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Constrição crônica do nervo ciático e Teste de Hipersensibilidade dor em ratos

DOI:

10.3791/3393

March 13th, 2012

In This Article

Summary

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Devido à simplicidade da cirurgia e os resultados robusto comportamental, constrição crónica do nervo ciático é um dos modelos pré-eminentes animais de dor neuropática. Dentro de 24 horas após a cirurgia, hipersensibilidade à dor é estabelecido e pode ser medida quantitativamente utilizando um von Frey aesthesiometer (teste mecânico) e medidor de analgesia plantar (teste térmico).

Abstract

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Dor neuropática crônica, resultante de danos ao sistema nervoso central ou periférico, é uma condição prevalente e incapacitante, afetando 7-18% da população 1,2. Os sintomas incluem dor (queimação, formigamento, choque elétrico como) espontânea, disestesia, parestesia, alodinia (dor resultante de normalmente não dolorosos estímulos) e hiperalgesia (um aumento de resposta a estímulos dolorosos). Os sintomas sensoriais são co-mórbidas com deficiências comportamentais, tais como insônia e depressão. Para estudar a dor neuropática crónica vários modelos animais que imitam a lesão do nervo periférico têm sido desenvolvidos, um dos mais amplamente utilizado é Bennett e (1988) unilateral de Xie lesão do nervo ciático constrição crónica (ICC) 3 (Figura 1). Aqui apresentamos um método para executar ICC e teste de hipersensibilidade a dor.

ICC é realizada sob anestesia, com o nervo ciático de um lado exposto fazendo comoincisão parentes, e cortando o tecido conjuntivo entre as superficial glúteos e bíceps femoral. Quatro ligaduras intestino crômico são amarrados frouxamente ao redor do nervo ciático em intervalos de 1 mm, apenas para ocluir, mas não deter o fluxo de sangue epineural. A ferida é fechada com suturas no músculo e grampos na pele. O animal é então permitido recuperar da cirurgia durante 24 horas antes do teste de hipersensibilidade dor começa.

Para os testes comportamentais, os ratos são colocados no dispositivo de ensaio e são permitidos para habituar o procedimento de teste. A área de teste é a superfície mid-plantar da pata posterior (Figura 2), que cai dentro da distribuição do nervo ciático. Limiar de retirada mecânica é avaliado por ambas as patas traseiras mecanicamente estimulando lesadas e usando um eletrônico dinâmico plantar von Frey aesthesiometer ou manual von Frey cabelos 4. O limiar de retirada mecânica é a pressão máxima exercida(Em gramas) que desencadeia retirada da pata. Para a medição da latência de retirada térmica, primeiro descrito por Hargreaves et ai (1988), a pata posterior é exposta a um feixe de calor radiante através de uma superfície de vidro transparente com um medidor de analgesia plantar 5,6. A latência de retirada ao estímulo de calor é registrado como o tempo para retirada da pata nas duas patas traseiras lesadas e não lesadas. ICC sequência, limiar de retirada mecânica, bem como a latência de retirada térmica na pata lesada são ambos significativamente reduzido, em comparação com as medições de linha de base e da pata não lesionado (Figura 3). O modelo ICC de lesão do nervo periférico combinados com testes de hipersensibilidade à dor fornece um sistema modelo para investigar a eficácia de agentes terapêuticos potenciais para modificar a dor neuropática crônica. No nosso laboratório, nós utilizamos ICC ao lado de sensibilidade térmica e mecânica das patas traseiras para investigar o papel das interacções neuro-imunes na patogénesee tratamento da dor neuropática.

Protocol

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1. Constrição do nervo ciático crônica

Técnicas assépticas deve ser utilizado para o procedimento cirúrgico. Desinfectar a superfície de trabalho cirúrgico com etanol a 70% e em preparar Advance Instruments estéril (por exemplo, tesouras finas, fórceps e afastador), gazes, grampos e esfregaços por autoclavagem. Para cirurgias múltiplas, limpar e instrumentos reesterilizar com etanol a 70% ou um esterilizador seco grânulo entre ratos. Uma máscara cirúrgica, gorro cabelo e luvas estéreis devem ser usadas.

Para constrição do nervo, preparar a sutura intestino crómico cortando-o em pequenos pedaços de cerca de 3 cm ....

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Discussion

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CCI é amplamente utilizado modelo de lesão de nervo periférico da dor neuropática crônica. É relativamente simples de executar, e produz hipersensibilidade dor robusta e estável durante pelo menos um mês após a lesão. Após CCI, os ratos apresentam postura anormal da pata ferida (dedos unidos e plantar-flexionados e pata evertido), bem como repetidos tremores, guarda e lambendo da pata ferida sugerindo a presença de dor espontânea 9. Além disso a disfunção sensorial, vários investigadores demonstraram que evoc.......

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Disclosures

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Experimentos com animais foram aprovados pelo Animal Care e Comitê de Ética da Universidade de New South Wales, Austrália, e seguiu as orientações formuladas pela Associação Internacional para o Estudo da Dor.

Acknowledgements

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Os autores gostariam de agradecer a descrição original do modelo de CCI por Bennett e Xie (1988).

Este trabalho foi financiado parcialmente por concessões do National Health and Medical Research Council da Austrália (ID # 568637) e do Instituto NSW para a Ciência e Investigação Médica ao GMT.

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Materials

List of materials used in this article
NameCompanyCatalog NumberComments
Nome do reagente / equipamentos Companhia Número de catálogo Comentários
Gut crômico Ethicon G-211 Espessura 4-0
Isoflurano Delvet Pty. Ltd., Sete Colinas, NSW n / a
Mersilk Ethicon W-580 5-0 espessura
Autoclip Becton Dickinson 427631 9 milímetros de aço inoxidável
Riodine Orion R1000802F 1% de iodo w / v
Instrumento analgesia térmica plantar Ugo Basile 37370
Aesthesiometer plantar dinâmica Ugo Basile 37400

References

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  1. Bouhassira, D., Lanteri-Minet, M., Attal, N., Laurent, B., Touboul, C. Prevalence of chronic pain with neuropathic characteristics in the general population. Pain. 136, 380-387 (2008).
  2. Toth, C., Lander, J., Wiebe, S. The prevalence and impact of ....

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Sciatic Nerve InjuryChronic Constriction InjuryPain Hypersensitivity TestingMechanical Withdrawal ThresholdThermal Withdrawal LatencyVon Frey HairsPlantar Analgesia MeterChromic Gut LigaturesHind Paw StimulationNeuropathic Pain Model

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