Montagem de cérebros de Drosophila adulta: um método para preparar lâminas para imagens confocais

Neste artigo

Resumo

Fonte: Kelly, S. M., et al. Dissecção e Coloração Imunofluorescente do Corpo do Cogumelo e Neurônios Fotorreceptores em Cérebros Adultos de Drosophila melanogaster. J. Vis. Exp. (2017).

Este vídeo descreve um método de montagem de cérebros intactos de moscas adultas sob uma lâmina de ponte e mostra o protocolo realizado em cérebros imunomarcados para microscopia fluorescente.

Protocolo

Este protocolo é um trecho de Kelly et al., Dissecção e coloração imunofluorescente de neurônios do corpo do cogumelo e fotorreceptores em cérebros adultos de Drosophila melanogaster, J. Vis. Exp. (2017).

1. Montagem de cérebros adultos de D. melanogaster em lâminas de microscópio e imagens

Construa um escorregador de "ponte". Posicione duas lamínulas de "base" a cerca de 1 cm de distância em uma lâmina carregada positivamente. Certifique-se de que o lado carregado positivamente do slide esteja voltado para cima. Cole as lamínulas na lâmina com esmalte de unha, conforme mostrado em

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Resultados

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Figura 1: Montagem de cérebros em preparação para imagens de imunofluorescência. (A) Os cérebros são montados em slides SuperFrost Plus com uma tampa de ponte para evitar o achatamento dos cérebros. Duas lamínulas de cobertura "base" são coladas a uma lâmina Superfrost Plus carregada positivamente com esmalte transparente e cérebros dissecados são então colocados na lâmina entre elas. Uma lamínula de cob.......