Injeção de células progenitoras neurais fluorescentes em organoides cerebrais humanos para modelagem de transplante

Resumo

Fonte: Ibanez-Rios, M.I., et al., Um Modelo Organoide Cerebral Humano de Transplante de Células Neurais. J. Vis. Exp. (2023)

Este vídeo demonstra a injeção de células progenitoras neurais (NPCs) marcadas com fluorescência em organoides cerebrais humanos usando uma mistura de matriz celular. O método é reprodutível e livre de animais, permitindo o transplante com o mínimo de ruptura organoide. Ele oferece uma plataforma valiosa para modelar transplantes neurais e doenças do sistema nervoso central (SNC).

Protocolo

Todos os procedimentos que envolvem a coleta de amostras foram realizados de acordo com as diretrizes do IRB do instituto.

1. Injeção de células rotuladas no organoide cerebral

NOTA: Para este artigo, os organoides cerebrais foram produzidos usando um kit comercial de acordo com as instruções do fabricante. Isso pode ser substituído pelo organoide cerebral de interesse. Os materiais utilizados nesta parte do protocolo devem ser pré-resfriados para evitar a gelificação da matriz da membrana basal solubilizada a temperaturas acima de 4 °C.

1. Coloque a(s) seringa(s), pontas e tubos de insulina que entrarão em contato com a matriz da memb....

Materiais

< classe de figura='tabela'>< estilo col = 'largura: 25%;'>< estilo col = 'largura: 25%;'>< estilo col = 'largura: 25%;'>< estilo col = 'largura: 25%;'> Lista de materiais utilizados neste artigo Nome Empresa Número de catálogo Comentários DMEM F12 / GlutamaxThermo10565018 Matrigel Fator de Crescimento Reduzido (TFG)Corning356231Fenol Vermelho Livre, Livre de LDEV