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1. Medição da adesão usando contagens celulares viáveis
- Determine o número de bactérias viáveis ligadas a plantas cultivadas em areia
- Remova a planta do vaso e lixe. Para remover plantas dos vasos, primeiro remova o material de vedação na parte superior e inferior do recipiente. Coloque o recipiente sobre uma folha de papel estéril e remova delicadamente toda a areia ou solo e plante como um grande cilindro afilado, batendo suavemente o recipiente contra uma superfície para soltar o material.
1. Se necessário, use uma espátula ou haste para soltar o material ao redor das bordas que entra pelo fundo do recipiente.
- Quando o cilindro de areia ou solo contendo a planta estiver livre sobre o papel, divida-o ao meio para revelar a raiz da planta. Se desejar, retire amostras da areia perto da borda do recipiente, assim como perto da raiz. Isso pode ser útil para determinar a disseminação (e acúmulo e crescimento) da bactéria.
- Meça o comprimento da raiz. Pegue a raiz e remova a areia e as bactérias que aderem frouxamente à raiz (o material da rizosfera) mergulhando a raiz em um volume medido de água ou tampão e sacudindo-a suavemente. Determine a contagem celular viável das bactérias na suspensão resultante por meio de revestimento em um meio adequado, como o ágar de Luria. Isso representa o número de bactérias vagamente associadas à raiz.
- Remova as bactérias fortemente ligadas por sonicação e determine seu número.