Um hidrogel Construir e fibrina à base de cola Approach to Deliver Therapeutics em um Infarto do Miocárdio modelo murino.

Resumo

Este protocolo visa aliviar a limitação do enxerto celular deficiente para o tratamento de infartos do miocárdio com células-tronco por meio do uso de um sistema de hidrogel e uma cola à base de fibrina. Com essa abordagem, o contato célula a tecido pós-infarto pode ser mantido, aumentando o potencial terapêutico de agentes benéficos no local da lesão.

Resumo

O modelo murino de IM é amplamente reconhecido no campo das doenças cardiovasculares e tem sido consistentemente usado como um primeiro passo para testar a eficácia dos tratamentos in vivo¹. O protocolo tradicional e estabelecido foi ajustado para minimizar os danos ao animal. Notavelmente, as camadas do músculo peitoral são removidas em vez de simplesmente cortadas, e a toracotomia é abordada intercostalmente em vez de quebrar as costelas em uma esternotomia, preservando a integridade da caixa torácica. Com essas mudanças, o estresse geral no animal diminui.

As terapias com células-tronco destinadas a aliviar os danos causados pelos infartos têm se mostrado promissoras ao longo dos anos por seus benefícios pró-angiogênicos e antiapoptóticos. As abordagens atuais de entrega de células à superfície do coração geralmente envolvem a injeção das células perto do local danificado, dentro de uma artéria coronária ou na corrente sanguínea periférica^2-4. Embora as células tenham provado abrigar o miocárdio danificado, a funcionalidade é limitada por seu enxerto deficiente no local da lesão, resultando em difusão na corrente sanguínea⁵. Este manuscrito destaca um procedimento que supera esse obstáculo com o uso de um adesivo de hidrogel encapsulado em células. O adesivo é fabricado antes do procedimento cirúrgico e é colocado no miocárdio lesado imediatamente após a oclusão da artéria coronária esquerda. Para aderir o adesivo no lugar, a cola de fibrina externa biocompatível é colocada diretamente em cima do adesivo, permitindo que ele seque tanto no adesivo quanto na superfície do coração. Essa abordagem fornece um novo método de adesão para a aplicação de uma delicada construção terapêutica de encapsulamento celular.

Introdução

Um enfarte do miocárdio (MI) é definida como a interrupção de sangue para uma região do coração causada por oclusão de uma artéria coronária principal. O dano resultante de um MI é devido à remodelação do tecido cardíaco viável em tecido cicatricial não-funcional, o que diminui a capacidade do coração ou, mais especificamente, no ventrículo esquerdo, para bater apropriadamente. Isto resulta numa diminuição no volume de sangue que pode ser entregue ao corpo com cada batimento cardíaco, conhecido como o volume de curso, e a percentagem de sangue que é bombeado para fora do coração com cada batimento cardíaco, conhecido como a fracção de ejecção ^6. Estas, jun....

Protocolo

Procedimento está em total compatibilidade com o número de protocolo do IACUC 13302 e foi aprovado pela divisão de recursos animais.

1. Instrumento Preparação

1. Autoclave todos os instrumentos não descartáveis ​​usados ​​antes do procedimento cirúrgico para garantir a esterilidade.
2. Esterilizar instrumentos utilizados várias vezes em uma sessão com um esterilizador talão de vidro entre os usos.

2. Preparação Hidrogel

1. Descongelar e células-tronco placa pelo menos 24 horas antes da criação do constructo hidrogel.
2. Prepare remendos um dia antes do procedimento cirúrgico....

Resultados

Durante o procedimento cirúrgico, a ligação da artéria coronária esquerda pode ser identificado por um acentuado branqueamento a jusante da artéria oclusa. Como um teste antes de amarrar o nó, a sutura pode ser apertado brevemente para verificar se ele está no lugar apropriado. Além disso, uma vez que a oclusão da artéria os resultados na redução quase instantâneo na capacidade do átrio esquerdo para bater apropriadamente, átrio esquerdo irá aumentar em resposta a um refluxo de sangue no sistema.

Discussão

Com esta abordagem para o modelo murino MI, desenvolvemos um sistema que minimiza o dano para as zonas não miocárdio, que estão associados a outras técnicas de MI de murino. Estas áreas incluem danos causados ​​por uma traqueostomia, o corte da camada muscular, e à ruptura de nervuras para expor a cavidade torácica. Nós acreditamos que estas mudanças melhorar os resultados globais cirúrgicos graças ao cuidado para manter o máximo das principais estruturas, incluind.......

Materiais

Lista de materiais utilizados neste artigo

Nome	Empresa	Número de catálogo	Comentários
Ventilador de Mouse Harvard Modelo 687	Harvard Apparatus	55-0001
Inintech Biosciences LLC Esterilizador de Esferas de Vidro Seco	Fisher Scientific	NC9531961
Microscópio cirúrgico Leica MZ6
	Gemini	GEM 5917
- Pontas de 0,4 mm Angulares	Ferramentas	de Belas Ciências11063-07
Afastador Agrícola - 3,5 cm Spread	Fine Science Tools	17005-04
Tesoura de Mola - Lâminas de 2,5 mm Retas	Fine Science Tools	15000-08
Castroviejo Porta-agulhas - com trava Carboneto de tungstênio 14 cm	Fine Science Tools	12565-14
Tesoura de íris - Delicada reta 10,5 cm	Fine Science Tools	14060-10
Sutura de monofilamento 8-0	Ethicon	8730P
6-0 Sutura de seda	Ethicon	639G
Trombina	Sigma	T7009
Fibrinogênio	Sigma	F3879
Adesivo de tecido Vetbond	3M	1469SB

Kit de Cauterização Lemini GEM 5917 Pinça Delicada