Apresenta-se um protocolo simples de visualizar regiões de morte celular programada (PCD) em embriões de ratinho e de diferenciação estaminais embrionárias de culturas (ES) de células utilizando um corante altamente solúvel chamada Lyso Tracker.
Artigo de método
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| Nome | Empresa | Número de catálogo | Comentários | ||||||||||||||
|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|
| Nome do reagente | Companhia | Número de catálogo | |||||||||||||||
| Lyso Tracker Red DND-99 | Invitrogen | # L-7528 | |||||||||||||||
| Hanks BSS | Invitrogen | 14025-076 | |||||||||||||||
| Paraformaldeído | EMD | EM-PX0055-3 | |||||||||||||||
| Vectashield | VETOR | H-1200 | |||||||||||||||
| DMEM | Cellgro | 10-013 CV- | |||||||||||||||
| Não-aminoácidos essenciais | Cellgro | 25-025 CI- | |||||||||||||||
| Piruvato de sódio | Cellgro | 25-000 CI- | |||||||||||||||
| FBS | Hyclone | SH30071.02 | |||||||||||||||
| Pen-Strep | Invitrogen | 15140-122 | |||||||||||||||
| b-mercaptoetanol, 50 mM | Invitrogen | 21985-023 | |||||||||||||||
| LabTek-II lâminas Câmara (8 poços) | Nalge Nunc International | 154534 | |||||||||||||||
| Gelatina a 0,1% | Millipore | ES-006-B | |||||||||||||||
| PBS de Dulbecco (D-PBS) | Cellgro | 21-031 CV- | |||||||||||||||
Receitas solução Paraformaldeído a 4% Para 100 ml:
AVISO: Paraformaldeído em 'babado' forma (comprimido pequenas pelotas) é menor em pó e pode, portanto, ser medido fora de um capuz. No entanto, você ainda deve usar uma máscara protetora contra poeira (N95pelo menos) durante o manuseamento. EB Meios de Cultura Para 500 ml EB Media:
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