><td>IHC</td></tr><tr><td>Standardowy podnośnik konserwacyjny</td><td>Suzhou Shuangshi Laboratory Animal Feed Technology Co., Ltd.</td><td>Tabela 2</td><td>Żywienie na zwierzętach doświadczalnych</td></tr><tr><td>koncentrat balansowy eBlot L2 5& razy;</td><td>Nanjing Genscript Biotechnology Co., Ltd.&nbsp;</td><td>C97212410&nbsp;</td><td>WB</td></tr><tr><td>koncentrat transferowy eBlot L2 5&razy;</td><td>Nanjing Genscript Biotechnology Co., Ltd.&nbsp;</td><td>C97211504</td><td>WB</td></tr><tr><td>Tris Buffered solanka, proszek i nie do pracy;</td><td>Biosharp Bioengineering Co. Ltd</td><td>BL602A</td><td>WB</td></tr><tr><td>Tween 20</td><td>Biofroxx</td><td>EZ681A3EA8</td><td>WB</td></tr><tr><td>Urethan</td><td>Sigma-Aldrich Co., Ltd.</td><td>U2500-100G</td><td>Znieczulone szczury</td></tr><tr><td>Przeciwciało poliklonalne na winkulinie</td><td>Proteintech Group, Inc,</td><td>26520-1-AP</td><td>WB</td></tr><tr><td>ksylen</td><td>Korporacja Reagentowa Nankińska</td><td>C0430530223</td><td>IHC</td></tr><tr><td>Young PAGE, Bis-Tirs, 10& razy; 8</td><td>Nanjing Genscript Biotechnology Co., Ltd.&nbsp;</td><td>C33152505</td><td>WB</td></tr><tr><td><silny>Sprzęt</mocny></td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Aparat do znieczulenia</td><td>Shenzhen RWD Life Science Co., Ltd.</td><td>Model R5805</td><td>Znieczulone szczury</td></tr><tr><td>Ball Mill&nbsp;</td><td>Retsch Technology GmbH - Microtrac</td><td>MM400</td><td>WB</td></tr><tr><td>Wirówki</td><td>Eppendorf SE</td><td>5418R</td><td>WB</td></tr><tr><td>Komputerowa biologiczna suszarka tkanek</td><td>Zhejiang Jinhua Kedi Instrument Co.</td><td>SC2013-G-KIT</td><td>IHC</td></tr><tr><td>odczynniki z rozszerzoną chemiluminescencją (ECL&nbsp);</td><td>OBRAZOWANIE BIOGRAFICZNE VILBERA</td><td>00170961</td><td>WB</td></tr><tr><td>mikrotom&nbsp;</td><td>Thermo Fisher Scientific Inc, Waltham, USA.</td><td>HM325</td><td>IHC</td></tr><tr><td>Mikrofalówka</td><td>Shanghai Boxun Industry Co., Ltd.&nbsp;</td><td>97000</td><td>IHC</td></tr><tr><td>Mini-PROTEAN Tetra System</td><td>Bio-Rad Laboratories, Inc.</td><td>1658004</td><td>WB</td></tr><tr><td>piekarnik</td><td>Shanghai Jinghong Scientific Co., Ltd.</td><td>DNP-9082</td><td>IHC</td></tr><tr><td>Czysta woda</td><td>Syczuan UPT Ultra-Pure Technology Co., Ltd.</td><td>ULUP-TEZ</td><td>IHC</td></tr></tbody></table>

opracowanie i walidacja metodologii ustalania modeli otyłych szczurów z typową stłuszczeniową trzustką

Development and Validation of a Methodology for Establishing Obese Rat Models with Typical Fatty Pancreas

Otyłość stała się dominującą globalną epidemią zdrowia, a niemal połowa światowej populacji jest obecnie klasyfikowana jako osoby z nadwagą lub otyłością. Kluczową cechą patologiczną u osób otyłych jest odkładanie lipidów pozamacicznych w tkankach nietłuszczowych, w tym trzustce – schorzenie zwane steatozą trzustki lub stłuszczeniem trzustki. W modelach gryzoni indukowanych dietą wysokotłuszczową (HFD), steatoza trzustki konsekwentnie poprzedza steatozę wątroby, co podkreśla szczególną podatność trzustki na gromadzenie się lipidów. To wczesne zaangażowanie stawia trzustkę jako kluczowy organ do zrozumienia zaburzeń metabolicznych w otyłości. Chociaż szczury otyłe (DIO) wywołane dietą powtarzają kluczowe aspekty postępu choroby u ludzi, dobrze scharakteryzowane modele zwierzęce, które wiarygodnie wykazują ten fenotyp trzustki, pozostają rzadkie w literaturze.
Istotnym aspektem metodologicznym w modelowaniu otyłości człowieka jest moment wprowadzenia HFD. Wiele istniejących modeli inicjuje HFD w okresie odstawiania od piersi, co może wprowadzać zakłócające efekty programowania metabolicznego, które nie odzwierciedlają w pełni ludzkiej otyłości, a ta rozwija się głównie po fazie rozwoju. Dla porównania, niniejsze badanie ustanawia ustandaryzowany protokół, w którym HFD wprowadza się po odstawianiu od mleka. To podejście dokładniej naśladuje typową ludzką trajektorię pojawiania się otyłości w dorosłości, unika wczesnych adaptacji metabolicznych i prowadzi do bardziej fizjologicznie istotnego postępu w kierunku steatozy trzustki.
Badania te dostarczają szczegółowych i powtarzalnych ram do stworzenia modelu otyłości szczura charakteryzującego się wyraźną patologią stłuszczenia trzustki. Metodologia obejmuje tygodniową fazę aklimatyzacji, 14-tygodniowy okres indukcji HFD rozpoczynający się po odstawieniu oraz systematyczne pobieranie tkanek. Opisane są dwa szlaki przetwarzania tkanek: zamrożenie snap-freezing do analiz molekularnych (np. western blotting) oraz perfuzyjne utrwalanie paraformaldehydu do ocen morfologicznych (np. IHC, H&E). Model ten oferuje solidną platformę do badań mechanistycznych dotyczących zaburzeń metabolicznych trzustki związanych z otyłością.

Opisujemy powtarzalny protokół umożliwiający ustanowienie prostego modelu otyłości, który niezawodnie wykazuje stłuszczenie trzustki (Rysunek 1). Cały proces, od karmienia zwierząt i pobierania tkanek po późniejszą walidację molekularną, jest schematycznie podsumowany na Rysunku 1. Tygodniowe zmiany wagi grupy modelowej (n = 5) i grupy kontrolnej (n = 5) zostały zarejestrowane i nie stwierdzono istotnej różnicy w masie obu grup przed karmieniem HFD. Chociaż waga...

Badanie to oferuje powtarzalną i standaryzowaną metodę mająca na celu ustalenie modeli otyłych szczurów wykazujących prostą otyłość, często charakteryzującą się stłuszczeniem trzustki. Zawiera również szczegółowe protokoły pobierania próbek tkanki trzustki oraz immunohistochemii.

Opracowanie i walidacja metodologii ustalania modeli otyłych szczurów z typową stłuszczeniową trzustką

Obesity has emerged as a predominant global health epidemic, with nearly half of the world's population now classified as overweight or obese. A key ...

development-validation-methodology-for-establishing-obese-rat-models

Research

JoVE Journal

Medicine

Medycyna

Opisano protokół przewlekłych infuzji glukozy i intralipidów u szczurów. Model ten można wykorzystać do badania wpływu nadmiaru składników odżywczych na funkcjonowanie narządów i parametry fizjologiczne.

Model przewlekłego wlewu składników odżywczych u szczura

Częstość występowania otyłości wzrasta i zwiększa ryzyko przewlekłych chorób płuc. Aby ustalić podstawowe mechanizmy i strategie zapobiegawcze, potrzebne są dobrze zdefiniowane modele zwierzęce. W tym miejscu przedstawiamy trzy metody (test tolerancji glukozy, pletysmografia ciała i stabilizacja płuc) w celu zbadania wpływu otyłości na wyniki płucne u myszy.

Dootrzewnowy test tolerancji glukozy, pomiar czynności płuc i zespolenie płuc w celu zbadania wpływu otyłości i upośledzonego metabolizmu na wyniki płucne

Opisujemy metody rozwoju eksperymentalnego modelu zespołu metabolicznego wywołanego dietą (MetS) u królików stosujących dietę wysokotłuszczową i bogatą w sacharozę. U zwierząt rozwinęła się otyłość centralna, łagodne nadciśnienie, stan przedcukrzycowy i dyslipidemia, reprodukując w ten sposób główne składniki ludzkiego MetS. Ten przewlekły model pozwoli na zdobycie wiedzy leżącej u podstaw mechanizmów progresji choroby.

Eksperymentalny model zespołu metabolicznego wywołanego dietą u królika: rozważania metodologiczne, rozwój i ocena

Opisano prosty i niezawodny model gryzoni indukowany dietą dla niealkoholowego stłuszczeniowego zapalenia wątroby (NASH), osiągnięty dzięki trzymaniu zwierząt bez SPF i podawaniu specyficznej diety wysokotłuszczowej. Opisujemy identyfikację podzbiorów komórek odpornościowych wątroby i tkanki tłuszczowej w celu podsumowania ludzkich warunków immunologicznych poprzez wystawienie myszy na zarazki środowiskowe.

Zaawansowany mysi model niealkoholowego stłuszczeniowego zapalenia wątroby w połączeniu z cukrzycą typu 2

Ten protokół opisuje użycie bardzo smacznej diety stołówkowej w stylu zachodnim do modelowania przejadania się i otyłości u gryzoni. W tym miejscu przedstawiamy szczegółowy zarys selekcji, przygotowania i pomiaru żywności oraz wyjaśniamy czynniki metodologiczne, które pomagają w generowaniu solidnego i powtarzalnego fenotypu.

Smaczna dieta stołówkowa w stylu zachodnim jako niezawodna metoda modelowania otyłości wywołanej dietą u gryzoni

Ominięcie żołądka Roux-en-Y (RYGB) jest wykonywane w leczeniu otyłości i cukrzycy. Jednak mechanizmy leżące u podstaw skuteczności RYGB nie są w pełni poznane, a badania są ograniczone przez trudności techniczne prowadzące do wysokiej śmiertelności w modelach zwierzęcych. Ten artykuł zawiera instrukcje, jak wykonać RYGB u szczurów z wysokimi wskaźnikami sukcesu.

Protokół obejścia żołądka Roux-en-Y u szczurów przy użyciu zszywaczy liniowych

Ten artykuł przedstawia reakcje morfometryczne i wyniki treningu według protokołu treningu interwałowego o wysokiej intensywności (HIIT) w szczurzym modelu otyłości wywołanej dietą metodą Sprague'a-Dawleya. Celem tego protokołu była maksymalizacja intensywności ćwiczeń i określenie fizjologicznych reakcji na HIIT u szczupłych i otyłych szczurów.

Przewlekły trening interwałowy o wysokiej intensywności i model otyłości wywołanej dietą w celu maksymalizacji wysiłku fizycznego i wywołania zmian fizjologicznych u szczurów

Ten protokół przedstawia metodę wywoływania kardiomiopatii cukrzycowej poprzez połączenie diety wysokotłuszczowej i wstrzykiwania streptozotocyny. Podejście to ma na celu zapewnienie wiarygodnych ram dla badań naukowych nad kardiomiopatią cukrzycową oraz zbadanie potencjalnych możliwości zastosowań leczenia klinicznego.

Modelowanie i ocena modelu mysiej kardiomiopatii cukrzycowej

Za pomocą modelu eksplantacji ex vivo, małe fragmenty części rostralnej tkanki tłuszczowej białej trzewnej od szczupłych myszy są hodowane przez 7–10 dni, co umożliwia indukcję i badanie zapalenia tkanki tłuszczowej, jak to ma miejsce podczas karmienia dietą wysokotłuszczową.

Ex vivo model myszy na zapaleniu tkanki tłuszczowej podobnym do diety wysoko tłuszczowej

W niniejszym filmie przedstawiono procedurę sekcji służącą do przetwarzania ludzkiej trzustki w celu uzyskania wielu formatów przechowywania. Orientacja anatomiczna jest zachowana we wszystkich obszarach trzustki, aby umożliwić określenie regionalnego składu i gęstości wysepek.

Protokół pobierania trzustki ludzkiej

Poznaj metodologię tworzenia modeli otyłych szczurów ze stłuszczeniową trzustką oraz protokoły pobierania tkanek i immunohistochemii. Standaryzowane procedury zapewniają powtarzalność w badaniach nad otyłością.

Opracowanie i walidacja metodologii ustalania modeli otyłych szczurów z typową stłuszczeniową trzustką

Przeglądaj więcej filmów