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Avaliação da colonização radicular de mudas de tomate por uma bactéria patogênica usando contagens celulares viáveis

February 26th, 2026

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Abstract

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Fonte: Matthysse, A. G. Adesão de bactérias às superfícies das plantas medida em laboratório. J. Vis. Exp., (2018)

Este vídeo demonstra um protocolo para medir a colonização radicular de mudas de tomate por bactérias patogênicas selvagens e deficientes em celulose. Contagens viáveis de bactérias aderentes firmes apresentam maior adesão e formação de microcolônias pela cepa selvagem, destacando o papel da celulose na colonização radicular estável.

Protocol

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$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

1. Medição da adesão usando contagens celulares viáveis

  1. Determine o número de bactérias viáveis ligadas a plantas cultivadas em areia
    1. Remova a planta do vaso e lixe. Para remover plantas dos vasos, primeiro remova o material de vedação na parte superior e inferior do recipiente. Coloque o recipiente sobre uma folha de papel estéril e remova delicadamente toda a areia ou solo e plante como um grande cilindro afilado, batendo suavemente o recipiente contra uma superfície para soltar o material.

1. Se necessário, use uma espátula ou haste para soltar o material ao redor das bordas que entra pelo fundo do recipiente.

  1. Quando o cilindro de areia ou solo contendo a planta estiver livre sobre o papel, divida-o ao meio para revelar a raiz da planta. Se desejar, retire amostras da areia perto da borda do recipiente, assim como perto da raiz. Isso pode ser útil para determinar a disseminação (e acúmulo e crescimento) da bactéria.
  2. Meça o comprimento da raiz. Pegue a raiz e remova a areia e as bactérias que aderem frouxamente à raiz (o material da rizosfera) mergulhando a raiz em um volume medido de água ou tampão e sacudindo-a suavemente. Determine a contagem celular viável das bactérias na suspensão resultante por meio de revestimento em um meio adequado, como o ágar de Luria. Isso representa o número de bactérias vagamente associadas à raiz.
  3. Remova as bactérias fortemente ligadas por sonicação e determine seu número.

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Materials

List of materials used in this article
NameCompanyCatalog NumberComments
SementesQualquerN/AAnote o número do lote de semente e o cultivar
AreiaFisher Scientific de areia marinhaS25 
AreiaSigma-AldrichS9887 
ConetainersStuewe & Sons, Inc.Cones-tainers de Ray-LeachExistem muitos tamanhos diferentes disponíveis para se adequar ao tipo de planta que você deseja cultivar
Sonicador de banhoQualquer empresa de fornecimento científicoN/A 
ParafilmQualquer empresa de fornecimento científicoN/A 

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Root ColonizationTomato SeedlingsPathogenic BacteriaViable Cell CountsSerial DilutionsAgar PlatingSonication TreatmentBacterial AdhesionCellulose DeficiencySand Culture

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