Adrenal medular cromafins sistemas de cultura de células são extremamente úteis para o estudo da secreção de excitação de acoplamento em uma configuração em vitro. Este protocolo ilustra o método utilizado para dissecar as supra-renais e, em seguida, isolar a região medular, removendo o córtex adrenal. A digestão da medula em células cromafins único é então demonstrada.
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Artigo de método
Rato de isolamento de células Adrenal Cromafim
Neste artigo
Resumo
Resumo
Adrenal medular cromafins sistemas de cultura de células são extremamente úteis para o estudo da secreção de excitação de acoplamento em uma configuração em vitro. Este protocolo ilustra o método utilizado para dissecar as supra-renais e, em seguida, isolar a região medular, removendo o córtex adrenal. A digestão da medula em células cromafins único é então demonstrada.
Protocolo
Abreviaturas:
ACCs - Células Adrenal Cromafim, E. Soln - solução enzimática, E. DMEM - Modified Dulbecco Enriquecido Eagle Medium
- Preparação
- Adicionar papaína a quantidade desejada de E. Soln (40 unidades papaína / 1ml E. Soln.).
- Ativar papaína com carbogênio por cerca de 15 minutos em gelo. Buffer de Locke oxigenar sobre gelo também.
- Dissecação
- Use 10/08 rato semana.
- Antes de remover a digestão oxigenado tampão de Locke e colocar no gelo.
- Consulte o vídeo para proc....
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