Preparação de uma vacina adjuvante de nanoemulsão

Resumo

Fonte: Zhang, Z. et al., Preparação, Características, Toxicidade e Avaliação da Eficácia da Vacina Nasal Auto-Montada em Tumor de Nanoemulsão In Vitro e In Vivo.J. Vis. Exp. (2022)

Este vídeo demonstra a produção de vacinas tumorais em nanoemulsão. Os depósitos estáveis de reservatórios de petróleo que transportam peptídeos sintéticos e adjuvantes são produzidos por nanoemulsão de baixa energia, oferecendo uma promessa significativa para a imunoterapia tumoral.

Protocolo

1. Preparação do I-OVA NE

1. Misture 1 mg de monofosforil lipídico A (MPLA) com 100 μL de dimetilsulfóxido (DMSO), vortex por 5 min e deixe repousar por 4 h em temperatura ambiente (RT) para se dissolver completamente.
2. Adicione Tween 80 e IKVAV-OVA_257-264 (I-OVA) quantitativamente e misture.
   nota: Tween 80 e I-OVA foram misturados em uma proporção de massa de 25:1.
3. Adicione esqualeno à mistura preparada na etapa 1.2 (7:3, Smix: esqualeno).
4. Adicionar 100 μL de solução de MPLA (10 mg/ml) à mistura preparada no passo 1.3.
5. Preparar a vacina de nanoemulsão usando métodos de emulsificação de baixa energia: adicionar a solução misturada às gotículas de água em aproximadamente 70% do volume total e mexer delicadamente para obter uma mistura transparente e de fácil fluxo.
   nota: O controle BNE (emulsão em branco) foi preparado pelo mesmo método, substituindo a água por I-OVA.

Materiais

Lista de materiais utilizados neste artigo

Nome	Empresa	Número de catálogo	Comentários
MPLA	Invivogen Lit. Co.	tlrl-mpla
OVA257–264	Shanghai Botai Biotecnologia Co., Ltd.	NA
Conjugação de peptídeos sintéticos (I-OVA) de IKVAV-PA	Shanghai Botai Biotecnologia Co., Ltd.	NA