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Para iniciar o experimento para medir as taxas de transpiração de folhas de diferentes espécies de plantas, você primeiro criará uma ferramenta chamada potômetro, usando um pedaço de tubo de plástico e uma pipeta calibrada de cinco mililitros. Para montar o dispositivo, basta conectar o tubo de borracha na ponta da pipeta. Em seguida, mergulhe o dispositivo em um balde de água e mova a pipeta sob a água para encher totalmente o tubo, tomando cuidado para não criar bolhas.
Em seguida, tampe a extremidade aberta do tubo com um bulbo de pipeta para manter a água. Agora, tomando cuidado para não derramar água do potômetro, use um clamp e suporte para segurar a extremidade tampada da pipeta cerca de uma a três polegadas abaixo do bulbo da pipeta. Em seguida, use um segundo clamp preso mais abaixo no mesmo suporte para prender a extremidade aberta do tubo de borracha.
Em seguida, use uma pipeta de transferência ou conta-gotas para remover a água da extremidade aberta da tubulação até que o nível de água na parte da pipeta do potômetro fique na linha zero. Neste experimento, a hipótese experimental pode ser que folhas de espécies de plantas mais adaptadas a ambientes mais quentes ou áridos terão taxas de transpiração mais baixas do que aquelas de regiões úmidas ou úmidas. A hipótese nula seria que as folhas das diferentes espécies de plantas não difeririam em suas taxas de transpiração.
Para iniciar o experimento, use cuidadosamente uma tesoura para cortar a extremidade do pecíolo, ou caule, da primeira folha e, em seguida, insira a folha no tubo. Em seguida, coloque uma camada de lubrificante ao redor da área onde o caule da planta e o tubo de borracha se encontram para fazer uma vedação à prova d'água. Em seguida, remova o bulbo da pipeta e, tomando cuidado para não perturbar a configuração, deixe o experimento rodar pelo período experimental apropriado, normalmente de 30 a 60 minutos.
Ao final do tempo alocado, registre o nível da água na pipeta, observando quanto o nível caiu em mililitros. Em seguida, reabasteça e redefina o nível de água do potômetro para zero e, em seguida, repita o procedimento para cada uma das folhas de teste restantes até que as taxas de transpiração de todas as quatro folhas tenham sido medidas. Em seguida, para determinar a área de superfície das amostras de folhas, coloque cada folha em um pedaço de papel em branco e trace cuidadosamente os contornos.
Em seguida, recorte os contornos e registre a massa de cada traçado. Por fim, recorte e pese um quadrado de quatro por quatro centímetros do mesmo tipo de papel usado para fazer os traçados das folhas. Isso funcionará como uma referência com área e peso conhecidos.
Em seguida, você precisará quantificar o número de estômatos por unidade de área em cada folha. Para fazer isso, primeiro prepare um suporte deslizante pintando pelo menos um centímetro quadrado da parte inferior de cada folha com esmalte transparente. Quando o esmalte estiver completamente seco, pressione cuidadosamente um pequeno pedaço de fita celofane diretamente em cada adesivo e, em seguida, retire suavemente a fita para remover o esmalte pintado.
Em seguida, coloque cada impressão e fita adesiva em uma lâmina de microscópio limpa e separada. Neste exercício, a hipótese alternativa poderia ser que as folhas das plantas adaptadas a ambientes mais secos terão menos estômatos por unidade de área do que as folhas das plantas adaptadas a ambientes mais úmidos. A hipótese nula pode ser que todas as espécies de plantas terão um número igual de estômatos por unidade de área.
Para observar cada impressão ao microscópio, primeiro use uma ampliação baixa para encontrar áreas da impressão foliar que contenham estômatos. Eles aparecerão como pontos ou impressões mais escuras. Em seguida, mude para uma ampliação maior, mantendo a janela de visualização da amostra centralizada na área que contém estômatos.
Desenhe e rotule suas observações, certificando-se de rotular cada esboço com as espécies de plantas. Em seguida, conte e registre o número de estômatos no campo de visão. Você deve realizar essa contagem um total de quatro vezes em quatro áreas diferentes da impressão da folha e, em seguida, determinar o número médio de estômatos por área contada na folha.
Para calcular o número de estômatos por milímetro quadrado, coloque uma régua de plástico transparente no microscópio sob a objetiva e meça o diâmetro do campo de visão. Você pode então usar esse número, o diâmetro ou D e a fórmula mostrada para calcular a área do campo de visão em milímetros ao quadrado. Primeiro, calcule a área de superfície do quadrado de papel de quatro por quatro centímetros para obter o número de centímetros quadrados.
Em seguida, divida o peso do quadrado do papel pelo número de centímetros quadrados que ele cobre para obter o peso de um centímetro quadrado de papel. Finalmente, para calcular a área de superfície de cada folha, divida o peso do traçado da folha pelo peso de um centímetro quadrado de papel. Isso lhe dará a área da folha em centímetros ao quadrado.
Agora você deve converter esse número em metros ao quadrado, a unidade padrão usada para calcular a taxa de transpiração. Para calcular a taxa de transpiração de cada folha, divida a perda total de água medida no potômetro em mililitros pelo tempo em que o experimento foi executado em minutos. Em seguida, divida isso pela área da superfície da folha em metros ao quadrado.
Faça um gráfico de barras com as quatro espécies de folhas diferentes no eixo X e suas taxas de transpiração correspondentes no eixo Y. Essas taxas parecem diferentes? Em seguida, adicione um segundo eixo Y ao seu gráfico e plote o número médio de estômatos por milímetro ao quadrado para cada folha que foi observada ao microscópio.
Você vê uma correlação entre a taxa de transpiração e o número de estômatos? Em caso afirmativo, isso parece ter alguma relação com o ambiente nativo que a árvore normalmente habitaria?
