O modelo experimental de hemorragia subaracnóidea (HSA) de shunt sanguíneo controlado por pressão intracraniana no coelho combina os procedimentos padrão - canulação da artéria subclávia e punção transcutânea da cisterna magna, o que permite uma imitação rigorosa das condições fisiopatológicas humanas após a HSA. Apresentamos instruções passo a passo e discutimos os principais pontos cirúrgicos para a criação experimental bem-sucedida de HSA.
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Artigo de método
O coelho Modelo Blood-shunt para o Estudo da aguda e tardia Sequelas de hemorragia subaracnóidea: Aspectos Técnicos
Neste artigo
Resumo
Resumo
Lesão cerebral precoce e vasoespasmo cerebral atrasou tanto contribuir para desfechos desfavoráveis após hemorragia subaracnóidea (HSA). Modelos animais reprodutíveis e controláveis que simulam as duas condições são actualmente incomum. Portanto, os novos modelos são necessários para imitar condições fisiopatológicas humanos decorrentes da HAS.
Este relatório descreve as nuances técnicas de um modelo HAS-sangue shunt coelho que permite o controle da pressão intracraniana (PIC). Uma derivação extracorpórea é colocada entre o sistema arterial e o espaço subaracnóide, que permite HAS-examinador independente num crânio fechado. Passo-a-passo as instruções processuais e equipamentos necessários são descritos, bem como considerações técnicas para produzir o modelo com a mortalidade e morbidade mínima. Detalhes importantes necessários para a criação cirúrgica com sucesso deste modelo de coelho HAS controlada pelo ICP robusto, simples e consistente são descritos.
Introdução
Hemorragia subaracnóide aneurismática (HAS) é um dos mais fatais condições neuropatológicas, muitas vezes levando a danos neurológicos permanentes ou morte 1. Pesquisas anteriores se concentrou em vasoespasmo cerebral tardio (DCV são) como etiologia primária de déficits neurológicos associados com HAS 2. No entanto, os resultados clínicos geralmente pobres de pacientes que sofrem de HAS após o tratamento de vasoespasmo levou a uma expansão do foco de pesquisa para incluir os efeitos da lesão cerebral precoce (EBI) após SAH 3. Maior compreensão da importância de ambos EBI e as DCV são em contribuir para desfechos clínicos após SAH é es....
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Protocolo
Três mulheres meses de idade coelhos da raça Nova Zelândia, pesando 2,5-3,5 kg foram utilizados para este procedimento. O estudo foi realizado de acordo com os Institutos Nacionais de Saúde diretrizes para o cuidado e uso de animais de laboratório e com a aprovação do Comitê de Cuidados Animais do Cantão de Berna, Suíça (aprovação como 105/13). Todos os procedimentos cirúrgicos foram realizados sob condições estéreis no Instituto Cirúrgico Experimental do Departamento de Pesquisa Clínica do Hospital Universitário de Berna, em Berna, na Suíça. Um anestesista veterinário acompanhou os animais durante a cirurgia e durante a recuperação.
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Resultados
O modelo de derivação de sangue de coelho de HAS descrito neste relatório produz EBI no hipocampo (Figura 2A, B), córtex basal (Figura 2A, B), e vasculatura cerebral (Figura 2C) tão cedo quanto 24 h depois da lesão e mostra uma característica distribuição de sangue (Figura 2D) 8. Além disso, o modelo provoca graus moderados a graves da DCV são no terceiro dia após a indução da SAH (Figura 3) 10. A taxa de mortalida.......
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Discussão
O modelo de derivação produz patologia semelhante ao observado em seres humanos após SAH 3,8,10 aguda. Tem sido sugerido que pode exacerbar EBI, manter e mesmo desencadear DCV são 12, e, como tal, este modelo pode ajudar na investigação de ambas as fases precoce e tardia DCV são, incluindo interacções EBI e DCV são seguintes HAS. Em particular, repetível in vivo as DCV são técnicas de controlo, incluindo DSA 13, angiotomografia 14, e Doppler transcraniano 15
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Divulgações
Nenhum. Os autores não têm interesse financeiro ou comercial em nenhum dos medicamentos, materiais ou equipamentos utilizados. Nenhum financiamento específico foi recebido para este trabalho. Os autores são os únicos responsáveis pelo desenho e condução do estudo apresentado e não relatam nenhum conflito de interesses em relação aos materiais e métodos utilizados neste estudo ou aos resultados especificados no artigo. Eles confirmam a adesão aos padrões éticos. O estudo foi realizado de acordo com as diretrizes do National Institutes of Health para o cuidado e uso de animais experimentais e com a aprovação do Comitê de Cuidados com Animais do Cantão de Berna, Suíça (aprovação # 109/07 e # 107/09).
Agradecimentos
Os autores agradecem Laurie von Melchner, Hospital Universitário de Berna, Departamento de Neurocirurgia, Berna, Suíça, para revisão e edição do manuscrito e Paskus Jeremias, Hospital Infantil de Boston, Boston, MA pela revisão do projecto inicial. Agradecemos a gestão hábil de cuidados com os animais, anestesia e assistência operacional a partir de Daniel Mettler, DVM, Max Müller, DVM, Daniel Zalokar e Olgica Beslac, Experimental Instituto Cirúrgico, Departamento de Pesquisa Clínica da Universidade de Berna, Berna, Suíça. Agradecemos Michael Lensch, Chefe de Pesquisa Enfermeira do Departamento de Medicina de Terapia Intensiva do Hospital Universitário de Berna e da ....
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Materiais
| Nome | Empresa | Número de catálogo | Comentários |
|---|---|---|---|
| Equipamento | |||
| Microscópio de operação | Zeiss, Jena, Alemanha | Zeiss, microscópio cirúrgico OPMI-MD | |
| Equipamento cirúrgico | B. Braun, Alemanha | Fórceps médico nº 5; tesoura de vaso 8 cm; microclip 4 mm | |
| Respirador | Hugo Sachs | ||
| Máquina de cortar cabelo | 3M Máquina de cortar cabelo | Starter Kit 9667A | |
| Placa quente do corpo | FHC | ||
| Analisador de gases sanguíneos | Radiômetro, Copenhague, Dinamarca | ABL 725 | |
| Monitoramento cardíaco | Camino Multi-Parameter Monitor, Integra, Plainsboro, NJ, US | AP-05 | |
| Análise de software | BIOPAC Systems, Inc., Goleta, CA, EUA | Biopac MP100 e software acqKnowledge, versão 3.8.1 | |
| Análise de software | ImagePro Discovery, MediaCybernetics, Silver Spring, MD, USA | Versão Image-Pro Plus | |
| Aparelho de angiografia | DFP 2000 A-Toshiba | MIIXR0001EAA | |
| monitor ICP | Camino Laboratories, San Diego, CA, EUA | Monitor ICP, Modelo 110-4B | |
| Monitor de fluxo sanguíneo | Oxford Optronix Ltd., Oxford, Reino Unido | de microesferas CAL KIT | |
| Sondas de agulha fina de fluxometria Laser-Doppler | Oxford Optronix Ltd., Oxford, Reino Unido | MNP110XP, 0,48 mm de diâmetro | |
| Tubo de pressão | B. Braun, Germay | PE 1.0 mm × 2.0 mm | |
| Monitor de anestesia | GE Medical Systems, Suíça | Datex S5 Monitor | |
| Material | |||
| 20 G cateter vascular | Smiths Medical | Jelco i.v. cateter, REF 4057 | |
| 5.5 F cateter venoso central de três lúmens | Conectores, Tagelswangen, Suíça | Cateter de silicone STH-C040 | |
| 22 G x agulha de 40 mm | Emergo Group Inc., Holanda | ||
| Microdrill de alta velocidade | Stryker, Solothurn, Suíça | 5400-15 | |
| Cera | Ethicon, Johnson & Johnson, NJ, EUA | ETHW31G | |
| Pinça bipolar | Aesculap, Inc., PA, EUA | US349SP | |
| Cetamina | Qualquer produto genérico | ||
| Xilazina | Qualquer produto genérico | ||
| Buprenorfina | Qualquer produto genérico | ||
| Fentanil | Qualquer produto genérico | ||
| Adesivos transdérmicos de matriz de fentanil | Qualquer produto genérico | ||
| Lidocaína 1% | Qualquer produto genérico | ||
| 4% de papaverina HCl | Qualquer produto genérico | ||
| Sulfato de neomicina | Research Organics Inc., OH, EUA | Qualquer produto genérico | |
| Povidona-iodo | Qualquer produto genérico | ||
| 0,9% de cloreto | Qualquer produto genérico | ||
| Iopamidol | Abott Laboratories, IL, EUA | Qualquer produto genérico | |
| 3-0 sutura reabsorvível | Ethicon Inc., EUA | VCP824G | |
| 5-0 sutura não absorvível | Ethicon Inc., EUA | 8618G | |
| 4-0 suturas de polifilamento | Ethicon Inc., EUA | VCP284G |
Referências
- Taylor, T. N., et al. Lifetime cost of stroke in the United States. Stroke; a journal of cerebral circulation. 27, 1459-1466 (1996).
- Kikkawa, Y., Kameda, K., Hirano, M., Sasaki, T., Hirano, K.
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Reimpressões e permissões
